腹水中乙型、丙型及庚型肝炎病毒的联合检测

观察小剂量血脂康、普伐他汀对高血脂病人的长期调脂作用。方法：多中心,１９５例高血脂病人,分血脂康组［每晚睡前口服血脂康２粒（含他汀类物质６ｍｇ）］与普伐他汀组（每晚睡前口服５ｍｇ）治疗６个月,比较治疗前、后血脂水平变化及两组间差异,用方差分析法检验及ｘ２检验。结果：血脂康与普伐他汀治疗６个月时,ＴＣ下降１６％及１７％,ＴＧ下降１３％及１５％,ＬＤＬ下降２３％及２１％;ＨＤＬ在血脂康组上升２％,在普伐他汀组上升１０ ％。两组均能有效降低 ＬＤＬ／ＨＤＬ。两组间比较普伐他汀升 ＨＤＬ作用较血脂康稍好（ Ｐ＝ ０．０５）。两组 ＴＣ、ＬＤＬ、ＬＤＬ／ＨＤＬ下降均有统计学意义。两组 ＴＧ下降及 ＨＤＬ升高无统计学意义,血脂康及普伐他汀组降 ＴＣ疗效分别为 ５４． ６％、 ６８． ４％;升 ＨＤＬ疗效分别为 ４９．１％、５３． ９ ％;降 ＴＧ为 ４６．２ ％、４０． ８ ％。两组疗效差异均无显著性。两组均未见严重副作用。结论：小剂量他汀类药物（如血脂康和普伐他汀）长期口服治疗成人血脂紊乱安全、有效。     

肝炎基因诊断芯片对丙型肝炎病毒基因分型检测的初步研究

目的 研究丙型肝炎病毒（HCV）基因分型诊断芯片的制备和其对丙型肝炎患者血清HCVRNA基因分型诊断的准确性。方法 根据丙型肝炎病毒5′端非编码区末端（5UTR）和C区设计引物和特异性探针,将设计的20条特异性寡核苷酸探针用核苷酸合成仪合成后,配制成浓度为50μmol/ml的点样液,用点样仪点到特殊处理的玻片介质上,制成丙型肝炎病毒基因分型诊断芯片,收集HCVRNA阳性的丙型肝炎患者血清60份作为实验组,健康人血清60份作为对照组,用荧光定量PCR仪对两组血清进行HCVRNA定量检测,实验组血清HCVRNA含量均大于500拷贝/ml,对照组血清HCVRNA含量均小地500拷贝/ml,两组血清进行HCVRNA分离纯化,逆转录反应,巢式PCR扩增后,分别用基因芯片,HCVRNA核酸序列测定法（美国Li-Cor核酸序列测定仪）进行双盲丙型肝炎基因分型检测。结果 实验组血清基因诊断芯片检测均为阳性;基因分型;1b型46例,3a型3例。3b型3例,2a型2例,2b型2例,混合型1b 2a2例。1b 3b型2例;核酸序列测定分型1b型50例,3a型3例,3b型3例,2a型2例,2b型2例;基因诊断芯片检测和核酸序列测定检测的基因分型结果符合率为93.3%。对照组血清基因芯片检测匀阴性。结论 肝炎病毒基因诊断芯片可以用于检测血清HCVRNA,并进行基因诊断分型,准确率较率。     

河北省赵县某农村单采血浆还输血细胞献血员丙型肝炎病毒感染的追踪调查

目的　调查我国输血后丙型肝炎病毒 (HCV)感染的自然史及其影响预后的因素。方法　河北省赵县某农村单采血浆还输血细胞献血员 (简称献浆员 ) ,于 1993年 8月经现场调查及血清学检测被诊断为HCV感染者 172例 ,未进行任何抗病毒治疗 ,2 0 0 2年 7月对其HCV感染 9年后的转归以及影响转归的因素进行调查分析。结果　在 172例HCV感染者中 ,9年后 2例死于晚期肝病 ,4例死于脑出血 ,1例意外死亡 ,9年后实际追踪到 14 2例 ,失访率为 13 9% (2 3/ 16 5 ) ,肝病的病死率为 1 2 % (2 / 172 )。该组HCV感染者的慢性化率为 91 5 % (130 / 14 2 ) ,自然阴转率为 8 4 % (12 /14 2 )。在持续性HCV感染者中 ,经B型超声检查提示 ,肝硬化率为 3 1% (4/ 130 ) ;重度肝炎占 6 9%(9/ 130 ) ;中度肝炎 36 2 % (47/ 130 ) ;轻度 5 3 1% (6 9/ 130 ) ;另有 10 0 % (13/ 130 )诊断为脂肪肝。HCVRNA阳性组的丙氨酸氨基转移酶、天冬氨酸氨基转移酶、和γ谷氨酸转肽酶的平均水平显著高于阴性组 (P <0 0 0 1)。HCV/HBV混合感染者肝硬化进程显著快于单独HCV感染 (P <0 0 5 )。结论　输血后HCV感染者的慢性化率远远高于乙型肝炎病毒 (HBV)感染者 ,HCV/HBV混合感染者较单一感染者预后差。     

长疗程低剂量α－干扰素治疗慢性乙型肝炎及丙型肝炎的疗效分析

目的：评价长疗程低剂量α－干扰素口含片治疗慢性乙型肝炎及丙型肝炎的疗效。方法：采用大样本随机双盲对照实验设计，以检验患者血清学指征为判断疗效的主要标志。结果：慢性乙型肝炎α－干扰素组血清ＨＢＶＤＮＡ阴转率、ＨＢｅＡｇ阴转率和抗－ＨＢｅ阳转率均显著高于对照组（Ｐ＜０．０５），而慢性丙型肝炎α－干扰素组血清ＨＣＶＲＮＡ阴转率亦显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。结论：长疗程低剂量α－干扰素口含给药治疗慢性肝炎与大剂量注射给药相比，其疗效相似，但其使用方便、价廉和副反应轻。     

HCV-核心抗原及HCV RNA检测在慢性丙型肝炎诊断中的价值分析

目的 探讨丙型肝炎病毒(HCV)-核心抗原及HCV RNA检测在慢性丙型肝炎诊断中的价值.方法 选取2018年1月至2019年6月就诊于本院的140例疑似慢性丙型肝炎行抗HCV抗体检测阳性患者为研究对象,抽取患者3 mL空腹静脉血,使用荧光定量检测法HCV RNA,酶联免疫吸附法(ELISA)测定HCV-核心抗原,统计...     

丙型肝炎诊断试剂的研究

本文用分子生物学方法根据中国人HCV基因特点进行多肽合成,研究丙型肝炎C区、E区酶标试剂的临床应用以及与抗C 100-3试剂的比较,并以 RT双 PCR的方法建立了HCV RNA的检测试剂及临床应用。结果发现抗-CP试剂敏感性、特异性均优于抗C100-3,从临床检测结果看,在自然人群中感染率抗-CP为2.8％,抗C100-3为2.1％,特别在输血后肝炎中,抗 CP阳性率高达 71.7％～75.9％。因此提出对HCV的诊断确立与愈后判断各类试剂有各自的作用,不能只根据某一试剂的某一次结果而简单地否定 HCV感染。HCV RNA测定,建立了5’末端非编码区及非结构区(NS 1),采用双PCR观察结果抗-CP阳性者绝大多数为RNA阳性,并提示将有助于抗病毒药物疗效的观察指标。     

二重RT-FCR同时测定HGV与HCV RNA方法学研究

本文对二重RT-PCR同时测定HGV与HCV RNA的反应条件进行了最佳化研究,发现在用于HGV扩增的三组引物中,NS5b区的L与S二组引物较5'NCR区的N组引物有更高的检测敏感度(P<0.01)。不同的样本贮存对HGV与HCV RNA检测结果影响较大,将逆转录与第一次扩增分开进行可使测定敏感度提高约100倍。本法在同一反应体系中可同时检测HGV与HCV RNA,减轻了实验人员的操作强度,可降低测定费用近50％。     

乙型和丙型肝炎病毒合并感染者自然感染过程的追踪研究

目的 了解我国人群乙型肝炎病毒(HBV)和丙型肝炎病毒(HCV)合并感染后的自然过程。方法 对87例HBV和／或HCV的慢性感染者分别于1994年与2002年进行了两次追踪,其中HBV／HCV合并感染组40例,HBV单独感染组16例,HCV单独感染组31例。用ELISA法检测病毒的血清学指标,荧光定量PCR法进行HBV DNA及HCV RNA的定量,并进行生化指标的检测以及B超检查。结果 在感染病毒14年～21年后,HBV／HCV合并感染者中合并感染组血清HBsAg、HBeAg和HBV DNA的自发清除率分别为67．5％、92．5％和87．5％,与HBV感染组相比差异无显著性。合并感染组中HCV RNA的清除率为87．5％,高于HCV感染组。各组中生化或B超检查异常者不足40％,且基本为轻到中度异常。结论 合并感染者的临床表现较隐匿,较高的HBV的清除率,男性更容易清除HBsAg,HBV DNA载量的高低不影响病毒的清除是我国成年感染HBV后的特点。HBV可以抑制HCV的复制,没有足够的证据表明HCV可以抑制HBV的复制。     

精细胞及血单个核细胞中丙型肝炎病毒RNA及其负链检测

用聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法对８例慢性丙型肝炎患者的血浆、外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）、精液和精细胞中的正链和负链丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）ＲＮＡ进行检测，以了解ＨＣＶ在肝外细胞中是否存在，有否复制。结果血浆中正链ＨＣＶＲＮＡ均阳性，而负链ＨＣＶＲＮＡ全部阴性；ＰＢＭＣ中正链ＨＣＶＲＮＡ阳性者５例，其中２例检出负链ＨＣＶＲＮＡ。在３例留取精液的患者中１例精液和精细胞中检出正链ＨＣＶＲＮＡ。精细胞未次洗液ＨＣＶＲＡＮ阴性，精细胞负链ＨＣＶＲＮＡ阴性。上述结果提示：（１）血浆中可能仅有正链ＨＣＶＲＮＡ存在；（２）ＨＣＶ可在ＰＢＭＣ中存在，并可能在其中复制；（３）精液中有ＨＣＶ存在，因此通过性交传播丙型肝炎的可能性确实存在，但ＨＣＶ可能不在精细胞中复制     

干扰素α对丙型肝炎病毒复制子的抑制作用

目的 利用丙型肝炎病毒（HCV）复制子细胞模型,体外研究干扰素α（IFN-α）对HCV复制子的抑制作用,并探讨IFN-α信号传导与激活转录分子（STAT）及介导IFN-α抗病毒作用的干扰素刺激基因（ISGs）的表达水平。方法 以HCV复制子质粒为模板体外转录合成HCV复制子RNA,将此RNA转染Huh7肝癌细胞并经G418筛选,建立HCV复制子细胞株;用不同剂量（0—5000 IU／m1）IFN-α处理HCV复制子细胞72h或用1000 IU／ml IFN-α处理细胞不同时间（0、24、48、72、96h）,通过半定量RT—PCR及实时定量PCR同时检测HCVRNA,Western印迹检测HCVNSSA蛋白表达水平,研究IFN-α对HCV复制子的抑制作用。结果 IFN-α能明显抑制HCVRNA的复制,10IU／ml及25 IU／mlIFN-α可使HCVRNA较无IFN-α处理的对照细胞分别降低约68％及75％;IFN-α 1000IU／ml作用24h或96h导致HCVRNA较对照组分别降低75％及88％,同样,IFN-α对HCVNSSA蛋白的合成也有明显抑制作用,说明IFN-α的抗HCV作用呈剂量及时间依赖性;HCV复制子细胞中有抗病毒作用的ISG（PKR、2′5′OAS、G1P3、ISG20及ISGF3γ）呈明显的IFN诱导性表达。结论 IFN-α能明显抑制HCVRNA的复制,其抑制作用与IFN-α剂量及作用时间有关,PKR、2′5′OAS、G1P3、ISG20及ISGF3γ等ISG可能介导IFN-α的抗HCV作用。