双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠TNF-α水平的影响

目的研究双氢青蒿素治疗对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠血清和肺泡巨噬细胞培养上清液 TNF- α水平的影响。方法以醋酸可的松皮下注射 Wistar大鼠建立卡氏肺孢子虫肺炎动物模型 ,用 60 m g/ kg双氢青蒿素治疗实验大鼠 ,杀鼠取肺 ,用胶原酶消化法分离肺泡巨噬细胞 ,用 L PS刺激培养 72 h,同时设有感染组和正常对照。用 TNF- α试剂盒分别检测血清和培养上清液 TNF- α的水平。结果感染组和治疗组 TNF- α水平均高于正常对照 ,治疗组 TNF- α水平则低于感染组。结论卡氏肺孢子虫感染引起大鼠肺泡巨噬细胞分泌高水平的 TNF- α,但双氢青蒿素治疗后 PCP大鼠肺泡巨噬细胞产生 TNF- α水平降低。     

双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响

目的：检测双氢青蒿素对卡氏肺孢子虫肺炎（PCP）大鼠肺泡巨噬细胞凋亡的影响。方法：以醋酸可的松皮下洲Wistar大鼠建立PCP动物模型，对60mg/kg双氢青蒿素治疗实验大鼠，杀鼠取肺，用胶原酶消化法分离肺泡巨噬细胞，可PI和TUNEL法检测其凋亡，同时设有正常大鼠对照组。结果：感染组和治疗组大鼠肺泡巨噬．细胞凋亡率显著高于正常对照组，治疗组大鼠肺泡巨噬细胞凋亡率明显低于感染组。结论：卡氏肺孢子虫感染引起大鼠肺泡巨噬细胞发生凋亡，经双氢青蒿素治疗后PCP大鼠肺泡巨噬细胞凋亡降低。     

卡氏肺大鼠肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达的变化

目的探讨卡氏肺孢子虫肺炎(Pneumocysitis carinii pneumonia,PCP)大鼠肺泡巨噬细胞(Alveolar macrophage,AM)TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达的变化。方法采用AM体外培养技术,应用RT-PCR法分别测定脂多糖(LPS)诱导的AM中TNF-α、IL-1β、IL-6基因表达的动态变化。结果肺泡巨噬细胞受LPS刺激后,PCP模型大鼠TNF-αmRNA在1、4 h表达高于正常组(P<0.05),IL-1βmRNA表达在4、8 h时表达高于正常组(P<0.01),IL-6mRNA表达在8 h时PCP高于正常(P<0.05),表达峰值都提前,并且在4 h达到峰值。结论LPS刺激后,PCP大鼠肺泡巨噬细胞在早期可能更易分泌TNF-α、IL-1β、IL-6作为免疫分子,起免疫防御和免疫损伤作用。     

mtLSU-巢式PCR检测实验大鼠卡氏肺孢子虫的实验研究

目的对mtLSU-巢式PCR方法检测大鼠卡氏肺孢子虫的应用价值以及基因序列进行评价。方法采用地塞米松免疫抑制法诱导大鼠感染肺孢子虫;实验组10只,对照组1只;诱导至第7周时收集实验组及对照组大鼠肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF）标本,采用mtLSU-巢式PCR方法对人源与鼠源肺孢子虫共有的基因进行扩增和序列测定,同时采用镜检法对实验组大鼠肺组织和肺泡灌洗液标本进行检测,评估两种方法的敏感性。结果采用mtLSU-巢式PCR方法对实验感染大鼠肺组织和BAL进行检测,卡氏肺孢子虫DNA阳性率分别为100%（10/10）、90%（9/10）。而GMS染色镜检法检测的阳性率分别为80%（8/10）、60%（6/10）。所测Wistar大鼠卡氏肺孢子虫mtLSU基因序列长度为155bp,与GenBank的大鼠源肺孢子虫（U20170）及人源肺孢子虫（DQ473446）同源性均为100%（154/154、155/155）。结论 mtLSU-巢式PCR方法应用于大鼠卡氏肺孢子虫检测敏感性高,特异性强;获得与人源耶氏肺孢子虫相同的Wistar大鼠卡氏肺孢子虫mtLSU的基因序列。     

实验性卡氏肺孢子虫肺炎的病理学研究

Ｗｉｓｔａｒ大鼠皮下注射醋酸考的松诱发卡氏肺孢子虫肺炎，自第６～１２周，每周解剖病鼠２只观察，全部给药鼠均发病。肺部病变表现为：（１）肺印片查见卡氏肺孢子虫包囊和滋养体。（２）组织病理学改变：第６～８周ＨＥ染色切片呈间质性肺炎伴中度淋巴细胞浸润，肺泡内缺乏泡沫样渗出物，第９～１２周肺泡内出现泡沫样渗出物，ＰＡＳ染色该渗出物呈阳性反应，ＧＭＳ染色查见染成黑色的包囊。（３）停用醋酸考的松后４～６周，肺部炎症明显好转，提示大鼠卡氏肺孢子虫肺炎有自愈可能。电镜显示包囊、滋养体及受损肺泡上皮细胞的超微结构。     

复方磺胺甲恶唑对肾移植后卡氏肺孢子虫肺炎的预防作用

背景：卡氏肺孢子虫肺炎是由卡氏肺孢子虫寄生于肺部引起的一种严重的致命性肺炎。复方磺胺甲恶唑是目前用于治疗卡氏肺孢子虫肺炎的一线药物,治疗量往往有明显的不良反应,小剂量预防用药临床疗效及毒副作用尚不清楚。 目的：观察复方磺胺甲恶唑对肾移植后卡氏肺孢子虫肺炎的预防效果。 方法：选择肾移植后1个月且无复方磺胺甲恶唑过敏者。肾移植后1个月至半年或1年常规服用复方磺胺甲恶唑(0.48 g/d)。观察移植肝肾功能,感染情况,药物不良反应。 结果与结论：2006年起,随访125例肾移植术后早期患者,73例术后1个月起常规服用复方磺胺甲恶唑(0.48 g/d)至术后半年者,1例停药4个月后感染卡氏肺孢子虫肺炎死亡,47例服用复方磺胺甲恶唑(0.48 g/d)至术后1年者,无感染卡氏肺孢子虫肺炎者,5例因复方磺胺甲恶唑过敏或医从性差未服用复方磺胺甲恶唑者,2例分别在术后4,5个月感染卡氏肺孢子虫肺炎,1例死亡。结果提示,肾移植术后1个月至1年常规服用复方磺胺甲恶唑(0.48 g/d),可有效预防卡氏肺孢子虫肺炎,临床无明显不良反应。     

肺炎支原体肺炎患儿细胞因子测定的探讨

目的：探讨肺炎支原体感染引起的小儿肺炎支原体肺炎与细胞因子的相关关系。方法：91例已确诊为肺炎支原体肺炎的患儿根据肺炎支原体IgM结果。分为重症组和轻症组；另选35例正常小儿为对照组。分别采取空腹静脉血，采用放射免疫分析法（RIA）测定血清TNF－α，IL－6的水平，并且对三组资料进行相关性分析。结果：重症组和轻症组血清TNF－α，IL－6水平明显高于正常对照组，差异有显著性（P＜0．01），重症组血清TNF－α，IL－6水平明显高于轻症组，差异有显著性（P＜0．05）。重症组和轻症组TNF－α，IL－6的资料进行直线相关分析，结果两组患儿TNF－α的相关系数为r=0.49，IL－6的相关系数为r=0.95；显示血清TNF－α，IL－6水平理肺炎支原体感染的严重程度呈正相关。结论：细胞因子TNF－α，IL－6参与肺炎支原体感染的全过程，并且血清TNF－α，IL－6水平的高低与机体感染严重程度呈正相关关系。     

寄生虫学

弓形虫不同地理株致密颗粒蛋白基因的比较研究；zs株弓形虫p22基因片段在巨噬细胞中的表达；急性弓形虫感染所致昆明鼠不孕的实验研究；弓形虫p24基因敲除转染质粒pGB／P5-P3的构建；大鼠天然抗体相关的弓形虫抗原基因的免疫筛选与克隆；弓形虫膜抗原SAG3基因打靶载体的构建及筛选；大鼠卡氏肺孢子虫肺炎的实验病理学研究；卡氏肺孢子虫病鼠氧化损害与中药防治的实验研究；肾移植后并发卡氏肺孢子虫肺炎12例临床研究；人蛔虫Ⅱ期幼虫提取物诱导人肺上皮细胞凋亡；旋毛虫新生幼虫cDNA文库的免疫筛选；广州管圆线虫成虫cDNA文库抗原基因的筛选；用组织化学方法鉴别日本血吸虫细胞来源的研究；日本血吸虫EST序列的电子延伸及结果分析。     

卡氏肺孢子虫肺炎大鼠血清中TNF—α、IL-8和sICAM-1水平的变化

目的检测卡氏肺孢子虫肺炎（PCP）大鼠血清中TNF-α、IL-8和sICAM-1水平。方法建立清洁级SD大鼠PCP动物模型,同时设正常对照组,检测血清中TNF-α、IL-8和sICAM-1含量。并观察肺脏病理学的变化。结果PCP模型组血清中TNF-α、IL-8和sICAM-1含量分别是（3．65±0．73）ng／mL、（0．65±0．12）ng／mL和（1247．39±288．57）pg／mL,正常对照组的含量分别是（0．70±0．21）ng／mL、（0．14±0．10）ng／mL和（261．40±53．21）pg／mL,并且PCP模型组肺组织炎症反应明显。结论卡氏肺孢子虫肺炎大鼠血清中TNF-α、IL-8和sICAM-1的含量均升高,并且肺组织炎症反应明显。     

免疫功能低下Wistar大鼠白念珠菌肺炎模型的建立

目的建立用于免疫干预研究的免疫功能低下白念珠菌肺炎Wistar大鼠模型.方法醋酸考的松皮下注射制成大鼠免疫功能低下模型,并于第14天气管内灌注白念珠菌,制成免疫功能低下合并白念珠菌肺炎模型.检测免疫功能低下组,免疫功能低下+白念珠菌1、3、7?d组,正常组,正常+白念珠菌1、3、7?d组大鼠肺泡巨噬细胞的吞噬及杀菌功能;抗原提呈功能;培养上清中TNF-α活性和IL-1β、IL-6水平;血淋巴细胞杀伤功能;血清IFN-γ活性、IL-1β、IL-6水平;免疫功能低下+白念珠菌1、7?d组和正常+白念珠菌1、7?d组肺组织IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6表达;并于第7天进行左肺白念珠菌培养计数.结果免疫功能低下的大鼠肺泡巨噬细胞的吞噬和杀菌功能,抗原提呈功能,以及分泌TNF-α、IL-1β、IL-6的功能均明显低于免疫功能正常的大鼠;免疫功能低下的大鼠血中淋巴细胞的细胞毒作用明显低于免疫功能正常的大鼠;免疫功能低下的大鼠血清IFN-γ活性和IL-1β、IL-6水平明显低于免疫功能正常的大鼠.免疫功能低下合并白念珠菌肺炎大鼠肺组织IFN-γ、TNF-α、IL-1β、IL-6表达灌菌后第1天均低于白念珠菌肺炎大鼠,第7天均高于白念珠菌肺炎大鼠.免疫功能低下的大鼠左肺白念珠菌培养计数6.50×108CFU,免疫功能正常的大鼠左肺白念珠菌培养未见白念珠菌生长.结论该模型是免疫功能低下宿主肺部感染研究的适宜模型.     

卡氏肺孢子虫的分类、命名、体外培养及其动物模型的建立

以往所称的“卡氏肺孢子虫” (Pneumocystiscarinii,Pc)能感染包括人和实验动物在内的多种哺乳动物 ,免疫力低下的宿主感染后能引起致命的卡氏肺孢子虫肺炎 (Pneumocystiscariniipneumonia,PCP )或称肺孢子虫病(Pneumocystosis)。国际上已将原感染人体的卡氏肺孢子虫 (Pneumocystiscarinii)更名为Pneumocystisjeroveci,国内张瑞娟、朱淮民( 2 0 0 3)将其译为耶氏肺孢子虫 ,然尚未被广泛应用。其生物学分类也由原来动物界的原虫定为真菌界的真菌类。重新命名和跨界的分类归属具有重要意义 ,然而 ,国内有关“卡氏肺孢子虫”的报道 ,尚未启…     

卡氏肺孢子虫感染大鼠血清中蛋白及血液中嗜酸粒细胞的变化分析

卡氏肺孢子虫肺炎（pneumocystis carinii pneumonia,PCP）是由卡氏肺孢子虫（pneumocystis carinii,PC）引起的一种呼吸系统机会性感染,多见于免疫功能低下患者。据报道,未经药物预防的爱滋病（AIDS）患者约80％感染PCP。     

跨膜型和分泌型肿瘤坏死因子α对内毒素性休克肝的影响及意义

目的：探讨分泌型（S）和跨膜型（TM）肿瘤坏死因子α（TNF－α）对内毒素性休克肝的影响及意义。方法：首先使用埃氏大肠杆菌死菌液制备大鼠内毒素性休克模型;并分不同时间点检测血清中的S－TNF－α、腹腔巨噬细胞表面上的TM－TN－α;然后,在给大鼠注射死菌液之前30min,注射TNF－α转化酶（TACE）反义寡核苷酸（5mg/kg);6h后分别检测S－TNF－α、TN－TNF－α水平;检查肝脏的病理改变,并监测各组大鼠的血压变化。结果：在内毒素性休克过程中,TM－TNF－α表达的动态变化不同于S－TNF－α,TM－TNF－α在注射菌液30min后开始升高,4．5h达最高峰,随后有所下降,但一直维持在较高水平。TACE反义寡核苷酸有能有效地抑制TM－TNF－α转化为S－TNF－α,使腹腔巨噬细胞表面上的TM－TNF－α表达明显增高（P＜0．001）,使血压维持在正常水平,肝脏未见病理改变。结论：内毒素性休克的病理过程主要与S－TNF－α有关,而TM－TNF－α则可抵抗内毒素的攻击,稳定血压,限制炎症反应及保护肝组织免受损伤,此研究为临床治疗休克和感染性疾病提供了新的线索和实验依据。     

补中益气汤对肺孢子虫肺炎模型大鼠细胞免疫影响的实验研究

目的观察补中益气汤煎剂对卡氏肺孢子虫肺炎模型大鼠的免疫调节作用。方法Waster雌性大鼠60只,随机分成正常对照组、模型对照组、西药治疗对照组、中药治疗组及中药预防组。除正常组外其他4组均参照国内外公认的造模方法建立肺孢子虫肺炎模型。模型对照组生理盐水灌胃：西药治疗对照组与中药治疗组于实验第5周起至第6周分别给予复方新诺明及补中益气汤煎剂灌胃;中药预防组于实验第1周起以补中益气汤煎剂灌胃。于实验第6周末处死各组大鼠并检测各组大鼠淋巴细胞转化率和T细胞亚群百分比。结果正常组大鼠淋巴细胞转化率、CD4＋T细胞数量和CD4＋／CD8＋的值高于模型组,其差异具有统计学意义。中药预防组大鼠淋巴细胞转化率、CD4CF细胞数量和CD4＋／CD8＋的值高于西药治疗组和模型组。预防组大鼠CD4＋、CD4＋／CD8＋的值与正常组差异无统计学意义。西药治疗组CD4＋、CD4＋／CD8＋的值与模型组无差异。结论正常组与中药预防组大鼠T淋巴细胞转化率高于模型组,CD4＋T细胞数量的减少与PCP的发生具有密切关系,正常组与中药预防组CD4＋T细胞数量高于模型组,补中益气汤能够提高卡氏肺孢子虫肺炎模型大鼠淋巴细胞转化率和CD4＋T细胞的数量,在本实验中中药预防组的效果尤为显著,证实该方剂对大鼠肺孢子虫肺炎具有防治作用。     

橙皮苷对重症肺炎大鼠肺组织炎症和细胞凋亡影响

目的：研究橙皮苷对重症肺炎大鼠肺组织炎症和细胞凋亡影响。方法：构建重症肺炎大鼠模型，分为SD组、Control组、Model组（肺炎模型）、Hesperidin-L组（12 mg/kg橙皮苷治疗）、Hesperidin-M组（24 mg/kg橙皮苷治疗）、Hesperidin-H组（36 mg/kg橙皮苷治疗），检测肺组织湿干重比（W/D），对肺组织病理损伤程度评分，计数肺泡灌洗液中炎症细胞数目，qRTPCR检测肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS mRNA水平，ELISA检测TNF-α、IL-1β、IL-6含量，Western blot检测肺组织中Bax、ccaspase-3、Bcl-2、p-STAT3、p-JAK2、STAT3、JAK2、JAK1和p-JAK1蛋白表达水平，TUENL染色检测肺组织中细胞凋亡水平。结果：与Control组相比，Model组大鼠肺组织病理评分升高，W/D升高，肺泡灌洗液中单核巨噬细胞、淋巴细胞、中性粒细胞、白细胞数目均升高，肺组织中炎症介质TNF-α、IL-1β、IL-6、iNOS mRNA表达水平和TNF-α、IL-1β、IL-6含量均...     

克拉霉素对小鼠肺炎支原体感染模型IL-10表达的影响

目的通过建立肺炎支原体(MP)感染BALB/c小鼠的模型,探讨克拉霉素对肺炎支原体感染小鼠IL-10表达的影响。方法 60只昆明小鼠随机分为对照组、MP感染组及克拉霉素治疗组,每组20只,建立小鼠肺炎支原体感染模型,克拉霉素治疗组用克拉霉素治疗5 d。HE染色观察病理组织学变化;Western blot方法检测各组小鼠肺组织IL-10的表达;RT-PCR方法检测各组小鼠肺组织IL-10m RNA的表达水平。结果 MP感染后,小鼠肺组织呈间质性炎性改变,肺泡间隔增宽,大量淋巴细胞和巨噬细胞浸润在支气管、血管周围,肺泡内有渗出。相比于对照组,MP感染组小鼠肺组织IL-10蛋白和m RNA表达水平明显降低(0.01);与MP感染组相比,克拉霉素治疗组小鼠肺组织IL-10蛋白和m RNA表达水平明显升高(0.01)。结论克拉霉素可显著上调肺炎支原体感染小鼠肺组织IL-10水平。     

肾移植后并发卡氏肺孢子虫肺炎36例资料回顾(英文)

背景:卡氏肺孢子虫肺炎是常见的肾移植后早期并发症,起病隐匿,进展快,若诊治不及时,死亡率高,认识和掌握肾移植后卡氏肺孢子虫肺炎的发生发展规律和干预措施具有重要的临床意义。目的:回顾性分析肾移植后并发卡氏肺孢子虫肺炎的病因、临床特点、诊疗措施及预后。方法:回顾分析36例南方医科大学珠江医院器官移植科收治的肾移植后并发卡氏肺孢子虫肺炎患者的临床资料,分析一般状况、临床表现、治疗方案及人、肾预后情况,总结和认识该病诊断干预措施。结果与结论:36例患者中男22例,女14例,33例痊愈且移植肾功能保持良好,3例患者并发严重急性呼吸窘迫综合征死亡。36例患者卡氏肺孢子虫肺炎发生在肾移植后6个月内31例,7～18个月5例。15例(41.7%)通过纤维支气管镜下支气管灌洗液或肺组织活检检出卡氏肺孢子虫,21例未检出。多数患者经过减少免疫抑制剂、给予复方磺胺甲恶唑及支持治疗后痊愈且移植肾功能良好。提示卡氏肺孢子虫肺炎多发生在肾移植后6个月内,临床症状典型,病原体难以发现,早期诊断主要依据临床病史、症状和影像学检查,尽早、足量给予复方磺胺甲恶唑,减少免疫抑制剂,充分的支持治疗能改善预后。     

红霉素抗哮喘气道炎症机理的研究

为探讨红霉素抗哮喘气道炎症的机理，对２６例过敏性哮喘患者肺泡巨噬细胞（ＡＭ），分别加红霉素、地塞米松、生理盐水（空白对照组）培养，测定培养上清液中血栓素Ｂ２（ＴＸＢ２）、肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）、白介素－８（ＩＬ－８）水平。结果显示加红霉素组培养上清液中ＴＮＦ－α、ＩＬ－８水平明显低于空白对照组，ＴＸＢ２水平与空白对照组无差异；地塞米松组培养上清液中ＴＸＢ２、ＴＮＦ－α水平低于空白对照组，ＩＬ－８与空白对照组无差异。提示红霉素可通过抑制哮喘患者肺泡巨噬细胞分泌ΤΝＦ－α、ＩＬ－８而起抗炎作用，且其抗炎机理与地塞米松不完全相同。     

克拉霉素对小鼠肺炎支原体感染模型IL-4表达的影响

目的通过建立肺炎支原体(MP)感染BALB/c小鼠的模型,探讨克拉霉素对肺炎支原体感染小鼠IL-4表达的影响。方法 60只昆明小鼠随机分为对照组、MP感染组及克拉霉素治疗组,每组20只,建立小鼠肺炎支原体感染模型,克拉霉素治疗组用克拉霉素治疗5 d。HE染色观察病理组织学变化;Western blot方法检测各组小鼠肺组织IL-4的表达;RT-PCR方法检测各组小鼠肺组织IL-4 m RNA的表达水平。结果 MP感染后,小鼠肺组织呈间质性炎性改变,肺泡间隔增宽,大量淋巴细胞和巨噬细胞浸润在支气管、血管周围,肺泡内有渗出;Western blot方法和RT-PCR方法检测发现,MP感染组小鼠肺组织IL-4蛋白和m RNA表达较对照组明显升高(P0.01),但是明显低于克拉霉素治疗组(P0.01)。结论克拉霉素可显著降低肺炎支原体感染小鼠肺组织IL-4水平。     

加味补中益气汤治疗大鼠肺孢子虫肺炎的疗效观察

目的探讨加味补中益气汤治疗大鼠肺孢子虫肺炎（PCP）的疗效。方法按国内公认的PCP造模方法，建立大鼠PCP动物模型。设中药治疗组和预防组，同时建立西药对照组、PCP模型对照组及正常对照组。通过观察各组大鼠存活率、体重、肺内肺孢子虫包囊的数量和肺组织病理学变化考核药物疗效。结果中药组大鼠存活率高于PCP模型组，但低于正常组；中药治疗组和预防组大鼠平均体重高于PCP模型组，包囊数低于PCP模型对照组；中药治疗组和预防组大鼠肺组织炎症反应明显轻于PCP模型对照组。结论加味补中益气汤对大鼠肺孢子虫肺炎，有一定的疗效。