枸杞糖肽对缺氧乳鼠心肌细胞内游离钙浓度的影响

目的：研究低氧心肌细胞内游离钙([Ca^2+]i)浓度的变化，枸杞糖肽减轻缺氧诱导的心肌细胞钙超载以及对缺氧心肌的保护作用。方法：实验选用出生两三天的SD乳大鼠80只进行心肌细胞培养，建立心肌缺血模型，实验分3组：对照组；缺氧组：细胞缺氧6h；枸杞糖肽组：先加入终浓度为50mg／L的枸杞多糖，再行缺氧6h。以Fluo／AM荧光指示剂负载，通过激光扫描共聚焦显微系统和Flou-3／AM荧光指示剂标记技术，观察枸杞糖肽对缺氧心肌细胞游离钙含量的影响。结果：心肌细胞经缺氧处理6h后，细胞之间相互连接减少，大部分细胞肿胀，折光性减弱，部分细胞甚至呈圆形，少部分细胞胞膜破裂，提示心肌细胞损伤。枸杞糖肽处理组心肌细胞经缺氧后，可见部分细胞肿胀，内有颗粒，折光性减弱，但较缺氧模型组有一定的改善作用。心肌细胞Fluo-3／AM负载后在激光共聚焦显微镜下观察，细胞的分布和外形与倒置显微镜下所见相符，呈不规则棱形、多角形、星形细胞，轮廓清晰，成群的细胞出现自发性，同步性、有节律的搏动。经Flu3-AM标记后，细胞出现规律性闪烁。对照组心肌细胞[Ca^2+]i荧光强度和吸光度(A值)较低，缺氧6h荧光强度明显增加(P&;lt;0．05)；枸杞糖肽组心肌细胞[Ca^2+]i荧光密度(62．86&;#177;28．71)低于缺氧组(156．76&;#177;55．39)(P&;lt;0．01)。结论：低氧导致心肌细胞钙超载，而枸杞糖肽能减轻钙超载。     

常氧与缺氧状态下豚鼠心肌细胞内钙离子浓度与葛根素注射液的干预

目的:探讨在常氧、缺氧状态下,豚鼠心肌细胞内游离钙离子浓度与葛根素注射液干预的影响,并与硝苯地平的作用相比较。方法:采用离体豚鼠心脏Langendorff法灌注,I型胶原酶分离心肌细胞,并调整细胞数为2×109L-1。在细胞外钙含量为2mmol/L情况下,采用F-2000型荧光分光光度计进行心肌细胞内钙含量测定,计算细胞内游钙离子浓度。将心肌细胞悬液分为6组,分别为常氧及缺氧条件下的对照组、葛根素注射液组、硝苯地平组。在常氧条件下(氧分压=15.9kPa),观察100s后,随机选择3组分别加入营养液10μL、葛根素注射液10μL(终浓度:0.1mmol/L)、硝苯地平l0μL(终浓度:20mmol/L)观察100,200,300,400,500s。而另外3组在缺氧条件下(氮气:0.1cm3/s)也分别给予同浓度的上述3种药物后,按上述5个时间点进行观察。采用荧光分光光度计动态测量不同条件下各组心肌细胞内游离钙离子浓度的变化。结果:①在静息(0～100s)常氧状态(氧分压=15.9kPa)及控制细胞外细胞内游离钙离子浓度为2mmo1/L(生理情况)时,6组的心肌细胞内游离钙离子浓度无显著差异(P>0.05),故知6组的组间一致性较好,具有可比性。②心肌细胞内游离钙离子浓度:葛根素注射液组和硝苯地平组给药后100,200,300,400,500s均明显低于对照组(P<0.05～0.01)。但葛根素注射液组下降速度较硝苯地平组慢(P<0.05～0.01)。③心肌细胞内游离钙离子浓度:缺氧状态下,葛根素注射液组缺氧后100,200,300,400,500s增加较对照组缓慢(163.7±19.7),(224.2±20.7),(309.7±15.1),(424.7±14.0),(477.5±21.5)nmol/L;(208.8±28.9),(328.5±14.4),(401.8±21.2),(534.3±20.8),(751.4±36.0)nmol/L,P<0.01犦。硝苯地平组在缺氧后100,200,300,400,500s比对照组增加少(P<0.01),且降低速率较葛根素注射液组高犤硝本地平组:(109.4±19.6),(140.8±16.2),(203.1±15.2),(265.4±17.3),(301.7±24.1)nmol/L,P<0.01犦。结论:在常氧条件下葛根素注射液使心肌细胞内游离钙离子浓度明显下降;缺氧条件下,葛根素注射液延缓缺氧所引起的心肌细胞内游离钙离子浓度增加,从而阻止心肌细胞内钙超载,对心肌起到保护作用。葛根素注射液的作用与经典的钙通道阻断剂硝苯地平相似,但与硝苯地平比较,具有相对缓慢的抑制缺氧后心肌细胞内游离钙离子浓度升高的特点。     

常氧与缺氧状态下豚鼠心肌细胞内钙离子浓度与葛根素注射液的干预

目的：探讨在常氧、缺氧状态下，豚鼠心肌细胞内游离钙离子浓度与葛根素注射液干预的影响，并与硝苯地平的作用相比较。方法：采用离体豚鼠心脏Langendorff法灌注。Ⅰ型胶原酶分离心肌细胞．并调整细胞数为2&;#215;10^9L^-1。在细胞外钙含量为2mmol／L情况下，采用F-2000型荧光分光光度计进行心肌细胞内钙含量测定，计算细胞内游钙离子浓度。将心肌细胞悬液分为6组，分别为常氧及缺氧条件下的对照组、葛根素注射液组、硝苯地平组。在常氧条件下(氧分压=15．9kPa)，观察100s后，随机选择3组分别加入营养液10μL、葛根素注射液10μL(终浓度：0．1mmol／L)、硝苯地平10μL(终浓度：20mmol／L)观察100，200，300，400，500s。而另外3组在缺氧条件下(氮气：0．1cm^3／s)也分别给予同浓度的上述3种药物后，按上述5个时间点进行观察。采用荧光分光光度计动态测量不同条件下各组心肌细胞内游离钙离子浓度的变化。结果：①在静息(0～100s)常氧状态(氧分压=15．9kPa)及控制细胞外细胞内游离钙离子浓度为2mmol／L(生理情况)时，6组的心肌细胞内游离钙离子浓度无显著差异(P&;gt;0．05)，故知6组的组间一致性较好，具有可比性。②心肌细胞内游离钙离子浓度：葛根素注射液组和硝苯地平组给药后100，200，300，400，500s均明显低于对照组(P&;lt;0．05～0．01)。但葛根素注射液组下降远度较硝苯地平组慢(P&;lt;0．05～0．01)。③心肌细胞内游离钙离子浓度：缺氧状态下，葛根素注射液组缺氧后100，200，300，400，500s增加较对照组缓慢(163．7&;#177;19．7)，(224．2&;#177;20．7)，(309．7&;#177;15．1)，(424．7&;#177;14．0)，(477．5&;#177;21．5)nmol／L；(208．8&;#177;28．9)，(328．5&;#177;14．4)，(401．8&;#177;21．2)，(534．3&;#177;20．8)，(751．4&;#177;36．0)nmol／L，P&;lt;0．01]。硝苯地平组在缺氧后100，200，300，400，500s比对照组增加少(P&;lt;0．01)，且降低速率较葛根素注射液组高【硝本地平组：(109．4&;#177;19．6)，(140．8&;#177;16．2)．(203．1&;#177;15．2)，(265．4&;#177;17．3)，(301．7&;#177;24．1)nmol／L,P&;lt;0．01】。结论：在常氧条件下葛根素注射液使心肌细胞内游离钙离子浓度明显下降；缺氧条件下，葛根素注射液延缓缺氧所引起的心肌细胞内游离钙离子浓度增加，从而阻止心肌细胞内钙超载，对心肌起到保护作用。葛根素注射液的作用与经典的钙通道阻断剂硝苯地平相似，但与硝苯地平比较，具有相对缓慢的抑制缺氧后心肌细胞内游离钙离子浓度升高的特点。     

应用Fura—2／AM和图像分析系统测定细胞内游离钙浓度

目的：测定培养大鼠心肌细胞游离钙浓度（［Ｃａ２＋］ｉ）。方法：采用钙荧光指示剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ结合图像分析技术。结果：静息时，心肌细胞内［Ｃａ２＋］ｉ为１３３．４６±４．９９ｎｍｏｌ／Ｌ（ｘ±ｓ），高Ｋ＋能引起细胞内［Ｃａ＋］ｉ升高。结论：本测定系统能更准确地反映细胞内［Ｃａ＋］ｉ变化，且能同步评估细胞形态学参数及观察细胞的形态学改变，灵敏度高，性能稳定，是研究Ｃａ２＋生物学功能的重要手段。     

一氧化氮对缺氧/复氧乳鼠心肌细胞内游离钙的影响

目的研究一氧化氮供体S-亚硝基-已酰青酶胺(SNAP)对缺氧/复氧乳鼠心肌细胞内游离钙浓度的影响。方法培养20×5只SD大鼠(1~3)d的心肌细胞,随机分为5组:A组为正常对照组;B组为单纯缺氧/复氧组(A/R缺氧2 h复氧1 h);C组为NO预处理组加入SNAP使其终浓度分别为0.1 mmol/L,预处理20 min后行A/R;D组为NO预处理组加入SNAP使其终浓度为1 mmol/L,预处理20 min后行A/R;E组为NO预处理组加入SNAP使其终浓度为2 mmol/L,预处理20 min后行A/R。与复氧后应用特异性Ca2+荧光指示剂Fluo-3/AM负载细胞,激光共聚焦显微镜检测游离Ca2+浓度。结果与正常组相比,单纯缺氧/复氧组钙浓度明显升高(P<0.01);0.1 mmol/L和1 mmol/L SNAP能明显降低钙超载(与B组相比,P<0.01),2 mmol/L SNAP组加重钙超载(与B组相比,P>0.05)。结论一氧化氮通过降低细胞内钙超载而减轻缺氧/复氧对心肌细胞的损伤,其作用有浓度依赖性。     

药物预适应对各部位心肌细胞缺氧再复氧的保护作用

目的:分析硝酸酯类药物预适应对不同部位的心肌细胞缺氧再复氧的保护作用。方法:实验于2003-05/2005-09在泰山医学院中心实验室完成。取新生的Wistar大鼠100只,无菌取出心脏,培养不同部位的心肌细胞(心房、左心室、右心室),分为4组:①空白对照组:不作任何处理。②单纯缺氧/再复氧组:在含有体积分数为0.95的N2、0.03的CO2和0.02的O2混合气体的缺氧培养箱内孵育2h,正常培养箱内孵育1h。③L-精氨酸处理 缺氧/再复氧组:先用10mmol/LL-精氨酸处理细胞2h,然后进行缺氧再复氧。④缺氧预适应组:先将细胞缺氧15min,再复氧15min,循环4次,然后进行缺氧再复氧。观察各组细胞坏死率、细胞凋亡情况、培养液中乳酸脱氢酶浓度及细胞内游离钙离子浓度等。结果:①单纯缺氧/再复氧组不同部位的细胞坏死率、培养液中乳酸脱氢酶释放量及胞内钙离子浓度均显著高于空白对照组(P<0.01),不同部位间比较差异无显著性意义(P>0.05)。②缺氧预适应组、L-精氨酸处理 缺氧/再复氧组不同部位的细胞坏死率、培养液中乳酸脱氢酶释放量及胞内钙离子浓度均显著低于单纯缺氧/再复氧组(P<0.05)。结论:L-精氨酸的预适应同经典的缺氧预适应一样,可以对缺氧再复氧损伤产生明显的保护作用,其可能是通过降低心肌细胞内钙离子的浓度来发挥作用的,而不同部位的心肌细胞产生药物预适应的能力无明显差别。     

血管紧张素Ⅱ与血管紧张素-（1-7）对人血管平滑肌细胞内游离钙浓度的影响

目的：观察血管紧张素Ⅱ与血管紧张素-（1-7）分别刺激后,培养的人血管平滑肌细胞内游离Ca^2＋浓度的变化情况.方法：实验于2004-06/2004-12在首都医科大学附属北京安贞医院高血压研究室完成.①收集2004-06/2004-09安贞医院心脏外科进行冠状动脉旁路移植术患者术中剩余大隐静脉,进行体外人血管平滑肌细胞培养,并分为高血压搭桥组（n=23,男22例,女1例）和正常血压搭桥组（n=17,男16例,女1例）.②用钙荧光探针Fluo-3/AM作为钙指示剂,利用激光共聚焦显微镜观察不同浓度的血管紧张素Ⅱ和血管紧张素-（1-7）分别刺激后的平滑肌细胞内游离钙浓度的变化情况.结果：①在分别加入血管紧张素Ⅱ和血管紧张素-（1-7）前,细胞内的Ca^2＋也具有一定的荧光光密度,但是相对较低.②经血管紧张素Ⅱ和血管紧张素-（1-7）刺激后人平滑肌细胞内Ca^2＋均迅速升高.③高血压搭桥组血管紧张素Ⅱ刺激后平滑肌细胞胞内Ca^2＋荧光光密度明显高于正常血压搭桥组,而经血管紧张素-（1-7）刺激后,高血压搭桥组平滑肌细胞胞内Ca^2＋荧光光密度明显低于正常血压搭桥组.结论：①血管紧张素Ⅱ和血管紧张素-（1-7）刺激后人血管平滑肌细胞存在胞内Ca^2＋的变化.②抑制血管紧张素Ⅱ介导的平滑肌细胞内游离Ca^2＋浓度增加可能是血管紧张素-（1-7）的舒血管机制之一.     

药物预适应对各部位心肌细胞缺氧再复氧的保护作用

目的：分析硝酸酯类药物预适应对不同部位的心肌细胞缺氧再复氧的保护作用。 方法：实验于2003-05／2005-09在泰山医学院中心实验室完成。取新生的Wistar大鼠100只，无菌取出心脏，培养不同部位的心肌细胞（心房、左心室、右心室），分为4组：①空白对照组：不作任何处理。②单纯缺氧／再复氧组：在含有体积分数为0．95的N2、0．03的CO2和0．02的O2混合气体的缺氧培养箱内孵育2h，正常培养箱内孵育1h。③L-精氨酸处理＋缺氧／再复氧组：先用10mmol／L L-精氨酸处理细胞2h，然后进行缺氧再复氧。④缺氧预适应组：先将细胞缺氧15min，再复氧15min，循环4次，然后进行缺氧再复氧。观察各组细胞坏死率、细胞凋亡情况、培养液中乳酸脱氢酶浓度及细胞内游离钙离子浓度等。 结果：①单纯缺氧／再复氧组不同部位的细胞坏死率、培养液中乳酸脱氢酶释放量及胞内钙离子浓度均显著高于空白对照组（P〈0．01），不同部位间比较差异无显著性意义（P〉0．05）。②缺氧预适应组、L-精氨酸处理＋缺氧／再复氧组不同部位的细胞坏死率、培养液中乳酸脱氢酶释放量及胞内钙离子浓度均显著低于单纯缺氧／再复氧组（P〈0．05）。 结论：L-精氨酸的预适应同经典的缺氧预适应一样，可以对缺氧再复氧损伤产生明显的保护作用，其可能是通过降低心肌细胞内钙离子的浓度来发挥作用的，而不同部位的心肌细胞产生药物预适应的能力无明显差别。     

钙三醇和甲状旁腺素对鼠心肌细胞凋亡的影响及机制

目的研究甲状旁腺素(parathyroidhormone,PTH)对心肌细胞内游离钙和细胞凋亡的影响,以及钙三醇的修复作用。方法利用培养的新生SD大鼠(n=25)心肌细胞,以Fluo-3/AM负载,通过激光共聚焦显微镜测定细胞内游离钙浓度([Ca2+]i);采用透射电镜和流式细胞仪观察细胞凋亡的变化。结果PTH1-340.01μmol/L和0.1μmol/L刺激7d后,心肌细胞内钙荧光强度分别为186.0±43.6,217.9±22.2,、细胞凋亡率分别为(6.97±1.00)%和(12.58±1.75)%较对照组[(77.7±19.9)%,(0.12±0.11)%]显著增加,差异有显著性意义(F=158.52,54.19,P<0.01)。若以PTH1-340.1μmol/L刺激,并同时加入0.001μmol/L的钙三醇干预上述指标明显降低[分别为(114.3±29.9)%,(3.43±0.40)%],差异有显著性意义(F=158.52,54.19,P<0.01);但同时应用0.1μmol/L钙三醇干预,则无显著改善。结论PTH1-34可以浓度依赖性增加心肌细胞内[Ca2+]i,诱导细胞肥大和凋亡;适宜浓度的钙三醇干预,具有修复作用。     

血管紧张素Ⅱ与血管紧张素-(1-7)对人血管平滑肌细胞内游离钙浓度的影响

目的：观察血管紧张素Ⅱ与血管紧张素-(1-7)分别刺激后，培养的人血管平滑肌细胞内游离Ca~(2+)浓度的变化情况。 方法：实验于2004-06／2004-12在首都医科大学附属北京安贞医院高血压研究室完成。①收集2004-06／2004-09安贞医院心脏外科进行冠状动脉旁路移植术患者术中剩余大隐静脉，进行体外人血管平滑肌细胞培养，并分为高血压搭桥组(n=23，男22例，女1例)和正常血压搭桥组(n=17，男16例，女1例)。②用钙荧光探针Fluo-3／AM作为钙指示 剂，利用激光共聚焦显微镜观察不同浓度的血管紧张素Ⅱ和血管紧张素-(1-7)分别刺激后的平滑肌细胞内游离钙浓度的变化情况。 结果：①在分别加入血管紧张素Ⅱ和血管紧张素-(1-7)前，细胞内的Ca~(2+)也具有一定的荧光光密度，但是相对较低。②经血管紧张素Ⅱ和血管紧张素-(1-7)刺激后人平滑肌细胞内Ca~(2+)均迅速升高。③高血压搭桥组血管紧张素Ⅱ刺激后平滑肌细胞胞内Ca~(2+)荧光光密度明显高于正常血压搭桥组，而经血管紧张素-(1-7)刺激后，高血压搭桥组平滑肌细胞胞内Ca~(2+)荧光光密度明显低于正常血压搭桥组。 结论：①血管紧张素Ⅱ和血管紧张素-(1-7)刺激后人血管平滑肌细胞存在胞内Ca~(2+)的变化。②抑制血管紧张素Ⅱ介导的平滑肌细胞内游离Ca~(2+)浓度增加可能是血管紧张素-(1-7)的舒血管机制之一。     

大蒜素对血管紧张素Ⅱ诱发人心房肌细胞钙电流和游离钙离子浓度的影响

背景近年来发现血管紧张素Ⅱ可诱发心房电重构,而大蒜素具有相应的拮抗作用,可阻止或减轻心房电重构的发生.目的观察大蒜素对血管紧张素Ⅱ诱发人心房肌细胞膜钙通道电流和细胞内游离钙离子浓度的影响.设计以急性分离的人的心房肌细胞为实验对象,随机对照设计.单位一所军医大学医院心内科. 方法实验于2003-06/2004-06在第四军医大学西京医院心脏内科实验室完成.选择在此期间接受心脏体外循环手术的先天性心脏病患者10例;男6例,女4例,平均年龄(15±6)岁.术中取患者右心耳标本送至实验室后,急性分离单个人心房肌细胞,实验分4组对照组(不加任何干预措施);血管紧张素Ⅱ组加入终浓度为0.1μmol/L的血管紧张素Ⅱ;大蒜素组加入终浓度为50 μmol/L的大蒜素;血管紧张素Ⅱ+大蒜素组大蒜素50 μmol/L与血管紧张素Ⅱ0.1 μmol/L同时加入.采用全细胞膜片钳方法记录L型钙电流;以钙荧光探针荧光指示剂负载,应用激光共聚焦显微镜技术,分别于加入干预药物后即刻与15 min检测游离钙离子浓度变化.主要观察指标各组人心房肌细胞L型钙电流峰值电流密度及钙离子游离钙离子的荧光强度变化率.结果①血管紧张素Ⅱ组人心房肌细胞膜L型钙电流峰值电流密度明显高于对照组[(-12.77±1.61),(-5.78±0.81)pA/pF,P＜0.05).②大蒜素组人心房肌细胞膜L型钙电流峰值电流密度与对照组比较,无明显差异[(-5.69±0.83)pA/pF,P＞0.05].③血管紧张素Ⅱ+大蒜素组人心房肌细胞膜L型钙电流峰值电流密度明显低于血管紧张素Ⅱ组[(-8.75±0.97)pA/pF,P＜0.05).④血管紧张素Ⅱ组人心房肌细胞内游离钙离子荧光强度和游离钙离子荧光强度变化率明显高于对照组和大蒜素组[(2610.1±112.6,(299.2±27.3)%;653.9±42.5,0;639.5±44.7,(-2.2±0.6)%,P＜0.05].血管紧张素Ⅱ+大蒜素组人心房肌细胞游离钙离子荧光强度和游离钙离子荧光强度变化率明显低于血管紧张素Ⅱ组[(1284.9±85.2,(96.5±8.4)%,P＜0.05].结论大蒜素可拮抗血管紧张素Ⅱ致人心房肌细胞膜L型钙电流峰值电流密度的增加,拮抗人心房肌细胞内钙超载,产生减轻心房肌细胞电重构的作用.     

枸杞多糖对胎儿卵巢组织冷冻保存的影响

背景：抗氧化剂的应用对于提高卵巢组织冻存后的活力起着很重要的作用。目的：通过观察冷冻保存的胎儿卵巢组织异种移植到裸鼠肾被膜下的发育情况,探索枸杞多糖在卵巢组织冷冻保存中的作用。方法：实验分为4组。①新鲜移植组：取材后的新鲜胎儿卵巢组织直接进行移植。②冻存对照组：冷冻保护液为基液。③β-巯基乙醇组：冷冻保护液为基液添加100μmol/Lβ-巯基乙醇。④枸杞多糖组：冷冻保护液为基液添加400mg/L枸杞多糖。对冷冻复温后的胎儿卵巢皮质块进行祼鼠的肾被膜下移植,并于移植后12周取材。结果与结论：各组在移植物的存活率上差异无显著性意义（P〉0.05）。在卵泡计数上冷冻对照组最低（P〈0.05）。在卵泡的存活率上,各组间差异均有显著性意义,其中以冷冻对照组最低,枸杞多糖组最高。β-巯基乙醇组和枸杞多糖组卵巢超微结构较冷冻对照组保存的好。提示400mg/L的枸杞多糖和100μmol/L的β-巯基乙醇有利于卵巢组织的冷冻保存,并可显著提高冷冻卵巢组织移植后的存活率。     

枸杞多糖对染铅小鼠学习记忆的影响

目的：探讨染铅小鼠灌服枸杞多糖后学习记忆的变化。方法：实验于2004—02／05在暨南大学药学院实验技术中心完成。选择健康6周龄昆明种小鼠50只，分为5组，即空白对照组，染铅模型组及枸杞多糖3．6g／kg，1．8g／kg，0．9g／kg组，每组10只。将醋酸铅溶于蒸馏水中按40mg／kg腹腔注射于染铅模型组及枸杞多糖组。枸杞多糖3个剂量组分别灌胃3．6，1．8，及0．9g／kg的枸杞多糖，其余两组灌服等量生理盐水，连续给药6周。笫7周采用Morris水迷宫（RB-100B圆型水迷宫）实验观察动物学习记忆变化情况，以连续8次训练中7次未超过15s找到避难台为训练达标。于训练1h后和1周后分别进行5次测试，记录每次到达避难台所需时间。第8周取小鼠血和股骨测血铅和骨铅含量。结果：50只小鼠全部进入结果分析。①小鼠血铅含量：模型对照组显著高于空白对照组[（1．70&;#177;0．01）mg／kg，（0．06&;#177;0．01）mg／kg，（t=366．7，P〈0．01）1。枸杞多糖1．8g,／kg，3．6g／kg组显著低于模型对照组[（0．30&;#177;0.23）mg/kg，（0．09&;#177;0．15）mg／kg，（t=19．32，33，87，P〈0．05）]。②小鼠骨铅含量：模型对照组显著高于空白对照组[（175．7&;#177;98．9）mg／kg，（1．4&;#177;0．9）mg／kg，（担19．06，P〈0．01）]。枸杞多糖0．9g／kg，1．8g／kg，3．6g／kg组均显著低于模型对照组[（153.5&;#177;993）mg／kg，（132．9&;#177;28．5）mg／kg，（122．8&;#177;19．6）mg／kg，（t=1．71—3．33，P〈0．05）1。③小鼠到避难台的时间：枸杞多糖不同剂量组均较模型对照组缩短，其中3．6g／kg组小鼠1h后到避难台的时间显著短于模型对照组[（28．2&;#177;13．6）s，（39．1&;#177;18．2）8，（t=1．80，P〈0．05）]。结论：枸杞多糖能有效促进染铅小鼠体内铅排除，改善铅对小鼠学习记忆的损害作用。可推测其改善记忆作用与枸杞多糖降低小鼠体内铅含量有关。     

枸杞多糖对染铅小鼠学习记忆的影响

目的:探讨染铅小鼠灌服枸杞多糖后学习记忆的变化。方法:实验于2004-02/05在暨南大学药学院实验技术中心完成。选择健康6周龄昆明种小鼠50只,分为5组,即空白对照组,染铅模型组及枸杞多糖3.6g/kg,1.8g/kg,0.9g/kg组,每组10只。将醋酸铅溶于蒸馏水中按40mg/kg腹腔注射于染铅模型组及枸杞多糖组。枸杞多糖3个剂量组分别灌胃3.6,1.8,及0.9g/kg的枸杞多糖,其余两组灌服等量生理盐水,连续给药6周。第7周采用Morris水迷宫(RB-100B圆型水迷宫)实验观察动物学习记忆变化情况,以连续8次训练中7次未超过15s找到避难台为训练达标。于训练1h后和1周后分别进行5次测试,记录每次到达避难台所需时间。第8周取小鼠血和股骨测血铅和骨铅含量。结果:50只小鼠全部进入结果分析。①小鼠血铅含量:模型对照组显著高于空白对照组(1.70±0.01)mg/kg,(0.06±0.01)mg/kg,(t=366.7,P<0.01)。枸杞多糖1.8g/kg,,3.6g/kg组显著低于模型对照组(0.30±0.23)mg/kg,(0.09±0.15)mg/kg,(t=19.32,33.87,P<0.05)。②小鼠骨铅含量:模型对照组显著高于空白对照组(175.7±28.9)mg/kg,(1.4±0.9)mg/kg,(t=19.06,P<0.01)。枸杞多糖0.9g/kg,1.8g/kg,3.6g/kg组均显著低于模型对照组(153.5±29.3)mg/kg,(132.9±28.5)mg/kg,(122.8±19.6)mg/kg,(t=1.71～3.33,P<0.05)。③小鼠到避难台的时间:枸杞多糖不同剂量组均较模型对照组缩短,其中3.6g/kg组小鼠1h后到避难台的时间显著短于模型对照组(28.2±13.6)s,(39.1±18.2)s,(t=1.80,P<0.05)。结论:枸杞多糖能有效促进染铅小鼠体内铅排除,改善铅对小鼠学习记忆的损害作用。可推测其改善记忆作用与枸杞多糖降低小鼠体内铅含量有关。     

Platelet intracellular free calcium concentration in normotensive and hypertensive pregnancies in the human

1. Basal and stimulated platelet intracellular free calcium concentrations were measured in non-pregnant women and in third trimester patients who were either normotensive or who had pregnancy-induced hypertension or pre-eclampsia. There were 15 subjects in each group. 2. A trend for a reduction of the maximal response of platelet calcium levels to stimulation by 5-hydroxytryptamine was seen in pregnant groups compared with nonpregnant subjects, but this was significant only in pre-eclampsia. 3. No significant differences in basal or adenosine 5'-pyrophosphate-stimulated levels of platelet intracellular free calcium concentration were observed between the four groups. 4. These results illustrate that basal platelet calcium levels are unchanged in hypertension of pregnancy. Alterations in basal platelet calcium levels may not be involved in the platelet activation that is a feature of pre-eclampsia.     

Effects of acute hypermagnesaemia on intracellular calcium concentration and adrenergic activity

The effects of acute hypermagnesaemia on intracellular free calcium and adrenergic activity were investigated in six normotensive volunteers given intravenous magnesium sulphate for 3 h. The free calcium concentration in platelets decreased after the first hour of infusion (P less than 0.05), but did not remain significantly depressed after 2 and 3 h of continued infusion. Plasma noradrenaline increased during the infusion (P less than 0.05), with no change in plasma adrenaline. The results demonstrate that the effects of intravenous magnesium sulphate on free intracellular calcium and plasma catecholamines are similar to those described with calcium antagonists.     

Effects of ethanol on neurotransmitter release and intracellular free calcium in PC12 cells

The effect of ethanol on muscarine-stimulated release of l-[3H]norepinephrine ([3H]NE) was studied using the rat pheochromocytoma cell line, PC12. At concentrations of 25 mM and above, ethanol produced a dose-dependent inhibition of muscarine-stimulated release of [3H]NE. The inhibition of muscarine-stimulated transmitter release occurred in the absence of any detectable effect of ethanol on [3H]NE uptake or on muscarinic binding to the cells. However, ethanol produced an inhibition of muscarine-stimulated elevation of intracellular free Ca++ which corresponded with the inhibition of transmitter release. At concentrations greater than 100 mM, ethanol produced an increase in the basal release of [3H]NE. Intracellular free Ca++ also was increased by ethanol concentrations greater than 100 mM. The elevation of basal transmitter release and intracellular free Ca++ by concentrations of ethanol greater than 100 mM occurred independently of the inhibition by ethanol of muscarine-stimulated elevation of intracellular free Ca++ and transmitter secretion. These results suggest that the effects of ethanol on neurotransmitter release are associated with the effects of ethanol on intracellular free Ca++.     

钙离子和钙网织蛋白对心肌细胞的作用

目的:阐述钙离子与钙网织蛋白对心肌细胞的作用。资料来源:检索PubMed 1994-01/2005-12与钙离子和钙网织蛋白对心肌细胞作用的相关文章,检索词为“Ca2 ,calreticulin,cardiomy-ocytes/cardiac myocyte,differentiation”,并限定语言种类为英语。资料选择:对所检索到的文献进行初筛,选择与钙离子和钙网织蛋白对心肌细胞作用的相关文章,筛除明显不符合原文的文章和重复性研究。资料提炼:共收集相关文章200篇,纳入42篇,排除158篇。资料综合:通过对内质网和肌质网上细胞内Ca2 释放通道(RyR和IP3R)的分子结构以及crt基因结构的研究表明:通道分子和钙网织蛋白共同参与调控体内Ca2 稳态,从而在心脏发育分化过程中发挥重要作用。结论:在心脏中细胞内游离Ca2 是一种关键的第二信使,细胞内Ca2 稳态的改变会显著影响许多心脏功能包括收缩舒张和心脏发育。细胞内Ca2 稳态的维持主要依赖内质网。在内质网中,钙离子主要与钙网织蛋白结合。crt基因敲除可损伤心脏发育而导致胚胎死亡。     

Effect of cytochalasin B on intracellular free calcium concentration in human polymorphnuclear leukocytes after repeated stimulation withn-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine

Summary Cytochalasin B can influence various functions of human polymorphonuclear leukocytes, including chemotaxis, lysosomal enzyme release, and reactive oxygen species generation. In this study we investigated the effect of cytochalasin B on the increase in intracellular free calcium concentration after three consecutive additions of 10⁻⁷ MN-formyl-methionyl-leucyl-phenylalanine. The interval between stimulations was 5 min. Intracellular free calcium concentration was monitored using the fluorencent calcium indicator FURA-2AM. Cytochalasin B (3.3 μg/ml) added 60 s before the cell stimulation enhanced all three polymorphonuclear leukocyte calcium responses by increasing theN-formyl-methionyl-leucylphenylalanine-induced calcium influx from the extracellular space. Cytochalasin B increased the peak intracellular free calcium concentration and elevated the plateau phase level, but had no influence on its shape. In addition, pretreatment with cytochalasin B of polymorphonuclear leukocytes suspended in low calcium medium restored their capacity to respond to a third stimulation withN-formyl-methiolnyl-leucyl-phenylalanini. Finally, in resting cells cytochalasin B caused a moderate increase in intracellular free calcium concentration which was independent of extracellular calcium.