MMP-9、CD133蛋白在复发人脑胶质瘤中的表达及意义

背景与目的：肿瘤干细胞在胶质瘤复发中的作用备受关注,然而其获得侵袭力的具体机制尚不清楚。本课题旨在研究基质金属蛋白酶一9（MMP．9）、肿瘤干细胞标志物CDl33蛋白在复发人脑胶质瘤中的表达及可能作用。方法：采用免疫组织化学方法检测24例脑胶质瘤患者原发、复发两次手术组织标本及15例正常脑组织标本中MMP．9、CDl33蛋白的表达情况,并行相关性分析。结果：正常脑组织标本中未检测到MMP．9、CD133蛋白表达。24例脑胶质瘤患者两次手术标本中．CDl33和MMP-9蛋白表达强度均随着胶质瘤病理级别的增加而增高（氏0．01）。胶质瘤原发、复发两次手术组织标本中CDl33和MMP．9蛋白表达强度差异有统计学意SL（P〈0．05）：复发胶质瘤病理级别有增高趋势（P〈0．01）。CDl33和MMP-9蛋白表达呈正相关（P〈0．01）。结论：MMP．9、CDl33蛋白的表达与脑胶质瘤的恶性程度密切相关．可能在脑胶质瘤的复发过程中起协同作用。     

Nogo-B在人脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤病理分级的相关性

目的：探讨Nogo—B基因在人脑胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤病理分级的相关性。方法：收集上海长征医院神经外科2005—2008年手术获得的经病理证实的人脑胶质瘤组织标本36份，另取其他手术切除的正常脑组织标本10份。以免疫组化技术、Real—timePCR和Western blotting等方法检测这些标本中Nogo—B在基因和蛋白质层面的表达水平，结合病理资料分析Nogo—B的表达和病理分级的相关性。结果：Real—timePCR检测发现，恶性程度高的胶质瘤组织中Nogo—B基因表达明显下调，Ⅲ级的胶质瘤组织中Nogo—B基因表达水平与正常脑组织相比下降了90％左右（P〈0．01），Nogo—B基因表达水平与肿瘤的恶性度成相关。Westernblotting检测显示，正常脑组织中Nogo—B蛋白表达相对恒定；在高恶性级别的胶质瘤中No—go—B的蛋白表达显著下调，其下降程度与肿瘤的恶性程度呈负相关。免疫组织化学检测显示，Nogo-B主要在人正常脑组织中弥漫性阳性表达（100％），在人胶质瘤组织中表达显著降低；36例胶质瘤组织中Nogo-B染色阳性程度随着肿瘤恶性程度增加而显著降低（在Ⅰ-Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级中阳性表达分别为88．2％，42．9％，25．0％），各组间比较差异有统计学意义（P〈0．01）。结论：在人脑胶质瘤中Nogo—B在mRNA和蛋白质水平上表达均出现下调，其下调程度与病理分级呈负相关。     

MSP58基因表达水平与人脑胶质瘤恶性度的关系

目的:观察MSP58基因表达水平与人脑胶质瘤恶性度的关系.方法:在41例按WHO分类和分级标准为Ⅰ-Ⅳ级的人脑胶质瘤标本、4株人脑胶质瘤细胞系(U251,U87,BT325和SHG44)以及6例正常脑组织标本中,运用半定量RT - PCR及蛋白质印迹法检测MSP58 mRNA和蛋白的表达水平.结果:MSP58 mR-NA和蛋白在人脑胶质瘤组织中存在表达,其表达水平随人脑胶质瘤恶性度的增加而升高.在正常脑组织和恶性脑胶质瘤之间,以及脑胶质瘤Ⅰ-Ⅳ级病理级别间比较均有显著差异.MSP58 mRNA和蛋白在U251、U87、BT325和SHG44细胞中均有高表达.结论:MSP58 mRNA和蛋白在人脑胶质瘤中高表达,其表达水平与脑胶质瘤的恶性度有关,提示MSP58在脑胶质瘤的形成和恶性演进中具有重要作用.     

碱性成纤维细胞生长因子在不同级别人脑胶质瘤中的表达

目的：研究碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）与人脑胶质瘤恶性程度之间的关系。方法：取手术切除人脑胶质瘤标本45例,手术内减压正常脑组织5例,免疫组织化学染色观察bFGF在正常脑组织及不同级别脑胶质瘤组织中的表达水平。结果：正常脑组织无bFGF表达,随胶质瘤级别增加bFGF表达率明显增高,正常脑组织、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤两两之间差异有显著性（P〈0.05）。结论：bFGF在正常脑组织中不表达,其表达与人脑胶质瘤的恶性程度正相关,可成为判断胶质瘤恶性程度和预后的一项指标,并为胶质瘤的治疗提供新的途径。     

人脑胶质细胞瘤中血管内皮生长因子基因的表达研究

目的　研究血管内皮生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor ,VEGF)在脑胶质细胞瘤中的表达及其与肿瘤病理分级、新生血管形成的关系。方法　采用Northern杂交和免疫组织化学染色检测 3 0例脑胶质瘤标本 ,2例脑胶质瘤细胞株 ,4例正常脑组织的VEGFmRNA和蛋白表达水平。结果　正常脑组织中VEGFmRNA的表达水平极低 ,而脑胶质瘤组织和细胞系中VEGFmRNA的表达水平高 ,P <0 .0 5。在正常脑组织中未见VEGF免疫组化染色阳性细胞 ,脑胶质瘤组织和细胞系中VEGF高表达 ,P <0 .0 5。随着脑胶质瘤恶性程度的增加 ,VEGFmRNA的表达增高 (γ =0 .85 ,P <0 .0 1)。VEGF的表达还与肿瘤的血管密度相关 (γ =0 .88,P <0 .0 1)。结论　脑胶质瘤中VEGF的异常表达 ,是判断脑胶质细胞瘤恶性程度和血管丰富程度的 1项客观指标。     

人脑胶质瘤中PHLPP1的表达及意义

目的:研究PHLPP1在人脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法:选取徐州医学院附属医院神经外科2009年12月至2011年10月间手术切除并经病理证实的人脑胶质瘤标本37例,其中I级1例,Ⅱ级12例,Ⅲ级16例,胶质母细胞瘤8例。另取11例因脑创伤行内减压术患者的正常脑组织标本作为对照。应用RT-PCR、Western blotting分别检测各标本中PHLPP1 mRNA和PHLPP1蛋白的表达。结果:RT-PCR和Western-blotting检测结果显示正常脑组织标本中PHLPP1 mRNA和PHLPP1蛋白表达最高,不同级别胶质瘤组织PHLPP1 mRNA和PHLPP1蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05),且随着肿瘤病理级别的增高,胶质瘤组织中PHLPP1 mRNA和PHLPP1蛋白表达值降低,表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:PHLPP1在正常脑组织和不同级别的脑胶质瘤组织中都有表达,其表达值与肿瘤的病理分级呈负相关性,这可能是胶质瘤发生发展的重要机制之一。     

Nogo B在人脑胶质瘤中的表达及其与肿瘤病理分级的相关性

目的: 探讨NogoB基因在人脑胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤病理分级的相关性。方法：收集上海长征医院神经外科2005-2008年手术获得的经病理证实的人脑胶质瘤组织标本36份，另取其他手术切除的正常脑组织标本10份。以免疫组化技术、Realtime PCR和Western blotting等方法检测这些标本中NogoB在基因和蛋白质层面的表达水平，结合病理资料分析NogoB的表达和病理分级的相关性。结果：Realtime PCR检测发现，恶性程度高的胶质瘤组织中NogoB基因表达明显下调，Ⅲ级的胶质瘤组织中NogoB基因表达水平与正常脑组织相比下降了90%左右(P<0.01)，NogoB基因表达水平与肿瘤的恶性度成相关。Western blotting检测显示，正常脑组织中NogoB蛋白表达相对恒定；在高恶性级别的胶质瘤中NogoB的蛋白表达显著下调，其下降程度与肿瘤的恶性程度呈负相关。免疫组织化学检测显示，NogoB主要在人正常脑组织中弥漫性阳性表达（100%），在人胶质瘤组织中表达显著降低；36例胶质瘤组织中NogoB染色阳性程度随着肿瘤恶性程度增加而显著降低（在ⅠⅡ、Ⅲ、Ⅳ级中阳性表达分别为88.2%，42.9%，25.0%），各组间比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论：在人脑胶质瘤中NogoB在mRNA和蛋白质水平上表达均出现下调，其下调程度与病理分级呈负相关。     

Bcl-2蛋白在人类胶质瘤中的表达水平与其分级的相关性研究

目的研究Bcl-2蛋白在人脑胶质瘤表达水平与组织学分级之间的相关性.方法收集不同病理级别人脑胶质细胞瘤标本47例,非肿瘤患者的正常脑组织10例.标本均行HE染色与SP免疫组织化学染色,分析Bcl-2蛋白表达程度与胶质细胞瘤恶性分级的关系.结果正常脑组织未见Bcl-2蛋白表达, Bcl-2的表达水平与人脑胶质细胞瘤的恶性程度呈正相关,Bcl-2在复发性脑胶质细胞瘤中的表达水平（84.6%）显著高于初发性脑胶质细胞瘤组（23.5%）（ P〈0.05）.结论 Bcl-2在正常脑组织中不表达,Bcl-2的表达水平与人脑胶质细胞瘤的恶性程度呈正相关,可作为判断人脑胶质瘤恶性程度的一项辅助指标.     

非同源末端连接修复通路DNA-PKcs基因在胶质瘤中表达及其机制研究

目的:研究DNA双链断裂损伤修复通路主要成员Ku70、Ku80、ERCC4、Lig4 和DNA-PKcs 基因在人脑胶质瘤中的mRNA 表达及其与肿瘤发生的关系。方法:采用SYBR Green实时定量PCR 技术检测36例人原发脑胶质瘤组织和12例正常脑组织中的Ku70、Ku80、ERCC4、Lig4 和DNA-PKcs 的mRNA 水平。用亚硫酸盐处理基因组DNA后,采用甲基化特异的聚合酶链式反应（MSP）检测正常脑组织和胶质瘤组织中DNA-PKcs 基因的甲基化水平变化。结果:与正常脑组织相比,Ku70、Ku80、ERCC4、Lig4 基因表达量在脑胶质瘤和正常脑组织中无显著性变化（P>0.05）,DNA-PKcs 基因在脑胶质瘤中表达显性著上调（P=0.002）。DNA-PKcs 基因在脑胶质瘤组织中表达量随胶质瘤恶性程度升高而增加。DNA-PKcs 基因启动子甲基化程度在正常组织中高于肿瘤组织,表明甲基化程度的减少是引起胶质瘤中DNA-PKcs 基因表达增高的原因。结论:DNA-PKcs 基因在人脑胶质瘤中较正常脑组织表达显著上调,并且表达与脑胶质瘤的恶性程度相关。DNA-PKcs 基因甲基化程度的降低是引起胶质瘤中DNA-PKcs基因表达增高的原因。      

碱性成纤维细胞生长因子在不同级别人脑胶质瘤中的表达

目的:研究碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)与人脑胶质瘤恶性程度之间的关系。方法:取手术切除人脑胶质瘤标本45例,手术内减压正常脑组织5例,免疫组织化学染色观察bFGF在正常脑组织及不同级别脑胶质瘤组织中的表达水平。结果:正常脑组织无bFGF表达,随胶质瘤级别增加bFGF表达率明显增高,正常脑组织、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤两两之间差异有显著性(P<0.05)。结论:bFGF在正常脑组织中不表达,其表达与人脑胶质瘤的恶性程度正相关,可成为判断胶质瘤恶性程度和预后的一项指标,并为胶质瘤的治疗提供新的途径。     

ZFX在小细胞肺癌组织中的表达及临床意义

背景与目的：小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)约占全部肺癌的15%,化疗是其主要的治疗方法之一,虽然早期对一线化疗方案敏感,但极易出现多药耐药而导致治疗失败。前期基因芯片发现X染色体耦联锌指蛋白(zinc finger protein X-linked,ZFX)在SCLC细胞中异常高表达,本研究进一步检测SCLC患者组织中ZFX的表达,并分析其与患者临床病理特征的关系,为SCLC的治疗提供依据。方法：收集在广东医学院附属医院肿瘤中心行支气管镜活检及手术切除的SCLC组织标本98例,采用QRT-PCR方法从基因水平检测其中临床资料完整的78例SCLC标本中ZFX的表达。结果：在78例SCLC组织标本中,ZFX在广泛期的SCLC组织中的表达较局限期患者的表达明显增高,差异有统计学意义(P<0.05)。ZFX的表达与患者性别、年龄无关(均P>0.05);而与肿瘤的分期、对化疗药物的敏感性及总生存时间相关(均P<0.001)。结论：ZFX的表达可能和SCLC发生、发展相关,ZFX的检测有望作为SCLC的预后指标。     

Mutation Analysis of the WT1 Gene in Myelodysplastic Syndromes

The WT1 tumor suppressor gene was examined for mutations in a panel of 44 patients with myelo-dysplastic syndromes (MDS) including acute myelogenous leukemias (AML) secondary to MDS, using polymerase chain reaction single-strand conformation polymorphism (PCR-SSCP) analysis and sequencing analysis. A WT1 mutation was detected in one out of 17 cases of AML secondary to MDS. This mutation exists upstream of the zinc finger region and is predicted to produce a truncated WT1 protein lacking the zinc finger region. No mutations were detected in 27 MDS patients who had not progressed to AML. This is the first report of analysis for WT1 mutations in a large number of MDS patients, suggesting that WT1 mutations are uncommon in MDS. Abnormalities in this gene may, however, contribute to a small proportion of cases showing progression from MDS into AML.     

p15和WIF－1在人脑胶质瘤中的表达及其临床意义

目的：探讨p15和WIF－1在人脑神经胶质瘤中的表达,及其与临床病理特征和生物学行为的关系。方法：应用免疫组化SP法检测53例神经胶质瘤和20例正常脑组织中p15和WIF－1蛋白的表达,结合病例随访资料分析其临床意义。结果：p15及WIF－1蛋白在神经胶质瘤中的阳性表达率明显低于正常脑组织,差异具有统计学意义（P＜0．05）;p15及WIF－1蛋白的阳性表达率与神经胶质瘤的病理学分级和瘤周脑水肿具有相关性（P＜0．05）,但与性别和年龄不相关（P＞0．05）。p15和WIF－1蛋白在神经胶质瘤中的阳性表达率复发组与无复发组有明显差异（P＜0．05）。p15与WIF－1蛋白的表达呈正相关（r＝－0．396,P＜0．01）。结论：p15、WIF－1的表达与人神经胶质瘤的发生及进展相关;p15、WIF －1低表达患者预后较差。联合检测p15、WIF－1蛋白的表达对神经胶质瘤的早期诊断、判断预后有参考价值。     

异性烯醇化酶和X链锁凋亡抑制蛋白在先天性胆管扩张症发病中的作用

目的:探索异性烯醇化酶和X链锁凋亡抑制蛋白对先天性胆管扩张症的致病作用，为先天性胆管扩张症发病机制研究提供实验、理论依据。方法:收集先天性胆管扩张症根治术后胆囊标本50例为先天性胆管扩张症组及32例非胆系尸检胆囊标本为对照组，采用酶联免疫吸附测定法（ELISA），对胆囊中异性烯醇化酶和X链锁凋亡抑制蛋白的含量进行测定，应用疼痛分级对表达量与分级标准进行关系分析。结果:对照组胆囊液中异性烯醇化酶和X链锁凋亡抑制蛋白的蛋白表达水平低于先天性胆管扩张症组，差异具有统计学意义（P<0.05）。随着疼痛分级的上升，异性烯醇化酶和X链锁凋亡抑制蛋白水平表达升高，差异有统计学意义（P<0.05）。结论:异性烯醇化酶和X链锁凋亡抑制蛋白与先天性胆管扩张症的发病可能有关，并有望成为反应先天性胆管扩张症疼痛严重性的一个生化指标。