高效液相色谱法测定穿琥宁注射液含量

【目的】建立反相高效液相色谱法测定穿琥宁注射液含量。【方法】采用Diamonsil C18柱,以0.1%枸橼酸溶液-甲醇(30∶70)为流动相,检测波长251 nm。【结果】在10~400μg/ml浓度范围内,穿琥宁的峰面积与其浓度呈线性关系;方法回收率为100.11%,RSD为0.77%。【结论】本法可用于穿琥宁注射液的含量测定。     

注射用盐酸头孢他美对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响

目的 研究注射用盐酸头孢他美对大鼠肝微粒体细胞色素P450(CYP450)酶系CYP1A2、CYP3A4和CYP2E1活性的影响。方法 将SD大鼠分成盐酸头孢他美给药组和生理盐水空白组,每组6只,雌雄各半,给药组尾静脉注射盐酸头孢他美50 mg/(kg·d),连续给药7 d,每天2次。HPLC法同时测定CYP450的3种同工酶特异性探针底物在SD大鼠肝微粒体内代谢产物生成量和原型探针底物降解量,判断酶亚型活性变化。分析柱Diamonsil C₁₈ (150 mm×4.6 mm,5 μm),流速1.0 mL/min。CYP1A2代谢样品测定条件为甲醇(0.1%甲酸)(A)-水(0.1%甲酸)(B),0~5 min: 18%A,5~10 min: 18%~60%A,10~15 min: 60%A,检测波长为247 nm;CYP3A4代谢样品测定条件为甲醇(A)-水(0.02%甲酸)(B),0~11 min: 40%~60%A,检测波长为223 nm;CYP2E1代谢样品测定条件为甲醇(A)-水(B),0~10 min: 37%~75%A,检测波长为287 nm。结果 探针底物及其代谢产物在测定浓度范围内线性关系良好(r≥0.999 7),精密度RSD<6％(n=5),提取回收率83.2%～97.5%。SD大鼠连续注射给予盐酸头孢他美后,CYP3A4的活性与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),可能存在诱导作用;CYP1A2和CYP2E1的活性与对照组比较差异无统计学意义 (P>0.05)。结论 静注给予盐酸头孢他美能诱导SD大鼠肝微粒体CYP3A4,对CYP1A2和CYP2E1没有诱导或抑制作用。提示经CYP3A4 代谢的药物在临床上与注射用盐酸头孢他美合用时,可能存在潜在药物-药物相互作用。     

穿琥宁注射液的不良反应

穿琥宁注射液 (Ｋａｌｌｉｉｄｅｈｙｄｒｏｇｒａｐｈｏｌｉｄｉｓｕｏｃｉ ｎｕｓ)为爵床科植物穿心莲叶中提取的一种纯中药复方制剂。具有抗菌、解毒、消炎等作用 ,是目前中医急诊中较为常用的药物之一。临床上常用于病毒性肺炎、上呼吸道感染、急性扁桃体炎、胃肠道及泌尿道感染等。穿琥宁虽为中药制剂 ,由于患者的个体差异、过敏体质、用药剂量及用药浓度等影响 ,在临床上引起许多不良反应 ,现综述如下。1　过敏反应1.1　热源样反应　谭宏莲[1] 报道 1例上呼吸道感染患者 ,静滴穿琥宁注射液仅 1ｍｉｎ后 ,出现面红、胸闷、全身发麻、抽…     

穿琥宁注射液过敏反应2例报道

我院于１９９７年起应用穿琥宁注射液治疗病毒和细菌感染性疾病数百例，其中２例出现过敏反应，现报道如下：案１：某女，３７岁，１９９７年８月２日以上感发热急诊。血常规正常，予穿琥宁（四川宜宾制药厂生产）４０ｍｇ肌注，１日２次。第１次用药１０ｍｉｎ后，患者出...     

肌注穿琥宁注射液致过敏反应1例

１病例介绍患者，男，４８岁，因头昏头痛伴反复咳嗽数天，于２００２年３月１日就诊。患者缘于３d前感到头昏头痛、咳嗽、痰多、全身酸软无力，不思饮食，自诉只昨晚服少许稀粥，至今未进食，精神萎糜，大小便尚正常。体格检查：T３７．４℃，P８８次／min，R２０次／min，BP１１０／７０mmHg。双侧瞳孔等大等圆，对光反射灵敏，唇无紫钳，咽部稍红，扁桃体无明显肿大，颈软无抵抗，双肺听诊呼吸音较粗，未闻及明显的罗音，心脏听诊未闻及异常，心率８８次／min，腹平软，无压痛及反跳痛，肝脾未及，肾区无叩击痛，肠鸣音正常，生理反射…     

环孢素A及其联合用药对人和大鼠肝CYP3A活性的影响

目的：探讨环孢素A(CsA)及其与甲基强的松龙(MP)、氟康唑(Flu)合用时对大鼠和我国正常成人肝脏CYP3A活性的影响。方法：制备大鼠和人肝微粒体，用不同浓度的CsA作用、加或不加MP、Flu，以红霉素为底物，经过NADPH系统孵育后，利用分光光度法测定人和大鼠肝微粒体的红霉素N-脱甲基酶(ERD)活性。结果：CsA单独作用时，在人肝微粒体中，CsA40、20、40μmol／L剂量组与对照组相比具有显著性差异；在大鼠肝微粒体中，CsA除低剂量组外，各组与对照组相比亦具有显著性差异，总体上，随着CsA浓度增加，CYP3A活性下降。此外，在大鼠肝微粒体中，MP、Flu与CsA联合作用较CsA单独作用相比，CYP3A的活性有显著性降低；但在人肝微粒体中，只在Flu与CsA联合作用时，CYP3A的活性有显著性降低。结论：CsA是CYP3A的一种活性抑制剂；Flu与CsA合用时加强了CsA对CYP3A活性的抑制作用。     

穿琥宁注射液致惊厥1例

患儿,女,6岁。因发热,抽搐入院。3d前患儿因发热到本院门诊就诊,以上呼吸道感染,给予穿琥宁注射液(济南利民制药有限责任公司H20045028)200mg,溶于5%葡萄糖注射液250ml,静脉滴注,1次/d,在治疗3d,静脉滴注穿琥宁约30min,患儿出现四肢阵性抽搐,左右眼上翻,口溢白沫,立即给予安定1     

穿琥宁注射液的不良反应

穿琥宁注射液是从中药穿心莲叶中提取的有效成分穿心莲内酯制成的脱水琥珀酸半酯单钾盐 ,具有清热、解毒、消炎的作用 ,为全国中医医院急诊必备中成药 ,临床广泛应用于呼吸道感染、肺炎、小儿支气管炎等的治疗。近年来 ,其不良反应报道日益增多 ,为引起临床重视 ,现综合报道如下。1　药物热郭春辉等[1] 报道 3例患者在应用穿琥宁过程中 ,出现药物热反应 ,而同一批号药物、输液、输液器在其他患者中 ,均未出现类似症状。如患者 ,男 ,34岁 ,T:36.7℃ ,因急性上呼吸道感染 ,予穿琥宁注射液 60 0 mg加入 5%葡萄糖注射液 2 50 ml静滴 ,用药后 1h…     

酮康唑对健康成人肝细胞微粒体细胞色素P450同工酶3A4、1A2活性的作用

目的 观察酮康唑对健康成人肝细胞微粒体细胞色素P450同工酶3A4、1A2活性的作用,为临床上安全有效地联合用药提供实验依据.方法 采用健康成人肝细胞微粒体,分为对照组和处理组.酮康唑处理组分别加入不同浓度的酮康唑1 ml,对照组仅加入培养液,孵育15 min后再加入CYP450同工酶3A4和1A2的相应底物(分别为睾酮和非那西丁)再孵育20 min.反应终止后用高效液相色谱仪测量代谢产物(分别为6β-羟基睾酮与对乙酰氨基酚)的生成量,分别代表3A4和1A2的活性.结果 细胞色素P450同工酶3A4的相对活性百分比减小到对照组50%时(IC50)酮康唑的质量浓度为0.16mg/L.而同工酶3A4的相对活性百分比随质量浓度酮康唑增加逐渐减小,各处理组与对照组比较差异均有显著性意义(P＜0.05).低剂量细胞色素P450同工酶1A2的相对活性百分比处理组与对照组比较明显降低(P＜0.05),高剂量细胞色素P450同工酶1A2的相对活性百分比处理组与对照组比较则明显升高(P＜0.05).结论 酮康唑对健康成人肝细胞微粒体细胞色素P450同工酶3A4的活性有抑制作用.然而对细胞色素P450同工酶1A2的活性则是低剂量有抑制作用,衙高剂量有诱导作用.     

甘遂配伍甘草对大鼠肝脏CYP2E1表达及活性的影响

目的通过检测细胞色素氧化酶CYP2E1的表达和活性变化,从分子水平探讨中药配伍禁忌"十八反"理论中甘遂配伍甘草的药理机制.方法利用RT-PCR检测大鼠肝脏CYP2E1 mRNA水平;通过Western blot检测大鼠肝脏CYP2E1蛋白表达;采用高效液相色谱(HPLC)法测定CYP2E1酶活性.结果甘遂组、甘草组和甘遂甘草配伍组均明显诱导大鼠肝脏CYP2E1的表达与活性上升,并发现甘草组和甘遂甘草配伍组对CYP2E1活性的诱导作用显著高于甘遂组.结论甘遂可能通过诱导肝脏CYP2E1的表达与活性上升,促使其所含的前致癌物质和前毒物转化成为致癌物和毒物,导致对机体的毒性作用;甘遂甘草配伍使用时,甘草对CYP2E1活性的诱导能力更强,故而甘草可促进甘遂所含前致癌物质和前毒物转化成为致癌物和毒物的过程,并导致对机体毒性作用的增强,从而表现出"十八反"中药物配伍禁忌的特征.     

大鼠肝微粒体CYP2B1的活性和P450含量的变化

目的研究3种诱导[地塞米松（Dexamethasone，DEX）、苯巴比妥钠（Phenobarbital sodium，PB）、β-奈黄酮（β-naphthoflavone，β-NF）]和丝裂霉素C（Mitomycin，MMC）对雄性SD大鼠细胞色素P450含量、CYP281活性的影响，以及普罗地芬（Proadifen，SKF525A）对不同活性CYP281的抑制作用。方法连续3d给大鼠腹腔注射各种诱导剂和MMC，另设空白对照和溶剂对照，处理结束后制备肝微粒体，测P450含量和CYP281活性；取各诱导组微粒体，用1．25mmol／L SKF525A处理，测CYP281活性。结果PB作用后使P450含量上升（P〈0．05），CYP281活性明显增大（P〈0．01）；DEX、β-NF、MMC作用后，P450含量、CYP281活性变化无统计意义（P〉0．05），但与空白对照组相比，β-NF组的CYP281活性增加显著（P〈0．05）；用SKF525A处理不同组别的微粒体后，CYP281活性均下降（P〈0．05或P〈0．01）。结论在体内一定条件下，PB能够诱导P450含量、CYP281活性，而DEX、β-NF、MMC对它们的作用不显著；1．25mmol／L的SKF525A在体外能够抑制不同水平的CYP281活性。     

甘遂配伍甘草对大鼠肝脏CYP3A2影响

目的: 研究中药"十八反"中甘遂与甘草配伍对大鼠肝脏CYP3A2在mRNA 水平、蛋白表达及酶活性方面的调控作用.方法: RT-PCR 检测大鼠肝脏CYP3A2 mRNA水平;Western Blotting 检测大鼠肝脏CYP3A2蛋白表达;通过红霉素N-去甲基反应评价CYP3A2酶活性.结果: 在mRNA水平、蛋白表达、酶活性方面,甘遂单用组均高于其他组.结论: 甘遂、甘草可能存在基于药物代谢酶机制的药物间相互作用.     

肺癌中医证候与代谢酶基因CYP1A1、CYP2E1多态性的关联研究

目的:探讨代谢酶基因多态性与肺癌中医证型的关联,寻找肺癌中医证型的易感基因,分析基因辅助辨证的可行性。方法:分析207例肺癌患者的中医证型,运用聚合酶链反应-连接酶检测(polymerase chain reaction-ligase detection reaction,PCR-LDR)技术检测207例肺癌患者CYP1A1基因MspⅠ、Ⅱe/val位点和CYP2E1基因RsaI位点的基因型,分析其基因型和等位基因频率分布与肺癌中医证候之间的关系。结果:CYP1A1基因MspⅠ位点3种基因型在不同中医证型中的分布具有统计学差异(P0.01);精气两亏证CC基因型和C等位基因出现的频率明显高于脾虚痰湿证和痰热内蕴证(P0.0083);痰热内蕴证以CT基因型为主(50.0%),阴虚内热证以CC基因型为主(76.2%),两组具有显著差异(P0.0083)。CYP1A1基因Ⅱe/val位点和CYP2E1基因RsaI位点基因型及等位基因频率在4组证型中的分布,差异均无统计学意义(P0.05)。结论:CYP1A1基因MspⅠ位点可能与肺癌中医证型具有关联,CC基因型和C等位基因可能与精气两亏证的形成相关联。     

代谢酶CYP1A1、CYP2D6基因多态性与肺癌易感性的病例对照研究

目的 探讨代谢酶CYP1A1基因MspⅠ位点多态性、CYP2D6*10等位基因C188T位点多态性与人群肺癌遗传易感性之间的相关性.方法 应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测86例广州市肺癌患者和86例对照的CYP1A1、CYP2D6基因多态性分布频率,分析基因多态性与肺癌遗传易感性之间...     

定点突变法确定人体CYP2A6 和 CYP2A13香豆素 代谢的关键氨基酸

  【目的】 通过比较人体主要尼古丁代谢酶CYP2A6和CYP2A13野生型及突变体酶蛋白对香豆素7-羥化反应的催化动力学特征,确定影响两者催化活性差异的关键氨基酸残基, 提供建立评估人群尼古丁代谢酶基因多态性与吸烟行为及癌症易感性生物标记的依据&#65377; 【方法】 运用定点突变和Sf9昆虫杆状病毒蛋白表达体系产生CYP2A6 和CYP2A13在300,301以及369位点氨基酸互换的突变体蛋白质,测定系列香豆素浓度下的各个酶蛋白对香豆素7-羥化的催化反应活性,获得动力学参数并与野生型酶蛋白进行比较分析&#65377; 【结果】 与野生型CYP2A6相比较,其Ile300 → Phe突变体催化效率(Kcat = Vmax / Km)显著下降而Gly301 → Ala 突变体催化效率显著上升(1.64 和8.02 相对于野生型3.56, P < 0.01)&#65377;与之相对应,CYP2A13 的Phe300 → Ile 突变体催化效率则明显上升而Ala301 → Gly 突变体催化效率显著下降(1.03 和0.06 相对于野生型的0.27, P < 0.05)&#65377;这些酶催化特性的改变,主要是由于Vmax 的改变所致&#65377;369位的氨基酸残基,无论是Ser还是Gly对CYP2A6或CYP2A13的香豆素7-羥化反应催化活性均无明显的影响&#65377; 【结论】 300 和301位的氨基酸是影响CYP2A6及CYP2A13对香豆素7-羥化反应催化活性的关键残基,而369位氨基酸不影响此活性&#65377;     

黄芩苷对Chang Liver细胞CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19表达的影响

目的 在Chang Liver细胞中观察黄芩苷处理对CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19表达的影响.方法 在Chang Liver细胞中分别加入DMSO 0.1% (v/v) (溶剂对照) 和不同浓度的黄芩苷 (0.01、0.1和1 μM) 24、36和48h后,用半定量RT-PCR的方法分别检测CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19表达量的改变.结果 用不同浓度黄芩苷分别处理Chang Liver细胞24和36 h,CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19的表达均呈现出增强的趋势;但是黄芩苷处理48 h后各浓度对CYP3A4和CYP2C9的表达产生显著的抑制效应 (P<0.01) . 结论黄芩苷对细胞中CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19的表达具有影响作用,这种影响作用随药物处理时间不同而表现出双向效应.