米非司酮对早孕绒毛及蜕膜细胞周期动力学的影响

目的 探讨米非司酮对早孕绒毛及蜕膜细胞周期动力学的影响,方法 应用流式细胞技术对２３例正常早孕和２４例口服米非司酮后吸宫流产物的绒毛及蜕膜组织,进行细胞周期动力学分析。结果 服用米非司酮后,绒毛滋养细胞Ｇ０,Ｇ１期细胞明显增加（Ｐ〈０．０１）,Ｇ２,Ｍ期明显降低（Ｐ〈０．０１）,细胞增殖指数明显降低（Ｐ〈０．０１）,蜕膜细胞除Ｇ２,Ｍ期细胞上升（Ｐ〈０．０５）外,其余各期无变化,结论米非司酮可阻断     

米非司酮药物流产后绒毛蜕膜细胞凋亡的相关研究

目的:探讨米非司酮对早孕绒毛蜕膜细胞凋亡、增殖的作用机制。方法:以20例药物流产患者为研究组,以20例非意愿妊娠要求行人工流产负压吸引刮宫术的患者为对照组,分别收集绒毛和蜕膜标本,应用原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,并采用免疫组织化学方法检测bcl-2、bax、fas、fasL、增殖细胞核抗原(PCNA)5种蛋白在绒毛和蜕膜中的分布与表达强度,同时应用原位杂交法测定fas与fasLmRNA的分布与表达强度。结果:凋亡细胞在正常早孕绒毛合体滋养细胞中少量存在,蜕膜中偶见;绒毛、蜕膜中bcl-2、bax、fas、fasL、PCNA均有表达。采用米非司酮药物流产的绒毛合体滋养细胞及蜕膜间质及腺上皮细胞的凋亡显著增多,同时伴有促凋亡bax、fas、fasL蛋白及fasLmRNA含量的增加,而PCNA蛋白含量与C组比没有变化。结论:米非司酮不仅能促进早孕绒毛合体滋养细胞、蜕膜间质及腺上皮细胞的凋亡,而且主要通过Fas与FasL转录及翻译途径介导,bax表达增加也其也有一定的相关性,此可能为其抗早孕机制之一。     

米非司酮药物流产时绒毛膜及蜕膜组织的超微结构改变

目的 探讨米非司酮药物流产时,绒毛膜及蜕膜的形成学变化。方法 应用光镜和透射电镜对10例米非司酮药物流产患者（观察组）和10例人工流产患者（对照组）在流产当时留取绒毛膜和蜕膜进行形态学观察。结果 观察组标本中绒毛膜和蜕膜组织细胞均表现出一种自噬性凋亡倾向。蜕膜组织中颗粒细胞内的分泌颗粒减少或消失,间质内网状纤维溶解,断裂。结论 米非司酮药物流产时,绒毛膜及蜕膜细胞均呈现一种自噬性凋亡倾向,同时释放大量松弛素,引起网状纤维溶解。断裂,蜕膜组织崩解,剥脱。     

survivin基因在早孕绒毛与蜕膜中的表达及米非司酮对其的影响

ｓｕｒｖｉｖｉｎ是一种凋亡抑制蛋白 ,大多数人类的恶性肿瘤组织及人与鼠的胚胎组织中有表达[1 ] 。本研究通过检测早孕绒毛和蜕膜组织中ｓｕｒｖｉｖｉｎｍＲＮＡ及其蛋白产物的表达 ,以证实绒毛和蜕膜中ｓｕｒｖｉｖｉｎ基因的存在 ,并初步探讨米非司酮对其表达的影响。一、资料与方法(一 )研究对象收集 2 0 0 0年 2月至 2 0 0 0年 6月于本院妇产科门诊自愿终止妊娠的健康早孕妇女的绒毛和蜕膜组织标本。随机选取其中人工流产 15例 (人流组 ) ,药物流产 15例 (药流组 )。药流组的服药方法为 :第 1天清晨空腹口服米非司酮 5 0ｍｇ,当晚口…     

米非司酮对人早孕绒毛细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨米非司酮对人早孕绒毛滋养细胞增殖和凋亡的影响。方法对１５例正常早孕吸宫流产和１５例米非司酮流产病例的绒毛组织,应用免疫组织化学ＡＢＣ法检测增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）在细胞中的染色（细胞增殖）情况,ＤＮＡ缺口原位末端标记法检测细胞凋亡。结果正常早孕绒毛细胞滋养细胞增殖指数为５３．７４％±１．３４％,且见细胞浆阳性染色,合体滋养细胞未见ＰＣＮＡ阳性染色;合体滋养细胞和细胞滋养细胞的凋亡指数分别为２．５２％±０．８６％和０．５２％±０．２６％;米非司酮流产绒毛细胞滋养细胞增殖指数降为５０．８６％±１．４４％,细胞浆阳性现象消失;细胞凋亡指数显著增加,合体滋养细胞和细胞滋养细胞分别达到２２．１６％±２．２６％和２０．１２％±１．７４％。结论米非司酮终止早孕可能是通过抑制滋养细胞增殖和促进滋养细胞凋亡来实现的     

米非司酮对人甲孕绒毛细胞增殖和凋亡的影响

探讨米非司酮对人早孕绒毛滋养细胞增殖和凋亡的影响。方法 对１５例正常早吸宫流产和１５例米非司酮流病例的绒毛组织，应用免疫组织化学，ＡＢＣ法检测增殖细胞核抗原在细胞中的染色情况，ＤＮＡ缺口原位末端标记法检测细胞凋亡。结果正常早孕绒毛细胞滋养细胞增殖指数为５３．７４％±１．３４％，且见细胞浆阳性染色，合体滋细胞未见ＰＣＮＡ阳性染色；     

凝集素受体WGA、RCA和ECL在米非司酮流产绒毛及蜕膜组织中表达的研究

目的:通过麦胚凝集素(WGA)受体、蓖麻凝集素(RCA)受体和鸡冠珊瑚树凝集素(ECL)受体在米非司酮流产的绒毛及蜕膜组织中的表达,探讨米非司酮的抗早孕机理。方法:以生物素标记的凝集素WGA、RCA和ECL为探针,应用亲和组织化学染色法检测3种凝集素受体在米非司酮流产组(实验组)和人工流产组(对照组)早孕绒毛及蜕膜组织上皮细胞及其间充质细胞的分布。结果:实验组WGA受体、RCA受体和ECL受体在蜕膜组织上皮细胞的表达比对照组均显著降低(P0.01)。实验组ECL受体在绒毛上皮的表达显著低于对照组(P0.01),实验组WGA和RCA受体在绒毛上皮细胞的表达与对照组无显著差异(P0.05)。实验组3种凝集素受体在绒毛及蜕膜的间充质细胞的表达,与对照组无显著差异(P0.05)。结论:米非司酮可能通过下调蜕膜上皮组织中WGA受体、RCA受体和ECL受体的表达,阻碍胚胎发育而导致流产。     

米非司酮对人早孕蜕膜组织细胞凋亡的影响

细胞凋亡（ａｐｏｐｔｏｓｉｓ）同胚泡植入及胎盘发育密切相关,为了进一步探讨米非司酮终止早孕的机制,本文随机选择要求人工流产的妇女２５名,服药组１３名,对照组１２名。应用流式细胞仪对经碘化丙锭（ＰＩ）染色后的蜕膜组织细胞ＤＮＡ进行分析。结果两组细胞ＤＮＡ直方图上均出现细胞凋亡峰,其细胞所占比例（ｘ±ｓ）％服药组为６．８２±３．０９,对照组为３．４３±２．１３,服药组明显高于对照组（Ｐ＜０．０１）。二倍体峰细胞比例服药组为７６．００±７．０９,对照组为８４．４５±３．８４,服药组低于对照组（Ｐ＜０．０５）。四倍体峰细胞比例两组分别为３．７０±１．６４、３．２９±０．６７,无明显差别（Ｐ＞０．０５）。结果表明人早孕蜕膜组织中存在着细胞凋亡,米非司酮终止早孕的作用可能是通过拮抗孕激素作用促进蜕膜细胞凋亡而实现的。     

组蛋白去乙酰化酶1蛋白在早期自然流产绒毛和蜕膜组织中的表达

目的:探讨组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)蛋白在早期自然流产发生中的病理生理作用及临床意义。方法:应用免疫组织化学和Western blot法检测早期自然流产和早期正常妊娠者绒毛及蜕膜组织中HDAC1蛋白的表达。结果:免疫组化示:HDAC1主要定位于绒毛细胞滋养细胞、合体滋养细胞和子宫蜕膜细胞、腺上皮细胞的胞核;早期自然流产绒毛组织中HDAC1的表达强度低于早期正常妊娠组,而蜕膜组织中,早期自然流产组织HDAC1的表达强度高于正常妊娠组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。Westernblot示:早期自然流产绒毛组织中HDAC1蛋白的相对表达量为1.38±0.63,明显低于正常妊娠组(1.92±0.82),差异有统计学意义(P<0.05);而早期自然流产蜕膜组织中HDAC1蛋白的相对表达量为1.02±0.53,明显高于正常妊娠组(0.71±0.36),差异有统计学意义(P<0.05)。结论:HDAC1在早期自然流产绒毛和蜕膜组织中的异常表达可能在早期自然流产的发生、发展中起重要作用。     

自然流产与绒毛中维甲酸X受体α基因突变关系的研究

目的 :探讨人类自然流产与绒毛中维甲酸X受体α(RXRα)基因突变的关系。方法 :用PCR SSCP 银染法和DNA测序法检测了自然流产 5 0例和正常早孕要求人工流产4 0例的胚胎绒毛组织中RXRα基因的外显子 2～ 10的突变。结果 :4 9例患者和正常对照组绒毛组织中RXRα基因的各个外显子在PCR SSCP 银染检测中均未显示异常。 1例患者SSCP 银染中显示异常的第 9外显子序列经DNA测序后未发现突变。结论 :目前尚不能认为人类自然流产与绒毛中RXRα基因突变有关     

Expression of FK506-binding protein 52 (FKBP52) in chorionic villi with early recurrent spontaneous abortion

Objective: To investigate the mRNA and protein expression of FK506-binding protein 52 (FKBP52) in the chorionic villi of patients with recurrent spontaneous abortion (RSA) and normal women during early pregnancy.

Methods: Fresh chorionic villus tissues were collected from 60 subjects. A total of 30 patients with a history of RSA were enrolled into the RSA group and 30 normal pregnant women were enrolled into the control group. The FKBP52 mRNA expression levels in chorionic villi of the RSA patients and healthy controls were measured via semiquantitative RT-PCR. The protein distribution and expression levels of FKBP52 in chorionic villi were analyzed through immunohistochemistry (IHC). The correlation between FKBP52 expression and RSA was analyzed.

Results: We demonstrated that FKBP52 mRNA is expressed in chorionic villi samples of normal pregnancy and RSA. RSA patients exhibited significantly lower FKBP52 gene expression levels compared with those in normal pregnancies (p?<?0.05). FKBP52 immunoreactivity in chorionic villi was mainly observed in trophoblast cell cytoplasm. The FKBP52 protein expression levels in the chorionic villi of RSA patients was significantly lower than in normal women during pregnancy (p?<?0.05).

Conclusions: FKBP52 protein levels were decreased in the chorionic villi of RSA patients, which indicate that the decrease in FKBP52 may be associated with RSA. The low FKBP52 mRNA expression level, which is consistent with the IHC result, may affect embryonic development and even lead to abortion. FKBP52 may be involved in the pathogenesis of RSA and new therapies that increase the FKBP52 expression may help treat RSA.     

多重连接依赖探针扩增技术在稽留流产绒毛组织染色体核型分析中的应用

目的 探讨多重连接依赖探针扩增(MLPA)技术在稽留流产绒毛组织染色体核型分析中的应用.方法 选择2008年2-10月于深圳市妇幼保健院就诊,经激素水平测定、B超和临床检查确诊为稽留流产患者91例为病例组;随机抽样方法选择同期20例经激素水平测定、B超和临床检查为正常妊娠,要求人工流产者为对照组.人工流产术中无菌条件下获取两组妇女的绒毛组织,培养后每份样本分别采用传统细胞遗传学G显带染色体核型分析方法、同时提取DNA采用MLPA技术分析染色体异常,并与传统染色体核型分析结果进行比较.结果 91例病例组样本中,有84例(92%)采用MLPA技术进行染色体核型分析的非整倍体结果与传统染色体核型分析方法的结果一致,其中包括正常核型40例、常染色体三体29例、常染色体双三体1例、X染色体单体合并常染色体三体1例、X染色体单体10例、嵌合性X染色体单体2例和1例结构异常46,XX,der(5)t(5;8)(p1.2;q1.2);其余结果不一致的7例中,采用传统染色体核型分析方法检测出2例三倍体和5例四倍体,而采用MLPA技术检测结果均为正常的二倍体.20例对照组样本两种技术的分析结果均一致.结论 MLPA技术分析染色体非整倍体异常是一种简单、快速且有效的方法,具有临床实际应用价值.     

不同分子遗传学方法用于自然流产绒毛细胞遗传分析的效果

目的 探讨多重连接探针扩增法(MLPA)+荧光原位杂交(FISH)和比较基因组杂交(CGH)+FISH的分子遗传学方法用于自然流产绒毛细胞遗传分析的效果.方法 收集29例自然流产绒毛组织以及6例选择性终止早期妊娠妇女的绒毛组织,采用CGH+FISH、MLPA+FISH方法进行遗传学分析,并与传统的绒毛细胞培养染色体核型分析结果进行比较.结果 MLPA+FISH检测时间为40 h,CGH+FISH检测时问为120 h,绒毛细胞培养染色体核型分析时间为(240±72)h,3者分别比较,差异有统计学意义(P<0.01).CGH、MLPA、FISH和绒毛细胞培养染色体核型分析的标本成功获检率分别为97%(34/35)、100%(35/35)、100%(35/35)和91%(32/35),4者比较,差异无统计学意义(P>0.01).除去CGH获检失败的1份样本外,MLPA+FISH与CGH+FISH的分析结果一致,CGH获检失败的1例标本经MLPA+FISH检测获得了结果.CGH+FISH或MLPA+FISH检测结果与绒毛细胞培养染色体核型分析结果的不一致率分别为13%(4/31)、12%(4/32),两者比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 MLPA+FISH检测耗时短,检测成功率高;MLPA+FISH检测用于自然流产绒毛细胞遗传分析是对绒毛细胞培养染色体核型分析方法的重要补充.     

人巨细胞病毒感染对早孕绒毛细胞Cyclins表达的影响及其机制的初步探讨

目的:探讨人巨细胞病毒(human cytomegalovirus,HCMV)感染孕妇后致宫内感染的机制。方法:检测15例血清HCMV IgM(+)早孕妇女绒毛中HCMVmRNA的表达;检测HCMVmRNA表达阳性的绒毛原位杂交蜕膜中诱生型一氧化氮合酶(induced ni-tric oxide sythnase,iNOS)mRNA的表达,用免疫组化技术检测细胞周期蛋白(Cyclins)D、E、B、A蛋白的表达,用生化方法测定绒毛组织中的超氧化物歧化酶(superoxide dis-mutase,SOD)、丙二醛(malondialdehyde,MDA);以同期血清HCMV IgM(-)、绒毛HCMVmRNA(-)的15例孕妇绒毛为对照组。结果:(1)15例血清HCMV IgM(+)孕妇中5例绒毛组织HCMVmRNA阳性,宫内传播率为33.33%;(2)5例HCMV-mRNA阳性绒毛Cy-clin D、Cyclin E表达发生率均较对照组高(80%vs 7.1%;80%vs 15.5%);而两组均无Cyclin A及Cyclin B表达;(3)HCMV-mRNA阳性蜕膜中iNOS-mRNA呈强表达,其吸光度为0.5021±0.0189显著高于对照组的0.1860±0.0119,差异有统计学意义(P<0.05);(4)HCMV mRNA阳性绒毛中SOD、MDA均高于对照组(178.35±13.25 vs 102.27±10.12;22.18±5.02 vs 10.15±4.56),(P均<0.05)。结论:孕早期绒毛活动性HCMV感染可导致Cyclin异常表达,NO、SOD、MDA对Cyclin的异常表达起了重要的作用。