山楂叶中主要多元酚类成分的HPLC法比较分析

目的:比较不同种、不同产地及不同采收期山楂叶中8种主要多元酚类成分(牡荆素、牡荆素2″O 鼠李糖苷、芦丁、绿原酸、槲皮素、金丝桃苷、4 O 葡萄糖牡荆素和4 O 鼠李糖芦丁)的含量。方法:用高效液相色谱(HPLC)法。色谱柱为LichrospherC18(250×4.6mmI.D.,5μm);流动相A为乙腈-四氢呋喃(95∶5)、B为0.5%磷酸水溶液,梯度洗脱,0 ～12minA由12%～17%,12～25minA由17%～18%,25～35minA由18%～40%,35～40minA由40%～100%,40～45 minA为100%,流速1ml/min;柱温30℃;进样量10μl;检测波长360nm。结果:野山楂叶中这8种多元酚类成分的总含量最高(3.70%～6.20%),其次是山里红叶(1.12%～2.28%),再次是单子山楂叶(0.98%),云南山楂叶中这8种成分的含量最低(0.70%～0.87%)。对同种的山楂叶来说,其含量随着产地及采收期的不同有着较大差异,含量最高的野山楂叶采自江西于都县,山里红叶中含量最高的是采自山东日照市;对不同时期采收的山里红叶分析表明,嫩叶中尤其是开花期(五月)采收的叶中这8种成分的含量最高,然后慢慢降低到一个相对稳定的水平。结论:不同种、不同产地及不同采收期的山楂叶中这8种主要多元酚类成分的含量存在明显的差异。     

山楂叶提取物中牡荆素鼠李糖苷的含量测定

目的：建立一种准确度和灵敏度高,重现性好的山楂叶提取物中牡荆素鼠李糖苷的高效液相色谱测定法。方法：色谱柱为Zorbax SB-C18（250mm×4.6 mm,5μm）,流动相A为乙腈,B为水溶液,梯度洗脱。0-5m in,流动相A由5%-10%,B由95%-90%;5-10m in,A由10%-18%,B由90%-82%;10-30m in,A保持18%,B保持82%,流速为1.0mL/m in,检测波长334 nm,柱温30℃。结果：牡荆素鼠李糖苷在4.296-64.440μg/mL浓度范围内与峰面积值线性关系良好（r=1）,平均回收率为99.19%,RSD=1.94%。结论：建立的含量测定方法简便、准确、灵敏,可用于山楂叶提取物中牡荆素鼠李糖苷的测定。     

基于指纹图谱结合多元统计分析评价山楂叶质量差异性

目的:建立山楂叶药材波长变换法HPLC指纹图谱,并用多元统计分析评价山楂叶的差异性。方法:采用色谱柱Agilent ZORBAX SB-C18;流动相为0.5%甲酸(A)-乙腈(B)-甲醇(C)-四氢呋喃(D)混合溶液,梯度洗脱;检测波长为0~15 min,检测波长为260 nm,参比波长为360 nm;15~65 min,检测波长为370 nm,参比波长为430 nm。将色谱图导入《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2004A版)》软件中进行相似度评价,并用SPSS19.0进行系统聚类分析和主成分分析,根据主成分分析结果再进行聚类分析,筛选出可能影响山楂叶药材差异的指标性成分。结果:山楂叶经聚类分析分为三大类,初步确定了山楂叶差异的8个指标性成分。结论:本方法快速、准确,适用于山楂叶差异性的评价。     

HPLC测定山楂叶中牡荆素-4"-O-葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、金丝桃苷的含量

目的:用高效液相法同时测定山楂叶中牡荆素-4'-O-葡萄糖苷、牡荆素鼠李糖苷、牡荆素、芦丁、金丝桃苷的含量.方法:采用HPLC法,色谱柱:Sepax HP C18柱(4.6 mm×250mm,5μm);流动相:A为乙腈-四氢呋喃(20:1),B为0.5%甲酸溶液,采用梯度洗脱;0-10min,A为14%-17%;10-26min,A为17%-18%;26-28min,A为18%～14%;检测波长:360nm,流速:1.0mL/min;柱温:320C.结果:该方法加样回收率牡荆素-4"-O-葡萄糖苷:99.59%(RSD=0.50%),牡荆素鼠李糖苷:99.57%(RSD=0.96%),牡荆素:98.70%(RSD=1.10%),芦丁:99.35%(RSD=1.16%),金丝桃苷:99.28%(RSD=0.88%).结论:该方法准确可靠,重现性好,可用于山楂叶的质量控制.     

金钗石斛中黄酮类和酚类成分HPLC指纹图谱研究

目的:建立金钗石斛药材中黄酮类和酚类成分的HPLC指纹图谱.方法:采用Phenomenex prodigy ODS(3)C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),乙腈-0.1%乙酸溶液梯度洗脱,柱温25℃,流速1.0 mL/min,检测波长254 nm.结果:该方法可使金钗石斛中黄酮类和酚类成分得到较好的分离,并根据检测结果选定了10个共有指纹峰.结论:该法操作简便、重现性好,可作为金钗石斛药材质量控制的方法.     

HPLC法测定蒙药嘎日迪-13味丸中甘草苷、甘草酸铵、木香烃内酯、去氢木香内酯含量

目的:HPLC法同时测定蒙药嘎日迪-13中甘草苷、甘草酸铵、木香烃内酯和去氢木香内酯含量。方法:甘草苷核甘草酸铵色谱条件:迪马色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.4%磷酸(B)梯度洗脱,0-10 min(16%-18%A),10-30 min(18%A),30-40 min(18%-27%A),40-85 min(27%-45%A),85-86 min(45%-16%A);柱温:30℃;检测波长:237 nm;流速:1 m L·min-1。木香烃内酯和去氢木香内酯色谱条件:迪马色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-水(65:35),检测波长:225 nm,柱温30℃,流速1.0 m L·min-1,结果:甘草苷、甘草酸铵线性范围分别为0.10-1.2μg(r=0.999 9)、0.341-4.092μg(r=1.000 0);平均回收率分别为97.07%和100.13%,RSD分别为1.00%和1.84%(n=5)。木香烃内酯和去氢木香内酯线性范围分别为0.12-1.2μg(r=1.000 0),0.106-1.06μg(r=1.000 0);平均回收率分别为98.44%和98.90%,RSD分别为2.21%和3.38%。结论:该方法专属性强,重复性好,可用于蒙药嘎日迪-13中甘草苷、甘草酸铵、木香烃内酯和去氢木香内酯含量测定。     

HPLC法测定热炎清颗粒中虎杖苷和白藜芦醇的含量

目的:建立同时测定热炎清颗粒中虎杖苷和白藜芦醇含量的方法.方法:采用HPLC法,色谱条件为Luna C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈(A)-0.4%(B,V/V)冰醋酸溶液梯度洗脱(0-40min,A18%-57%,B82%-43%),流速:1.0 mL·min-1,柱温:25 ℃,检...     

HPLC-DAD测定不同采收期壮族药山绿茶中8种酚类成分含量

建立HPLC-DAD同时测定壮族药山绿茶中绿原酸、2-羟甲基-3-羟基-1-丁烯-4-O-β-D-(6″-O-咖啡酰基)-葡萄糖苷、pubescenoside B、芦丁、华中冬青黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C等8种酚类成分含量。以上述8种成分为对照品,采用Waters XBridge C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5μm),0.5%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(0～8 min, 5%～12%B;8～18 min, 12%～18%B;18～30 min, 18%～25%B;30～40 min, 25%～30%B;40～42 min, 30%～80%B;42～45 min, 80%B),流速0.8 mL·min~(-1),柱温25℃,检测波长282、324、360 nm,进样量5μL。8批不同采收期山绿茶药材中绿原酸、2-羟甲基-3-羟基-1-丁烯-4-O-β-D-(6″-O-咖啡酰基)-葡萄糖苷、pubescenoside B、芦丁、华中冬青黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C分别为0.30～6.29、0.29～3.27、0.15～10.4、0.51～5.85、0.49～9.02、0.51～4.68、1.93～13.4、0.87～5.95 mg·g~(-1)。同时对不同月份采收的样品进行比较,10月份采收的样品中酚类成分含量较高。该研究可用于山绿茶药材中酚类成分的含量测定,为该药材质量标准的完善提供参考。     

HPLC法测定山楂叶总黄酮磷脂复合物中牡荆素鼠李糖苷

目的 建立山楂叶总黄酮磷脂复合物中牡荆素鼠李糖苷的HPLC测定方法.方法 色谱柱为Zorbax SB C18柱(250mm×4.6 nm,5 μm),流动相为乙腈(A)-水(B),梯度洗脱:0～5 min,5%～10%A:5～10 min,10%～18%A:10～30 min,18%A;体积流量1.0 mL/min,检测波长334nn,柱温30℃.结果 牡荆素鼠李糖苷在4.296～64.440μg/mL与峰面积值线性关系良好(r=1.000 0),平均回收率为100.83%,RSD为2.12%.结论 建立的测定方法简便、准确、灵敏,可用于山楂叶总黄酮磷脂复合物中牡荆素鼠李糖苷的测定.     

多波长RP-HPLC测定山楂叶中芦丁、金丝桃苷及槲皮素含量

目的:建立同时测定山楂叶中芦丁、金丝桃苷及槲皮素的分析方法。方法:采用多波长RP-HPLC法,色谱柱为Agilent Eclipse XDB-C18柱(4.6mm×150mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.025mol/L磷酸水(B),梯度洗脱依次为0～15min(18%A～18%A),15～30min(18%A～40%A);检测波长为363nm(0～18min),371nm(18～30min);流速:0.9mL/min;柱温:28℃。结果:芦丁、金丝桃苷及槲皮素的线性范围分别为0.3148～1.5740μg、0.4205～2.1024μg、0.0261～0.1305μg。平均加样回收率分别为100.29%、99.42%、98.86%,RSD分别为1.79%、1.46%、1.50%。结论:该方法简便、快速、准确,重现性好,可用于山楂叶中芦丁、金丝桃苷及槲皮素的同时测定。     

丹参多酚酸对照提取物的质量控制

目的:建立丹参多酚酸对照提取物多指标含量测定及指纹图谱的质量控制方法。方法:采用Agilent ZORBAX SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%甲酸-水溶液为流动相A,0.1%甲酸-乙腈溶液为流动相B,梯度洗脱(0~30 min,20%~21.5%B;30~35 min,21.5%~25%B;35~45 min,25%~40%B;45~50 min,40%~95%B),柱温30℃,流速1 mL·min^-1,检测波长288 nm;采用浓度法测定咖啡酸,丹酚酸E,迷迭香酸,紫草酸,丹酚酸B,丹酚酸Y的相对校正因子,并测定丹参多酚酸对照提取物各指标成分含量,与单体对照品外标法测定结果进行比较;同时建立指纹图谱方法,并对10批次提取物进行相似度评价。结果:咖啡酸,丹酚酸E,迷迭香酸,紫草酸,丹酚酸B,丹酚酸Y在各自的检测质量浓度范围内线性关系良好(r>0.9999),进样精密度RSD在0.1%~1.2%,重复性RSD在1.2%~1.6%,6种成分的加样回收率在82.03%~98.68%,样品溶液在36 h内各成分稳定性良好。经测定各指标成分的相对校正因子分别为咖啡酸(2.92),丹酚酸E(1.10),迷迭香酸(1.61),紫草酸(1.07),丹酚酸B(1.00),丹酚酸Y(0.83)。考察不同方法、浓度、仪器、色谱柱、波长等因素的影响,发现测得的相对校正因子适用性较好。校正因子法测定结果和单体对照品外标法测定结果差异较小。建立了丹参多酚酸对照提取物的HPLC特征指纹图谱,确定了5个共有特征峰,并根据对照品对色谱峰进行确认,10批次提取物指纹图谱相似度较高,质量差异较小。结论:该研究建立的多指标含量测定方法和指纹图谱方法简便、快速、准确性高、重复性好,可用于丹参多酚酸对照提取物的质量控制。     

双波长HPLC同时测定延胡索中3种生物碱的含量

目的:建立同时测定延胡索中巴马汀、脱氢紫堇碱和延胡索乙素的HPLC方法.方法:采用C18柱(4.6 mm×250nm,5 μm),以乙腈(A)-0.1％磷酸(加三乙胺调节pH 6.0,B)进行梯度洗脱(0～ 20 min,25％A;20～30 min,25％～55％ A;30 ～45 min,55％A;45 ～ 50 min,55％～25％A;50 ～55 min,25％A);检测波长为270,280 nm,柱温30℃.结果:巴马汀在2.12×10-2～1.59 μg呈良好的线性关系(r=0.999 9);脱氢紫堇碱在4.10 e 10-2～ 3.07 μg呈良好的线性关系(r=0.999 9);延胡索乙素在2.10×10-2～1.57 μg呈良好的线性关系(r =0.999 9);加样回收率分别为100.10％,100.03％,97.47％.结论:该方法准确、稳定、分离效果好,可用于测定延胡索药材中巴马汀、脱氢紫堇碱和延胡索乙素的含量.     

多波长RP—HPLC测定山楂叶中芦丁、金丝桃苷及槲皮素含量

目的：建立同时测定山楂叶中芦丁、金丝桃苷及槲皮素的分析方法。方法：采用多波长RP—HPLC法,色谱柱为AgilentEclipseXDB—C18柱（4．6mm×150mm,5μm）;流动相：乙腈（A）-0．025mol／L磷酸水（B）,梯度洗脱依次为0—15min（18％A～18％A）,15～30min（18％A-40％A）;检测波长为363nm（0—18min）,371nm（18—30min）;流速：0．9mL／min;柱温：28℃。结果：芦丁、金丝桃苷及槲皮素的线性范围分别为0．3148～1．5740μg、0．4205～2．1024μg、0．0261—0．1305μg。平均加样回收率分别为100．29％、99．42％、98．86％,RSD分别为1．79％、1．46％、1．50％。结论：该方法简便、快速、准确,重现性好,可用于山楂叶中芦丁、金丝桃苷及槲皮素的同时测定。     

HPLC测定CO2超临界萃取的当归油药效组分

目的:测定CO2超临界萃取的当归油药效组分藁本内酯、正丁烯基苯酞、正丁基苯酞.方法:采用HPLC,ZORBAX-Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm× 25 cm,5 μm),流动相0.05 mol· L-1醋酸铵水溶液(pH 4.0±0.2)(A)-乙腈(B),梯度洗脱(0～10 min,30％B;10～60 min,30～60％ B;60～65 min,60％ B;65 ～70 min,60～30％B),检测波长274 nm,流速1.0 mL· min-1,柱温25℃.结果:超临界萃取的当归油药效组分藁本内酯、正丁烯基苯酞、正丁基苯酞分别在0.4610～20.842 6μg,0.012 6～0.4768μg,0.0228～0.8251μg呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为101.27％,99.12％,97.14％.结论:HPLC可用于超临界萃取的当归油药效组分测定,为建立当归油及其制剂与临床疗效对应的质量标准提供了新的思路和方法.     

反相高效液相色谱法测定藏药材红毛五加中金丝桃苷的含量

目的 建立藏药材红毛五加药材中金丝桃苷的含量测定方法并比较其不同药用部位及不同产地、不同采收期的红毛五加皮中金丝桃苷的含量.方法 Kromasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),柱温30℃,流动相甲醇(A)-0.5 %磷酸水溶液(B),梯度洗脱,程序为:基线(A∶B=30∶70),0～5 min(A∶B=35∶65),5～15 min(A∶B=40∶60),15～30 min(A∶B=50∶50);检测波长 358 nm,流速1 ml·min-1.结果 金丝桃苷在2.90×10-3～0.58 μg范围内峰面积与进样量具有良好的线性关系,回归方程 Y =4×106X-14 065,r=0.999 9(n=9),平均回收率为100.6 %,RSD为0.96 %(n=6).结论 该法简便、准确、重复性好,有助于红毛五加质量控制方法的研究.     

不同产地清蒸熟地黄饮片高效液相指纹图谱研究

目的：对不同产地清蒸熟地黄饮片的高效液相指纹图谱进行对比研究,建立可靠的质量控制方法。方法：采用高效液相法,以麦角甾苷为对照品,Polaris C18色谱柱（4.6 mm×250 mm,5μm）,检测波长为334 nm,流速1.0 mL/min,柱温25℃,进样量20μL。以乙腈-0.1%醋酸为流动相。溶剂A为乙腈,溶剂B为0.1%醋酸溶液,线性梯度洗脱：0-40 min,A 10%-20%;40-60 min,A 20-30%。结果：不同产地清蒸熟地黄饮片的高效液相指纹图谱极为相似,相似度在0.9以上。重复性实验（n=5）,以各峰相对保留时间和相对峰面积为指标进行考察,各个色谱峰的相对保留时间RSD%0.10%-0.41%之间,相对峰面积的RSD%在0.14%-1.70%之间。结论：本方法检测熟地黄饮片指纹图谱鉴别特征明显,可用于熟地黄质量鉴定。     

UPLC快速分析穿心莲药材及制剂中内酯成分

目的:建立UPLC-PDA技术快速测定穿心莲药材及制剂中主要内酯类成分含量的方法.方法:采用超高效液相色谱仪,用Acquity BEH Shield RP C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7 μm);流动相甲醇(A)-水(B),梯度洗脱(0～2 min,40％A;2 ～4 min,40％ ～45％ A;4 ～ 10 min,45％ ～50％ A;10 ～15 min,50％A);流速0.5 mL· min -1,检测波长226 nm,柱温30℃.结果:在15 min内可以完成药材和制剂中穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯的分析,分离度良好,线性范围分别为0.0286 ～0.286 g·L-1(r=0.9996,n=6),0.0940～0.940 g·L-1(r =0.9993,n=6);平均加样回收率分别为97.32％,97.11％.结论:该方法快速、准确、灵敏度高,可用于穿心莲药材及制剂的质量控制.     

三七HPLC指纹图谱的建立

目的 :建立三七药材的高效液相指纹图谱 (HPLC-FP) ,在量上为三七的鉴定与合理应用提供依据。方法 :LunaC₁₈(2 )色谱柱 ,流动相 :(A)乙腈 (B) 0.05%磷酸梯度洗脱 ,0～8min(20%A ,80%B) ,8～20min(20%A～40%A ,80%B～60 %B) ,20～ 30min(40 %A～20 %A ,60 %B～80 %B) ,30～36min(20%A～100%A ,80%B～0) ,36～50min (100%A) ,50～65min(100%A～20%A ,0～80%B) ,流速 1.0mL·min^-1 ,检测波长 203nm。咖啡因为内标物。结果 :通过聚类分析 ,21个不同产地、不同规格的三七样品被聚为 4类 :地道药材优级品、地道药材、市售一般品和次品。通过相似度计算 ,21个三七样品的相似度均在0.9～1.0之间 ,8个常见伪品的相似度均小于0.9。结论 :该色谱图可作为三七的HPLC-FP ,用于三七的真伪鉴别和质量评价。     

RP-HPLC法同时测定忍冬不同变异类型花蕾中7种成分

目的建立RP-HPLC法同时测定金银花药材中酚酸类(绿原酸、咖啡酸)、环烯醚萜类(马钱苷)和黄酮类(芦丁、金丝桃苷、木犀草苷、槲皮素)7种主要成分,并测定不同变异类型花蕾中各成分,为金银花药材的多指标、多成分质量控制体系建立奠定基础。方法采用Aglient TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相A为0.4%磷酸水溶液,流动相B为乙腈,梯度洗脱程序为0～18 min,A为87%;18～30 min,A为85%;30～43 min,A为85%～80%;43～48 min,A为80%;48～50 min,A为80%～70%;50～55 min,A为70%;55～65 min,A为70%～50%;检测波长为0～16 min,240 nm;16～40 min,323 nm;40～65 min,355 nm;体积流量1.0 mL/min,柱温为30℃。结果 7种成分均达到了基线分离,且各成分在线性范围内线性关系良好;7种成分的加样回收率变化范围为99.56%～102.12%。结论该方法准确、简便、可行,可以用于不同变异类型金银花花蕾7种活性成分的测定。