全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠血清和骨组织碱性磷酸酶水平的影响

目的:观察全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠血清和骨组织碱性磷酸酶水平的影响。方法:将36只3月龄雌性SD大鼠按体重分层后随机分为假手术、去卵巢静止和去卵巢振动三组。去卵巢10周后,去卵巢振动组每天进行2次全身垂直振动治疗,振动频率90 Hz,时间15 min。治疗7周时,采用双能Χ线骨密度仪检测各组大鼠左侧离体股骨骨密度,用721分光光度计检测血清和右侧股骨远端碱性磷酸酶水平。结果:与假手术组比较,去卵巢静止组血清碱性磷酸酶水平显著增加,股骨远端碱性磷酸酶水平以及离体股骨近端和远端的骨密度显著下降,而离体股骨中段骨密度无显著变化。与去卵巢静止组比较,去卵巢振动组离体股骨远端碱性磷酸酶水平以及股骨近端和远端骨密度显著增加,而血清碱性磷酸酶水平和离体股骨中段骨密度无显著变化。结论:全身垂直振动可能通过增加骨组织碱性磷酸酶水平改善去卵巢骨质疏松大鼠的骨密度。     

全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠骨髓细胞PPARγ和P-GSK-3β蛋白表达的影响北大核心CSCD

目的:观察全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠全骨髓细胞和骨髓基质干细胞PPARγ和PGSK-3β蛋白表达的影响。方法:36只3月龄雌性SD大鼠按体重分层后随机分为假手术、去卵巢静止和去卵巢振动3组。去卵巢手术10周后,去卵巢振动组大鼠开始每天进行2次时间15 min、频率90 Hz的全身垂直振动治疗。振动治疗7周时,腹主动脉取血处死大鼠,迅速在无菌条件下截取双后肢,冲洗骨髓细胞,一部分细胞直接提取蛋白,另一部分细胞采用全骨髓方法培养后再提取蛋白。采用Western blotting方法检测提取蛋白中的PPARγ和P-GSK-3β蛋白表达水平。结果:(1)与假手术组比较,去卵巢静止组全骨髓细胞PPARγ蛋白表达无显著差异,而P-GSK-3β蛋白表达显著降低;与去卵巢静止组比较,去卵巢振动组全骨髓细胞PPARγ蛋白表达无显著差异,而P-GSK-3β表达显著增加。(2)与假手术组比较,去卵巢静止组骨髓基质干细胞PPARγ蛋白表达无显著差异,而P-GSK-3β表达显著降低;与去卵巢静止组比较,去卵巢振动组骨髓基质干细胞PPARγ和P-GSK-3β蛋白表达均无显著差异。结论:全身垂直振动能促进去卵巢骨质疏松大鼠全骨髓细胞P-GSK-3β蛋白表达,但其效应在体外培养后消失。     

全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠腰椎转录因子Osterix蛋白表达的影响

目的:观察全身垂直振动对去卵巢骨质疏松大鼠腰椎转录因子Osterix蛋白表达的影响,探讨全身垂直振动治疗绝经后骨质疏松的作用机制。方法:将36只3月龄健康雌性未孕SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、去卵巢静止组(OVX组)和去卵巢振动组(WBV组),每组12只。手术后10周,WBV组开始接受全身垂直振动治疗。振动频率90 Hz,重力加速度3.8 g,振幅0.5 mm,每天2次,每次15 min,每周7天,振动7周。振动结束后,腹主动脉取血处死各大鼠,按解剖位置分离第2腰椎(L2)和第3腰椎(L3)。用HE染色观察L2组织形态学变化;用TRAP染色法对L2石蜡切片破骨细胞进行染色并计数;用免疫组化检测L2转录因子Osterix定位变化;用Western blot检测L3转录因子Osterix蛋白表达水平的变化。结果:与Sham组和WBV组比较,OVX组大鼠腰椎骨髓腔脂肪空泡数目、骨小梁表面破骨细胞数目显著增加,而转录因子Osterix蛋白表达显著下降。结论:全身垂直振动能降低去卵巢骨质疏松大鼠腰椎破骨细胞的数目,增强腰椎转录因子Osterix蛋白的表达。     

全身振动对去卵巢大鼠三种组织ER-α基因表达的影响

目的:探讨全身振动治疗绝经后肥胖与骨质疏松的作用机理。方法:对体重相近的去卵巢3月龄雌性SD大鼠进行全身垂直振动训练,7周后测定受试大鼠血清雌激素、孕酮、睾酮、骨密度、体重以及肝、脂肪、骨骼肌组织中雌激素受体(ER)-α基因表达水平。结果:去卵巢振动训练组体重增加显著低于去卵巢静止组;去卵巢振动训练组股骨远端和近端的离体骨密度显著高于去卵巢静止组;去卵巢振动训练组大鼠肝脏、脂肪、骨骼肌组织中ER-α基因表达水平较去卵巢静止组显著增加;但去卵巢振动训练组与去卵巢静止组血清雌激素、孕酮、睾酮水平均较假手术组显著降低。结论:促进大鼠ER-α基因的表达是全身振动训练改善因性激素缺乏造成骨密度下降、体重增加等症状的机理之一。     

不同干预疗法对去卵巢骨质疏松大鼠股骨生物力学指标的影响

目的:对比观察雌激素、金雀异黄酮、跑台运动、全身垂直振动和氯化锂等5种不同干预疗法对去卵巢骨质疏松大鼠股骨生物力学指标的影响。方法:将80只3月龄雌性SD大鼠按体重分层后随机分为去卵巢(n=68)和假手术(n=12)两个组。手术后第11周,将去卵巢组大鼠按体重分层后又随机分为去卵巢组(11只)、振动组(10只)、跑台组(10只)、金雀异黄酮组(10只)、氯化锂组(10只)和雌激素组(10只),并开始进行不同的干预处理。干预8周时,处死各组大鼠,取右后肢股骨,采用三点弯曲试验检测各组大鼠股骨生物力学指标的变化。结果:(1)雌激素组、金雀异黄酮组、全身振动组、跑台运动组和氯化锂组大鼠股骨结构力学指标中的最大载荷和弹性载荷显著高于去卵巢组(P<0.01,P<0.05),而最大挠度和弹性挠度无显著差异;(2)雌激素组、金雀异黄酮组和全身振动组大鼠材料力学指标中的弹性应力、最大应变和弹性模量显著高于去卵巢组(P<0.05,P<0.01),而最大应力和弹性应变无显著差异。跑台运动组大鼠最大应力、弹性应力、最大应变和弹性模量显著高于去卵巢组(P<0.05,P<0.01),而弹性应变无显著差异。氯化锂组大鼠最大应力、弹性应力和弹性模量显著高于去卵巢组(P<0.05,P<0.01),而最大应变和弹性应变无显著差异。结论:雌激素、金雀异黄酮、跑台运动、全身垂直振动和氯化锂对去卵巢骨质疏松大鼠股骨结构力学指标的干预效果相似,而对材料力学指标的干预效果有一定的差别。     

跑台运动训练和停训对去卵巢大鼠腰椎骨密度和骨髓脂肪细胞数目的影响

目的:观察中等强度跑台运动训练和停训对去卵巢大鼠腰椎骨密度、骨组织形态学和骨髓脂肪细胞数目的影响。方法:将60只成年雌性SD大鼠按体重分层后随机分为假手术组、去卵巢静止组和去卵巢运动组,每组20只。去卵巢运动组每周进行4次时间45 min、速度18 m/min、跑道倾角5°的跑台训练。持续训练14周后,将各组大鼠再次按体重分层后随机分为两个亚组,即假手术16周(Sham-16)组和假手术32周(Sham-32)组、去卵巢16周(OVX-16)组和去卵巢32周(OVX-32)组以及去卵巢运动(EX)组和停训组(DEX)。Sham-16、OVX-16和EX三组大鼠在末次训练结束36-48小时内,Sham-32、OVX-32和DEX三组大鼠在停训16周时,用双能Χ线骨密度仪活体检测大鼠腰椎骨密度,常规HE染色对第2腰椎(L2)进行组织形态学观察。结果:(1)训练结束时,OVX-16组L2脂肪细胞数目显著高于Sham-16组和EX组,腰椎骨密度显著低于Sham-16组和EX组。(2)停训16周时,OVX-32组腰椎骨密度与Sham-32组比较显著下降,L2脂肪细胞数目显著增加,而DEX组与OVX-32组比较无显著性差异。结论:中等强度跑台运动对去卵巢大鼠腰椎骨密度下降的减缓效应和对骨髓脂肪细胞数目增加的抑制效应在停训16周后未能保持。     

不同干预疗法对去卵巢骨质疏松大鼠骨微结构影响的对比研究

目的:对比观察跑台运动、全身垂直振动、金雀异黄酮和雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠股骨和腰椎骨微结构的影响,为绝经后骨质疏松的防治提供理论参考依据。方法:将60只3月龄雌性SD大鼠按体重分层后随机分为假手术组(10只)和去卵巢组(50只)。去卵巢10周时,将去卵巢组大鼠按体重分层后又随机分为去卵巢组、跑台运动组、振动训练组、金雀异黄酮组和雌激素组,并开始进行不同的干预处理。干预处理8周时,腹主动脉取血处死各组大鼠,游离左股骨和第5腰椎,从每组随机取6只大鼠的左股骨和第5腰椎行micro-CT扫描及三维结构重建,选取股骨远端和第5腰椎椎体距生长板1 mm处,2.0mm×3.5 mm、厚0.9 mm的骨组织区域为感兴趣区域,进行骨形态计量学分析。结果:与去卵巢组比较,去卵巢大鼠经全身垂直振动和雌激素干预后,股骨体积骨密度(v BMD)、骨体积分数(BV/TV)和骨小梁数目(Tb.N)显著增加,骨小梁间隙(Tb.Sp)显著下降,骨小梁厚度(Tb.Th)和结构模型指数(SMI)无显著变化。经跑台运动和金雀异黄酮干预后,Tb.Sp显著下降,其他指标无显著变化;去卵巢大鼠经跑台运动、全身振动、金雀异黄酮和雌激素干预后,第5腰椎所有检测指标均无显著变化。结论:全身垂直振动和雌激素对去卵巢骨质疏松大鼠股骨骨微结构的改善效应大于跑台运动和金雀异黄酮,且对股骨的改善效应大于腰椎。     

中等强度跑台运动对去卵巢大鼠腰椎骨量、骨髓脂肪细胞数量和血脂水平的影响

目的:通过观察中等强度跑台运动对去卵巢大鼠腰椎骨量、骨髓脂肪细胞数量和血脂水平的影响,探讨其预防绝经后骨质疏松的机制。方法:将45只3月龄雌性SD大鼠按体重随机分为假手术、去卵巢静止、去卵巢运动和雌激素四个组。运动组每周进行4次45 min、速度18 m/min、坡度5°的跑台训练。雌激素组每周颈部皮下注射3次17-β雌二醇,剂量为25μg/kg体重。正式运动处理14周时,称量各组大鼠体重和第5腰椎(L5)干重;检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、雌激素(E2)水平以及L5的骨矿物含量和骨密度;常规HE染色观察第2腰椎(L2)组织形态学变化,计数骨髓腔内脂肪细胞数。结果:去卵巢静止组L5骨密度、骨矿物含量、骨干重/体重以及血清E2、TC和HDL/TC水平显著低于其他三组,而血清LDL/TC水平和骨髓脂肪细胞数目显著高于其他三组;去卵巢静止组血清TC和LDL水平显著高于假手术和去卵巢运动组,与雌激素组比较无显著性差异;各组HDL水平均无显著变化。结论:中等强度跑台运动减缓去卵巢大鼠椎骨骨量丢失的效应可能与其能改善去卵巢大鼠血脂紊乱、抑制去卵巢大鼠椎骨骨髓脂肪细胞的增加有关。     

低强度复合振动治疗去卵巢老龄大鼠骨质疏松实验研究

目的:观察低强度复合振动对去卵巢老龄大鼠骨质疏松的治疗作用。方法:13月龄SD雌性经产大鼠16只,随机均分为对照组和实验组。卵巢摘除法骨质疏松造模,3个月后检查骨密度(BMD)下降后实验组接受低强度复合振动(振动频率45 Hz～55 Hz,振动强度0.12 g～0.21 g,g=9.8 m/s2,20分钟/次/天,5天/周),对照组不进行振动治疗。13周复合振动实验结束后分别活体测量两组大鼠腰椎、股骨骨密度(Lorland XR-46),胫骨标本骨微结构扫描分析(SCANCO u-CT),测试腰椎、股骨标本力学性能(858 mini bionix)及酶法检测血清碱性磷酸酶、非前列腺酸性磷酸酶,电化学发光免疫法检测血清骨钙素和I型胶原C端交联肽。结果:复合振动实验结束后实验组腰椎和股骨BMD较实验前显著增加(分别增加0.0110±0.0048 g/cm2,P=0.000和0.0056±0.0065 g/cm2,P=0.004),而对照组显著下降(分别下降0.0071±0.0042 g/cm2和0.0073±0.0063 g/cm2)。相较对照组,骨微结构参数Tb.N显著增加(P=0.002)、Tb.Sp显著降低(P=0.005)以及BV/TV显著增加(P=0.048),腰椎、股骨强度极限也显著增加(P=0.038,P=0.014),但血清骨钙素、碱性磷酸酶、I型胶原C端交联肽、非前列腺酸性磷酸酶两组无统计学差异。结论:低强度复合振动可以减轻去卵巢老龄大鼠骨质疏松程度,提高骨质疏松大鼠骨质量。     

中等强度跑台运动对去卵巢大鼠肝脏脂类水平的影响

目的:观察中等强度跑台运动对去卵巢大鼠肝脏脂类水平的影响。方法:80只雌性3月龄SD大鼠按体重随机分为假手术组、去卵巢静止组、去卵巢运动组和雌激素组,每组20只。除假手术组外,其它三组均切除双侧卵巢,假手术组行相同手术操作,但不切除卵巢,只切除与卵巢等大的脂肪。去卵巢运动组进行每周5次、每次45min、速度18m/min、坡度5°的跑台训练;雌激素组每周颈部皮下注射两次17β-雌二醇,剂量为25μg/kg体重。各组于去卵巢后7周和14周时分别取材,称体重和腹腔内脂肪重量,乙醇/氯仿提取肝脏总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)。结果:(1)去卵巢后7周时,去卵巢静止组肝脏TG含量显著高于假手术组,TC无显著变化;去卵巢运动组肝脏TC和TG以及雌激素组肝脏TG含量均显著低于去卵巢静止组,而雌激素组肝脏TC无显著变化。(2)去卵巢后14周时,去卵巢静止组肝脏TC和TG含量均显著高于假手术组,而去卵巢运动组和雌激素组肝脏TC和TG均极显著低于去卵巢静止组。结论:中等强度跑台运动能显著降低去卵巢大鼠肝脏脂类水平。     

局部植入BMP对去势大鼠股骨近端生物力学强度及髓腔面积变化的影响

目的探讨去势大鼠股骨近段植入牛骨形成蛋白(bone morphorgeneic protein,BMP)后其骨生物力学强度及髓腔面积的变化。方法随机选取6月龄wistar雌性大鼠22只,摘除卵巢制作绝经后骨质疏松模型成功后,同一只动物双侧肢体对照,试验侧股骨颈植入牛骨形成蛋白及纤维蛋白(FS)复合物,对照侧植入纤维蛋白,术后4周、8周处死取材,测量股骨近端生物力学强度及髓腔面积和截面面积。结果4周后,试验侧与对照侧股骨近端骨生物力学强度和髓腔面积无明显差异;8周后,试验侧股骨近端生物力学强度较对照侧增高;髓腔面积较对照侧有较明显的减小(P<0.05)。结论股骨近端局部植入BMP可提高去势大鼠股骨近端局部的生物力学强度和减小近端髓腔面积和截面积,其可能减少骨质疏松性髋部骨折置换后假体的松动,成为骨质疏松性骨折假体置换中新的辅助治疗方法。     

不同强度运动对去卵巢大鼠骨量的影响及其机理

以成年SD大鼠去卵巢建立骨质疏松模型,用骨形态计量学方法,研究了8周的大强度和中等强度(分别为20m/min和30m/min,1h/day,5d/week)跑台运动对大鼠胫骨近心干骺端松质骨骨量的影响.结果去卵巢安静组大鼠骨量减少(%Tb.Ar-75%,p＜0.01;Tb.N-74%,p＜0.01),骨形成增加(BFB/BS+115%,BFR/BV+123%,P＜0.01)、骨吸收增加(Oc.No+229%,p＜0.01),为高转换型的骨代谢.中等强度运动的去卵巢大鼠比去卵巢安静大鼠骨形成减少(%L.Pm-42%,BFR/BS-36%,P＜0.05),骨吸收减少(Oc.No-42%,p＜0.05),高转换受到抑制,骨量增加(%Tb.Ar+53%,p＜0.05;Tb.N+69%,p＜0.01),但仍比正常组大鼠骨量降低(%Tb.Ar-61%,p＜0.01).去卵巢后大强度运动与去卵巢安静组大鼠各项指标相比无显著性差异(p＞0.05),与中等强度运动比骨形成增加(BFR/BS+121%,P＜0.01),骨吸收增加(Oc.No+103%,p＜0.05),骨量减少(%Tb.Ar-37%,p＜0.05),仍为高转换型骨代谢.结论大鼠去卵巢后中等强度运动通过抑制高骨转换可减少骨丢失,减轻骨质疏松的程度,大强度运动对减轻骨质疏松的程度无作用.     

不同强度运动和雌激素联合作用对去卵巢大鼠骨骼生物力学性能的影响

目的:探讨不同强度运动和雌激素联合作用对去卵巢大鼠骨骼生物力学性能的影响。方法:将80只成年雌性SD大鼠按体重随机分为基础对照组、假手术组、骨质疏松对照组、雌激素对照组、低强度运动组、低强度运动加雌激素组、中等强度运动组、中等强度运动加雌激素组、大强度运动组以及大强度运动加雌激素组,利用858BIONIX生物力学检测系统测定8周实验后各组大鼠股骨颈最大载荷、第2腰椎最大凹入载荷和第3腰椎最大压缩载荷。结果:(1)与假手术组比,骨质疏松对照组的股骨颈最大载荷、第2腰椎最大凹入载荷和第3腰椎最大压缩载荷3项力学性能指标分别降低了50%、40%和27%(P<0·05)。(2)与骨质疏松对照组和雌激素对照组比,大鼠去卵巢后3种强度的单纯运动组和运动加雌激素联合组股骨颈最大载荷均显著增加(P<0·05),且随运动强度的增加而增加(P<0·05);相同强度下,运动加雌激素联合组的股骨颈最大载荷与单纯运动组无显著性差异。(3)单纯大强度运动组的第2腰椎最大凹入载荷和第3腰椎最大压缩载荷较骨质疏松对照组和雌激素对照组显著增加(P<0·05);低强度运动加雌激素组第2腰椎最大凹入载荷和第3腰椎最大压缩载荷两项力学指标既显著高于单纯低强度运动组(P<0·05),也显著高于雌激素对照组(P<0·05)。中等强度运动加雌激素组的第2腰椎最大凹入载荷显著高于单纯中等强度运动组(P<0·05)及雌激素对照组(P<0·05)。结论:单纯运动对力直接作用部位的力学性能———股骨颈最大载荷的影响大于单纯补充雌激素,运动和雌激素无明显协同作用;对于非力直接作用部位的力学性能———第2腰椎最大凹入载荷及第3腰椎最大压缩载荷,运动和雌激素联合有一定的协同作用。     

短期培养小鼠骨髓细胞的增殖、分化及其移植效果

实验采用添加肌条件培养液方法进行小鼠骨髓细胞短期液体培养,细胞增殖分化十分活跃。2天起细胞总数和CFU-C逐渐增多,6天分别增至原来的4倍和6倍。淋巴细胞在培养4天或3天消失。CFU-S 6天时减至原来的21%。照后1天或3天静脉输注培养6天的CFU-S,提高照射900拉德同系小鼠的活存率82%。照后30天和60天分别活杀,8只受体小鼠的骨髓细胞2只为供体型,5只为以供体型为主的嵌合体,1只为受体型为主的嵌合体。     

大豆异黄酮和运动对去卵巢大鼠股骨骨密度的影响

目的:探讨大豆异黄酮与中等强度运动联合作用对去卵巢大鼠骨密度的影响。方法:将50只12周龄雌性Wistar大鼠按体重随机分为假手术组(Sham,正常对照组)、去卵巢组(OVX)、去卵巢+大豆异黄酮组(OVX+IF)、去卵巢+运动组(OVX+EXE)及去卵巢+大豆异黄酮+运动组(OVX+EXE+IF),每组10只。补药组大鼠以50mg/kg体重大豆异黄酮灌胃,其余组以等量溶剂灌胃。各运动组大鼠进行跑台训练。实验期包括2周适应期和8周训练期。实验前后称重。实验结束后处死大鼠,测量其股骨骨密度。结果:实验后,去卵巢组大鼠体重显著高于假手术组(P<0·01),去卵巢+运动组和去卵巢+大豆异黄酮+运动组大鼠体重均显著低于去卵巢组(P<0·05)。去卵巢组大鼠股骨骨密度显著低于假手术组(P<0·01)。去卵巢+运动组和去卵巢+大豆异黄酮组大鼠股骨骨密度与去卵巢组相比显著增加(P<0·05,P<0·01)。去卵巢+大豆异黄酮+运动组大鼠的股骨骨密度非常显著高于去卵巢组(P<0·001)。结论:大豆异黄酮和运动联合对抑制去卵巢大鼠骨密度减少有一定协同作用。     

小鼠骨髓细胞及骨髓基质细胞混合输注对骨髓移植后造血重建的影响

观察小鼠骨髓细胞及骨髓基质细胞混合输注对骨髓移植后造血重建的影响。给予受致死剂量照射的Ｂａｌｂ／ｃ小鼠输注同基因骨髓细胞１×１０７ 个及经体外扩增的同基因原代骨髓基质细胞 ２×１０５ 个,与单纯骨髓移植组比较,移植后第１４ 天外周血白细胞、血小板回升较快,第１５ 天、第２０ 天ＢＦＵ－ＧＭ、ＢＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｅ、ＣＦＵ－Ｓ明显高于后者,第２０ 天已达正常。　结论：原代骨髓基质细胞不仅是可以移植的,而且能够加快造血重建,提高移植效果。