冷暴露大鼠应激与适应代谢状态的实验研究

本文研究了大鼠冷暴露1～6周时,组织中腺苷酸环化酶(AC)、环腺 苷酸磷酸二酯酶(PDE)、红细胞膜Na~+·K~+-ATPase及细胞内Na~+、K~+的变化。结果表明,冷暴露的前3周、肝、骨骼肌中AG、PDE活性显著高于对照组水平,而冷暴露4周后,酶活性恢复至对照组水平。在整个冷暴露期间,BAT中酶活性、红细胞膜ATP酶及细胞内Na~+/K~+比值均显著高于对照组(P<0.05)。红细胞膜ATP酶与细胞内Na~+/K~+比值间有明显的相关性(r=0.917)。研究表明,机体在冷应激阶段,肝脏、骨骼肌为主要产热组织,而在冷适应阶段,机体产热则以BAT为主。可以设想藉助于钠泵的离子运输是冷适应细胞产热的主要机制。     

冷暴露大鼠红细胞膜及肝组织中某些酶的活性变化

本文对大鼠冷暴露的第1、2、3、4、6周时红细胞膜Na~+、K~+-ATPase、肝组织腺苷酸环化酶(Adenyl cyclase,AC)以及环腺苷酸磷酸二酯酶(cAMP phosphodiesterase,PDE)的活性变化进行了研究。结果表明,大鼠冷暴露第1周时,3种酶活性均增至最高水平;在第2至第6周时,酶活性呈下降趋势。大鼠在整个冷暴露期间,红细胞膜Na~+、K~+-ATPase活性都显著高于对照水平(P<0.05)。冷暴露第4周时,肝组织AC及PDE活性均降至对照水平(P>0.05)。研究表明,大鼠红细胞膜Na~+、K~+-ATPase在冷适应的建立和形成过程中起代谢调节作用。肝组织AC及PDE在冷应激阶段起代谢调节作用,而在冷适应阶段则不起作用。     

冷应激对心肌细胞损伤的影响

目的 :探讨冷应激对心肌细胞损伤 ,特别是对心肌细胞凋亡的影响 ,为寻求保护或减轻冷应激心肌损伤研究提供可能途径。方法 :将体外培养的Wistar大鼠乳鼠心肌细胞分别置于 - 10℃、- 2 0℃进行冷应激 ,然后取培养液测定乳酸脱氢酶 (LDH)的活性 ,同时用流式细胞仪 (FCM )测定心肌细胞的凋亡率 ,用荧光分光光度法测定细胞内活性氧 (ROS)含量的变化。结果 :心肌细胞经 - 10℃、 - 2 0℃冷应激后 ,细胞凋亡率由 ( 3.73± 1.0 3) % ,分别增加到 ( 19.58±6.17) % (P <0 .0 1)和 ( 34 .54± 6.0 3) % (P <0 .0 1) ;ROS含量由 ( 18.8± 2 .1)荧光强度·mgpr- 1分别增加到 ( 34 .8± 2 .0 )和 ( 4 0 .8± 1.3)荧光强度·mgpr- 1(P <0 .0 1,P <0 .0 1) ;冷应激后 ,细胞培养液中LDH的活性也显著增高。结论 :冷应激后心肌细胞凋亡是心肌细胞死亡的重要途径 ,其机制可能是ROS升高造成心肌细胞的氧化应激所致     

沥青烟作业工人脂质过氧化水平的观察

目的 探讨沥青烟作业工人脂质过氧化水平和红细胞膜ATP酶活力的改变.方法 选择炭素分厂生阳极车间接触沥青烟工人53名为观察组,选择该厂非沥青烟作业职工50名为对照组,检测血浆中脂质过氧化水平相关指标谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力和丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)含量及总抗氧化能力(T-AOC)、抑制羟自由基能力和红细胞膜Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-ATPase活力.结果 观察组抑制羟自由基能力为(786.03±227.54)U/ml,与对照组[(897.79±153.87)U/ml)]比较明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).观察组MDA含量为(11.97±4.26)nmol/ml,明显高于对照组[(9.26±4.90)nmol/ml)],差异有统计学意义(P<0.05).观察组红细胞膜Na~+-K~+-ATPase活力为(18.83±9.97)U/ml,明显低于对照组[(27.06±11.62)U/ml)],差异有统计学意义(P<0.05).抑制羟自由基能力、GSH-Px活力与工龄呈负相关(r=-0.320,r=-0.347,P<0.05),MDA含量与工龄呈正相关(r=0.421,P<0.01).红细胞膜Na~+-K~+-ATPase和Ca~(2+)-ATPase活力与工龄均无明显相关性.结论 沥青烟可引起作业工人脂质过氧化水平和红细胞膜ATP酶活力的改变     

骨髓间充质干细胞心肌移植对大鼠心梗后心功能的影响

目的　探讨骨髓间充质干细胞心肌移植对大鼠心梗后心功能及钙泵的影响。方法　取大鼠骨髓间充质干细胞进行体外培养、增殖和标记 ,同时以液氮冷冻左室游离壁建立心梗模型。 4周后分别将 2× 10 6个细胞悬液或冷D -Hanks液注入实验组和对照组心梗区数个不同部位。另取 5只大鼠作为正常组 ,仅行两次开胸手术。 4周后行心功能测定及取标本 ,RT -PCR检测SERCA2基因mRNA的表达。结果　骨髓间充质干细胞于移植后 1周、2周和 4周后均可存活并具有分化成熟倾向。Buxco系统行有创动态心功能测定 ,发现SLVP、+dp/dt以正常组为最高 ,实验组次之 ,对照组最低。而LVEDP则相反以正常组最低 ,实验组次之 ,对照组为最高。心梗后SERCA2基因mRNA表达水平对照组较正常组明显降低 ( 0 988± 0 0 0 4对 1 82 4± 0 0 0 9,P <0 0 1)。骨髓间充质干细胞心肌移植后 ,虽然SERCA2基因mRNA表达水平实验组也较正常组有所降低 ( 1 5 83± 0 0 12对 1 82 4± 0 0 0 9,P <0 0 1) ,但与对照组相比明显升高 ( 1 5 83± 0 0 12对 0 988± 0 0 0 4,P <0 0 1)。结论　骨髓间充质干细胞心肌移植可促进SER CA2mRNA表达 ,并使大鼠心梗后受损的心功能改善。     

血管内皮细胞冷损伤模型的建立

目的建立在细胞水平进行冷冻损伤研究的细胞冷损伤实验模型。方法在不加任何低温保护剂的条件下将体外培养的大鼠主动脉血管内皮细胞(VEC),以1℃·min1、10℃·min1和20℃·min1的冷冻速率冷冻至-40℃,或以1℃·min1的冷冻速率分别冻至0℃、-10℃、-20℃和-40℃,在冻后1d和3d观察VEC生长情况以及乳酸脱氢酶(LDH)活性的变化,分析冷冻速率和冷冻温度与VEC损伤程度的关系。结果VEC活存率1℃·min1组为80.0%,10℃·min1组为61.5%,20℃·min1组为42.3%。在冻后1d和3dVEC生长率(%)分别为:0℃组91.7,95.1;-10℃组57.7,54.2;-20℃组20.5,16.8;-40℃组5.4,4.4。冷冻至0℃、-10℃、-20℃和-40℃,冻后1dVCE培养液中LDH活性(U·L-1)依次为:141.6±15.3,270.2±18.6,328.9±29.6,359.8±28.0。结论本实验建立了以1℃·min-1的速率冷冻至0℃的轻度冷损伤模型、冷冻至-10℃的中度冷损伤模型和冷冻至-20℃或-40℃的重度冷损伤模型。对冷冻损伤反应较为适宜的细胞冷冻模型是中度冷损伤模型或重度中的-20℃冷损伤模型。     

刺五加复方口服液提高冷习服能力的研究

目的研究刺五加复方口服液对提高冷习服能力的作用,为应用药物提高冷习服能力提供依据.方法Wistar大鼠,在0±2℃饲养,每天灌胃刺五加复方口服液2 ml·只-1,分别灌胃1、7、14、21 d,在不同的时间点断头取血,进行各项指标的测定.人员观察对象为寒区某部战士,分为服药组和对照组,在冬季参加室外训练,每天6 h连续20 d为冷暴露条件,当时室外平均气温为-18.6℃,观察期间,服药组每天服用刺五加复方口服液40 ml,2次·d,在服药第10、20 d抽血检测各项指标.结果大鼠冷暴露给药组的各项指标在某些时间点上均较单纯冷暴露组有明显的变化;而在人员观察给药组尿中香草基扁桃酸(VMA)、寒冷血管反应指数(VRCI)在服药后第10、20 d明显高于对照组,而且抗疲劳指数和血乳酸在服药20 d后比对照组有明显的变化;血液流变学指标则无明显改变.结论结果提示刺五加复方口服液能增强冷暴露机体的能量代谢,增加超氧化物岐化酶(SOD)的活性,改善机体局部微循环功能,并有一定的抗疲劳作用.     

乐果染毒对大鼠心血管系统的影响

目的观察乐果28天染毒对雄性SD大鼠心血管系统的影响,探讨乐果诱导其毒性的可能机制。方法雄性SD大鼠,乐果灌胃染毒,每天1次,连续28 d。每5天测定大鼠外周血AChE活力,每周测定2次血压。染毒结束后测定心脏AChE、Ca2+-ATPase和Na+-K+-ATPase酶活力,以及M2受体、Ca2+-ATPase和兰尼碱受体基因表达水平。结果乐果28天染毒SD大鼠心肌和外周血AChE活力显著下降。染毒初期,乐果可以引起SD大鼠血压升高,染毒剂量越高,血压升高越显著,但到染毒后期,血压呈现下降趋势。染毒结束后,SD大鼠心肌Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase活力以及mRNA表达,均未见显著性改变,50 mg/kg染毒组大鼠的M2受体和RyR的mRNA表达均明显下调,分别达到0.64±0.02和0.61±0.03。结论接触一定剂量的乐果可以引起SD大鼠血压的改变,可能同M2受体基因和兰尼碱受体基因表达水平有关。 更多还原     

丙烯腈对作业工人红细胞膜ATP酶活性的影响

[目的 ]探讨丙烯腈 (ACN)对职业接触工人红细胞膜ATP酶活性的影响。 [方法 ]对 119名ACN接触工人(接触组 )及 43名无毒物接触史工人 (对照组 )的红细胞膜上Na+ K+ ATPase和Ca2 + Mg2 + ATPase活性进行测定。 [结果 ]接触组和对照组红细胞膜上的Na+ K+ ATPase活性分别为 ( 5 .5 3± 0 .2 6)× 10 -3 μmolPi/( 10 7RBC·h)和 ( 5 .16± 0 .2 2 )× 10 -3 μmolPi/( 10 7RBC·h) ,Ca2 + Mg2 + ATPase活性为 ( 4 .97± 1.65 )× 10 -3 μmolPi/( 10 7RBC·h)和 ( 4 .92± 1.66)× 10 -3μmolPi/10 7RBC·h ,两组间两种酶的活性差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。 [结论 ]低浓度ACN职业接触对作业工人红细胞膜ATP酶活性无明显影响     

镉对大鼠Na+-K+-ATPase和Ca2+-ATPase影响的实验研究

目的 研究不同剂量镉对大鼠钠钾ATP酶(Na^ -K^ -ATPase)和钙ATP酶(Ca^ -ATPase)的影响,以探讨镉中毒的细胞分子学机制。方法 大鼠按体重随机分成4组,第1组为对照组,皮下注射0．9％氯化钠,第2～4组为镉染毒组,分别皮下注射3,5,7μmol／kg的氯化镉溶液,注射容量均为2ml／kg。染毒6周后,测定尿中乳酸脱氢酶(LDH)、尿蛋白、尿镉和肝、肾组织中Na^ -K^ -ATPase及Ca^2 -ATPase的活力。结果 随着镉染毒剂量的增加,各组大鼠尿LDH、尿蛋白和尿镉含量均逐渐递增,呈现明显的剂量-效应关系;同时,肝、肾组织中的：Na^ -K^ -ATPase和Ca^2 -ATPase活力也随之增加。结论 随着镉染毒剂量的增加,大鼠肝、肾组织损伤逐渐加重,同时伴随着细胞膜上Na^ -K^ -ATPase和Ca^2 -ATPase的变化,这可能与细胞内钙稳态的破坏有关。