氧化修饰的低密度和极低密度脂蛋白对巨噬细胞单核趋化蛋白表达的影响

探讨氧化修饰的低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）和氧化修饰的极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）是否能诱导巨噬细胞表达单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）ｍＲＮＡ和蛋白，以阐明二者在动脉粥样硬化发生中的作用。方法在巨噬细胞的培养基中分别加入２５μｇ／ｍｌ的低密度脂蛋白（ＬＤＬ）、极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）、ＯＸ－ＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ，３７℃下温育２４小时，收集巨噬细胞的条件培养基，同时用异硫氰酸胍法提取巨噬细胞总ＲＮＡ。用Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析的方法检测巨噬细胞ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ的表达，用夹心ＥＬＩＳＡ检测其条件培养基中ＭＣＰ－１蛋白的含量。用微孔滤膜法进行单核细胞的趋化试验。结果当巨噬细胞分别暴露于ＯＸ－ＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ２４小时后，其ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ和蛋白的表达明显增加，同时单核细胞迁移距离的明显增加。而当巨噬细胞分别暴露于ＬＤＬ和ＶＬＤＬ２４小时，其ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ和蛋白的表达只有轻微的增加，单核细胞迁移距离亦无明显的增加。结论巨噬细胞能表达ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ和蛋白，ＯＸ－ＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ能诱导该细胞更强地表达ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ和蛋白     

用斑眯免疫结合法测定登革病毒单克隆抗体亲和力

建立斑点免疫结合法（ＤＩＡ）测定抗体相对亲和力，用此法测定了登革病毒Ⅱ型非结构蛋白ＮＳ１四株单克隆抗体（ＭｃＡｂａ）的相对亲和力，４株ＭｃＡｂｓ对ＮＳ１的亲和力各不相同，按５０％最大结合浓度分析，抗体株６－１／Ｃ为０．０５μｇ／ｍｌ。１－７／Ｆμｇ／ｍｌ，５Ｄ为２５．００μｇ／ｍｌ。３－１１／Ｃ为５７．０μｇ／ｍｌ。以上结果为应用单克隆抗体提供了依据。同时，说明用ＤＬＡ法测定ＭｃＡｂ相对亲和力的可     

氧化修饰的低密度和极低密度脂蛋白对巨噬细胞单核趋化蛋白表…

探讨氧化修饰的低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）和氧化修饰的极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）是否能诱导巨噬细胞表达单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）ｍＲＮＡ和蛋白，以瘅二者在动脉粥样硬化发生中的作用，方法在巨噬细胞培养基中分别加入２５μｇ／ｍｌ的低密度脂蛋白（ＬＤＬ）极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）ＯＸ－ＬＤＬ和ＯＸ－ＶＬＤＬ，３７℃下温育２４小时，收集巨噬细胞的条件培养基，同时用异硫氰酸胍法提取巨噬细胞总ＲＮ     

NO在外源性自由基损伤内皮细胞中的作用

目的：探讨ＮＯ在外源性自由基损伤内皮细胞（ＥＣ）中的作用。方法：培养的家兔主动脉ＥＣ随机分为四组：１．对照组（Ｃ,ｎ＝６）：２ｍｌＰＢＳ;２．自由基损伤组（Ｘ／ＸＯ,ｎ＝６）：２ｍｌＰＢＳ中加入终浓度为１μｍｏｌ／ｍｌＸ,０．１ＩＵ／ｍｌ的ＸＯ;３．Ｌ－Ａｒｇ组：含终浓度为１０＾－３Ｍ的Ｌ－Ａｒｇ,余同２;４．ＳＮＰ组：含终浓度为１０＾－５Ｍ的ＳＮＰ,余同２。在观察Ｌ－ＮＡＭＥ对自由基损伤的作用时     

辅酶Q10及山莨菪碱对培养心肌细胞缺氧复氧的保护作用

目的：探讨辅酶Ｑ１０ 及山莨菪碱对培养心肌细胞缺氧复氧的作用机制。方法：观察培养液中ＬＤＨ 和ＣＰＫ－ＭＢ含量,细胞内ＭＤＡ、ＳＯＤ和ＧＳＨ－ＰＸ的活性变化。结果：辅酶Ｑ１０ 和山莨菪碱可减少氧自由基产生。结论：氧自由基是造成心肌细胞缺氧复氧损伤的重要原因;辅酶Ｑ１０和山莨菪碱能保护心肌细胞内ＳＯＤ及ＧＳＨ－ＰＸ的活性     

不饱和脂肪酸对肺癌细胞的抑制作用

不饱和脂肪酸（ＬＡ）浓度为２５μｇ／ｍｌ，对人肺腺癌细胞系（ＳＰＣ－Ａ１）细胞和二倍体人胚肺细胞系（ＨＬＦ）细胞抑制率分别为：９８．４±２．２％，１８．０±２．１％（Ｐ＜０．００１）。表现为对恶性细胞的选择性抑制作用。ＳＰＣ－Ａ１对５μｇ／ｍｌ ＬＡ无反应，１μＭ丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）对ＳＰＣ－Ａ１细胞抑制率为４３．４±２．９％而当用１μｍ ＭＭＣ处理这种对５μｇ／ｍｌ ＬＡ无反应的ＳＰＣ－Ａ１时，     

冬虫夏草水提液对心肌细胞脂质过氧化作用的影响

观察了冬虫夏草水提液对心肌细胞缺氧再给氧时细胞内丙二醛含量，超氧化物歧化酶活性及细胞膜脂质流动性的影响，探讨冬虫夏草的抗脂质过氧化作用。结果显示缺氧再给氧组心肌细胞ＭＤＡ含量增加，ＳＯＤ活性降低，细胞膜脂质流动性下降，缺氧再给氧加冬虫夏草组上述改变减轻，其中１００μｇ／ｍｌ，１０００μｇ／ｍｌ组上述指标与缺氧再给氧组及１０μｇ／ｍｌ组比较，Ｐ均〈０．０１。     

LPO、MDA、SOD、GSH－PX测定对脑外伤高压氧治疗的疗效评估

对４０例脑外伤患者进行了高压氧治疗，并在治疗前后进行了血清过氧化脂质（ＬＰＯ）、丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和谷胱甘肽过氧化物酶（ＧＳＨ－ＰＸ）的测定。结果：治疗前ＬＰＯ、ＭＤＡ、ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ分别为：８．０４±１．２５（μｍｏｌ／Ｌ）、７．３５±０．２０（ｎＭ／ｍｌ）、８８．３０±１５．２０（Ｎｕ／ｍｌ）、１７１．５６±２８．２０（ｕ），治疗后为５．３５±１．７５（ｕｍｏｌ／Ｌ），４．８５±１．２０（ｎＭ／ｍｌ），９７．４４±２１．０２（Ｎｕ／ｍｌ），１８８．８５±４５．５５（ｕ）。治疗前病人组ＬＰＯ、ＭＤＡ含量明显高于健康组，而ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ活力则明显低于健康组。治疗后随着症状体征的消失，ＬＰＯ、ＭＤＡ明显降低，而ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ逐渐升高，四项指标均向正常范围逆转。且ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ已接近正常值（Ｐ＞０．０５）．故ＬＰＯ、ＭＤＡ、ＳＯＤ、ＧＳＨ－ＰＸ的测定可做为高压氧治疗脑外伤的有价值的疗效判断指标而用于临床。     

用斑点免疫结合法测定登革病毒单克隆抗体亲和力

建立斑点免疫结合法（ＤＩＡ）测定抗体相对亲和力。用此法出定了登革病毒Ⅱ型非结构蛋白ＮＳ１四株单克隆抗体（ＭｃＡｂｓ）的相对亲和力，４株ＭｃＡｂｓ对ＮＳ１的亲和力各不相同。按５０％最大结合浓度分析，抗体株６─１／Ｃ为０．０５μｇ／ｍｌ．１─７／Ｆ为０．６７μｇ／ｍｌ．５Ｄ为２５．００μｇ／ｍｌ，３─１１／Ｃ为５７．００μｇ／ｍｌ。以上结果为应用这些单克隆抗体提供了依据。同时，说明用ＤＩＡ法测定ＭｃＡｂ相对亲和力的可行性。     

绿茶提取物对细胞氧自由基损伤的保护作用

目的通过实验观察绿茶提取物—茶色素（ＴｅａＰｉｇｍｅｎｔ，ＴＰ）对豚鼠心肌氧自由基损伤的保护作用。方法取豚鼠右室前乳头肌，置于Ｔｙｒｏｄｅ液３３±１℃浴槽中，通９５％Ｏ２和５％ＣＯ２混合气体。１组加黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶系统（ＸＸＯＤ）产生氧自由基诱发乳头肌氧化损伤；另１组在加ＸＸＯＤ之前５ｍｉｎ先加入ＴＰ２５ｍｇ／Ｌ。分别观察各组心室乳头肌的生理特性变化，最后测定各标本匀浆中超氧化歧化酶（ＳＯＤ）和脂质过氧化物丙二醛（ＭＤＡ）的含量。结果ＴＰ能显著对抗氧自由基损伤诱导的心肌细胞膜损伤和心肌生理特性的变化，对心肌组织中ＳＯＤ活性降低及ＭＤＡ含量升高，有明显对抗作用。结论ＴＰ对心肌细胞膜氧自由基损伤有显著的保护作用     

PAOA与四种免疫抑制剂对小鼠体外脾细胞单相和双相混合培养影响初探

本文报道了中药ＰＡＯＡ水提取物对小鼠体外脾细胞单相和双相混合培养有显著的抑制作用。其中１０００μｇ／ｍｌ浓度抑制效应最明显（Ｐ＜０．０１）。并将ＰＡＯＡ与环孢素Ａ（ＣｙｃｌｏｓｐｏｒｉｎｅＡ，ＣｓＡ）、硫唑嘌呤（Ａｚａｔｈｉｏｐｒｉｎｅ，Ａｚａ）、地塞米松（Ｄｅｘａｍｅｔｈａｓｏｎｅ，ＤＸＭ）及环磷酰胺（Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ，Ｃｙ）四种临床常用的免疫抑制剂作比较，其结果显示ＰＡＯＡ（１０μｇ／ｍｌ，１００μｇ／ｍｌ，１０００μｇ／ｍｌ）的免疫抑制作用明显强于Ａｚａ、ＤＸＭ和Ｃｙ，也不亚于ＣｓＡ的抑制作用。因此，作者认为，ＰＡＯＡ作为免疫抑制剂用于临床治疗将会有广阔前景。     

大蒜提取物DAS对培养大鼠心肌细胞的抗氧化损伤作用

目的：观察大蒜提取物二烯丙基二硫（ＤＡＳ）的抗氧化损伤作用。方法：用电子自旋共振法（ＥＳＲ）测定各组心肌细胞的自由基含量,并用玻璃微电极测定心肌细胞的动作电位（ＡＰ）。结果：ＤＡＳ可降低黄嘌呤－黄嘌呤氧化酶（Ｘ－ＸＯＤ）诱导的氧化损伤的心肌细胞自由基含量,并可改变其损伤电位。结论：大蒜提取物ＤＡＳ具有对抗Ｘ－ＸＯＤ诱导的氧化损伤作用。     

银杏叶提取物对牛主动脉平滑肌细胞的增殖的影响

目的：观察银杏叶提取物（ＥＧＢ）对小牛主动脉平滑肌细胞（ＳＭＣ）增殖的影响。方法：分别采用体外培养的的ＳＭＣ及经氧化修饰型低密度脂蛋白造成ＳＭＣ增殖,选用３～８代ＳＭＣ,（１）分为对照组和ＥＧＢ组。（２）分为对照组和ｏｘｌｄｌ（０．１ｍｇ／ｍｌ）组,在ｏｘｄｌ组中加入个浓度ＥＧＢ（０,５０,１００,２００,４００,４００μｇ／ｍｌ）,培养２４ｈ后用ＭＴＴ和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定细胞含量及其培养液中ＳＯＤ、ＬＰＯ、ＴＸＢ２、ＰＧＩ２。结果：ＥＧＢ后可使细胞ＭＴＴ含量和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入量减少,其抑制作用与剂量相关。ｏｘｌｄｌ可使ＳＭＣ明显增殖,加用ＥＧＢ后可使ＳＭＣ增殖受到抑制。ＥＧＢ组与ｏｘｌｄｌ组相比,ＳＯＤ、ＰＧＩ２升高,ＬＰＯ、ＴＸＢ２降低。结论：ＥＧＢ可直接抑制ＳＭＣ增值,并呈剂量依赖型。ＥＧＢ抑制ｏ     

洋地黄毒甙体外抗人癌细胞株的作用

目的：探讨洋地黄毒甙体外抗肿瘤作用。方法：以台盼蓝排染法、中性红活染法和克隆形成实验测定洋地黄毒甙（ＤＴ）对多种人癌细胞株的细胞毒作用。结果：０．０１～１．２５μｇ／ｍｌＤＴ在体外能显著杀伤ＨＬ－６０．Ｋ５６２．ＳＭＭＣ－７７２１，ＳＧＣ－７９０１细胞，并呈剂量依赖性，药物作用２４ｈ．ＩＣ５０分别是０．１３２．０．１８２．０．２６５．０．４８９μｇ／ｍｌ。对正常成纤维细胞株ＨＬＦ的ＩＣ（５０）为４．２８８μｇ／ｍｌ．明显高于癌细胞，对癌细胞具有选择毒性作用。克隆形成实验中，０．０１～１．２５μｇ／ｍｌＤＴ处理１２ｈ，对ＨＬ－６０和ＳＧＣ－７９０１细胞集落形成有明显的抑制作用，ＩＣ５０分别是０．０５６．０．ｌ１９μｇ／ｍｌ。结论：应用洋地黄毒甙及其他Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶抑制剂防治肿瘤是一个值得探讨新方向。     

珍珠丸—1和珍珠丸—2清除和抑制自由基的实验研究

本文报道珍珠丸－１（Ｚｈｅｎ－１）和珍珠丸－２（Ｚｈｅｎ－２）清除和抑制自由基的作用。结果显示Ｚｈｅｎ－１对０２＾－的ＩＣ５０为１１５．７μｇ／ｍｌ，ＳＣ５０为１１１．５μｇ／ｍｌ，对ＯＨ的ＩＣ５０为７４７μｇ／ｍｌ，ＳＣ５０为１１２１μｇ／ｍｌ；Ｚｈｅｎ－２对０２＾－的ＩＣ５０为６６．０μｇ／ｍｌ，ＳＣ５０为８２．４μｇ／ｍｌ，对ＯＨ的ＩＣ５０为６６０μｇ／ｍｌ，ＳＣ５０为６５２μｇ／ｍｌ。提增     

抗CD3McAb和rhGM—CSF对再障患者CFU—GM生长的体外影响的研究

用ＣＦＵ－ＧＭ单固体琼脂培养技术研究了抗ＣＤ３单克隆抗体（ＭｃＡｂ）和重组人集落刺激因子对再生障碍性贫血（ＡＡ）患者骨髓ＣＦＵ－ＧＭ体外生长进行研究。结果表明：１０μｇ／ｍｌ的抗ＣＤ３ＭｃＡｂ和０．１μｇ／ｍｌ的ｒｈＧＭ－ＣＳＦ均可增加ＡＡ患者ＣＦＵ－ＧＭ的集落数,抗ＣＤ３ＭｃＡｂ作用较ｒｈＧＭ＝ＣＳＦ显著,且不同患者对抗ＣＤ３ＭｃＡｂ和ｒｈＧＭ－ＣＳＦ的敏感性不同,对ＡＡ患者,临床治疗时,应先行     

宁夏枸杞多糖对CC14损伤大鼠肝脏的保护作用

以ＣＣ１４诱发大鼠肝脏脂挝过氧化为自由基损伤模型，观察枸杞多糖，不同剂量（２５ｍｇ／１００ｇＮＷ６ｄ＾－１；５０ｍｇ／１００ｇＢＷ．ｄ＾－１）对鼠肝的保护作用。结果低剂量组能明显降低肝中丙二醛（ＭＤＡ）及甘油三脂（ＴＧ）（Ｐ〈０．０１），Ｐ〈０．０５）；两剂量组均能明显升高肝中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性（Ｐ〈０．００１）。提示ＬＢＰ对鼠肝自由基损伤有保护作用。高剂量级至ＭＤＡ是ＴＧ降低作用不明显     

氧化修饰LDL及VLDL对兔主动脉平滑肌细胞单核细胞趋化蛋白1mRNA表达的作用

单核细胞趋化蛋白１（ＭＣＰ－１）是一种强的单核细胞趋化因子，在体外可由多种细胞分泌，包括血管平滑肌细胞（ＳＭＣ）。本研究采用斑点杂交方法检测了氧化修饰低密度脂蛋白（ＯＸ－ＬＤＬ）、极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）及氧化修饰极低密度脂蛋白（ＯＸ－ＶＬＤＬ）对培养的兔主动脉ＳＭＣＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达的作用。结果表明，培养的ＳＭＣ可表达ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ，而且ＳＭＣ暴露于ＯＸ－ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＯＸ－ＶＬＤＬ后，其ＭＣＰ－１ｍＲＮＡ表达水平明显增高，分别增高约１１倍、６倍和２０倍。因此我们认为ＯＸ－ＬＤＬ、ＶＬＤＬ及ＯＸ－ＶＬＤＬ可以刺激培养的兔主动脉ＳＭＣＭＣＰ－１ｍＲＮＡ的表达。     

高效液相色谱法同时测定生物体液中TMP、SMZ、Ac-SMZ的含量

建立了同时测定生物体液中磺胺甲基异恶唑、乙酰磺胺甲基异恶唑和甲氧苄啶的反相高效液相色谱分析方法。药物在ＯＤＳ柱上分离，流动相为甲醇－０．０６７ｍｏｌ／Ｌ磷酸缓冲溶液（３５：６５Ｖ／Ｖ），检测波长为２２５ｎｍ，ＴＭＰ，ＳＭＺ和Ａｃ－ＳＭＺ的检测限可分别达到０．４μｇ／ｍｌ，０．１μｇ／ｍｌ和０．３μｇ／ｍｌ。原型和代谢产物均可用有机酸经简单提取，该法精确、灵敏，并适用于药代动力学研究。     

参麦注射液抗心肌缺氧-再给氧损伤实验研究

采用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ离体心脏灌注模型，对大鼠心肌缺氧—再给氧损伤中抗自由基酶ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ，过氧化产物ＭＤＡ、心肌酶ＣＰＫ和心肌细胞超微结构进行了观察、同时探讨了参麦注射液的保护作用机理。结果表明：（１）心肌缺氧灌注４０ｍｉｎ，富氧再灌５ｍｉｎ，与正常对照组比较，心肌细胞超微结构损伤严重，线粒体数目减少，大部分空泡变性，嵴消失，糖原颗粒减少，心肌收缩结构受到严重破坏。同时ＣＰＫ活性明显升高，ＳＯＤ及ＧＳＨ－Ｐｘ活性明显降低，ＭＤＡ含量明显升高（Ｐ＜０．０１）。（２）预先给不同剂量参麦注射液进行灌注，与模型组比较，心肌超微结构损伤明显减轻，线粒体数目较多，嵴密集，未见肿胀变形，糖原颗粒丰富，心肌收缩结构基本正常。ＣＰＫ活性明显降低，心肌ＳＯＤ及ＧＳＨ－Ｐｘ活性明显增高，心肌ＭＤＡ含量明显降低（Ｐ＜０．０１）。且参麦大剂量组疗效优于复方丹参液（Ｐ＜０．０５）。我们推测其保护作用机理可能是稳定心肌细胞膜，保护心肌线粒体，增加能量供应，提高抗自由基酶活性，从而减轻氧自由基对心肌的损害