复合三联抗结核药聚乳酸-羟基乙酸缓释微球的制备及体外释药特性

目的 :制备复合异烟肼(H)、利福平(R)、吡嗪酰胺(Z)的聚乳酸-羟基乙酸(HRZ/PLGA)缓释微球,观察其理化性质和体外缓释特性。方法:以PLGA(450mg)为载体,避光条件下称取H(40mg)、R(60mg)、Z(125mg),采用复乳-溶剂挥发法制备HRZ/PLGA缓释微球,应用扫描电镜观察微球的形态特征;应用高效液相色谱法(HPLC)测定其载药量、包封率;采用溶出法、HPLC于3h、6h、12h、1d、2d、3d、6d、9d、12d、15d、20d、25d、30d、40d、50d测定H、R、Z三种药物的浓度,观察其是否均大于10倍最低抑菌浓度(MIC),计算其日均释药率、累计释药率。结果:HRZ/PLGA微球在电镜下观察呈圆球形,平均粒径为10.3±4.7μm;H、R、Z三种药物的载药量分别为(18.02±0.36)%、(22.46±0.24)%、(21.68±0.37)%,包封率分别为(54.79±1.13)%、(72.35±0.39)%、(67.21±0.68)%;体外缓释试验显示微球缓释前12d左右,三种药物的累计缓释度均超过了50%,日均释药率分别为5.05%、4.89%、6.86%;第12天后三药的缓释基本趋于稳定,日均释药率分别为0.17%、0.26%、0.16%;三种药物缓释到50d时均大于10倍MIC。结论:HRZ/PLGA微球具有优良的载药及药物缓释效果,是一种理想的复合抗结核药物缓释系统。     

聚乳酸聚乙醇酸／RNAⅢ抑制肽缓释微球的制备及评价

目的探讨聚乳酸聚乙醇酸（PLGA）／RNAⅢ抑制肽（RIP）缓释微球的合理制备方法,测定其载药率和体外释药特征。方法采用改良复乳－溶剂挥发法制备PLGA／RIP缓释微球,观察其表征,测定缓释微球的载药率和包封率。采用高效液相色谱法测定不同时点PLGA／RIP的释放速度,观察PLGA／RIP微球的体外释药特点。结果采用改良复乳－溶剂挥发法制备的PLGA／RIP缓释微球粒径均匀、表面光滑,包封率约为（68．22±6．20）％,载药率为（15．35±3．26）％。PLGA／RIP释药动力学方程为y=31．016x＋59．611,符合Huguchi方程。结论采用改良复乳-溶剂挥发法制备的PLGA／RIP缓释微球粒径均匀、表面光滑,包封率和载药率较高,体外释放动力学符合Huguchi方程,是理想的缓释载药体系。     

5-FU缓释微球腹腔内给药的实验研究

目的以明胶为载体材料，制备5-FU缓释微球，研究5-FU缓释微球腹腔内给药后的5-FU药代动力学变化、组织中的分布及腹腔液中的药物浓度。方法通过动物实验，采用高效液相色谱法测定5-FU缓释微球腹腔内给药后，药物的释放速度、腹腔液浓度及在组织中的分布。结果5-FU缓释微球腹腔内给药后，可使5-FU缓慢持续释放，腹腔液浓度明显高于组织及血药浓度，利用已建立的标准曲线，采用3p97药代动力学软件处理，证明腹腔内给药时曲线下面积（AUC）5-FU缓释微球组明显高于5-FU原料药组。结论7d后5-FU缓释微球在腹腔内仍可保持有效抑癌浓度，其分布主要在腹腔中。     

复合三联抗结核药聚乳酸-羟基乙酸缓释微球体内缓释实验研究

目的 :观察载异烟肼(H)、利福平(R)、吡嗪酰胺(Z)复合抗结核药/聚乳酸-羟基乙酸共聚物缓释微球在大鼠体内的缓释特性。方法:选取SD雄性成年大鼠84只,随机分成A、B、C三组,分别设为载药微球组、空白微球组、空白组,于术后1d、3d、1周、2周、4周、6周、8周时分别处死各组4只大鼠,处死时取微球周边1cm肌肉组织和腹腔静脉血5ml,应用高效液相色谱法检测肌肉组织和血清中三种药物浓度;在1周、4周时检测肝、肾功能,留取肝、肾组织观察其组织病理学变化。结果:术后3d时A组中肌肉和血浆中HRZ的药物浓度达到最高,1周后药物的浓度趋于稳定;8周时肌肉组织中HRZ的浓度分别为0.56、0.63、1.51μg/g,均达到了各自的10倍最低有效抑菌浓度,血浆中HRZ浓度分别为0.112、0.046、0.189μg/ml,肌肉中药物浓度和血浆中药物浓度行配对t检验,差异有统计学意义(P0.05);B、C两组肌肉及血浆中均未检测出HRZ。在1、4周时,对三组大鼠肝、肾功能相关指标进行检测,A与C、A与B、B与C组间两两比较t检验,肝、肾功能各项指标在各检测点均无统计学差异(P0.05);A、B、C三组大鼠肝、肾组织病理学检查未见明显损伤。结论:HRZ/PLGA微球具有缓慢、平稳释放药物的特性,具有良好的组织生物相容性,可直接植入体内实现局部给药和缓释长程治疗的双重效果。     

载利福喷丁/聚乳酸-聚乙醇酸共聚物微球制备及体外释放

目的：制备可用于持续抑制脊柱结核术后病灶残留结核分枝杆菌的载利福喷丁／聚乳酸-聚乙醇酸共聚物[ Poly（ lactic-co-glycolic acid）, PLGA]微球,并研究其体外释放性能。方法通过乳化-溶剂挥发法制备载利福喷丁／PLGA微球,光学显微镜和扫描电镜观察微球形貌,激光粒度分布仪测定微球粒径及分布,紫外分光光度计测定微球载药量及包封率。检测利福喷丁抗结核分枝杆菌的最低抑菌浓度,并以pH＝7．4的PBS缓冲溶液为释放介质,紫外分光光度计检测载药微球体外释放特性。结果载利福喷丁／PLGA微球成球形状良好,表面光滑,分散性好,粒径分布均匀,平均粒径为25．49μm。载药量及包封率分别为21．37％±0．16％和74．79％±2．71％。体外释放实验显示在突释期内,利福喷丁释放量占载药微球中药物含量的37．08％±1．68％;在缓释期内载药微球释药速度减慢,第5周释放量仍超过利福喷丁抗结核分枝杆菌的最低抑菌浓度,35 d后体外累积释放量为80．67％±0．97％,仍高于利福喷丁抗结核分枝杆菌的最低抑菌浓度2μg／mL。结论 PLGA是一种理想的控缓释材料,所制备的载利福喷丁／PLGA微球具有良好的控释效果,是一种有效的抗结核缓释剂型。     

局部麻醉药经聚乳酸-羟基乙酸共聚物缓释给药的研究

背景 临床常用局部麻醉药物的体内生物半衰期短,且局部组织的高药物浓度极易产生中枢神经和心血管毒性反应. 目的 综述局部麻醉药聚乳酸羟基乙酸共聚物[poly (lactic-co-glycolic acid),PLGA]缓释给药系统的研究进展. 内容 阐述PLGA相关研究,局部麻醉药PLGA微粒的类型与制备工艺,PLGA在不同动物实验模型的研究结果,临床研究进展及存在的缺陷和改进等四方面的相关内容. 趋向 局部麻醉药缓释系统的研究能够为临床提供更好的镇痛药物和麻醉方式,但是在载药量、生产工艺等方面还有待改进.     

“类乒乓球”状壳聚糖微球的制备及其缓释性能的研究

以液体石蜡作为有机分散介质,采用反相悬浮交联法制备出具有"类乒乓球"结构且粒径近单分散的壳聚糖微球.对产物的形貌及结构进行了初步表征.在模拟肠液的条件下系统研究了壳聚糖微球承载和缓释牛血清白蛋白(BSA)的情况.结果表明,药物的担载效率与初始BSA浓度没有确定的线性关系,但随着初始BSA浓度的增加,吸附量增加;且在释药过程中,不同包药效率对担载有BSA的壳聚糖微球的释放性能影响不大;在模拟肠液条件下,壳聚糖微球吸附BSA的量与BSA溶液的pH值密切相关,实验发现pH=5时,壳聚糖微球吸附BSA的量最大.     

rhBMP-2明胶纳米微球制备及体外缓释效果研究

目的制备重组人骨形态发生蛋白2(recombinant human bone morphogenetic protein-2,rhBMP-2)明胶纳米微球并检测其体外缓释效果。方法 "二次凝聚法"制备明胶纳米微球,扫描电镜、透射电镜和粒径分析仪检测纳米微球的表面形态、内部结构、粒径,计算其溶胀率;将rhBMP-2与明胶纳米微球复合,计算其包封率和载药量,并对其体外缓释效果进行检测。结果明胶纳米微球的表面形态良好,分散均一,内部结构多孔隙、通道,平均粒径(171.49±50.12)nm,溶胀率为1.83;rhBMP-2明胶纳米微球的包封率为(98.13±0.131)%,载药量为(58.89±0.079)ng/mg;rhBMP-2明胶纳米微球释药时间在1个月以上,呈"双相缓释",第1天为"突释相",释药量约为7%,以后平缓释放呈"缓释相",40%左右的药物于28 d内释放,约60%的药物在1个月以后释放。结论成功制备rhBMP-2明胶纳米微球,不但包封率高,而且体外缓释效果好。     

生长因子缓释微球的制备及其对内皮细胞的影响

目的:制备碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)可降解缓释微球,考察其生物活性的保存情况及它们对内皮细胞的作用。方法:采用改良的乳化冷凝法交联制备复合bFGF、VEGF的明胶缓释微球,将它们加入内皮细胞的培养液中,用细胞计数法、四甲基偶氮唑盐微量反应比色法(MTT法)测定细胞增殖情况。结果:复合bFGF、VEGF的缓释微球平均粒径(11.32±3.64)μm;培养1天后各组细胞计数、吸光度(A)值差异均无显著性;5天后两种生长因子缓释微球组细胞计数、吸光度(A)值明显高于对照组;7天后两种生长因子缓释微球组值仍高于其它组。结论:复合bFGF、VEGF的缓释微球制备工艺简便,具有良好的缓释活性能较长时间地持续释放活性bFGF、VEGF,可明显促进内皮细胞的增殖。     

转化生长因子明胶微球制备及体外缓释研究

目的: 研制转化生长因子β1 (TGFβ1 ) 缓释明胶微球, 探索将微球药物控释系统引入组织工程学领域的可行性。方法: 采用改良的双相乳化冷凝聚合法制备明胶微球, 将其与TGFβ1 复合, 观察微球分散度、粒径及外观形态; 计算微球包封率、载药率及体外释药特性;分别使用缓释微球、诱导液 (含TGFβ1 4. 5ng/ml) 诱导兔骨髓间充质干细胞 (MSCs) 6d, 免疫组化检测Ⅱ型胶原、S 100蛋白表达。结果: 微球大小均匀, 平均直径 ( 15. 1±3. 4 )μ, 载药量为 900ng/g, 包封率为90. 0%, 体外 7d内药物缓释 92%; 缓释微球可持续释放具有生物活性的TGFβ1 诱导MSCs, 6d后细胞Ⅱ型胶原、S 100蛋白免疫组化染色阳性, 而诱导液组Ⅱ型胶原、S 100蛋白免疫组化染色阴性。结论: TGFβ1 明胶微球具有良好的药物缓释功能, 体外可持续诱导MSCs向软骨细胞分化, 维持细胞表型。为软骨组织工程中生长因子能够持续高效发挥作用提供一种新途径。     

载超顺磁性氧化铁高分子液态氟碳纳米粒的制备及体外显像

目的制备一种能同时用于超声造影及MR成像的多模态造影剂,观察其体外成像效果。方法采用双乳化法合成载超顺磁性氧化铁（SPIO）纳米颗粒及全氟己烷（PFH）的高分子微球（s-PFH／PLGA）,检测其一般特性及光声信号。对不同浓度的s—PFH／PLGA水囊模型进行超声显影,以JC200聚焦超声肿瘤治疗系统辐照后观察回声强度变化;对不同铁含量的s—PFH／PLGA进行MR成像。结果透射电镜下s—PFH／PLGA呈球形,SPIO颗粒均匀分布在外壳上,平均粒径（738．9±158．4）nm,平均电位（-15．9士6．9）mV,并检测到明显光声信号。体外超声显像中s—PFH／PLGA呈点状高回声,HIFU辐照后回声强度增强。s-PFH／PLGA在T2wI中呈负增强显像;随着铁含量增高,MRI信号呈降低趋势。结论成功制备的载SPIO及PFH多模态造影剂具有体外超声、MR显影功能。     

取向聚乙醇酸聚乳酸共聚物支架的制备及初步实验观察

目的 研制聚乙醇酸聚乳酸共聚物(PLGA)材料的纵向取向支架,观察体外生物相容性、细胞在支架内分布等特性,探讨其作为关节软骨组织工程支架的可能性.方法 相分离法制备纵向取向PLGA支架,等离子改性、胶原包埋处理,体外接种关节软骨细胞,在环境扫描电镜下观察细胞生长、分布情况.结果 研制的PLGA取向支架生物相容性明显提高,细胞沿纵向管道垂直排列,细胞分布均匀,单侧加载细胞进入深度可达2.5 nlln.结论 取向支架能明显改善细胞在载体内的分布,细胞纵向排列接近关节软骨细胞排列方式.     

聚乳酸阿霉素纳米微粒的制备及体内外释药的研究

目的研究聚乳酸阿霉素纳米微粒(ADM-NP)的制备及其在体内外的释药特点。方法以聚乳酸为包封材料,以阿霉素为模型药物,采用复乳法制备ADM-NP。采用扫描电镜、动态光散射法及高效液相色谱法分别考察纳米微粒的形态、粒径分布、载药量及包封率,通过体内外实验探讨纳米微粒的释药特点。结果ADM-NP在扫描电镜下呈球形,粒径为(163±52)nm,载药量为(28.4±4.5)%,包封率为(73.6±9.2)%。ADM-NP在体外释药缓慢,在大鼠体内的消除半衰期(t1/2)、曲线下面积(AUC)、平均滞留时间(MRT)均明显大于游离阿霉素(F-ADM,P<0.01)。结论ADM-NP在体内外均具有良好的缓释性,其化疗效果理论上可望优于F-ADM。     

Azoospermia in a renal transplant recipient during sirolimus (rapamycin) treatment

Sirolimus is used as a powerful immunosuppressant drug in patients after organ transplantation. It was shown to block spermatogenesis by interrupting the stem cell factor/c-kit system. Oligozoospermia was shown in single patients. In addition, a decrease of testosterone and an increase of gonadotropin levels were observed. We report on a young patient who showed azoospermia during the treatment with sirolimus after renal transplantation. After changing the immunosuppression to tacrolimus, spermatogenesis of the patient recovered. Five months after cessation of the treatment with sirolimus, a sperm concentration of 8 x 10(6) ml(-1) was found. Depression of spermatogenesis is an important side effect in younger men who aspire paternity, so that waiving of sirolimus is advisable in these patients.     

庆大霉素抗菌骨制备及体内外释放特性实验研究

目的 研制一种既有成骨作用又有局部抗感染能力，且有较低免疫原性的新型高效骨植入材料。方法 采用超声和负压双重复合法制备复合庆大霉素抗菌骨并辐照灭菌，通过扫描电镜和微生物测定法分别检测其复合情况及庆大霉素在体内外的缓释特性。结果 明胶复合庆大霉素抗菌骨在体外12d、体内14d持续高于金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度，基本达到临床局部抗菌效果。结论 明胶复合庆大霉素抗菌骨具有良好的体内外缓释特性，有望成为感染性骨缺损的理想植入材料。     

MicroRNA-145-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) nanoparticles attenuate venous intimal hyperplasia in a rabbit model

BackgroundMicroRNA-145 (miR-145) reportedly alters the phenotype of vascular smooth muscle cells (VSMCs) from a proliferative to a contractile state. So far, viral or plasmid vectors have been experimentally used to transduce microRNAs into VSMCs. We hypothesized that a simple ex vivo microRNA delivery system using miR–145-loaded poly(lactic-co-glycolic acid) (PLGA) nanoparticles (PLGA NPs) could control the VSMC phenotype and prevent intimal hyperplasia.MethodsJugular vein grafts of male Japanese white rabbits were soaked in phosphate-buffered saline, control microRNA (cont-miR)-loaded PLGA NP solution or miR–145-loaded PLGA NP solution for 30 minutes (n = 8 for each). Vein grafts were implanted in the ipsilateral carotid artery and assessed 2 weeks after the implantation.ResultsQuantitative polymerase chain reaction analysis showed significantly higher miR-145 expression in the miR–145-treated group. The neointimal area was significantly smaller in the miR–145-treated group (phosphate-buffered saline-treated vs cont–miR-treated vs miR–145-treated group; 1.63 ± 0.52 mm² vs 1.67 ± 0.49 mm² vs 0.88 ± 0.34 mm², respectively; P < .01 for the miR–145-treated vs the cont–miR-treated group). In the miR–145-treated group, Ki–67-positive cells were significantly fewer, indicating lower VSMC proliferation. An inflammation-related molecule, CD40 expression was significantly reduced by miR–145-loaded PLGA NP treatment.ConclusionsLocal and sustained release of miR-145 by PLGA NPs attenuated intimal hyperplasia in the rabbit model by maintaining VSMCs in a contractile state. This simple ex vivo miR-145 delivery system would be promising toward broader clinical application.