卵巢癌组织KLK11基因的表达意义

目的: 探讨卵巢癌KLK11基因中的表达及临床意义. 方法: 采用RT-PCR和免疫组化技术检测48例卵巢癌组织中KLK11 mRNA及其蛋白的表达,并分析其与临床病理资料的关系. 结果: KLK11蛋白表达位于细胞质. KLK11 mRNA及蛋白的表达与临床分期有关,晚期(Ⅲ, Ⅳ期)KLK11 mRNA及蛋白的表达水平明显高于早期(Ⅰ, Ⅱ期,P＜0.05),中低分化癌KLK11 mRNA及蛋白的表达明显高于高分化癌(P＜0.05),但KLK11 mRNA及蛋白的表达与组织学类型无关. 结论: KLK11基因表达可能与卵巢癌的恶性程度有关.     

KLK11对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的:探究激肽释放酶相关肽11(KLK11)对卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。方法:qRT-PCR及Western blot技术检测卵巢癌细胞中KLK11基因的表达水平。Western blot评估siRNA特异性抑制KLK11在A2780和HO8910细胞株中表达的抑制效率。CCK-8、划痕实验及Transwell实验检测KLK11对卵巢癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。Western blot检测卵巢癌细胞中上皮-间质转化(EMT)相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、锌指转录因子(Snail)的表达水平。结果:与人正常卵巢上皮细胞相比,KLK11在卵巢癌细胞株中表达上调(P<0.01);与Control组相比,si-KLK11组卵巢癌细胞中KLK11蛋白表达降低(P<0.01),卵巢癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力被抑制(P<0.01);同时,si-KLK11组A2780和HO8910细胞中Vimentin、Snail蛋白表达水平均下调(P<0.01),而E-cadherin蛋白表达水平上调(P<0.01)。结...     

KLK10蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及意义

目的：探讨KLK10蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义。方法：应用免疫组化法检测10例上皮性卵巢良性、12例交界性和45例恶性肿瘤中KLK10蛋白的表达，分析KLK10表达与上皮性卵巢癌临床病理及生存状态的关系。结果：（1）在上皮性卵巢良性、交界性和恶性肿瘤组织中KLK10表达的阳性率分别为10％、58.33％和86．67％，3组间阳性率和阳性级别比较差异均有统计学意义（P〈0．05）；（2）KLK10表达的阳性率和表达强度在晚期组高于早期组，中低分化组高于高分化组，有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组，生存时间〈5年组高于≥5年组，各组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论：（1）KLK10蛋白在上皮性卵巢良性、交界性和恶性肿瘤细胞中表达的阳性率和表达强度呈逐渐升高。（2）KLK10蛋白在上皮性卵巢癌中的表达与临床分期、病理分级、淋巴结转移和5年生存率有关。     

BRCA2在卵巢肿瘤组织中的表达及临床意义

目的:乳腺癌易感基因2(breast cancer suscepbility gene 2,BRCA2)是近几年发现的新的抑癌基因,本研究旨在分析BRCA2在卵巢癌组织中的表达及其临床意义?方法:采用1对引物扩增BRCA2基因第14外显子,应用聚合酶链反应和基因测序技术检测BRCA2基因,并且应用免疫组化和Western blot检测肿瘤组织BRCA2蛋白的表达?结果:卵巢黏液性囊腺瘤和正常组织BRCA2基因未发生突变,浆液性肿瘤和黏液性囊腺癌的BRCA2第14外显子的128位碱基T突变为C?Western blot检测结果显示BRCA2在卵巢囊腺癌上的表达低于正常卵巢组织和卵巢囊腺瘤,免疫组化检测结果发现BRCA2在卵巢黏液性囊腺瘤和黏液性囊腺癌中的阳性率分别为87.50%和53.33%,差异有统计学意义(P < 0.05);而BRCA2在卵巢浆液性囊腺瘤和浆液性囊腺癌中阳性率分别为53.85%和73.17%,差异没有统计学意义(P > 0.05)?BRCA2蛋白在不同年龄?组织学分型?分化程度和临床分期各组间差异均无统计学意义(P > 0.05)?结论:BRCA2在卵巢癌组织中的表达不仅可以用于诊断,也可能为治疗提供一个途径?     

子宫内膜癌组织中KLK8、Maspin水平的表达及其相关性分析

目的探讨老年子宫内膜癌组织中激肽释放酶蛋白8(KLK8)及乳腺丝氨酸蛋白酶(Maspin)水平的表达及其相关性。方法选择我院2010年1月至2011年5月手术切除的标本,其中子宫内膜癌25例,子宫内膜复杂型增生26及正常增殖期子宫内膜组织30例。采用免疫组化法检测KLK8、Maspin阳性细胞在相关组织中的表达情况,采用Spearman相关性分析,研究KLK8和Maspin水平的相关性。结果根据免疫组化染色结果显示,KLK8蛋白主要存在于细胞基质中;KLK8蛋白在子宫内膜癌、子宫内膜复杂型增生以及正常子宫内膜中的阳性表达绿呈逐渐下降趋势,且KLK8在子宫内膜癌组织中的阳性表达率与子宫内膜复杂型增生及正常子宫内膜的表达比较差异具有统计学意义(P<0.05);Maspin蛋白定位于子宫内膜细胞核内,Maspin蛋白在子宫内膜癌、子宫内膜复杂型增生及正常子宫内膜中的阳性表达率逐渐下降,且Maspin在子宫内膜癌组织中的阳性表达率同子宫内膜复杂型增生及正常子宫内膜中的表达比较差异具有统计学意义(P<0.05)。子宫内膜癌组织中的KLK8、Maspin阳性表达率相关性分析显示两者之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 KLK8、Maspin在老年子宫内膜癌中起重要作用,可能成为临床诊断治疗的新靶点,但其相关性还需要进一步研究。     

KLK10蛋白和骨桥蛋白在上皮性卵巢癌中的表达及意义

目的:研究KLK10蛋白和骨桥蛋白(OPN)在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义。方法:应用免疫组化法检测10例上皮性卵巢良性、12例交界性和45例恶性肿瘤中KLK10蛋白和OPN的表达,分析KLK10蛋白和OPN表达与上皮性卵巢癌临床病理及生存状态的关系,并分析KLK10蛋白和OPN表达的相关性。结果:在上皮性卵巢良性、交界性和恶性肿瘤组织中KLK10蛋白表达的阳性率分别为10%、58.33%和86.67%;OPN表达的阳性率分别为0%、41.67%和71.11%;两者三组间阳性率和阳性级别比较均有统计学意义(P<0.05);KLK10蛋白和OPN表达的阳性率和表达强度在晚期组高于早期组,中低分化组高于高分化组,有淋巴结转移组高于无淋巴结转移组,生存时间<5年组高于≥5年组,各组之间KLK10蛋白和OPN表达阳性率及阳性级别比较均有统计学意义(P<0.05)。KLK10蛋白和OPN在上皮性卵巢癌中表达呈正相关。结论:KLK10蛋白和OPN在上皮性卵巢良性、交界性和恶性肿瘤细胞中表达的阳性率和表达强度逐渐升高。KLK10蛋白和OPN在上皮性卵巢癌中的表达与临床分期、病理分级、淋巴结转移和5年生存率有关。KLK10...     

siRNA抑制人卵巢癌KLK6基因表达的实验研究

目的探讨siRNA沉默KLK6基因表达对卵巢癌细胞生长的抑制作用及其机制,为卵巢癌的基因诊断和治疗提供理论依据。方法针对KLK6 mRNA序列设计合成siRNA,构建2个重组质粒PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6和PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/Non;将重组质粒导入卵巢癌SKOV-3细胞株,G418筛选获得稳定转染的细胞株;实验分为脂质体对照、阴性质粒转染对照及KLK6 siRNA重组质粒转染组,实时荧光定量PCR法检测KLK6 mRNA的表达的变化,用四甲基偶氮唑盐（MTT）法测量细胞生长情况。结果测序证实表达载体构建成功,在稳定转染重组质粒PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6的卵巢癌SKOV-3细胞株中,KLK6 mRNA抑制率（76%）明显高于阴性质粒对照组（2.7%）,SKOV-3细胞增殖活性显著低于阴性对照组和脂质体对照组。结论重组质粒PGCsilencerTMH1/GFP/Neo/KLK6可抑制卵巢癌细胞中KLK6基因的表达,并抑制卵巢癌细胞的生长。     

KLK7蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨KLK7蛋白在卵巢上皮性癌组织中的表达及其临床意义.方法 采用Western-blot技术检测34例卵巢上皮性癌、19例卵巢交界性上皮性肿瘤、32例卵巢良性上皮性肿瘤及37例正常卵巢组织中KLK7蛋白的表达,并分析其与各临床病理指标的相关性.结果 KLK7蛋白在卵巢上皮性癌及卵巢交界性上皮性肿瘤组织中的阳性表达率(分别为79.4%、47.4%)及表达水平(分别为0.85±0.15、0.53±0.09)均显著高于卵巢良性上皮性肿瘤及正常卵巢组织(分别为15.6%、16.2%和0.20±0.13、0.22±0.11,P均<0.05);且KLK7蛋白在卵巢上皮性癌组织中的阳性表达率和表达水平均与手术病理分期和淋巴结转移有明显的相关性(P<0.05).结论 KLK7蛋白在卵巢上皮性癌组织中呈高表达,其不同程度的表达增强与卵巢上皮性肿瘤可能有关.     

TRAIL及其受体和Fas-L在卵巢癌组织中的表达

目的　探讨TRAIL 及其受体在正常卵巢和卵巢癌组织中的表达,以及其与Fas- L 表达的相互关系。方法　用免疫组化法检测37例卵巢癌在2 1例正常卵巢组织TRAIL、TRAIL 受体(DR4、Dc R1)和Fas- L 的表达,并进行两两之间直线相关分析。结果　卵巢癌中DR4和Dc R1的表达均低于正常卵巢组织;高中分化卵巢癌DR4阳性率为(92 .31% )明显高于低分化癌DR4 (5 4 .5 5 % ,P<0 .0 5 ) ,表明卵巢癌分化程度越低,DR4表达也降低;TRAIL与Fas- L 的表达呈明显正相关(r=0 .777)。结论　卵巢癌中DR4和Dc R1表达低于正常卵巢组织,DR4的表达可能与卵巢癌的预后有关,初步提示TRAIL 及其受体相互作用与卵巢癌细胞凋亡有关。     

Clusterin蛋白过度表达与上皮性卵巢癌患者预后的关系

目的：探讨clusterin蛋白表达与上皮性卵巢癌临床病理学参数和预后的关系。方法：应用免疫组织化学方法检测clusterin蛋白在10例正常卵巢,10例卵巢良性腺瘤和68例上皮性卵巢癌组织中的表达;结合上皮性卵巢癌患者的临床病理学和预后资料,分析它们之间的相关性。结果：本组10例正常卵巢和10例卵巢良性腺瘤组织均呈clusterin蛋白的阴性或低水平的表达;在68例上皮性卵巢癌中,36例（53％）肿瘤出现clusterin蛋白过度表达,而且clusterin蛋白表达与肿瘤的临床分期有显著的相关性（P〈0．05）,Clusterin蛋白过度表达明显地多见于临床晚期（Ⅲ一Ⅳ期）的卵巢癌。另外,上皮性卵巢癌中clusterin蛋白表达与肿瘤的预后显著相关,Clusterin蛋白过度表达的卵巢癌患者的生存时间明显短于正常表达者（10g—rank=4．108,P=0．043）。结论：上皮性卵巢癌组织中clusterin蛋白的过度表达可以作为临床评估该肿瘤预后的新分子标记物之一。     

层粘连蛋白在上皮性卵巢肿瘤中的表达及其与预后的相关性

目的 研究层粘连蛋白(LN)在卵巢上皮性肿瘤中的表达情况及其与卵巢癌临床特征和预后的相关性.方法 选取2001年1月至2006年12月在哈尔滨医科大学附属第一医院治疗的正常卵巢20例、良性卵巢肿瘤30例、交界性卵巢肿瘤30例、恶性卵巢肿瘤60例,采用免疫组织化学方法检测组织中LN的表达情况.结果 在正常卵巢、良性、交界性与恶性4组之间,LN的表达阳性程度比较,差异有统计学意义(Hc=24.127,P＜0.01);基底膜表达的完整性分级比较,差异亦有统计学意义(Hc=53.263,P＜0.01).LN在癌巢基底膜表达的完整性与临床分期、组织分化程度、淋巴结转移、腹水形成及术后生存时间有关:临床分期晚、组织学分化差、淋巴结转移、腹水形成及术后生存时间短的肿瘤,比临床分期早、组织学分化好、无淋巴结转移、无腹水及术后生存时间长的肿瘤LN表达明显减少甚至缺失(P均＜0.01);而恶性肿瘤不同组织学分型间LN的表达无统计学差异(P＞0.05).结论 LN作为细胞黏附相关因子与恶性肿瘤的浸润和转移有关,癌巢周围层粘连蛋白的缺失可作为判断肿瘤恶性程度和预后的指标,可望成为判断卵巢癌预后的独立性因素.     

人端粒酶逆转录酶在膀胱肿瘤中的表达及其与预后的关系

目的检测人端粒酶逆转录酶(hTERT)在膀胱肿瘤中的定量表达,探讨hTERT与膀胱肿瘤预后复发的关系。方法采用免疫组织化学法和高清晰彩色医学图文分析系统,对45例膀胱移行细胞癌(BTCC)组织标本中的hTERT的表达情况进行定量检测,并用13例正常膀胱组织标本作为对照。结果BTCC组织标本中均可见有hTERT的表达,正常膀胱组织中无表达。hTERT的表达强度与患者的性别、年龄、肿瘤的大小、部位以及肿瘤的单多发等情况无关(P>0.05),而与肿瘤复发有关(P<0.05)。结论hTERT在膀胱肿瘤中表达上调,其活性与预后相关,可以作为检测肿瘤复发的指标。     

伴神经内分泌分化结直肠腺癌中p53、Ki-67的表达及其与预后的关系

目的：探讨伴神经内分泌分化（NED）结直肠腺癌中p53、Ki-67的表达及其与预后的关系。方法采用SP法检测NSE、CgA、Syn、CD-57及p53、Ki-67蛋白在65例结直肠腺癌组织中的表达,分为NED阳性组35例和NED阴性组30例,并分析p53、Ki-67表达对预后的影响。结果 NED阳性组中p53、Ki-67阳性表达率均明显高于NED阴性组（P〈0.05）。p53、Ki-67的表达与淋巴结转移、组织学分化和DUCK分期密切相关（P〈0.05）。NED阴性组的5年生存率明显高于NED阳性组（P〈0.05）;NED阳性组中,p53表达阴性者和Ki-67表达阴性者的5年生存率明显高于两者表达阳性者（P〈0.05）。 Cox回归分析表明,淋巴结转移、DUCK分期、p53及Ki-67表达是患者5年生存率的独立预后因素（P〈0.05）。结论 p53、Ki-67的高表达可能在伴NED结直肠腺癌发生发展过程中起重要作用;两者均为伴NED结直肠腺癌预后的独立危险因素。     

miR-631的表达与卵巢上皮性癌预后的关系

目的：分析微小RNA-631（miR-631）的表达量与卵巢上皮性癌（EOC）患者临床病理特征和预后的关系,并探讨miR-631对EOC细胞迁移的作用及对成瘤体积的影响。方法：从癌症和肿瘤基因图谱（TCGA）数据库中提取570例EOC患者的临床病理特征及相应的miR-631的相对表达量,由X-tile软件计算出miR-631相对表达量的最佳截断值,根据此最佳截断值将患者分为miR-631高表达组和miR-631低表达组,再用Kaplan-Meier曲线和Cox比例风险模型来评估miR-631表达量在EOC患者中的预后价值。挑选miR-631低表达的EOC细胞株A2780、COV504和miR-631高表达的细胞株ES2和SKOV3,分别上调和下调miR-631表达量,观察细胞迁移能力。建立裸鼠EOC模型,分为对照组和miR-631类似物组,观察2组肿瘤体积。结果：Kaplan-Meier分析显示,miR-631低表达组（miR-631相对表达量＜4.78）的EOC患者的总体生存期（OS）较miR-631高表达组（miR-631相对表达量≥4.78）差（HR=0.65,95%CI=0.47～0.89,P=0.008）。单因素和多因素COX回归分析发现miR-631的表达可能是影响EOC患者预后的独立因素（HR=0.72,95%CI=0.54～0.97,P=0.029）。上调miR-631的表达会抑制EOC细胞的迁移,下调miR-631的表达会促进EOC细胞的迁移。在EOC裸鼠模型中,上调miR-631会减小EOC体积。结论：miR-631的低表达可能预示着EOC患者预后较差,上调miR-631可以抑制EOC细胞的迁移,并且可以显著地减小肿瘤体积,可能对EOC有治疗意义。     

Bcl-2蛋白表达与乳腺癌预后相关的病理参数的研究

目的：探讨Ｂｃｌ－２蛋白在乳腺癌及良性乳腺病变中的表达,观察Ｂｃｌ－２蛋白与乳腺癌预后参数的关系。方法：采用免疫组化方法检测 ６９例浸润乳癌,４５例导管原位癌（ｄｕｃｔａｌｃａｒｃｉｎｏｍａ ｉｎ ｓｉｔｕ,ＤＣＩＳ）,１５例正常乳腺组织,３８例乳腺良性增生病变中Ｂｃｌ－２蛋白表达。结果：Ｂｃｌ－２蛋白在浸润乳癌,ＢＣＩＳ,乳腺良性增生病变以及正常乳腺组织阳性率分别为６５．２％,７５．６％,１００％,１００％。Ｂｃｌ－２蛋白表达与乳腺癌好的预后参数有关,如肿瘤体积小,低的组织学分级,ＥＲ、ＰＲ阳性,坏死出现少（Ｐ＜０．０１）,低ｐ５３蛋白表达（Ｐ＜０．０５）,与腋淋巴结浸润没有关系（Ｐ＞０．０５）。大部分乳腺癌表现 Ｂｃｌ－２＋／ｐ５３－表达表型,多属于高分化和中分化病例。而正常乳腺组织,良性增生病变中均为 Ｂｃｌ－２＋／ｐ５３－表达表型。结论：①Ｂｃｌ－２蛋白在正常乳腺组织、良性增生病变的表达高于乳腺癌的表达。②Ｂｃｌ－２蛋白表达与好的乳腺癌预后因素有关。③Ｂｃｌ－２与ｐ５３两种基因蛋白负相关。     

JAKs家族基因在急性髓系白血病中的表达与预后的相关性分析

目的: 分析JAKs家族基因在不同时期急性髓系白血病(AML)细胞中的表达及其与预后的相关性。分析JAKs家族基因在不同时期急性髓系白血病(AML)细胞中的表达及其与预后的相关性。方法: RT-PCR法分别检测AML初治组、复发组、完全缓解组(CR组)以及正常对照组(NC组)骨髓MNC细胞中JAKs家族基因(JAK1、JAK2、JAK3和TYK2 mRNA)的表达。同时对初治组患者随访3年, 统计3年生存率。结果: 初治组和复发组AML患者JAK3和TYK2 mRNA表达水平均高于CR组和NC组(P< 0.05~P< 0.01), 4组JAK2 mRNA表达水平差异有统计学意义(P< 0.05), 而初治组和复发组以及CR组和NC组间JAKs家族基因表达水平差异无统计学意义(P>0.05);JAK1、JAK2、JAK3和TYK2阳性组和阴性组间CR率差异无统计学意义(P>0.05)。Kaplan-Meier分析显示, JAK1、JAK2、JAK3和TYK2 mRNA阳性表达组3年生存率依次为36.75%、33.12%、22.13%和19.07%, 而阴性表达者依次为46.56%、41.25%、39.55%和37.02%。COX风险回归分析显示,JAK3和TYK2 mRNA阳性表达是影响AML患者预后的独立危险因素(P< 0.05)。结论: JAKs家族基因在AML发生、发展中发挥重要作用, 尤其是JAK3和TYK2 mRNA表达阳性与CR和总体生存率关系密切, 直接影响预后。