用RAPD技术分析出血性大肠杆菌O157∶H7

目的应用RAPD技术分析肠出血性大肠杆菌O157∶H7 DNA多态性并对其分型.方法用两条10bp的随机引物对3株肠出血性大肠杆菌O157∶H7和3株其它病原性大肠艾希氏菌进行扩增,扩增产物经凝胶电泳后得到指纹图.结果共得到12个不同的DNA指纹图谱,经统计软件SPSS系统聚类分析得到两个不同的分类树状图.结论 RAPD技术方法简便、快速、分辨力高,在肠出血性大肠杆菌O157:H7分子流行病学研究中有较大的应用前景.     

应用多重引物PCR方法检测O157：H7毒力基因的初步研究

目的 研究一种快速、特异的检测大肠杆菌O157：H7毒力的复合RSR方法。方法 选用针对大肠杆菌O157：H7志贺样毒素I、Ⅱ的两对引物，在同一扩增体系中进行PCR，检测不同来源的大肠杆菌O157：H7及E．coli ATEEE5922株。结果 EHEC O157：H7 933W株扩增出两条志贺样毒素基因产物，而E．coli ATOC25922株和EHEC O157：H7 97-l-68的扩增结果均为阴性。结论 应用多重引物RCR方法检测大肠杆菌O157：H7毒力基因，简便、快速、特异、敏感，对流行病学调查分析、制定预防和控制对策有重要的参考价值。     

应用插入序列PCR进行大肠杆菌O157:H7基因分型的研究

目的对不同地区、不同宿主大肠杆菌O157：H7分离株进行基因分型。方法应用插入序列PCR方法，对反应体系中dNTPs、引物以及镁离子浓度等反应条件进行优化。扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳检测和分析。结果14株不同来源O157：H7分离株根据插入序列PCR图谱可分为A、B、C、D四个基因型。不同地区O157：H7菌株存在不同的基因型；同一地区、毒力基因谱相同的O157：H7菌株基因型也不相同；不同宿主O157：H7菌株也存在相同的基因型。结论插入序列PCR技术用于大肠杆菌O157：H7的基因分型，简便、快速、敏感，对大肠杆菌O157：H7的分子流行病学研究具有重要价值。     

肠出血性大肠杆菌O157：H7流行病学调查

目的 了解芜湖县动物宿主携带肠出血性大肠杆菌P157：H7的情况，为防治工作提供依据。方法选择芜湖县境内家畜粪便、水样以及各类养殖场饲料等标本821份，以免疫磁珠法和血清学方法检测EHEC0157：H7。结果821份标本检出1株EHEC O157：H7，检出率为0．12％。结论芜湖县部分动物携带EHEC O157：H7。     

济宁市E．coli O157宿主动物粪便带菌监测情况和分析

为查明O157大肠杆菌(E．coli O157)在本地区动物携带情况，2000—2002年采集部分农家动物粪便，用免疫磁株富集方法捕获0157：H7，接种于山梨醇一麦康凯培养基，可疑菌落转种科玛嘉E．coli O157显色培养基之后进行生化和血清学鉴定。结果显示，3年共检出猪、牛、鸡、羊动物粪便1460份，检出E．coli O15765株(O157：H726株)，检出率为4．45％，其中猪携带率最高为7．35％，提示本地区有肠出血性大肠杆菌O157：H7感染的可能．．应加强动物管理和疫情监测，防止疫情扩散蔓延。     

2003—2012年中国肠出血性大肠杆菌O157：H7病原微生物学文献计量学分析

目的：从文献计量学的角度分析2003-2012年间国内肠出血性大肠杆菌O157：H7的病原微生物学研究状况。方法：利用中国科学引文数据库为统计源,检索2003-2012年国内肠出血性大肠杆菌O157：H7病原微生物学工作的研究文献,利用文献计量学方法进行统计分析。结果：在中国科学引文数据库中共收集关于肠出血性大肠杆菌O157：H7病原微生物学研究工作相关文献279篇,其年度间变化呈逐渐上升趋势,《中华微生物学和免疫学杂志》、《中国人兽共患病学报》是刊载此类文献数量较多的期刊,张雪寒和宋宏新是报道相关文献最多的专家,《2001年中国食源性致病菌及其耐药性主动监测研究》为单篇被引频次最高的文献,所有研究中基因技术研究最多,肠出血性大肠杆菌O157：H7的免疫学研究也占有较大比例。结论：肠出血性大肠杆菌O157：H7基因技术和免疫学研究工作是相关科研工作者研究的重点。     

肠出血性大肠杆菌O157：H7流行特征和控制对策研究

肠出血性大肠杆菌O157：H7(以下简称O157：H7)是一种新发现的病原菌。1982年首次在美国引起出血性肠炎暴发，其后世界上许多发达国家和一部分发展中国家发生了O157：H7感染的疫情，特别是1996年在日本发生的O157：H7暴发，9000多名儿童感染，引起全世界的广泛关注。O157：H7感染已成为世界性的公共卫生问题。1986年我国首次在江苏省徐州地区从腹泻病患者的粪便标本中分离到O157：H7，到1998年之前我国已经在14个省市分离到该菌，     

肠出血性大肠杆菌O157：H7对抗生素敏感性的研究

目的 了解和掌握O157：H7大肠杆菌对抗生素的敏感性,以便选择防治O157：H7大肠杆菌感染的药物,方法 按照NCCLS药敏试验法,选用MH平板,参照改良K－B法药敏试验判断标准进行结果判定。结果 对选择的29种药物,其中21种为敏感,4种为耐药。结论 肠出血性大肠杆菌O157：H7对大多数抗生素敏感。     

改良分子信标实时PCR快速检测大肠杆菌O157：H7

目的建立改良分子信标实时PCR快速检测大肠杆菌O157：H7的快速方法。方法根据GenBank公布O157：H7的rfbE保守序列，设计一对引物和改良分子信标探针，用FAM荧光剂标记探针的5’端，建立改良分子信标实时PCR检测O157：H7的反应体系，应用于食物中毒快速诊断和食品微生物检测。结果共检测11种细菌。只有大肠杆菌O157：H7有荧光信号，其余10种全无荧光信号，且与其他细菌无交叉反应，DNA灵敏度为64fg，菌液灵敏度为59cfu／ml或2cfu／PCR反应体系。应用改良分子信标实时PCR反应体系检测10株O157：H7均出现特异的荧光信号，无干扰。对89份食品样品进行检测，5份O157：H7实时PCR阳性，其余样品为阴性，检测仅需2h。5份阳性样本，经传统方法培养，有3份检出大肠杆菌O157：H7。结论改良分子信标实时PCR检测体系快速、灵敏度高，特异性强，可用于大肠杆菌O157：H7食物中毒的快速诊断和食品微生物检测，为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。     

江苏省建湖地区肠出血性大肠杆菌O157：H7监测分析

目的 了解建湖地区腹泻患者肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染情况,家禽、家畜O157∶H7带菌情况,水源水中O157∶H7污染情况. 方法 在2008年5月-9月采集腹泻患者和家禽、家畜的粪便以及水源水、肉制品、苍蝇等标本计836份,应用免疫磁珠浓集、山梨醇麦康凯琼脂(SMAC)分离、生化和血清学反应进行鉴定.结果 共检出肠出血性大肠杆菌O157∶H7 阳性标本17份,其中腹泻患者阳性率为1.15%,4种动物粪便、肉制品均检出阳性标本,但水、苍蝇标本中均未检出阳性.菌株对青霉素耐药性最高,达100%,对其他受试抗生素均敏感.结论 该地区腹泻患者和家禽、家畜中存在肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染,且具潜在的流行性危险.     

肠出血性大肠杆菌O157:H7流行病学调查

目的 了解芜湖县动物宿主携带肠出血性大肠杆菌 O157:H7的情况,为防治工作提供依据.方法 选择芜湖县境内家畜粪便、水样以及各类养殖场饲料等标本821份,以免疫磁珠法和血清学方法检测EHEC O157:H7.结果 821份标本检出1株EHEC O157:H7,检出率为0.12%.结论 芜湖县部分动物携带EHEC O157:H7.     

海南省首例O157:H7大肠杆菌感染性腹泻病例调查报告

目的分析海口市在腹泻病人监测发现的1例O157：H7肠出血性大肠杆菌感染性腹泻病例的流行病学特征，为防制O157：H7感染性腹泻提供科学依据。方法收集在常规监测中发现的1例腹泻病人的现场流行病学调查资料，以描述性流行病学方法进行分析。结果根据现场流行病学调查资料，患者肛拭子标本实验室检测结果为O157：H7大肠杆菌阳性，并参考海南省肠道传染病监测资料和疫情信息，认定该病例系海南首例报告O157感染性腹泻病例。疫情得到有效处理，病人痊愈，无二代病例发生。结论海南省存在有O157疫情的威胁，今后应加强该病监测．     

寡核苷酸阵列芯片快速鉴定大肠杆菌O157:H7初步研究

目的设计、制作一种微型化寡核苷酸阵列芯片，评价快速鉴定肠出血性大肠杆菌O157：H7的效果。方法多重PCR扩增大肠杆菌O157：H7七个特异性基因位点（rfbE、flicH7、intimin、Shiga-like toxins Ⅰ and Ⅱ、hemolysin A和uidA）．通过PCR反应掺入SpectrumOrang^TM-dUTP获取荧光标记的靶序列，与制备的芯片寡核苷酸探针杂交。结果寡核苷酸阵列芯片检测结果与试验预期相符，获取的杂交图分辨效果明显优于多重PCR琼脂糖凝胶电泳。结论基于玻片的寡核苷酸阵列芯片制作简便，鉴定病原菌检测细菌毒力因子快速、灵敏、特异，有良好的应用前景。     

EMA-PCR技术检测肠出血性大肠杆菌O157∶H7

目的 将叠氮溴化乙锭 （ethidium monoazide bromide,EMA）与PCR技术相结合,建立一种有效、快速检测活肠出血性大肠杆菌O157∶H7的方法。方法 以rfbE为PCR检测靶基因,O157∶H7培养物经EMA处理后制备模板进行PCR检测,并对EMA使用浓度、作用时间等进行优化。结果 不抑制O157∶H7活菌PCR扩增的最大EMA浓度为10 μg/mL;抑制2×107 CFU/mL死菌PCR反应的最小EMA浓度为0.5 μg/mL;该法对O157∶H7检测的灵敏度为2×104 CFU/mL,结果显示能检出混合体系中含有的1%的活菌。结论 EMA-PCR技术能有效检测活的O157∶H7,在突发公共卫生事件的快速检测中具有良好的应用前景。     

金乡县2005～2008年动物粪便O_(157)∶H7大肠杆菌带菌监测情况分析

目的为进一步摸清O157∶H7大肠杆菌在本地区动物携带情况,于2005～2008年采集金乡县部分农家动物粪便共计1654份。方法用免疫磁珠富集方法捕获O157∶H7,接种于山梨醇—麦康凯培养基,可疑菌落转种科玛嘉大肠杆菌O157∶H7显色培养基之后进行生化和血清学鉴定。结果4年从牛、鸡、猪、羊等动物粪便中共检出O157∶H7大肠杆菌59株,检出率为3.57%,其中牛携带率最高为8.02%,结论提示本地区有肠出血性大肠杆菌O157:H7感染的可能,应加强动物管理和疫情监测,防止疫情扩散蔓延。     

O157：H7型大肠杆菌感染症的临床研究

O157：H7型大肠杆菌(eschefiehia coli O157：H7，简称ECOH)是肠出血性大肠杆菌的主要血清型，牛、猪是ECOH的主要贮菌库。ECOH对人的感染剂量低达10小菌体，能引起人类腹泻、出血性肠炎(HC)、溶血性尿毒综合征(HUS)、血栓性血小板减少性紫癜(TIP)等疾病。ECOH感染症已成为全球关注的公共卫生问题，本综述该病的临床研究进展。     

肠出血性大肠杆菌O157:H7对抗生素敏感性的研究

目的了解和掌握O157H7大肠杆菌对抗生素的敏感性,以便选择防治O157H7大肠杆菌感染的药物,方法按NCCLS药敏试验法,选用MH平板,参照改良K-B法药敏试验判断标准进行结果判定.结果对选择的29种药物,其中21种敏感,4种为中敏,4种为耐药.结论肠出血性大肠杆菌O157H7对大多数抗生素敏感.     

金乡县7年动物粪便O157：H7大肠杆菌带菌监测情况分析

目的 为了解O157:H7大肠杆菌在本地区动物携带情况,探索疾病发生的原因,制定防治对策.方法 于2000-2002年和2005～2008年采集金乡县部分农家动物粪便,用免疫磁珠富集方法捕获O157:H7,接种于山梨醇一麦康凯培养基,可凝菌落转种科玛嘉大肠杆菌O157:H7显色培养基之后进行生化和血清学鉴定.结果 7年共检测牛、鸡、猪、羊等动物粪便3114份,检出O157:H7大肠杆菌124株,检出率为3.98%,其中牛携带率最高为6.52%.结论 本地区有肠出血性大肠杆菌O157:H7感染的可能,应加强动物管理和疫情监测,防止疫情扩散蔓延.     

肠出血性大肠杆菌O_(157)∶H_7对抗生素敏感性的研究

目的　了解和掌握O157∶H7大肠杆菌对抗生素的敏感性 ,以便选择防治O157∶H7大肠杆菌感染的药物 ,方法　按照NCCLS药敏试验法 ,选用MH平板 ,参照改良K -B法药敏试验判断标准进行结果判定。结果　对选择的 2 9种药物 ,其中 2 1种为敏感 ,4种为中敏 ,4种为耐药。结论　肠出血性大肠杆菌O157∶H7对大多数抗生素敏感。