脊髓背角神经元凋亡在炎性痛大鼠吗啡耐受中作用研究

目的:探讨NMDAR及谷氨酸转运体(GT)在阿片耐受机制中的作用,以及脊髓神经元凋亡在慢性阿片耐受形成机制中的意义.方法:将60只健康雄性SD大鼠行鞘内置管后随机分为6组(n=10),空白对照组(A)于左后足踝关节腔注射生理盐水50μl,其他5组注射CFA 50μl.3d后分别经鞘内给予生理盐水10μl(A和B)、吗啡10μg(C组)、吗啡20μg(D组)、吗啡10μg+NMDA受体抑制剂MK-801 10nM(E组)、吗啡10μg+GT抑制剂PDC10μg(F组),1日2次,连续给药7 d.检测大鼠左后肢机械缩爪阈值评价其痛行为学,于给药后第7天取出左侧腰膨大处脊髓进行TUNEL染色和Western blotting检测.结果:C、D两组关节炎大鼠在鞘内给予吗啡第7天形成较稳定的吗啡耐受,MK-801和PDC分别对吗啡耐受的机械痛敏具有抑制和促进作用.B组大鼠脊髓背角凋亡细胞数及凋亡相关蛋白表达与A组比较,差异无统计学意义.与B组比较,C、D组大鼠脊髓背角的凋亡细胞数显著增加(P＜0.01),Bax和caspase-3蛋白表达上调(P＜0.01),Bcl-2表达下调(P＜0.01).与C组比较,E组大鼠脊髓背角凋亡细胞显著减少(P＜0.05),Bax和caspase-3蛋白表达下调(P＜0.01),Bcl-2表达上调(P＜0.05);F组凋亡细胞增多(P＜0.01),Bax和caspase-3蛋白表达上调(P＜0.01),Bcl-2表达下调(P＜0.01).结论:脊髓神经元凋亡可能是慢性阿片耐受的神经基础,NMDAR及GT在阿片耐受的神经细胞凋亡过程中发挥作用.     

托吡酯对大鼠脊髓损伤后神经的保护机制

目的:观察托吡酯(TPM)对大鼠脊髓损伤(SCI)后氧化应激及细胞凋亡的影响.方法:采用改良Allen's法制作大鼠SCI模型,随机分为假手术组、模型组及TPM低、中、高剂量组,采用BBB评分及斜板试验评价各组大鼠后肢运动功能的改变,HE染色观察脊髓形态学变化,紫外分光光度计检测大鼠脊髓组织丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,Western blot法观察脊髓B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)及Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达情况.结果:伤后各组BBB评分及斜板试验结果显著下降,1d、3d各组间差异不显著(P＞0.05),伤后5d高剂量组恢复情况显著优于低、中剂量组及模型组(P＜0.05);伤后14d时各组脊髓切片HE染色示高剂量组脊髓病理改变明显轻于低、中剂量组及模型组;与模型组比较,SCI后24h高剂量组MDA含量显著降低(P＜0.01),GSH含量显著增加(P＜0.01):高剂量组Bcl-2表达上调(P＜0.01),而Bax表达下调(P＜0.01).结论:TPM可有效降低SCI后的氧化应激水平,抑制细胞凋亡,减轻脊髓继发性损害,促进SCI后神经功能的恢复.     

甲基强的松龙联合嗅鞘细胞移植对急性脊髓损伤大鼠运动功能和诱发电位的影响

背景:嗅鞘细胞移植和甲基强的松龙是两种非常有前途的治疗脊髓损伤方法,关于二者联合治疗脊髓损伤的报道较少,结果也不尽相同.目的:通过对大鼠行为学评分和诱发电位学检测了解嗅球嗅鞘细胞移植和甲基强的松龙对大鼠急性脊髓损伤的修复作用以及二者之间有无协同作用.方法:以NYU脊髓打击法建立大鼠急性T10脊髓损伤模型,术后分别注射嗅鞘细胞、甲基强的松龙、嗅鞘细胞+甲基强的松龙、无血清的DF12培养液、生理盐水.于术后8周进行后肢体感诱发电位、运动诱发电位检测,并通过BBB评分了解各组大鼠手术前、后运动功能的变化.结果与结论:术后8周,嗅鞘细胞组、甲基强的松龙组、嗅鞘细胞+甲基强的松龙组与损伤组、DF12组比较,大鼠后肢BBB评分明显升高,体感诱发电位、运动诱发电位N1波潜伏期缩短,波幅升高,差异有显著性意义(P＜0.05).嗅鞘细胞+甲基强的松龙组与嗅鞘细胞组、甲基强的松龙组比较,大鼠后肢BBB评分明显升高,体感诱发电位、运动诱发电位N1波潜伏期缩短,波幅升高,差异有显著性意义(P＜0.05).说明嗅鞘细胞移植和甲基强的松龙单独应用均可以显著促进急性脊髓损伤大鼠运动功能恢复.二者联合促进急性脊髓损伤大鼠运动功能恢复的效果更加显著.     

脊髓损伤大鼠核因子kappa B与细胞凋亡及肢体功能间的相关性分析

目的研究急性脊髓损伤（ASCI）大鼠核因子kappa B（NF-κB）与细胞凋亡及肢体功能间的相关性。 方法共选取48只雌性SD大鼠,将其随机分为实验组及对照组。2组大鼠均采用手术切除椎板,对照组术中未进行脊髓压迫处理,实验组大鼠术中采用压迫法制作脊髓中度损伤模型。2组均于术后第4 h、8 h、1 d、3 d、7 d及14 d时各随机选取4只大鼠,参照BBB评分标准对其后肢功能进行评定,待评分结束后处死大鼠并提取脊髓标本,采用免疫组织化学染色法检测各组大鼠脊髓标本内NF-κB、Bcl-2及Bax表达水平。 结果实验组大鼠受损脊髓神经细胞中有NF-κB、Bcl-2及Bax表达,且表达水平随术后时间延长呈现先增高、后降低过程;大鼠肢体功能BBB评分随时间延长而逐渐升高。经相关性分析发现,随着术后时间延长,实验组大鼠NF-κB表达量与Bcl-2表达量无明显相关性（P＞0.05）,与Bax表达量有正相关性（P＜0.05）,与Bcl-2/Bax比值及BBB评分有负相关性（P＜0.05）。 结论ASCI大鼠NF-κB表达与Bcl-2/Bax比值及肢体运动功能均具有显著负相关性。     

芒果苷在大鼠脊髓缺血再灌注性损伤中的保护作用及机制研究

目的探索芒果苷(MAN)对大鼠脊髓缺血再灌注损伤的保护作用及相关分子机制。方法腹主动脉夹闭法制备大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型,采用前瞻性分析,实验分3组:对照组、模型组和实验组。实验组利用50 mg/kg芒果苷干预治疗,对照组和模型组给予等量生理盐水腹腔注射。于造模后第7天和14天检测各组大鼠下肢运动功能;14 d利用ELISA法检测肝脏组织中丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)以及谷胱甘肽过氧化氢酶(GSH-px)活性;化学定量法及Western blotting法分别检测肝脏组织中一氧化氮(NO)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)、Bax、Bcl-2蛋白表达;14 d后取脊髓组织进行快蓝/HE(LFB/HE)染色和eNOS、Bax免疫组织化学染色。结果BBB评分显示,第7天,与对照组比较,模型组下肢运动功能评分明显下降,而实验组较模型组有升高(P0.05);第14天,实验组BBB评分显著高于模型组(P0.05);ELISA法显示,模型组大鼠脊髓组织MDA含量显著高于对照组,CAT、SOD和GSH-px显著高于对照组,而实验组MDA含量显著低于模型组,CAT、SOD和GSH-px显著高于模型组(P0.05);化学定量法和Western blotting显示,模型组肝脏组织中NO和eNOS、Bax表达量显著高于对照组,而Bcl-2显著低于对照组(P0.05),而实验组肝脏组织中NO和eNOS、Bax表达量显著低于模型组,而Bcl-2显著高于模型组(P0.05)。免疫组织化学染色显示eNOS、Bax平均光密度实验组显著低于模型组(P0.05)。结论芒果苷可通过抗氧化应激和细胞凋亡保护大鼠脊髓缺血再灌注性损伤。     

许旺细胞-海藻酸钠凝胶移植修复大鼠脊髓损伤

目的:观察许旺细胞-海藻酸钠凝胶移植对大鼠脊髓损伤后细胞凋亡、Bcl-2表达及下肢运动功能恢复的影响.方法:清洁级SD大鼠随机分为4组:正常对照组、单纯损伤组、许旺细胞组、许旺细胞海藻酸钠凝胶组.后3组制作脊髓全横断损伤模型.正常对照组、单纯损伤组不进行移植处理,许旺细胞组植入吸附许旺细胞悬液的明胶海绵块、许旺细胞-海藻酸钠凝胶组植入许旺细胞-海藻酸钠凝胶.分别于12 h,1,3,7,21 d对动物进行BBB评分后处死,取损伤区脊髓节段制成石蜡切片进行TUNEL、Bcl-2染色,观察脊髓内凋亡细胞、Bcl-2细胞的数量及分布变化.结果:正常对照组仅有少量淡染Bcl-2阳性细胞;单纯损伤组神经元Bcl-2免疫反应阳性细胞表达的高峰在第3天,14 d时Bcl-2免疫反应阳性细胞表达接近正常水平.许旺细胞-海藻酸钠凝胶移植后损伤脊髓细胞Bcl-2免疫反应阳性细胞表达具有显著增高(P＜0.05),7 d高度表达并持续2周以上.单纯损伤组脊髓内细胞凋亡最多,并于损伤后1,7 d形成两个高峰,多分布于白质中.许旺细胞-海藻酸钠凝胶组BBB评分较单纯损伤组及许旺细胞组明显提高(P＜0.05).结论:许旺细胞-海藻酸钠凝胶移植能抑制大鼠脊髓损伤后脊髓细胞凋亡、促进Bcl-2的表达,提高了脊髓运动功能的恢复,但未达到正常水平.     

N-甲基D-天门冬氨酸受体2B亚型反义寡核苷酸鞘内注射对骨癌痛模型大鼠痛行为的改善作用

目的:在大鼠骨癌痛模型上观察鞘内注射N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚基(NR2B)反义寡核苷酸的镇痛效果.方法:将含2 × 105个SHZ-88大鼠乳腺癌细胞注射到SD大鼠左侧股骨远端骨髓腔,制作骨癌痛模型(T组).同时设假手术组(S组,n=8).所有大鼠均于接种前1 d,接种后第3、5、7、10、14天检测痛行为学指标.骨癌痛模型制作成功的T组大鼠在接种后第14天,进一步分为鞘内注射反义寡核苷酸(TA组)、正义寡核苷酸(TS组)、生理盐水(TN组),分别鞘内注射相应剂寡核苷酸和溶媒,鞘内注射后第1、3、5天再进行行为学检测.并在最后一次行为学测定后将大鼠处死,取其L4～6脊髓组织,检测术侧的NR2BmRNA.结果:与S组和术前基础值相比.造模后第7天,T组大鼠自由行走痛行为评分显著增高(P＜0.05),机械痛缩足阈值(PWT)显著降低(P＜0.05);在鞘内给药后第3、5天,TA组大鼠自由行走痛行为评分显著降低(P＜0.05),PWT增高(P＜0.05);而TS组和TN组在鞘内注射前后无显著变化(P＞0.05);TA、TS组及TN组L4～6脊髓组织的NR2B mRNA表达均高于S组(P＜0.05,P＜0.01);鞘内注射后5 d,TA组L4～6脊髓组织的NR2B mRNA表达低于TS组和TN组降低(P＜0.01).结论:鞘内注射NR2B反义寡核苷酸能下调脊髓NR2B mRNA表达.有效改善骨癌痛大鼠的痛行为学反应.     

芒果苷对脑性瘫痪模型大鼠神经运动功能及皮质区神经细胞凋亡的影响

目的探索芒果苷(MAN)对脑性瘫痪模型大鼠神经运动功能及脑皮质区神经细胞凋亡的影响。方法建立大鼠脑性瘫痪模型后,60只大鼠随机分为5组:假手术组,模型组,芒果苷低浓度组,芒果苷中浓度组和芒果苷高浓度组。芒果苷组在造模后分别给予10 mg/kg、25 mg/kg、50 mg/kg芒果苷治疗,于造模后第1、15和30天进行神经运动功能(BBB)评分,30 d后取出各组大鼠脑组织皮质区进行HE染色和caspase-3、Bax蛋白免疫组织化学染色,以及通过Western blotting检测Bax、Bcl-2蛋白表达。结果 BBB评分显示,第1天模型组和各浓度芒果苷组大鼠BBB评分无显著差异(P0.05),第15和第30天,芒果苷组BBB评分显著高于模型组,并呈剂量依赖趋势(P0.05);免疫组织化学染色显示,芒果苷组caspase-3、Bax蛋白平均光密度显著低于模型组,并呈剂量依赖趋势(P0.05);Western blotting结果显示,芒果苷组Bax蛋白灰度值显著低于模型组(P0.05),而Bcl-2蛋白灰度值显著高于模型组,并呈剂量依赖趋势(P0.05)。结论芒果苷能显著改善脑性瘫痪大鼠神经运动功能,抑制脑皮质区神经细胞凋亡,并其作用呈剂量依赖性。     

鞘内注射曲马多对福尔马林炎性疼痛大鼠脊髓c-fos mRNA及蛋白质表达的影响

[目的]探讨预先鞘内注射曲马多对福尔马林炎性疼痛大鼠脊髓c-fos mRNA及蛋白质表达的影响.[方法]选取鞘内置管成功的32只雄性大鼠随机分成四组,每组8只,分别注射生理盐水(NS组),12.5 μg/h曲马多(T1组),25 μg/h曲马多(T2组),50 μg/h曲马多(T3组).制备福尔马林炎性疼痛大鼠模型,取模型大鼠脊髓L4～L6阶段脊髓做c-fos mRNA的半定量RT-PCR和Western-blotting检测,观察大鼠脊髓c-fos的mRNA及蛋白质表达量的变化.[结果]NS组中的c-fos mRNA表达水平1.34±0.40明显高于T2组0.69±0.40(P＜0.01),高于T1组1.12±0.50,但比较差异无统计意义(P＞0.05);T3组0.41±0.13显著低于T2组,T2组显著低于T1组,其差异均有统计学意义(P＜0.01).NS组中的c-fos蛋白表达水平1.20±0.50明显高于T2组0.64±0.40(P＜0.01),高于T1组0.98±0.38,但比较差异无统计意义(P＞0.05);T3组0.27±0.09显著低于T2组,T2组显著低于T1组,其差异均有统计学意义(P＜0.01).[结论]鞘内注射曲马多均能抑制大鼠脊髓背角c-fos的mRNA和蛋白质的表达量;不同剂量的曲马多对c-fos表达量的影响不同,但剂量低时对c-fos表达无影响.     

鞘内注射氯胺酮对镜像痛大鼠热痛敏的影响及可能机制

目的：探讨氯胺酮鞘内注射对镜像痛大鼠热痛敏的影响及可能机制.方法：30只雄性SD大鼠建立大鼠坐骨神经镜像痛模型,随机分为3组（n=10）：Ⅰ组鞘内注射生理盐水,Ⅱ组鞘内注射氯胺酮25 μg,Ⅲ组鞘内注射氯胺酮50 μg,分别测定鞘内给药前（T1）、给药后2 h（T2）、4 h（T3）、6 h（T4）的大鼠热缩足反射潜伏期（TWL）、运动功能.每组大鼠在给药6h后处死,取出腰段脊髓背角,石蜡切片,采用免疫组化检测单核细胞趋化蛋白-1（MCP-1）的表达.结果：鞘内给药后,Ⅱ组、Ⅲ组在各时间点与Ⅰ组及给药前相比,两侧TWL明显延长,比较有显著差异（P＜0.01）.Ⅰ组MCP-1平均积分光密度值（IOD）表达明显高于Ⅱ组和Ⅲ组（P＜0.01）,鞘内注射氯胺酮后大鼠运动功能不受明显影响.结论：鞘内注射氯胺酮可抑制镜像痛大鼠的热痛觉过敏,该作用可能与抑制脊髓背角的MCP-1表达有关.     

北京市医院消毒剂使用情况调查

目的了解北京市各级医疗机构消毒剂使用情况。方法采用现场抽样方法对54所医院进行了调查。结果在所调查的医院中,有72.22%的医院同时索取消毒剂生产企业卫生许可证和卫生许可批件(含备案凭证)。有46.30%的医院建立了消毒剂日常配制记录;38.89%的医院建立了消毒剂生物监测记录;61.11%的医院建立了消毒剂化学监测记录。医院的消毒剂储存条件整体较好。结论北京市各级医疗机构使用消毒剂的管理不够完善,卫生监督机构需要进一步加强监督管理。     

甲型肝炎病毒感染性灭活与抗原性破坏的比较

经比较，在３００μＷ／ｃｍ２紫外线照射下，ＨＡＶ颗粒感染性灭活速度远快于抗原性的破坏。经１％过氧化氢作用的ＨＡＶ颗粒，其感染性灭活速度与抗原性破坏速度基本呈平行关系，作用６０分钟，感染性消失，抗原性亦被破坏。     

手术室空气消毒管理现状调查

目的了解江西省不同级别医疗机构手术室空气消毒方法的应用与管理情况。方法对11个地级市所有有手术室的医院进行了调查。结果江西省各级医疗机构手术室空气消毒主要使用消毒液熏蒸法、消毒液喷雾法、紫外线照射法、循环风紫外线空气消毒机、静电吸附式空气消毒机等方法。有46.49%的医疗机构的手术室采用其中1种消毒方法;有42.26%的医疗机构手术室使用2种消毒方法;有11.33%的医疗机构手术室同时拥有3种消毒方法。仍有77.08%的医疗机构手术室使用了紫外线照射消毒法,使用循环风紫外线空气消毒机的占37.50%,使用静电吸附式空气消毒机的只占11.46%。有81.64%的医疗机构接受疾病预防控制机构的消毒效果检测,有82.43%的医疗机构可进行自我检测。结论江西省各级医疗机构手术室都进行空气消毒,所使用的消毒方法不尽相同,以使用紫外线消毒法的居多,多数手术室能接受监督管理。     

医疗用品消毒管理情况调查

目的了解医院特殊医疗器材消毒管理情况,以便改进和加强管理。方法采用现场考察和填写调查表方法对临床特殊医疗器材的消毒技术和管理情况进行了专题调研。结果医院市场采购的一次性医疗用品主要采用环氧乙烷灭菌法,少数采用电离辐射灭菌法;使用后需要进行消毒处理者主要使用含氯消毒剂和戊二醛消毒剂处理。全院使用的一次性注射器、输液器、导尿管、胃管、吸痰管等物品抽样检测全部合格。各科室常用医疗器械使用后消毒处理多数采用含氯消毒剂浸泡处理;复用前灭菌多数采用戊二醛浸泡法,少数采用压力蒸汽灭菌法,仍有用低效消毒剂处理的情况。结论该医院一次性医疗用品灭菌质量能够得到保证,使用后处理和常用医疗器械消毒与灭菌处理存在不规范情况,需要改进提高。     

广东省32所医院胃肠镜清洗消毒管理现状调查

目的了解广东省医院胃肠镜消毒管理现状,以便改进胃肠镜消毒质量。方法采用实地考察和问卷调查的方式,对广东省32所医院胃肠镜清洗消毒管理情况进行了调查。结果三级综合性医院胃肠镜消毒质量合格率为92.31%,二级综合性医院和专科医院合格率分别为85.71%和50.00%。三类医院胃肠镜清洗消毒有专人负责分别占100%、85.71%和66.67%;三类医院胃肠镜清洗消毒专职人员的培训率分别为84.62%、85.71%和41.67%。在所调查的32所医院中共有7所医院使用酸性氧化电位水消毒胃肠镜,能正确规范使用酸性氧化电位水消毒的医院仅有1所。结论广东省不同类型医院胃肠镜检查室的消毒管理现状存在问题,需要加强管理。     

镇江市医院内镜消毒现状调查

目的了解镇江市医院内镜清洗消毒状况,以提高内镜消毒质量。方法采用问卷调查和现场抽样检测方法,对镇江市部分医院内镜消毒情况进行了调查。结果共抽样检测内镜及其相关用品297份,总合格率为47.81%,各级医疗机构消毒效果合格率均较低,但上级医院好于下级医院。检测胃镜、肠镜和纤维支气管镜共37份内腔面,合格率为54.1%,其中胃镜细菌总数最高达6000 cfu件/,肠镜细菌总数最高达6300 cfu件/,并检出铜绿假单胞菌。检测内镜清洗消毒槽内壁、进水管口、出水管口内表面122份,合格率仅为36.1%,其中胃镜冲洗槽内壁最高污染菌数为2100 cfu/cm2,进水管口内表面为3000 cfu/cm2;肠镜冲洗槽内壁为1800 cfu/cm2,有9份样检出铜绿假单胞菌。结论镇江市医疗机构内镜消毒与灭菌质量合格率比较低,市级医院好于县级以下医院;存在制度不健全,清洗消毒操作不规范问题,需要加强管理和改进内镜消毒质量。     

沈阳市医院空气微生物监测结果分析

为了解本市医院空气微生物污染情况 ,采用平板沉降法对 71所医院室内空气进行了采样检测。结果 ,4年内空气中微生物合格率依次为 6 5 .86 %、4 7.5 1%、30 %和 5 2 .91% ,春季比夏季空气微生物污染要轻 ,除 2 0 0 1年差异无显著性 (P >0 .0 5 )外 ,其余均有显著性差异 (P <0 .0 0 1)。结果说明 ,医院空气污染比较严重 ,在气候干燥的北方 ,夏季气温上升 ,空气污染加重 ,应加强医院空气的消毒管理 ,提高空气消毒质量     

关于医务人员手卫生质量管理调查报告

目的调查我院医务人员洗手消毒情况,加强医院感染的预防和控制措施。方法随机问卷调查40名医生和60名护士,对医护人员手卫生现状及影响洗手的因素进行调查,要求被调查对象对手卫生概念、标准隔离措施、自我防护原则和洗手方法的掌握等问题进行回答,并对是否按标准执行、不能执行的原因给予解释。结果临床医生对手卫生各调查项目知晓率最高为32.4%,最低为21.6%;医生对手卫生措施平均执行率为19.0%。临床护士对手卫生各项调查项目知晓率最高为61.0%,最低为44.06%;护士对手卫生措施平均执行率为34.0%,知晓人数和执行人数护士明显高于医生。多数人是因工作忙忽视手的卫生或洗手设施不足所致;部分是因为操作时要戴手套,认为不必洗手;少数人惧怕长期洗手消毒会损伤皮肤,部分医护人员认为手卫生与临床医疗质量无关。结论医院医务人员存在对手卫生的重要性认识不足的问题,医院存在洗手设备不足,必须加强专项培训,减少医院感染。     

消毒剂对两种动物阴道黏膜刺激试验结果比较研究

为比较两种动物阴道黏膜对不同受试物刺激敏感性,采用大鼠和家兔阴道黏膜刺激性试验观察黏膜消毒剂及卫生用品刺激反应及病理变化。结果,黏膜消毒剂对家兔与大鼠阴道黏膜刺激试验阳性反应检出率分别为56.3%和15.8%。黏膜消毒剂对大鼠阴道黏膜刺激反应强度均为无刺激性,对家兔阴道黏膜有极轻刺激性者占37.5%;一次性卫生用品对家兔或大鼠阴道黏膜刺激强度分级均为无刺激性。40种产品对动物阴道黏膜组织病理检查病理改变检出率为97.5%;主要病理改变有黏膜下水肿、血管充血及炎细胞浸润等。结论,黏膜消毒剂对大鼠阴道黏膜刺激反应率明显低于家兔的反应率;细胞水平病理组织学检查对评价受试物阴道黏膜组织损伤的程度比较敏感,对受试物的刺激强度易于分级。     

INFLUENCE OF CHARACTER OF ANTIBODY UPON VELOCITY OF FLOCCULATION

Results of a thorough study of the rates of flocculation of 20 antisera when mixed with their antigens in all proportions are presented. The relation between the α (constant antibody) and β (constant antigen) optima is discussed. It is suggested that most of the antisera examined can be classified into two main types, one of which, the H type, gives an optimum by both the α and β procedures, whereas the R type gives an optimum only by the former technique. It appears that these differences can only be accounted for by the influence of differences in the physical and chemical properties of the various antibodies.