FK506对周围神经端侧吻合侧枝生长的影响

目的 探讨FK506对神经端侧吻合侧枝生长的影响。方法 Wistar大白鼠26只，右侧腓总神经切断后，近端反转结扎，远端与胫神经外膜开窗处行端侧吻合，左侧作正常对照。术后动物分实验组和对照组，每组13只。于术后当天开始，实验组右小腿外侧肌肉注射生理盐水稀释的FK506（每日2mg／kg体重），连续2周，对照组注射等量的生理盐水。术后3个月，行双侧腓总神经、胫前肌组织学检查、胫前肌肌湿重测定及运动终板检查。结果 实验组及对照组腓总神经均有一定程度的再神经化，实验组再生神经纤维数目、肌湿重、肌纤维截面积、运动终板的面积及着色均明显优于对照组。结论FK506对神经端侧吻合侧枝生长具有促进作用。     

神经端侧吻合术与侧侧吻合术再生能力比较的实验研究

目的比较周围神经端侧吻合与神经侧侧吻合术后神经再生的情况.方法Wistar大鼠22只,分成A、B两组,每组11只.A组左侧腓总神经切断并在胫神经干上外膜开窗后,与胫神经干作端侧吻合;B组左侧腓总神经切断后与胫神经作侧侧吻合.术后3月,行形态学、电生理检查,辣根过氧化物酶(HRP)逆行追踪法评价神经再生情况.结果两组间神经纤维的数目、面积、神经传导速度以及背根神经节阳性神经元数目均无明显差异(P＞0.05).结论神经端侧吻合术与神经侧侧吻合术的再生能力无明显差异.     

周围神经端侧吻合后神经再生的研究

目的研究周围神经端侧吻合后远端神经的再生及其临床应用价值。方法选用３７只Ｗｉｓｔａｒ大鼠，分成Ａ、Ｂ两组。Ａ组：切断腓神经，在邻近的胫神经干外膜上开一１ｍｍ小窗，将腓神经远端吻合到胫神经干侧方开窗处。Ｂ组：切断腓神经后，在胫神经干和远侧腓神经干外膜上各开一小窗，取对侧相应的腓神经以端侧吻合的方式桥接于胫、腓神经干两窗之间。两组分别于术后４、８、１２周取材，作神经组织学、电镜及图像分析仪检测：（１）神经再生的数量和质量；（２）定性定量观察神经再生情况；（３）再生神经的数目、密度及截面积。结果直接端侧吻合或神经桥接移植的端侧吻合，均可使神经再生，且再生纤维的质量与端端吻合组（对照组）无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；对被吻合神经－胫神经的功能亦无影响。结论神经端侧吻合可作为神经损伤后一种新的修复方法     

FK506局部缓释膜片促进周围神经再生的临床应用研究

目的临床观察在神经缝合口周围置入FK506高分子缓释膜片后对神经再生的影响。方法?选取同一时间段(4个月内)，在腕横纹至肘上5cm处因切割伤而导致正中神经或尺神经断伤的急诊病例16例。结合病人是否接受FK506治疗的意愿分为实验组及对照组，每组8例。实验组用9-0无创尼龙缝线将神经两断端作端端缝合，并将含有20mg FK506的高分子可生物降解膜片环绕神经缝合口一圈后用筋膜等软组织覆盖修复的神经和膜片。将膜片制成以1mg／d的速度释放，共20d。对照组仅用同法修复神经。结果术后1周起随访至2年。实验组在术后14周肌电图检测即有新生电位出现，较对照组提前4周。术后3～12个月测定，实验组感觉神经再生速度平均为3．1mm／d，明显快于对照组的1．7mm／d。实验组远期功能恢复的优良率也优于对照组。结论从FK506的药理作用和应用结果分析，FK506具有针对性促进周围神经再生的作用。     

大鼠腓总神经"π"式桥接于胫神经再生的原配连接

目的研究大鼠腓总神经被切断桥接于胫神经后，再生的腓总神经纤维的来源。方法将大鼠右侧腓总神经在胭窝处剪除约5mm后，将断裂的腓总神经近端和远端分别就近与同侧胫神经上的外膜窗施行端侧吻合，吻合口间距约10mm；动物存活24个月后，将手术侧近端吻合口以上胫神经剪断，再将辣根过氧化物酶注入远段腓总神经干内，72h后取材并经四甲基联苯胺显色显示脊髓L3-6节段神经元和L4、L5脊神经节细胞，同时取腓总神经远段行电镜观察神经纤维再生状态。结果远段腓总神经再生神经纤维清晰、明显，神经纤维比正常者略细；脊髓L3-6节段和L4、L5脊神经节均见到蓝染细胞。结论断裂腓总神经“π”式桥接于胫神经，至少有部分再生神经纤维经腓总神经近段来源于原配神经的胞体。     

FK506缓释膜片促进外周神经再生的实验研究

目的观察神经断伤吻合口局部植入FK506缓释膜片对神经再生的影响.方法取Wistar大鼠60只,随机平均分为A、B、C、D 4组.切断大鼠右侧坐骨神经后间断吻合,将免疫抑制剂FK506溶入聚乳酸(PLA)后制成15 mm×8 mm×1 mm大小的膜片,植入神经吻合口周围作为生物降解缓释制剂,可稳定、持续释放FK506约3周.A组为对照组,膜片内不含FK506;B、C、D组设计释放率分别为1 mg@kg-1@d-1、2 mg@kg-1@d-1和5 mg@k-1@d-1.术后第3、6、10周观察神经吻合口质量、测定坐骨神经功能指数以及电生理学和组织学检查的定性、定量分析.结果B、C组测定结果明显优于A组,C组优于B组.D组神经连接及再生不良.结论适量FK506神经吻合口植入,缓释应用对周围神经再生的速度和质量均有明显的促进作用.     

周围神经端端或端侧吻合后降钙素基因相关肽和P物质免疫组织化学的对比研究

目的　探讨周围神经端端或端侧吻合后神经递质降钙素基因相关肽 (CGRP)和 P物质 (SP)水平的变化。　方法　选取雌性 Wistar大鼠 2 0只 ,随机分为 5组 ,每组 4只 ;实验组为 4组 ,正常对照组为 1组。实验组 :切断双侧腓总神经。将左侧腓总神经远侧断端吻合至胫神经侧方 ,右侧行腓总神经端端吻合 ,术后 1、2、4和 2 7周于各时间点分别在神经吻合口、腰段脊髓和背根神经节处取材 ,每次 4只进行 CGRP和 SP的免疫组织化学染色。对照组 :不行神经切断及吻合术 ,1周后检测同上。　结果　实验组术后 1周在腰段脊髓后角和背根神经节中 CGRP和 SP的表达均显著减少 ,术后 4、2 7周 ,CGRP和 SP在腰段脊髓后角的表达逐渐恢复至接近正常水平 ,但在背根神经节中的表达却无显著变化。端端、端侧吻合的两侧 CGRP和 SP变化的趋势一致 ,但在腰段脊髓后角的 4个时间点的样本中 ,端端吻合的表达显著高于端侧吻合。对坐骨神经进行乙酰胆碱酯酶 (Ach E)、SP、CGRP和 PGP9.5染色显示神经纤维均可通过端端与端侧神经吻合口。　结论　再生的神经纤维可以通过端侧吻合口 ,端侧吻合中感觉神经的恢复与端端吻合相似 ,但恢复的程度稍差于端端吻合。     

FK506对GAP-43和Tau蛋白活性影响的实验研究

目的观察FK506缓释膜片对大鼠神经损伤后生长相关蛋白(Growthassociatedprotein43,GAP43)和Tau蛋白活性的影响。方法将FK506缓释膜片(释放速度为1mg·d,共21d)放置于损伤坐骨神经周围为实验组,损伤坐骨神经周围不放置药物者为对照组。于术后3d,术后1、2、3、4、6和8周共7个时间组,分别取神经缝合口近端和远端的神经段、腰段脊神经节及脊髓腰膨大,用SABC法检测GAP43及Tau蛋白的阳性标记量。结果实验组于术后1～4周已出现GAP43及Tau蛋白表达增强,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。结论FK506能增加GAP43及Tau蛋白表达,对周围神经损伤后的神经再生有一定的促进作用。     

逆行追踪神经端侧缝合后侧支生长的神经元胞体实验研究

目的 探讨神经端事后侧支生长的神经远胞体来源。方法 将实验组端侧缝合的腓总神经距吻合口２．５ｃｍ外切断,其近端植入有辣根过氧化酶（ｈｏｒｓｅｒａｄｉｓｈ ｐｅｒｏｘｉｄａｓｅ,ＨＲＰ）的硅胶囊中,同法标记正常腓总神经与正赏胫神经近端。观察脊髓前角Ｌ７￣Ｓ２段及相应疹神经节。结果 对照组为正常腓总神经伸肌运动神经元核群;实验组标记细胞会布于正常总神经伸肌运动神经元核群的复内侧,与下沉胫神经标记细胞分     

黄体酮促进端侧吻合外周神经再生的实验研究

目的探讨黄体酮对外周神经端侧吻合后神经侧芽生长及远段神经再生的影响。方法选用雌性SD大鼠36只,周龄9~10周。随机分为2组,黄体酮(PROG)组和对照组,每组18只。两组均先切除双侧卵巢,2周后行腓总神经和胫神经端侧吻合术。PROG组:切断左侧腓总神经,在同侧的胫神经干外膜上开一面积为1mm×1mm小窗,将腓总神经远端吻合到胫神经干侧方开窗处,近端反转包埋于附近肌肉内。经臀部肌内每日注射PROG注射液(10mg/ml)0·2ml;对照组:吻合方法同PROG组,术后注射等量的茶油0·2ml。各组分别于术后4周、8周、12周进行神经电生理、组织学和形态定量学检测。结果外周神经端侧吻合后,两组腓总神经均有一定程度再生。PROG组在各时间点,运动神经传导速度、腓总神经远端再生有髓神经纤维截面积、再生有髓神经纤维数目均明显优于对照组(P<0·05)。透射电镜结果显示PROG组较对照组髓鞘更为成熟,轴索再生明显。结论黄体酮可以促进外周神经端侧吻合后神经侧芽生长及远段神经再生和功能恢复。     

终末器官对端侧神经吻合后轴突再生影响的实验研究

目的　探讨受神经远端终末器官对端侧吻合后神经再生的影响。方法　SD雌性大鼠 1 0只 ,动物随机分为A、B2组。A组 :在近端切断腓总神经 ,其远断端与胫神经外膜开窗处进行端侧吻合 ;B组 :同A组两神经端侧吻合后 ,在距吻合口 1 .5cm处切断其与终末器官的联系 ,并将连接肌肉的腓总神经远端反折固定在邻近的肌肉组织。术后 1 2周取吻合口处的神经标本 ,甲苯胺蓝和抗神经微丝抗体免疫组化染色、光镜检查及图像分析。结果　甲苯胺蓝染色及神经微丝免疫组化染色结果说明A、B2组再生神经纤维数目、髓鞘厚度、纤维结缔组织含量及神经纤维丝排列 ,均有明显差异。结论　终末器官对促进端侧神经吻合后神经再生具有重要作用     

不同剂量FK506对周围神经端侧吻合功能恢复的影响

目的探讨不同剂量FILS06对神经端侧吻合功能恢复的影响。方法30只Wistar大鼠取右侧腓总神经切断后,近端结扎并反转缝于邻近肌肉上,远端与胫神经外膜开窗处行端侧缝合。左侧为正常对照。术后分为5组,每组6只。于术后当天开始,每组于动物右小腿外侧肌肉内分别注射生理盐水(对照组)和生理盐水稀释的FKS06(实验组)．剂量分别为lmg／kg-1·d~(-1)(实验组1)、2ms、kg~(-1)·d~(-1)(实验组2)、4mg/kg~(-1)·d~(-1)(实验组3)、8mg/kg~(-1)·d~(-1)(实验组4),连续2周。于术后3个月检测术肢双侧腓总神经、胫前肌电生理、组织学检查和胫前肌肌湿重的测定。结果实验各组全部电生理检测动作电位恢复率、肌肉单次收缩力恢复率、强直收缩力恢复率均显著高于对照组,再生神经纤维数目、肌湿重、肌纤维截面积均显著优于对照组。实验组2、3、4组之间差异无显著性意义．但均高于实验组1。结论FKS06对神经端侧吻合功能恢复具有促进作用。2mg/kg~(-1)·d~(-1)为比较合适的使用剂量。     

荧光逆行示踪法定位神经端侧缝合后再生来源的实验研究

目的 应用荧光逆行示踪法研究神经端.侧缝合修复臂丛神经损伤的有效性及再生神经的脊髓定位.方法 雌性SD大鼠24只,随机分为4组,造成臂丛神经上干损伤模型,分别以膈神经、同侧颈,神经根为供体神经,按照端.侧和端.端两种缝合方式修复肌皮神经.术后3个月,对大鼠肌皮神经和供体神经分别采用真蓝和双脒基黄进行逆行示踪.3、7、14 d后进行灌注固定,取颈段脊髓连续切片,荧光显微镜观察.结果 各观察点背根节及脊髓前角均出现荧光标记细胞,并逐渐增多.以同侧颈,为供体神经组,标记细胞仅出现在该节段,而以膈神经为供体神经组,标记细胞出现在颈_(3-5)节段.端一侧缝合组在相应脊髓前角或背根神经节出现,同时具有两种荧光剂的双标细胞或在同一脊髓节段同时出现分别以两种荧光剂标记的单标细胞.结论 采用不同供体神经进行端.侧缝合联合神经移植修复臂丛神经可使神经再生,荧光逆行示踪可以准确定位端.侧缝合后再生神经的来源.     

Choline acetyltransferase activity in collateral sprouting of peripheral nerve after surgical intervention: experimental study in rats.

The purpose of this study was to establish an assay of choline acetyltransferase (ChAT) activity to investigate the regeneration of injured peripheral nerve, repaired by end-to-end or end-to-side neurorrhaphy. Murine sciatic and peroneal nerves were exposed, and the peroneal nerve was transected at a site 5 mm from its ramification. For end-to-side neurorrhaphy, an epineurotomy producing a 5-x5-mm window was carried out on the tibial nerve, just above the level of gastrocnemius muscle ramification. The peroneal nerve stump was then sutured end-to-side to the tibial nerve window. For end-to-end neurorrhaphy, the peroneal stump was directly sutured end-to-end. ChAT activity was measured at a site distal to the peroneal stump at 1 to 3 months postoperatively, and the results were compared among four groups: 1) end-to-end neurorrhaphy group; 2) end-to-side neurorrhaphy group; 3) unrepaired group; and 4) positive controls. ChAT activity in the end-to-side neurorrhaphy yielded approximately two-thirds the value of the end-to-end neurorrhaphy, and more than half the value of positive controls at 3 months postoperatively. Histologic sections of the end-to-side and end-to-end sutured peroneal nerve demonstrated large numbers of myelinated axons and Schwann cells at the third postoperative month. All the results demonstrated that end-to-side neurorrhaphy is comparable to well-performed end-to-end neurorrhaphy, thus providing another option for surgical treatment of avulsion nerve injury and massive nerve defect.     

鼠周围神经端侧缝合与侧侧缝合修复方式的比较研究

目的　进一步探讨神经缝合修复方式对神经再生的影响。　方法　将SD鼠分为两组。端-侧缝合组将腓神经远侧断端与去外膜胫神经（开窗）行端侧缝合,开窗大小相当于腓神经的直径。侧-侧缝合组将腓神经远侧断段侧壁去除外膜,同样胫神经侧壁去外膜,两者去除外膜的面积相当于腓神经直径的3倍。将去外膜的两神经干进行侧-侧缝合。通过足印分析法,组织学方法,电生理,神经纤维密度等测量。比较两种修复法神经再生质量。　结果　术后16周时端-侧组和侧-侧组腓神经功能指数分别为(－39.92±11.67)和（-64.49±31.31）（P=0.033）,有显著差异。电生理术后16周侧-侧组腓神经潜伏期（Lat）(1.17±0.26)、波幅（Amp）(24.9±3.59)优于端-侧组Lat(1.42±0.06)、Amp(16.5±7.04)。组织学检查显示侧-侧组神经纤维密度(4330±672)较端-侧组(3186±199)高。　结论　鼠类腓-胫神经侧-侧缝合对神经再生有益。     

神经高位端端与低位端侧或侧侧缝合相结合提高神经修复能力的实验研究

目的对无缺损的周围神经高位损伤，提出高位端端与低位端侧或侧侧缝合相结合的新方法，观察神经再生和靶器官的恢复情况。方法SD大鼠80只，高位切断左侧胫神经。随机分为5组：A组：胫神经两断端行端端缝合，远端于膝关节水平与腓神经干行侧侧缝合。B组：断端处理同A组，远端移植正中神经作胫腓神经干之间的端侧桥接缝合。C组：单纯作断端的端端吻合。D组：胫神经干近端结扎并固定，远端与腓神经干行侧侧缝合。E组：近端处理同D组，远端切除部分神经段后，与腓神经干行端侧缝合。术后行肌电图检查及组织学观察并作统计学分析。结果术后早期（4周）D、E组有神经再生，术后12周A、B组的神经再生、传导功能及靶肌肉和运动终板的恢复情况均优于C、D、E组。结论高位端端与低位端侧或侧侧缝合相结合的方法，可尽早恢复对靶组织的营养和神经再支配，为高位缝合处高质量神经的长入赢得时间，提高了有效功能的恢复。     

FK506 increases the regeneration of spinal cord axons in a predegenerated peripheral nerve autograft

The authors examined the ability of FK506 to accelerate axonal regeneration of rat spinal cord axons in a peripheral nerve (PN) graft. Predegenerated autografts were produced by transecting the left tibial nerve 1 week prior to spinal cord implantation into the lumbar (L-3-L-4) spinal cord. Rats were given daily injections of either FK506 (5 mg/kg, subcutaneous) or vehicle for 21 days. The PN grafts from FK506-treated rats contained larger sized regenerating axons compared with vehicle-treated controls, and mean axonal areas increased by 25% at 7.5 mm along the PN graft. Fluoro-Gold retrograde labeling confirmed that the regenerating axons originated from the central nervous system. Unexpectedly, the majority (>50%) of neurons in the red nucleus were retrogradely labeled in the FK506-treated animals only. The results indicate that FK506 not only accelerates the elongation of spinal cord axons but also promotes regeneration of rubrospinal neurons.