双炔失碳酯α、β单体体外抗前列腺癌作用比较

目的比较双炔失碳酯（ANO）的两个差向异构体β、β-ANO体外抗前列腺癌作用的差别。方法氧化铝柱层析法分离纯化仅、B单体,薄层分析法定性检测所分离的产物;在常规培养液中,以4～32μmol·L^-1的β、β-ANO分别作用于人前列腺癌非激素依赖型细胞DU145、PC－3和激素依赖型细胞LIA、LNCaP、RV1,作用时间分别为3d,5d,SRB法测细胞生存率;在去除激素培养液中,以不同浓度的α、β－ANO分别作用于激素依赖型细胞,同时加入雄激素拟似剂（R1881）,SRB法测细胞生存率;以32μmol·L^-1的α、β-ANO分别作用于LNCaP、DU145细胞,相差显微镜观察细胞形态和数量的变化。结果对于非激素依赖型和激素依赖型细胞,α-ANO作用均强于α—ANO,且二者作用差距具有时间和剂量依赖性;α—ANO对抗雄激素的促细胞生长作用强于β—ANO,具有时间和剂量依赖性;相差显微镜观察结果表明,α-ANO作用后,细胞形态及数量变化较之β—ANO更为显著。结论α-ANO体外抗前列腺癌作用强于β—ANO。     

皮质醇与雄激素非依赖前列腺癌的关系

目的探讨皮质醇与前列腺癌雄激素非依赖发生的关系。方法应用放射免疫法检测激素依赖和激素非依赖前列腺癌(PCa)血清皮质醇水平,并与前列腺增生(BPH)患者相比较。结果PCa患者血清皮质醇水平明显高于BPH患者,雄激素非依赖者明显高于依赖者。结论皮质醇与前列腺癌激素非依赖的发生有密切关系。     

前列腺癌患者血皮质醇胆固醇变化及其意义

目的 探讨前列腺癌雄激素非依赖发生的机制.方法 根据临床疗效及PSA变化将前列腺癌(PCa)患者分为激素依赖和激素非依赖两组,分别应用放射免疫法和标准酶法检测血皮质醇和总胆固醇(TC)水平,并与前列腺增生(BPH)患者相对比.结果 血皮质醇水平PCa患者明显高于BPH患者(P<0.01),雄激素非依赖者明显高于雄激素依赖者(P<0.05).总胆固醇水平PCa高于BPH(P<0.05),均高于正常值,激素依赖和非依赖之间无明显差别.结论 胆固醇是前列腺癌的促发因素,皮质醇与前列腺癌激素非依赖的发生有密切关系.     

葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的凋亡作用

目的研究葡萄汁对人前列腺癌PC-3细胞的影响。方法将低、中、高剂量(分别为16、32和64μl/ml)的葡萄汁加入体外培养的人前列腺癌PC-3细胞,检测葡萄汁对PC-3细胞的毒性作用,用单细胞凝胶电泳测其对DNA损伤作用,流式细胞术测细胞凋亡,免疫组化法测凋亡相关基因Bax、Bcl-2的表达。结果3种剂量的葡萄汁能抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖;DNA迁移长度与彗星细胞拖尾率逐渐增高,拖尾细胞率最高为71%;能诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡,细胞凋亡率分别是14.5%3、2.1%和40.5%,促凋亡基因Bax表达率分别是36.8%、50.4%和64.8%;抑凋亡基因Bcl-2表达率依次为39.1%、25.0%和12.4%。结论葡萄汁可抑制人前列腺癌PC-3细胞增长,诱导其细胞凋亡,能上调促凋亡基因Bax的表达,下调抑凋亡基因Bcl-2的表达。     

油菜花粉脂溶性提取物对人前列腺癌细胞PC-3的体外生长抑制研究

目的探讨油菜花粉脂溶性提取物(BPE)对体外培养的人前列腺癌细胞PC-3的杀伤效应。方法光镜观察用药前后PC-3细胞形态,透射电镜观察细胞凋亡的形态变化;流式细胞术检测BPE对PC-3细胞凋亡的影响;反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测bax/bcl-2基因表达。结果 BPE对PC-3细胞增殖有抑制作用,PC-3细胞随着BPE浓度的增高其活细胞数下降,呈负相关。透射电镜下可见:核结构破坏,染色质稀疏,有些凝聚成团。随着时间的延长,细胞凋亡率上升,BPE与多西他赛能一同促进PC-3细胞发生凋亡。BPE的作用效应不是通过bax/bcl-2基因。结论 BPE可抑制人前列腺癌细胞PC-3的增殖,诱导细胞的凋亡。     

苦参素对人前列腺癌PC-3细胞体外作用研究

目的探讨苦参素对人前列腺癌PC 3细胞的生长抑制作用及可能的作用机制。方法采用MTT法检测PC 3细胞的生长抑制率,流式细胞仪检测PC 3细胞周期改变,免疫组化法检测PC 3细胞中Bcl 2和Bax的表达。结果随着苦参素浓度的增加和作用时间的延长,PC 3细胞生长抑制率呈明显上升趋势(P＜0.05)。随着苦参素浓度的增加,G0/G1期和S期PC 3细胞所占比例逐渐上升,而G2/M期所占比例逐渐下降,同时Bcl 2表达下调,而Bax表达上调。结论苦参素能通过诱导人前列腺癌PC 3细胞周期阻滞于G0/G1和S期,下调Bcl 2表达和上调Bax的表达抑制癌细胞的生长增殖。     

番茄汁和葡萄汁联合作用对人前列腺癌细胞的影响

植物化学物独立抗肿瘤的实验研究已渐近到基因和分子水平，然而大量研究发现，将这些纯化物质单独用于肿瘤预防，虽有一定的效果，但并不令人十分满意，由此，人们逐渐开始关注植物化学物之间的联合抗肿瘤作用。蔬菜水果中植物化学物如番茄红素，白藜芦醇的抗前列腺癌效果已得到证实协引，番茄汁、葡萄汁单独作用时，在适宜的剂量下分别比番茄红素、     

间歇雄激素阻断治疗晚期前列腺癌的疗效观察

<正>随着生态环境和生活方式的改变,我国前列腺癌的发病率有逐年升高的趋势。近年来对前列腺肿瘤认识的加深,间歇性雄激素阻断治疗方法被提出。通过借鉴国外研究进展的资料[1],2005年1月至2011年5月我院开展了间歇性雄激素阻断治疗的临床观察,研究间歇性雄激素阻断治疗在雄激素依赖的晚期前列腺癌患者治疗的可行性及其     

拉米夫定和干扰素α2b体外细胞毒性与抗乙型肝炎病毒作用比较

目的 体外比较拉米夫定和α-干扰素的细胞毒性和抗乙型肝炎病毒作用. 方法体外培养L-02和 HepG2.2.15细胞,给予不同浓度的拉米夫定和干扰素α2b,作用72 h后,噻唑蓝(MTT) 法检测L-02和 HepG2.2.15细胞的生存率;收集不同浓度的拉米夫定和干扰素α2b处理的HepG2.2.15细胞上清液,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测HBsAg、HBeAg的分泌.结果拉米夫定对L-02和 HepG2.2.15有一定的毒性作用,而干扰素α2b对细胞无毒性作用,甚至能促进正常细胞的增殖;拉米夫定对HBsAg和HBeAg的抑制作用大于干扰素α2b,拉米夫定对HBsAg的抑制率较高,而干扰素α2b对HBeAg的抑制率较高.结论拉米夫定和α干扰素联合使用可提高抗HBV的作用和质量.     

藤苦参素的体外抗肿瘤活性及其对癌细胞凋亡的作用

藤苦参（Streptocaulon griffithii Hook．f．）系萝摩科（Asclepiadaceae）马连鞍属（Streptocaulon Wight et Arn．）植物马连鞍的干燥根，又名古羊藤、南苦参、有毛老鸦嘴、虎阴藤、红藤、地苦参、小暗消、哈骂醒合（傣语）、哈骂不果（哈语）等，产于我国广西、贵州、云南等地。藤苦参为傣药经方雅叫哈顿散中的主治药之一，雅叫哈顿散已被中国药典2005版（一部）收载。张琳等研究了藤苦参的化学成分，未见有关藤苦参药理作用的研究报道。文献资料表明，藤苦参的同属植物多具有抗肿瘤作用。本实验对从藤苦参中分离得到的藤苦参素的体外抗肿瘤活性及其对癌细胞凋亡的作用进行研究。     

基因miRNA-34a靶向纳米复合物抗前列腺癌细胞增殖的作用研究

目的 通过构建具有前列腺癌细胞特异性靶向作用的基因载体适配体——聚乙二醇-聚酰胺-胺(APT-PEG-PAMAM),携带具有抗前列腺癌增殖作用的基因miRNA-34a,考察载体系统的转染效率及其对前列腺癌细胞的抑制作用。 方法 运用核磁共振(NMR)鉴定APT-PEG-PAMAM基因载体的结构;利用粒径电位仪对APT-PEG-PAMAM/miRNA纳米复合物进行表征;利用基因转染实验考察APT-PEG-PAMAM/miRNA纳米复合物在前列腺癌细胞(PC3和LNCaP)上的表达效果;利用CCK-8细胞增殖抑制实验考察APT-PEG-PAMAM/miRNA-34a对前列腺癌细胞的抑制作用。 结果 通过结构鉴定确定APT-PEG-PAMAM合成成功。定性、定量转染效率实验证明,经APT进一步修饰后,对LNCaP细胞转染效率显著增加,证明APT的靶向作用。CCK-8细胞增殖实验证明,APT-PEG-PAMAM/miRNA-34a对前列腺癌细胞具有抑制作用。 结论 APT-PEG-PAMAM/miRNA-34a有望成为今后靶向治疗前列腺癌的基因药物。     

藤茶总黄酮体外抗人肝癌细胞作用研究

目的:研究藤茶总黄酮体外抗人肝癌细胞的作用。方法:以MTT法、细胞生长曲线法、集落形成法观察藤茶提取物对人肝癌BEL7404细胞的体外抑制作用。结果:藤茶总黄酮能显著抑制体外培养的BEL7404细胞的生长。MTT法测得的半数抑制浓度(IC50)为28·59μg·mL-1;细胞生长曲线法提示藤茶总黄酮对BEL7404细胞的生长有显著的抑制作用;集落形成法提示当药物浓度在22·22μg·mL-1以上时IC50为100%,当药物浓度在14·81μg·mL-1时IC50为58·05%。结论:藤茶总黄酮对体外培养的BEL7404细胞有显著的抑制作用。     

Zeylenone抑制人前列腺癌PC-3细胞增殖及诱导凋亡作用研究

目的研究(4R,5S,6S)-4-苯甲酰氧基-6-[(苯甲酰氧基)甲基]-5,6-二羟基-2-环己烯-1-酮Zeylenone(Zey)对人前列腺癌PC-3细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。方法采用MTT法观察Zey对PC-3细胞和正常前列腺基质细胞WPMY-1的增殖抑制作用,应用平板克隆形成实验观察Zey对PC-3细胞克隆形成的作用,AO/EB荧光染色观察细胞形态、JC-1染色观察Zey对细胞内线粒体膜电位的影响,An-nexin V-FITC/PI双染检测凋亡细胞比率,Western blot检测凋亡相关蛋白Caspase-9、Caspase-8、Caspase-3、Caspase-7和PARP的激活及Bcl-2、Bax、Bid、Bcl-xL蛋白的表达。结果Zey可以明显抑制人前列腺癌PC-3细胞的增殖并诱导其凋亡,而对正常前列腺基质细胞WPMY-1的抑制作用显著低于PC-3细胞。Zey抑制PC-3细胞克隆形成并明显诱导其凋亡。线粒体膜电位检测结果显示Zey导致细胞内线粒体膜电位的明显降低,Western blot检测结果表明Caspase-8、Caspase-9、Caspase-7、Caspase-3被激活,PARP和Bid被剪切活化,Bcl-2、Bcl-xL表达下降,而Bax表达上调。结论 Zey可选择性抑制人非激素依赖性前列腺癌PC-3细胞的增殖并诱导其凋亡,作用机制与其对Bcl-2和Caspase家族蛋白的影响,从而诱导PC-3细胞发生内源性和外源性凋亡相关。Zey有望成为治疗前列腺癌的候选药物。     

猫爪草总皂苷体外抗人非小细胞肺癌NCI-H460细胞活性研究

目的 观察猫爪草总皂苷体外对人非小细胞肺癌NCI-H460细胞活性的影响。方法 采用系统溶剂法提取猫爪草总皂苷,3H-TdR掺入法观察猫爪草总皂苷对NCI-H460细胞增殖的影响;流式细胞仪检测其对NCI-H460细胞凋亡和周期的影响。结果 猫爪草总皂苷对NCI-H460细胞增殖有较好的抑制作用,呈现较好的量效关系,可促进NCI-H460细胞的早期凋亡,细胞周期出现G0/G1期的阻滞。结论 猫爪草总皂苷能较好的抑制NCI-H460细胞增殖,其机制可能与诱导凋亡、G0/G1期阻滞有关。     

Satraplatin在前列腺癌的治疗中无法提高生存期限

GPCBiotech公司的主导抗肿瘤药物Orplatna（satraplatin）（I），虽然在前期能提高无肿瘤进展生存期限（PFS），但在关键性的Ⅲ期SPARC试验中，无法提高激素耐药性前列腺癌（HRPC）的总体存活期限（OS）。另一个治疗非小细胞性肺癌（NSCLC）的Ⅱ期临床试验也对这个基于铂剂的化疗药物进行评估。（I）与其他基于铂剂化合物的不同之处在于，它可以口服，而且或许不会受到其他药物所面临的抗药机制的影响。     

舒肝宁注射液体外抗纤维化作用实验研究

目的:研究舒肝宁注射液对人肝星状细胞LX2(HSC-LX2)细胞生长的影响,探讨其抗纤维化机制.方法:使用舒肝宁注射液处理HSC-LX2细胞,用细胞计数试剂盒-8(CCK8)法测定细胞的吸光度值,计算细胞增殖率.荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法和免疫印迹法分别检测Ⅰ型胶原蛋白、Ⅲ型胶原蛋白和转化生长因子-β(TGF-...     

纳米雄黄抗B细胞非霍奇金淋巴瘤Raji细胞的体外作用研究

目的考察纳米雄黄对B细胞非霍奇金淋巴瘤Raji细胞的体外作用。方法利用激光粒度仪、TEM和AFM对纳米雄黄和水飞雄黄进行表征;利用光镜、AFM和TEM依次观察纳米雄黄和水飞雄黄作用下Raji细胞的增殖形态变化、单细胞表面细胞膜变化以及细胞内超微结构的变化;MTT法检测纳米雄黄和水飞雄黄作用下的细胞存活率;利用荧光显微镜及流式细胞术观察纳米雄黄和水飞雄黄引起Raji细胞的凋亡和细胞周期分布情况。结果纳米雄黄的粒径为(79±8)nm,水飞雄黄的粒径为(1.89±0.2)μm。光镜下,可明显观察到纳米雄黄可抑制Raji细胞的聚集生长状态,AFM下可观察到纳米雄黄作用下的Raji细胞皱缩,体积变小,膜表面的黏附物质不再向四周伸展,而水飞雄黄作用下的Raji细胞变化不明显。TEM下可观察到纳米雄黄作用下的Raji细胞胞内亚细胞器受到破坏,线粒体空泡明显增多,水飞雄黄组变化不明显。MTT结果显示,50 mg·L~(-1)纳米雄黄作用Raji细胞24 h时,细胞的存活率为(40±2)%,而相同剂量的水飞雄黄作用组为(65±3)%;50 mg·L~(-1)纳米雄黄作用Raji细胞48 h时,Raji细胞的存活率仅为10%,而相同剂量的水飞雄黄组,Raji细胞的存活率为(42±2)%。荧光显微镜下可观察到纳米雄黄作用下的Raji细胞核凋亡明显,水飞雄黄组作用不明显。流式细胞术结果显示,水飞雄黄作用下的Raji细胞总凋亡率为11.14%,而纳米雄黄处理组的Raji细胞总凋亡率为15.9%。与水飞雄黄相比,纳米雄黄作用下Raji细胞在G_1期的分布比例明显升高,S期分布比率下降。结论与水飞雄黄相比,相同剂量的纳米雄黄在相同作用时间下,可明显抑制B细胞淋巴瘤Raji细胞的增殖,破坏其亚细胞结构,进而引起其凋亡。     

淫羊藿苷通过Notch1/Jagged1信号通路抑制人前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭

目的:探讨淫羊藿主要有效成分淫羊藿苷(icariin, ICA)对人前列腺癌细胞(prostate cancer cells, PC-3细胞)的侵袭、迁移和增殖的影响及作用机制。方法:运用不同浓度的ICA对PC-3细胞进行24,36,48 h的预处理后,采用MTT法筛选合适的受试浓度;采用流式细胞术检测ICA对PC-3细胞周期的影响;采用划痕实验和Transwell实验分别检测ICA对PC-3细胞的迁移能力和侵袭能力的影响;采用RT-PCR和Western blot分别检测ICA对PC-3细胞Notch1、Jagged1、Hes1、Hey1 mRNA及蛋白表达的调控作用。结果:不同浓度的ICA处理PC-3细胞24,36,48 h后,对PC-3细胞的增殖有明显抑制作用,且呈浓度和时间依赖性;流式细胞术检测结果表明ICA主要将PC-3阻滞在G0/G1期;划痕实验和Transwell实验结果显示ICA对PC-3细胞的迁移和侵袭能力有明显抑制作用;1×10^-4 mol·L^-1的ICA作用于PC-3细胞48 h后,对Notch1、Jagged1、Hes...     

二甲双胍抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移、侵袭及其机制

目的 体外实验研究二甲双胍(Met)对前列腺癌DU145增殖、迁移、侵袭的影响及可能的作用机制。方法 0、5、20、50 mmol·L^-1 Met处理细胞后,CCK8法检测细胞增殖,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,实时荧光定量PCR和Western Blot实验在mRNA和蛋白水平检测人抗原R(HuR)的表达变化;分别过表达和敲低HuR后,用上述相同实验方法检测DU145的增殖、迁移、侵袭的能力;Western Blot法检测Met处理,过表达HuR或敲低HuR后对AKT/mTOR通路的影响。结果 Met处理细胞后,DU145的增殖、迁移、侵袭能力降低,并呈现出浓度依赖性,同时在mRNA和蛋白水平降低了HuR的表达;敲低HuR对细胞增殖、迁移、侵袭有一定抑制作用,而过表达HuR对细胞则有相反的作用;Met和低表达HuR组抑制了细胞中AKT、mTOR的磷酸化,而过表达HuR则促进了AKT、mTOR的磷酸化。结论 Met可抑制前列腺癌细胞DU145的增殖、迁移、侵袭;其作用机制可能是Met通过降低HuR表达进而抑制AKT/mTOR通路的异常激活,从而抑制...     

吡非尼酮和尼达尼布体外抗肺纤维化作用

目的通过评价吡非尼酮、尼达尼布对人胚肺成纤维细胞HFL1增殖、迁移、活化的抑制作用,在细胞层面研究对比现有肺纤维化上市药物的作用机制。方法通过MTT、划痕、qPCR和蛋白免疫印迹实验,评价吡非尼酮和尼达尼布对TGF-β1/PDGF诱导的HFL1增殖、迁移、活化的抑制作用。结果 MTT、划痕实验结果显示,吡非尼酮和尼达尼布均可抑制TGF-β1诱导的成纤维细胞增殖和迁移,其中尼达尼布效价高于吡非尼酮。抗活化实验中,吡非尼酮和尼达尼布均能抑制成纤维细胞活化标志物mRNA和蛋白的表达,作用相当,且均能抑制Smad3的磷酸化,抑制TGF-β/Smad3信号通路的活化,其中尼达尼布对Smad3磷酸化的抑制率为51%,吡非尼酮对Smad3磷酸化的抑制率为13%,尼达尼布抑制作用强于吡非尼酮。结论吡非尼酮和尼达尼布均可抑制成纤维细胞的增殖、迁移和活化,其中尼达尼布作用效价高于吡非尼酮,且对TGF-β/Smad3信号通路抑制作用较强。