河纯Ⅰ型胶原蛋白提取物防治环磷酰胺、顺铂或阿糖胞苷诱发小鼠骨髓抑制的研究

目的：观察河鲍Ⅰ型胶原蛋白提取物（Pufferfish type Ⅰ collagen extract，PTICE）对环磷酰胺（CTX）、顺铂（DDP）或阿糖胞苷（Ara-c）诱发的小鼠骨髓抑制的影响。方法：分别用CTX、DDP、Arac腹腔注射（i．P．）诱发小鼠骨髓抑制、免疫抑制等毒副反应，VHCE灌胃（i.g．）预防治疗，观察小鼠的一般状况，测定外周血细胞分类、脾脏指数和骨髓DNA含量。结果：PRICE可改善应用上述化疗药物小鼠的一般状况，保护小鼠毛发，升高外周血中的白细胞、血小板、中性粒细胞、淋巴细胞数，增加脾脏指数和骨髓DNA含量；PRICE显著降低DDP导致的小鼠死亡率。结论：PRICE可降低化疗药物引起的小鼠骨髓抑制等毒副作用。     

应用含顺铂方案治疗鼻咽癌患者致骨髓抑制的调查分析

目的:了解含顺铂(DDP)的方案治疗鼻咽癌后引起骨髓抑制的情况,为临床上对其预防和治疗提供依据。方法:对接受含DDP方案治疗的鼻咽癌患者的出院病历进行回顾性调查,记录治疗方案、治疗前后的外周血常规等指标,并进行统计、分析。结果:在使用含DDP方案治疗的299例鼻咽癌患者中,治疗后出现骨髓抑制的有205例(占68.6%),其中Ⅰ～Ⅱ级骨髓抑制为57.2%,Ⅲ～Ⅳ级骨髓抑制为11.4%;42.9%的骨髓抑制患者可治愈,其中Ⅰ、Ⅱ级骨髓抑制的治愈率分别为54.6%、37.8%,Ⅲ、Ⅳ级骨髓抑制的治愈率分别为25.0%、0。结论:含DDP方案治疗鼻咽癌后骨髓抑制的发生率高,严重的骨髓抑制不易恢复。     

环磷酰胺介导小鼠骨髓抑制动物模型的建立

目的建立环磷酰胺(CTX)介导的小鼠骨髓抑制动物模型。方法将小鼠随机分为两组即正常对照组(n=8)和CTX组(n=8)。CTX组腹腔注射CTX(120mg·kg-1),一天一次,连续三天,取外周血细胞和骨髓细胞分别计数,并通过流式细胞仪分析骨髓细胞的细胞周期。对照组腹腔注射生理盐水,其他处理同CTX组。结果与正常对照组相比,CTX组WBC和骨髓细胞数分别降至(1.81±0.58)×109.mL-1和2×105.mL-1(P<0.01)。CTX组小鼠骨髓细胞G0/G1期的的比例为(88.57±2.79)%,S期的比例为(7.52±1.59)%,正常对照组分别为(76.61±3.78)%和(18.55±2.99)%,两者有显著差异(P<0.01)。另外,CTX组的骨髓细胞增殖指数(PI)为12.38%,明显低于正常对照组(23.34%)(P<0.01)。结论小鼠骨髓抑制动物模型成功建立。     

顺铂与环磷酰胺联合应用剂量优化的实验研究

目的 :观察低剂量顺铂 (DDP)和环磷酰胺(DTX)联合用药治疗恶性肿瘤疗效及其对免疫器官的毒性。方法 :采用小鼠肉瘤S180 进行体内实验 ,观察两药单独及联合使用对小鼠S180 及胸腺和脾脏的影响。结果 :DDP组和不同剂量的DTX配伍应用与DDP组相比抑瘤率分别提高 13.6 %～ 2 9.6 % ,与相应剂量DTX组相比抑瘤率分别提高 33.5 %～34.3% ,其中DDP DTX 0 .75 7.5mg·kg-1组与DDP及相应剂量DTX组相比较有显著意义 (P <0 .0 1～ 0 .0 0 1) ;DDP组及两药联合应用各剂量组使小鼠胸腺指数和脾指数明显低于对照组。结论 :低剂量DDP与DTX联合使用加强了对肿瘤生长的抑制作用 ,与DDP组相比 ,联合应用引起的免疫器官的萎缩与DDP组无差别     

莪术提取物ERC61对化疗小鼠造血功能的影响

目的:观察莪术提取物ERC61对环磷酰胺(CTX)抑制小鼠造血功能的影响并确定其最佳给药方式。方法:实验小鼠ipCTX(100mg.kg-1.d-1),连续给药3d,复制白细胞减少症模型;将ERC61按照单纯预防、单纯治疗和预防+治疗3种给药方式ip给药,常规方法计数小鼠白细胞数、骨髓有核细胞数,并测定脾指数。结果:ERC61对CTX抑制小鼠的白细胞数、骨髓有核细胞数、脾指数均有不同程度的改善。结论:ERC61可改善CTX抑制小鼠的造血功能,其中预防+治疗的给药方式效果最好。     

螺旋藻多糖对小鼠移植性肿瘤化疗后造血恢复及相关细胞因子的影响

目的：研究螺旋藻多糖（polysaccharide from spirulina platensis,PSP)对小鼠移植性肿瘤化疗后造血恢复及相关细胞因子的影响。方法：通过右前肢皮下接种肿瘤细胞形成小鼠移植性实体瘤，给予PSP边疆灌胃10d,d4给予环磷酰胺（CTX）腹腔注射连续3d。于d11，分别了外周细胞，骨髓有核细胞及CFU－S计数，用紫外分光光度计检测骨髓DNA含量，用双抗体夹心ELISA法检测血清中IL-1,IL-3,GM-CSF,TNF含量。结果：CTX可造成明显骨髓抑制，而PSP则提升了外周血细胞，增加了骨髓中有核细胞计数和DNA含量以及促进了CFU－S形成。此外，PSP还增加了血清中IL－1，IL－3，GM－CSF，TNF含量。结论：PSP可能通过促进内源性细胞因子的分泌来实现其促进小鼠移植性肿瘤化疗损伤后的造血恢复。     

复方甘草酸苷注射液对小鼠放、化疗模型减毒作用实验研究

目的 考察复方甘草酸苷注射液(美能注射液)对于放、化疗动物模型骨髓抑制和免疫损伤的减毒作用,探寻本品临床应用的新价值。方法 选择正常及S180荷瘤小鼠,采用放疗(⁶⁰Co照射,5.0 Gy)和化疗(环磷酰胺,100 mg·kg^-1,腹腔注射)方法建立模型,通过体质量、胸腺指数、脾脏指数、白细胞数和骨髓有核细胞数等指标,评价复方甘草酸苷注射液对放、化疗模型减毒作用。复方甘草酸苷注射液设高、中、低剂量组(以甘草酸苷计分别为40,20,10 mg·kg^-1),1次·d^-1,连续静脉注射给药7 d。第8天处死动物,测定体质量、外周血白细胞数、骨髓有核细胞数、胸腺系数、脾脏系数。结果 ①化疗模型中,环磷酰胺可使得正常小鼠和S180荷瘤小鼠胸腺和脾脏的脏器指数显著下降(P<0.01),白细胞数和骨髓有核细胞数显著减少(P<0.05)。复方甘草酸苷注射液高剂量可明显升高2种化疗动物模型白细胞数和骨髓有核细胞数(P<0.05),中低剂量组也有部分改善作用。复方甘草酸苷注射液对胸腺和脾脏的脏器指数改善作用不明显。②放疗模型中,⁶⁰Co照射可使得正常小鼠和S180荷瘤小鼠胸腺和脾脏的脏器指数显著降低(P<0.01),白细胞和骨髓有核细胞数显著减少(P<0.01)。复方甘草酸苷注射液各剂量组对60Co照射引起的正常小鼠和S180荷瘤小鼠各项指标变化均未见明显改善作用。结论 对于环磷酰胺化疗引起的正常小鼠和S180荷瘤小鼠的骨髓抑制,复方甘草酸苷注射液具有明显的改善作用;对于60Co放疗引起的正常小鼠和S180荷瘤小鼠的骨髓抑制,复方甘草酸苷注射液改善作用不明显,提示本品在化疗骨髓抑制防护方面具有一定的应用价值。     

阿糖胞苷引起毛囊损伤离体模型的建立以及他克莫司对其的逆转作用

目的建立阿糖胞苷(Ara-c)诱导毛囊损伤的离体器官培养模型,并观察他克莫司(FK506)对Ara-c诱导的小鼠触须毛囊损伤的逆转作用.方法用离体器官培养的方法在倒置显微镜底下每日测量空白组、FK506 Ara-c和单纯Ara-c作用下毛囊生长长度、记录生长天数,以及液相闪烁仪测量同位素^3H-TdR的掺入率.结果 Ara-c10mg/L和25mg/L的浓度,作用2.5h能明显抑制毛囊生长和DNA合成,缩短毛囊在体外的生长时间,抑制毛囊球部细胞增殖.0.01～0.3mg/L的FK506能改善10mg/L Ara-c引起的毛囊生长和DNA合成的抑制,体外生长时间缩短以及毛囊球部细胞增殖抑制.0.1mg/L的FK506对25mg/L Ara-c引起的毛囊损伤也有相似的改善作用.结论 Ara-c诱导毛囊损伤的离体模型可以用于研究化疗脱发的机制和某些因子及药物对它的干预作用,FK506在体外对Ara-c诱导的毛囊损伤有修复作用,是治疗化疗后脱发的潜在药物.     

沙棘油静脉乳联合环磷酰胺抗肿瘤实验研究

目的:探讨沙棘油静脉乳对化疗药物环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)抗S180小鼠的增效减毒作用。方法:将接种S180瘤细胞的小鼠分为荷瘤对照组、CTX组、沙棘油静脉乳组(20,10,5mL.kg-1)、沙棘油静脉乳(20,10,5mL.kg-1)+CTX组。给药10d,进行抑瘤率计算,以及外周血常规、骨髓有核细胞计数、脾脏、胸腺质量、网状内皮系统对血流中惰性碳粒的吞噬廓清能力等的检测。结果:沙棘油静脉乳联合CTX各剂量组,肿瘤生长明显低于荷瘤对照组(P<0.01或P<0.05),沙棘油静脉乳+CTX组肿瘤生长低于CTX组(P<0.05)。与荷瘤对照组相比,CTX组骨髓有核细胞数、WBC、胸腺指数、脾指数明显下降。与CTX组相比,沙棘油静脉乳中、高剂量组联合CTX组可使骨髓有核细胞数、外周血白细胞数、脾指数明显升高(P<0.01或P<0.05);沙棘油静脉乳20mL.kg-1的吞噬系数明显高于正常对照组(P<0.05),显著提高正常小鼠的碳粒廓清能力。结论:沙棘油静脉乳对化疗药物CTX抗S180小鼠具有增效减毒的作用。沙棘油静脉乳能明显提高非特异性免疫功能。     

芪术口服液对环磷酰胺所致小鼠骨髓造血功能损伤的保护作用

目的:观察芪术口服液对环磷酰胺所致小鼠骨髓造血功能损伤的保护作用.方法:对小鼠腹腔注射100 mg/kg环磷酰胺后,观察芪术口服液对小鼠外周血象、骨髓有核细胞和胸腺、脾脏指数的影响.结果:芪术口服液能升高受损小鼠白细胞、红细胞、血小板、血红蛋白和骨髓有核细胞数量,并能使小鼠胸腺、脾脏指数升高.结论:芪术口服液对环磷酰胺引起的小鼠骨髓造血功能损伤有一定的保护作用.     

清毒饮和养正片改善L7212白血病小鼠化疗后骨髓抑制的实验研究

目的:探讨清成毒饮和养正片改善L7212小鼠骨髓抑制的作用机理。方法:取40只6 15小鼠随机平均分为四组,除10只空白对照外,均接种成L72 12白血病模型,化疗药物为2 5 0毫克/千克CTX小鼠腹腔注射,灌服中药清毒饮和养正片各0 .5毫升,治疗7d后,测定小鼠外周血像中WBC、HB、PLT ;取骨髓测定红系祖细胞(BFU E)和粒单细胞集落形成细胞(CFU GM )和粒单细胞集落形成细胞(CFU GM)数,以及小鼠骨髓中有核细胞计数。结果:治疗后小鼠外周血像(WBC、PLT、HB)均有不同程度上升;治疗组BFU E、CFU GM和骨髓有核细胞计数均高于化疗组,与模型组比较差异显著(P<0.05)。结论:清毒饮和养正片有改善L72 12白血病小鼠化疗后骨髓抑制的作用。     

正源方对环磷酰胺所致豚鼠骨髓抑制的保护作用研究

目的探讨正源方对环磷酰胺(CTX)致豚鼠骨髓抑制的保护作用。方法将豚鼠随机分为对照组、模型组、rhG-CSF组(20μg·kg-1)、正源方低、中、高剂量组(2.00,4.00,8.00g·kg-1)。正源方各给药组及rhG-CSF组在造模前提前给药3d,其余组给予同等剂量的生理盐水,连续给药18d。除对照组外,实验第4天各组肌肉注射CTX(64mg·kg-1),连续3d。于造模后第8天观察外周血象。实验结束后测定心、肝、脾、肺、肾等脏器指数,在显微镜下观察骨髓涂片的变化。结果与对照组比较,模型组豚鼠的外周血白细胞、红细胞、淋巴细胞、中性粒细胞计数、血红蛋白含量均不同程度地降低(P<0.01或P<0.05),骨髓涂片显示,骨髓巨核细胞受到不同程度地破坏;与模型组比较,各给药组的白细胞计数均显著上升(P<0.01),以rhG-CSF组提升白细胞、中性粒细胞计数最为显著(P<0.01);其中正源方中剂量组的白细胞、红细胞、淋巴细胞、中性粒细胞计数、血红蛋白含量均显著上升(P<0.01或P<0.05);各给药组豚鼠的心、肝、脾、肺、肾指数并无显著变化(P>0.05);骨髓涂片显示,正源方中剂量组对环磷酰胺抑制的骨髓有核细胞和巨核细胞系统修复作用最好。结论正源方能够促进环磷酰胺所致豚鼠骨髓抑制外周血的恢复和骨髓细胞的再生,对豚鼠的骨髓造血系统有一定的保护作用。     

1号、2号三胶扶正合剂拮抗放化疗对小鼠毒副作用的实验研究

目的:研究1号、2号三胶扶正合剂在小鼠体内对放化疗所致的骨髓抑制和免疫功能低下的拮抗作用。方法:腹腔注射环磷酰胺(CTX)复制低白细胞小鼠模型,皮下注射CTX复制免疫抑制小鼠模型,分别以复方阿胶浆为阳性对照药,设立1号、2号三胶扶正合剂高、中、低给药剂量,测定外周白细胞数、骨髓有核细胞数、脾集落形成单位(CFU-S)及碳粒廓清能力,考察各组疗效及最佳用药剂量;小鼠灌胃给药考察急性毒性作用。结果:1号、2号三胶扶正合剂及复方阿胶浆均有一定的提升外周白细胞、促进骨髓有核细胞增殖及CFU-S增加,并增强免疫功能低下小鼠的网状内皮系统吞噬功能的作用,且1号合剂效果最好;1号、2号三胶扶正合剂及盐酸左旋咪唑片对小鼠网状内皮系统功能的增强作用无明显差异;小鼠的最大耐受量为150g·kg-1。结论:三胶扶正合剂能够拮抗放化疗所致小鼠的骨髓抑制和免疫功能低下,且安全无毒副作用,可为临床推广奠定理论基础。     

香菇多糖对放化疗致动物白细胞减少症的影响

目的研究香菇多糖对放化疗致动物白细胞减少症的影响。方法通过制备小鼠和家兔白细胞减少实验动物模型,观察香菇多糖的升白作用。结果在所选择的剂量范围内,10、5、1 mg.kg-1剂量的香菇多糖不仅可以提升X射线照射和环磷酰胺致小鼠的外周血白细胞总数、血小板数量、血红蛋白含量和骨髓有核细胞总数,还可使外周血及骨髓白细胞分类趋于正常,减轻X射线照射和环磷酰胺注射所造成的骨髓抑制作用,并使胸腺、脾脏指数升高;3.7、1.9、0.9 mg.kg-1剂量香菇多糖可以提升盐酸阿糖胞苷致家兔的外周血白细胞、血小板数量和血红蛋白含量,并使外周血及骨髓白细胞分类趋于正常,减轻盐酸阿糖胞苷所造成的骨髓抑制,并使胸腺、脾脏指数升高。结论香菇多糖可以促进白细胞升高,减轻X射线照射、环磷酰胺、盐酸阿糖胞苷导致的骨髓抑制,明显改善骨髓的造血功能。     

HPLC法同时测定人血浆中顺铂和环磷酰胺的浓度

目的:建立同时测定人血浆中环磷酰胺(CTX)和顺铂(DDP)浓度的方法。方法:采用双波长高效液相色谱法,色谱柱为Hypersil-ODS2,流动相为甲醇-水(80∶20),检测波长为254 nm(DDP)、195 nm(CTX),流速为1 mL·min-1。结果:CTX、DDP保留时间分别为5.15、9.26 min,血药浓度分别在0.5～10μg·mL-1(r=0.999 9)、0.1～2.0μg·mL-1(r=0.999 8)范围内线性关系良好,检测限各为0.1、0.02μg·mL-1(S/N≥3);方法回收率分别为96.0%～98.4%、97.2%～99.2%;日内、日间RSD均<7%。结论:本方法灵敏、稳定、结果准确可靠,可用于二者血药浓度测定。     

The Research on Chimeric MHC-Ⅰ Gene Responsing to Allogeneic Dendritic Cells

目的:构建分子嵌合主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅰ基因小鼠骨髓造血干细胞,并探讨其诱导脾脏T细胞对异基因小鼠树突状细胞(DC)反应的机制.方法:密度梯度法分离培养BALB/c小鼠骨髓造血干细胞.构建携带C57BL/6小鼠MHC-Ⅰ基因慢病毒载体(病毒感染组),携带无意义基因慢病毒载体(阴性对照组).分别感染BALB/c 小鼠骨髓造血干细胞,构建分子嵌合细胞.分别取病毒感染组、阴性对照组及未加入病毒的空白对照组造血干细胞输注BALB/c小鼠后7d,获取脾脏T淋巴细胞,分别与C57BL/6小鼠DC进行混合淋巴细胞培养,测定刺激指数.结果:成功体外分选及培养BALB/c小鼠骨髓造血干细胞.病毒感染组C57BL/6小鼠MHC-Ⅰ蛋白表达率可达98.17％.单向混合淋巴细胞培养结果显示,C57BL/6小鼠DC对输注病毒感染组细胞后BALB/c小鼠脾脏T细胞刺激指数明显降低(P＜0.01).结论:输注分子嵌合MHC-Ⅰ基因造血干细胞后,小鼠脾脏T细胞对异基因小鼠DC反应明显减低.     

叔丁基对苯二酚上调Nrf2调控的基因表达并减轻环磷酰胺导致的小鼠血液毒性

血液毒性（或称骨髓抑制）是癌症化疗最常见的剂量限制毒副作用,而转录因子Nrf2控制着包括骨髓在内的许多组织对化学刺激的敏感性。本文研究了叔丁基对苯二酚（tBHQ）对小鼠外周血细胞中Nrf2调控的基因表达和环磷酰胺（CTX）导致的血液毒性的影响。CTX处理导致了小鼠外周血有核细胞的凋亡和白细胞减少,伴随着骨髓造血细胞的动员。tBHQ处理则可以在体外和体内激活RAW264.7小鼠巨噬细胞和外周血细胞中Nrf2信号和下游基因如血红素氧化酶1和谷胺酸半胱氨酸连接酶催化亚基等的表达同时,tBHQ预处理可以减轻CTX导致的小鼠外周血有核细胞的凋亡和白细胞减少,说明Nrf2可能在减轻CTX血液毒性中发挥作用。本文的研究有助于加深对化疗所致血液毒性的了解,并提示Nrf2可能作为减轻化疗毒副作用的化疗保护剂的药物靶标。     

晚期上皮性卵巢癌术后顺铂腹腔灌注联合化疗疗效观

目的探讨顺铂（Cisplatin,DDP）腹腔灌注联合环磷酰胺（Cyclophosphamide,CTX）化疗治疗卵巢癌患者术后的疗效及预后因素。方法对2000年6月至2005年6月间入住我院的晚期卵巢癌患者术后43例进行回顾性分析,所有患者都经初次手术,化疗方案为PC（CTX iv＋DDP腹腔灌注）,分别为1-~12个疗程不等,分析他们的药物反应以及预后情况。结果Ⅲ期患者中CR10例,PR 14例,SD6例,PD1例,总有效率（overall response rate,ORR）为77.4%。Ⅳ期患者CR3例,PR5例,SD3例,PD1例,PR5例,SD3例,PD1例,ORR为66.7%,两组无显著差异。但Ⅲ期同Ⅳ期患者3年生存率及5年生存率均有显著性差异。43例无进展生存PFS（progression-free survival,PFS）为21.5个月,平均生存时间为37.5个月。结论顺铂腹腔灌注联合CTX化疗治疗卵巢癌是有效而且安全的,预后与病理类型、组织分级、术后残留癌大小及化疗疗程相关。     

海洋真菌多糖YCP对小鼠扶正减毒作用的研究

从海洋真菌YC中提取的真菌多糖YCP,选择9,3,1 mg/kg的不同剂量,分别联合60Co放疗和Cy化疗正常小鼠和Heps荷瘤鼠,观察药物对放、化疗的减毒作用。以荷瘤小鼠观察药物对小鼠的扶正作用。结果:YCP(9,3,1 mg/kg)剂量组可显著地对抗由大剂量Cy造成的正常小鼠外周血白细胞,骨髓有核细胞数和胸腺指数的下降(P<0.01,P<0.05)。YCP(9,3 mg/kg)剂量组可显著地抑制由大剂量Cy和60Co照射造成的Heps荷瘤小鼠外周血白细胞,骨髓有核细胞数和脾脏指数和胸腺指数的下降(P<0.01,P<0.05)。YCP(9,3 mg/kg)可显著提高S180荷瘤小鼠的吞噬指数k和血清半数溶血值(P<0.01,P<0.05)。结论YCP可明显对抗由60Co照射,大剂量化疗药Cy引起的正常和荷瘤小鼠的血液和骨髓抑制毒性。YCP可显著提高S180荷瘤小鼠免疫功能。     

奈达铂（Nedaplatin）在大鼠体内的肾毒性和骨髓抑制的时辰毒理学研究

目的:以大鼠为实验对象,通过测定给药时间与奈达铂(Nedaplatin)诱发的肾毒性和骨髓抑制的关系,研究铂(Pt)衍生物奈达铂的时辰毒理.方法:于8:00或20:00通过尾静脉给S-D大鼠(n=8)注射奈达铂(5 mg/kg体重)或空白溶媒,给药间隔为7天.定期采血、采尿测定血清肌苷清除率和周边血中的中性粒细胞.最后一次给药后24小时,处死动物,采集肾脏和大腿骨用于Pt浓度测定和组织学检查.共给药6次.结果:20:00给药组的体重抑制明显高于8:00给药组,实验结束时,两实验组均有2只动物死亡.奈达铂诱发的骨髓抑制没有明显的给药时间相关性,但20:00给药组的肾毒性明显大于8:00给药组.肌苷清除率和肾组织损伤积分均与肾皮质中n的含量有很好的相关性.结论:奈达铂诱发的肾毒性和药物在组织中的蓄积与给药时间有很好的相关性,提示该类药物在临床使用过程中应注意给药时间的选择.