腺病毒介导CTLA4Ig对舍格伦综合征小鼠颌下腺AQP5表达的影响

目的：观察CTLA4Ig-重组腺病毒载体（Ad-CTLA4Ig）对SS颌下腺AQP5表达的影响。方法：采用完全弗氏佐剂＋同种鼠颌下腺抗原激发诱导小鼠舍格伦综合征（SS）。实验组在激发前30min予以Ad-CTLA4Ig腹腔注射,未转CTLA4IgcDNA的腺病毒载体（Adv）及SS作对照。比较各组动物颌下腺形态学改变,并采用Western blot分析SS小鼠颌下腺AQP5表达变化。结果：CTLA4Ig-重组腺病毒实验组颌下腺病理学改变不明显。并且删表达量明显高于对照组（P〈0．05）。结论：Ad-CTLA4Ig可正向调节小鼠颌下腺AQP5的表达,并可有效抑制小鼠合格伦综合征的发生。     

α1-肾上腺素受体在颌下腺的表达及苯肾上腺素对唾液分泌调节的动物实验

目的研究α-肾上腺素受体亚型在家兔颌下腺的表达和分布，及其激动剂——苯肾上腺素促家兔颌下腺唾液分泌的相关机制。方法应用RT—PCR和Western blot检测家兔正常颌下腺α1-肾上腺素受体亚型mRNA及蛋白质的表达；免疫组化法检测颌下腺α1-肾上腺素受体亚型的分布及水通道蛋白5的表达；经颌下腺导管插管给予（1×10^-8）-（1×10^-6）moL／L的苯肾上腺素，观察家兔心率和血压的变化及促颌下腺唾液分泌的量效关系。结果家兔颌下腺有α1A-α1B和α1D-肾上腺素受体3种亚型的mRNA及蛋白质的表达，并广泛分布于导管和腺泡细胞的胞膜及胞质中。给予1×10^-7moL／L苯肾上腺素7d，促进颌下腺唾液分泌增加，而对心率、血压无明显影响；水通道蛋白5在腺泡及导管细胞的顶膜和侧膜的表达增加。结论家兔颌下腺存在α1A-、α1B-和α1D-肾上腺素受体3种亚型的mRNA和蛋白质的表达。经颌下腺导管给予低剂量苯肾上腺素促进唾液分泌是安全有效的；水通道蛋白5的表达增加可能与苯肾上腺素促唾液分泌的机制有关，该研究为临床治疗领下腺功能低下提供了初步依据。     

AQP6和AQP5在人下颌下腺上的免疫组化定位

目的检测水通道蛋白亚型AQP6和AQP5在人下颌下腺的分布情况。方法对源自10例行颈淋巴清扫术患者的正常颌下腺组织,通过免疫组织化学染色方法,标记确定人下颌下腺组织中AQP6和AQP5的分布情况。结果 AQP6在部分颌下腺腺泡细胞质中表达。AQP5在浆液性腺泡和粘液性腺泡顶膜以及分泌小管均有表达,而闰管和纹状管未见表达。结论 AQP6在部分颌下腺腺泡细胞中表达,与AQP5相协调,参与唾液中水和阴离子的分泌调节。     

一次性18Gy放射对大鼠颌下腺损伤的实验研究

目的:观察一次性18 Gy放射对大鼠颌下腺组织学形态和唾液流率的改变。方法:40只大鼠随机分为实验组和对照组,每组20只。实验组一次性18 Gy局部照射大鼠颌下腺区域,对照组只麻醉不放射。8周后处死所有大鼠,处死前插管法提取大鼠颌下腺唾液,称取其质量,计算唾液流率,比较两组唾液流率的改变。处死后取颌下腺组织,经4%多聚甲醛固定,切片,HE染色,镜下观察颌下腺的组织学形态。结果:放射后实验组进食进水量下降、活动减少。实验组饮水频率高于对照组。对照组的唾液流率为(18.64±8.23)μL/min,实验组的唾液流率是对照组的57.42%,为(10.70±2.22)μL/min。HE染色显示,放射后实验组颌下腺细胞变性,间质血管充血,腺泡细胞内的空泡数量明显增多。结论:放射后大鼠颌下腺唾液流率明显降低,放射后8周,组织学形态出现显著变化。放疗对大鼠颌下腺组织学形态和唾液分泌功能的远期影响,尚需进一步观察和研究。     

异丙肾上腺素对SD大鼠原代颌下腺细胞增殖的影响

目的研究异丙肾上腺素对颌下腺细胞增殖的影响,为体外构建组织工程化涎腺提供充足的种子细胞。方法采用不同的方式加入异丙肾上腺素后,用Brdu标记阳性的细胞比率及绘制生长曲线的方法,检测颌下腺细胞的增殖能力。结果体外培养条件下,颌下腺细胞保持了对肾上腺素能受体刺激的反应,但与给药浓度及方式有关。结论异丙肾上腺素能在一定作用时间和浓度条件下促进颌下腺细胞的增殖,能为体外构建组织工程化涎腺提供种子细胞。     

β-肾上腺素受体对颌下腺功能调控的研究进展

根据与不同肾上腺素类药物的亲合力,可将肾上腺素受体（adrenoceptor,AR）分为α-AR和β-AR两型,α-AR介导内脏器官和皮肤血管收缩以及腺体分泌;β-AR介导心率加快、支气管扩张和脂肪细胞分解。     

黄芪丹参对干燥综合征模型大鼠颌下腺组织的水通道蛋白-5表达的影响

目的 探讨黄芪合并丹参对干燥综合征模型大鼠颌下腺组织水通道蛋白-5(AQP5)的影响。方法 自身同种鼠抗原合并百白破疫苗加强免疫法免疫模型动物;用Western blot分析SS大鼠颌下腺AQP5表达的影响。结果 免疫动物出现类似SS的病理改变,存在大量淋巴细胞浸润,提示免疫造模成功。Western blot检测显示各组均出现分子量为42 KD的条带。空白对照组AQP5表达值正常(1.35±0.13),造模生理盐水组AQP5表达值(1.03±0.08)明显减少,造模中药高剂量组AQP5表达值较造模生理盐水组明显增强(1.31±0.15)。与空白对照组比较,造模生理盐水组AQP5表达显著减少(P<0.05);与造模生理盐水组比较造模中药高剂量组AQP5有表达显著增加(P<0.01)。结论 唾液流量的增加、颌下腺指数降低提示中药黄芪、丹参有改善唾液腺分泌唾液的功能;Western blot检测显示黄芪、丹参通过增强颌下腺水分子通道的释放,上调AQP5的表达,扩大颌下腺水分子的滤过,缓解口腔干燥的症状。?     

电离辐射对大鼠颌下腺TNFα和FGF2表达的影响

目的:观察照射后大鼠颌下腺TNFα和FGF2的表达变化,探讨放疗后唾液腺纤维化的可能分子机制。方法 :19只大鼠随机分为对照组(只麻醉不照射)、照射组。照射组用15 Gy的X射线进行颌下腺区局部照射1次,照射后3 d和30 d处死大鼠取颌下腺,4%多聚甲醛固定、石蜡包埋、切片,免疫组化染色观察颌下腺TNFα和FGF2表达的变化。结果:照射后3 d和30 d大鼠颌下腺TNFα和FGF2表达均升高,30 d组高于3 d组。结论:照射后唾液腺纤维化可能与TNFα和FGF2表达升高有关。     

放疗对小型猪腮腺颌下腺舌下腺微血管损伤影响的实验研究

目的:观察放疗对小型猪腮腺、颌下腺、舌下腺的微血管损伤状况。方法:将6只实验用小型猪分为2组。2组动物进行放疗,将双侧腮腺、颌下腺、舌下腺加入放射野中,放疗组20Gy/每侧,对照组0Gy/每侧。放疗结束后4 h处死两组动物,取两组动物腮腺、颌下腺、舌下腺标本行HE染色与CD31免疫组化染色,观察放疗早期3种腺体微血管密度变化。结果:两组小型猪腮腺、颌下腺、舌下腺CD31阳性染色颗粒数有显著差异(P＜0.05);3个腺体间统计结果有显著性差异(P＜0.05);腮腺与颌下腺及舌下腺有显著性差异(P＜0.05),颌下腺与舌下腺无显著性差异。结论:放疗可导致小型猪腮腺、颌下腺、舌下腺微血管密度明显减低,且各腺体间微血管密度减低有差异,腮腺的损伤程度大于颌下腺和舌下腺。     

变形链球菌SBR经颌下腺免疫小鼠后局部神经生长因子和白介素-5表达变化

目的　探讨在涎腺免疫接种后局部免疫调节相关细胞因子的变化。方法　以变形链球菌SBR作为亚单位疫苗经颌下腺注射免疫BALB/C小鼠 ,应用逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)检测接种后颌下腺内神经生长因子和白介素 5的表达。结果　免疫接种之后 ,小鼠颌下腺内神经生长因子和白介素 5的mRNA表达量均高于对照组。结论　变形链球菌SBR在涎腺作局部免疫接种 ,可诱导抗体应答 ,促进免疫调节相关细胞因子的表达 ,进一步增强涎腺的免疫功能和分泌功能。     

Sialin(SLC17A5)在腮腺、颌下腺及颌下腺细胞系HSG表达的初步分析

目的研究唾液酸转运蛋白Sialin在正常涎腺组织和颌下腺细胞系HSG的表达.方法应用基因芯片检测正常人腮腺、颌下腺组织Sialin编码基因SLC17A5的表达;提取腮腺、颌下腺组织及颌下腺细胞系(HSG)总RNA,通过RT-PCR在基因水平上验证SLC17A5基因的表达;提取HSG细胞总蛋白,用免疫印迹法检测Sialin在蛋白水平表达.结果基因芯片检测到Sialin编码基因SLC17A5基因在正常人腮腺、颌下腺均有表达,表达比值分别为226、206.9,不存在表达差异;RT-PCR验证芯片结果并在其他涎腺样本及颌下腺细胞系HSG中能扩增出其全部翻译区1485bp的片段,应用商业化的抗体能够在HSG细胞检测到Sialin相应的约54KDa蛋白.结论正常腮腺、颌下腺组织和颌下腺细胞系HSG均表达SLC17A5基因,但是唾液酸转运蛋白Sialin在组织、细胞内定位和功能需要进一步研究.     

AQP3、7、9在人下颌下腺的免疫组化定位

采用免疫组化ABC法检测源自10例颈淋巴清扫患者的正常下颌下腺组织AQP3、7、9蛋白的表达。AQP3在浆液性腺泡和黏液性腺泡细胞均有表达,分布于腺泡细胞的基底膜和侧膜,在浆液性腺泡细胞中的表达明显高于黏液性腺泡细胞,导管系统未见AQP3表达;AQP7在极少数肌上皮细胞有表达;AQP9在部分浆液性腺泡腔、混合性腺泡腔以及部分闰管管腔和浆液性半月体上有表达。     

产气荚膜梭菌肠毒素对鼠颌下腺紧密连接蛋白表达影响的研究

目的 观察产气荚膜杆菌肠毒素对鼠颌下腺上皮细胞形态及细胞间紧密连接蛋白表达影响。 方法 制备提纯气荚膜杆菌肠毒素羧基段184-319残基短肽片段,并灌注大鼠颌下腺3h,行H.E及免疫荧光组织化学染色,观察腺泡及导管细胞形态及紧密蛋白ZO-1及Claudin-4表达变化。 结果 成功提纯产气荚膜杆菌肠毒素短肽片段,未观测到上皮坏死,未观察到紧密连接ZO-1及Claudin-4表达变化。 结论 未发现产气荚膜杆菌肠毒素短肽片段对上皮细胞及其细胞间紧密连接的破坏作用,为进一步研究细胞间涎腺分泌机理提供基础。     

表皮生长因子受体单抗MAb225对舌癌细胞DNA放射后损伤修复的影响

目的 研究表皮生长因子受体(EGFR)单克隆抗体MAb225对放射所致舌癌细胞DNA损伤修复的影响及其作用机制.方法 应用单细胞凝胶电泳的方法检测MAb225对舌鳞癌细胞Tca8113放射后DNA双链断裂所致的尾矩,半定量逆转录多聚酶链反应和Western blot检测MAb225对DNA蛋白激酶Ku70、Ku80表达...     

表皮生长因子受体单抗MAb225对舌癌细胞DNA放射后损伤修复的影响

目的研究表皮生长因子受体（EGFR）单克隆抗体MAb225对放射所致舌癌细胞DNA损伤修复的影响及其作用机制。方法应用单细胞凝胶电泳的方法检测MAb225对舌鳞癌细胞Tca8113放射后DNA双链断裂所致的尾矩,半定量逆转录多聚酶链反应和Western blot检测MAb225对DNA蛋白激酶Ku70、Ku80表达的影响。结果MAb225作用后的细胞单细胞凝胶电泳的彗星尾矩明显高于未处理细胞（P<0.05）,并能显著抑制DNA蛋白激酶Ku70、Ku80的表达。结论MAb225通过抑制DNA蛋白激酶Ku70、Ku80的表达影响了DNA双链断裂的修复能力。     

放射对口腔鳞癌细胞DNA损伤和糖酵解的影响

目的:探究放射诱导下口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)DNA损伤特点,及其对细胞糖酵解的影响。方法:4Gy的X-ray照射OSCC细胞(HSC3和CAL27)后,Western Blot和细胞免疫荧光检测DNA损伤标志γH2AX蛋白表达;CCK8法检测细胞增殖能力;RT-PCR检测若干糖酵解相关酶m R NA水平。结果:放射诱导OSCC细胞γH 2AX蛋白表达在0.5h后迅速上调,24h-48h恢复至正常水平,60h后再次上调;OSCC细胞增殖能力受到时间依赖性的抑制(P<0.05);糖酵解相关酶GLUT1、GLUT3、HK2、PK-M2和LDH A基因水平上调(P<0.05)。结论:放射诱导OSCC细胞发生DNA损伤,并促进糖酵解。     

局部麻醉药加苯肾上腺素的应用

肾上腺素有收缩血管和延长麻醉时间的作用。然而用药后有使心率加快的缺点,对一些高血压和冠心病患者不宜使用。自1979年以来,我们在局麻药中加新福林(即苯肾上腺素),经临床应用证实与肾上腺     

EGF对颌下腺导管细胞增殖作用的影响

目的 :探讨表皮生长因子 (EGF)对颌下腺导管细胞增殖作用的影响。方法 :向培养液中加入EGF进行颌下腺导管细胞培养 ,以MTT法测定细胞的增殖能力 ,研究不同浓度下生长因子对大鼠颌下腺导管细胞增殖的剂量 -效应关系及时间—效应关系。结果 :EGF在 0 .5～ 10ng/ml浓度范围内呈剂量 -效应关系 (P <0 .0 1) ,当浓度持续增大时 ,培养细胞的增殖能力则有所降低 (P >0 .0 5 ) ;与对照组比较 ,加入EGF作用第 2天开始出现促增殖效应 ,第 3天开始EGF显示出明显的促增殖效应 (P <0 .0 1) ,第 5天时培养细胞的增殖能力开始降低。结论 :EGF在一定浓度和时间范围内对颌下腺导管细胞具有促增殖作用