P-gp和Topo-Ⅱ在原发性肝癌中的表达及临床意义

目的研究多药耐药相关蛋白P-糖蛋白（gp）和拓扑异构酶Ⅱ（Topo-Ⅱ）在原发性肝癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测49例原发性肝癌组织V-gp和Topo-Ⅱ的表达。结果V-gp和Topo-Ⅱ在原发性肝癌中阳性表达率分别为61．22％（30／49）和32．65％（16／49），V-gp主要在细胞膜和细胞浆中表达，Topo-Ⅱ在细胞核内表达，V-gp和Topo-Ⅱ表达与Edmonson分级有关，Topo-Ⅱ还与转移有关。V-gp、Topo-Ⅱ在原发性肝癌中表达呈负相关（P〈0．05）。结论肝癌组织V-gp和Topo-Ⅱ表达可能是肝癌对化疗不敏感的原因之一。     

多药耐药基因产物P-gp、TopoⅡ在胃癌组织中的表达及意义

目的　探讨胃癌组织中多药耐药 (MDR)基因产物 P-糖蛋白 (P- gp) ,DNA拓扑异构酶 (Topo )表达与胃癌分型、分期和淋巴结转移间的关系。方法　应用链菌素亲生物素 -过氧化物酶 (SP)法 ,对 10 6例胃癌标本中的 P- gp、 Topo 进行检测。结果　 P- gp表达与胃癌临床分期有关 (P<0 .0 5 ) ;Topo 表达与胃癌组织分型有关 (P<0 .0 5 ) ;P- gp高表达和 Topo 低表达与胃癌淋巴结转移相关 (P<0 .0 5 )。结论　检测 P- gp、Topo 不仅可以作为多药耐药的标志物 ,而且对于胃癌治疗方案的选择和预后判断具有重要参考价值。     

P-gp,ToPoⅡ和GST-π在胃癌组织中的表达及与预后的关系

目的:探讨胃癌患者中耐药基因P-糖蛋白(P-gp)、DNA拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)和谷胱苷肽-S转移酶(GST-π)的表达特点及对预后的影响.方法:用免疫组化方法检测130例胃癌组织中的P-gp,TopoⅡ及GST-π,分析其与临床病理特征的关系,并随访部分患者以研究其表达与预后的相关性.结果:在130例胃癌患者中,P-gp,TopoⅡ和GST-π表达的阳性率分别为24.62%,81.54%和75.38%.这3种耐药基因中,P-gp和GST-π与病变大小相关,病变直径>5cm患者中,其阳性率显著高于直径<5cm患者(χ2=4.56,P=0.033;χ2=5.545,P=0.020),有淋巴结转移患者P-gp的阳性表达率高于无淋巴结转移组(χ2=5.84,P=0.016),有血管侵犯患者P-gp和GST-π阳性表达率高于无血管侵犯患者(χ2=17.69,P<0.001;χ2=5.40,P=0.020),P-gp和GST-π表达为 ~ 患者2a生存率明显低于-~ 患者(χ2=3.964,P=0.047;χ2=4.2576,P=0.039);TopoⅡ的表达与病理类型及分化程度有关,在印戒细胞癌中表达率低于其他类型(χ2=7.29,P=0.007),且在低分化组中强阳性表达率明显低于中高分化组(χ2=7.79,P=0.005).结论:P-gp和GST-π的表达不仅与胃癌的生物学行为有关,同时也可作为判断胃癌患者预后的指标之一.耐药基因在胃癌中的表达程度及特点不同,因而有必要对其进行联合检测以判断耐药及预后情况.     

EGFR 及耐药表型 GST-π、P-gp、TopoⅡ在大肠癌组织中的表达及意义

目的：探讨表皮生长因子受体（ EGFR）及耐药表型谷胱甘肽S-转移酶π（ TopoⅡ）在大肠癌组织中的表达及意义。方法采用免疫组化法检测190例大肠癌组织（大肠癌组）和20例正常大肠黏膜组织（对照组）中EGFR和GST-π、淋巴结及远处转移有关（P均＜0．05）。 EG-FR表达与GST-π高表达;与多药耐药表型GST-π与了化疗耐药。针对EGFR的靶向治疗对化疗耐药、EGFR阳性患者有较好疗效。     

P-gp、MRP、LRP、GSTπ和TOPOII在胃癌表达的趋势

多药耐药(multidrugresistance,MDR)是严重影响肿瘤病人化疗效果及生存的主要原因之一,是指肿瘤细胞对某一化疗药物产生耐药性后,对其他化学结构及机理不同的化疗药物也产生交叉耐药性[1]。在1970年,Biedler和Riehm首次注意到多药耐药现象[2]。目前认为多药耐药有关主要分子包括转运蛋白如P糖蛋白(P gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)和抗原过程相关转运泵(TAP),细胞解毒系统如谷胱甘肽转移酶(GST)和DNA修复系统,药物靶点如拓扑异构酶Ⅱ(TOPOⅡ),参与细胞调亡的分子如Bcl2、Bcl XL和p53等。…     

P-gp、MRP、LRP、GSTπ和TOPOⅡ在胃癌表达的趋势

多药耐药（muhidrug resistance，MDR）是严重影响肿瘤病人化疗效果及生存的主要原因之一，是指肿瘤细胞对某一化疗药物产生耐药性后，对其他化学结构及机理不同的化疗药物也产生交叉耐药性。在1970年，Biedler和Riehm首次注意到多药耐药现象。目前认为多药耐药有关主要分子包括转运蛋白如P糖蛋白（P-gP）、多药耐药相关蛋白（MRP）、     

乳腺癌原发灶及淋巴结转移灶中C—erbB-2、P—gP、TopoⅡ的表达及临床意义

选择伴有同侧腋窝淋巴结转移的乳腺癌标本36例。用免疫组化sP法检测原发灶和淋巴结转移灶C-erbB-2、p-gP、TopoⅡ的表达。发现原发灶C-erbB-2的表达在不同的肿瘤分期存在差异;乳腺癌原发灶和淋巴结转移灶的TopoⅡ表达有相关性,C-erbB-2及P—gp的表达无相关性。提示原发灶C-erbB-2的高表达与肿瘤的分期呈正相关;乳腺癌原发灶与淋巴结转移灶的耐药性不尽一致。     

耐药相关蛋白在肺癌组织中的表达及意义

目的　探讨耐药相关蛋白在肺癌组织中的表达及意义。方法　应用免疫组化法检测治疗前 90例肺癌组织标本中 P-糖蛋白 (P- gp)、多药耐药相关蛋白 (MRP)、肺耐药蛋白 (L RP)、谷胱苷肽 S转移酶 (GST- π)、DNA拓扑异构酶 (Topo- )蛋白的表达 ;流式细胞术检测肺癌组织增值指数 (PI)、DNA指数 (DI)及细胞周期各时相分布。结果　非小细胞癌 (NSCL C组 ) P- gp、L RP表达明显高于小细胞癌 (SCL C)组 (P <0 .0 5 ) ,MRP+L RP共表达者高于 SCL C组 (P <0 .0 5 ) ;中、高分化癌组 P- gp、L RP表达高于 SCL C组 (P <0 .0 5 ) ,MRP表达高于低分化癌组 (P <0 .0 5 ) ;腺癌组 MRP、L RP、MRP+L RP、MRP+L RP+GST- π、MRP+L RP+P- gp+GST-π表达高于鳞癌组、SCL C组、低分化癌组 (P <0 .0 5 ) ,MRP+GST- π共表达者高于鳞癌组、低分化癌组 (P <0 .0 1)。P- gp与 Topo 蛋白表达呈正相关 (P <0 .0 5 )。MRP与肺癌组织增殖指数 (PI)、G2 / M期细胞比例呈正相关 (P <0 .0 5 ) ,与 G0 / G1 期细胞比例呈负相关 (P <0 .0 5 )。结论　联检肺癌组织中耐药相关基因蛋白的表达有助于判断化疗疗效及预后。 P- gp、L RP、MRP、GST-π可作为判断肺癌细胞原发性耐药的指标。     

GP73在原发性肝癌组织中的表达及意义

目的探讨高尔基体糖蛋白73(GP73)表达诊断肝癌的价值。方法采用免疫组织化学染色SP法检测60份肝癌组织、癌旁组织及24份正常肝组织中GP73表达;分析GP73表达与肝癌临床病理特征的关系。结果肝癌组织、癌旁组织GP73阳性率显著高于正常肝组织(P<0.05)。GP73表达与Child-Pugh分级呈正相关(P<0.05),在肝外转移和HBV感染中表达亦显著增强(P<0.05),与性别、年龄、AFP、肿瘤大小、肝硬化和门脉癌栓无明显相关性。结论 GP73与肝癌的发生发展有关。     

Down-regulation of extracellular signal-regulated kinase 1/2 activity in P-glycoprotein-mediated multidrug resistant hepatocellular carcinoma cells

AIM： To study the expression and phosphorylation of extracellular signal-regulated kinase （ERK） i and ERK2 in multidrug resistant （MDR） hepatocellular carcinoma （HCC） cells.
METHODS： MDR HCC cell lines, HepG2/adriamycin （ADM） and SMMC7721/ADM, were developed by exposing parental cells to stepwise increasing concentrations of ADM. MTT assay was used to determine drug sensitivity. Flow cytometry was employed to analyze cell cycle distribution and measure cell P-glycoprotein （P-gp） and multidrug resistant protein 1 （MRP1） expression levels. ERK1 and ERK2 mRNA expression lev-ls were measured by quantitative real-time PCR （QRTPCR）. Expression and phosphorylation of ERK1 and ERK2 were analyzed by Western blot.
RESULTS： MTT assay showed that HepG2/ADM andSMMC7721/ADM were resistant not only to ADM, but also to multiple anticancer drugs. The P-gp expression was over 10-fold higher in HepG2/ADM cells than in HepG2 cells （8.92% ±0.22% vs 0.88% ± 0.05%, P 〈 0.001） and over 4-fold higher in SMMC7721/ADM cells than in SMMC7721 cells （7.37% ± 0.26% vs 1.74% ± 0.25%, P 〈 0.001）. However, the MRP1 expression was not significantly higher in HepG2/ADM and SMMC7721/ADM cells than in parental cells. In addition, the percentage of MDR HepG2/ADM and SMMC7721/ADM cells was significantly decreased in the G0/G1 phase and increased in the the S phase or G2/M phase. QRT-PCR analysis demonstrated that the ERK1 and ERK2 mRNA expression increased apparently in HepG2/ADM cells and decreased significantly in SMMC7721/ADM cells. Compared with the expression of parental cells, ERK1 and ERK2 protein expressions were markedly decreased in SMMC7721/ADM cells. However, ERK2 protein expression was markedly increased while ERK1 protein expression had no significant change in HepG2/ADM cells. Phosphorylation of ERK1 and ERK2 was markedly decreased in both HepG2/ADM and SMMC7721/ADM MDR cells.
CONCLUSION： ERK1 and ERK2 activities are downregulated in P-gp-mediated MDR HCC cells. ERK1 or ERK2 might be a potential drug target for circumventing MDR HCC cells,     

造血干细胞多药耐药P-糖蛋白的表达及多药耐药逆转剂对其功能的影响

了解多药耐药Ｐ－糖蛋白在造血干／祖细胞的表达,探讨多药耐药逆转剂在临床应用过程中可能对造血干细胞的损害。方法：采用ＭＲＫ１６单克隆抗体,利用流式细胞仪测定健康人骨髓ＣＤ３４阳性细胞表达Ｐ－ｇｐ的表达;将多药耐药逆转剂ＭＳ－２０９作用于造血细胞,检测ＭＳ－２０９对ＣＤ３４阳性细胞摄取染料Ｒｈｏｄａｍｉｎ－１２３的影响。     

多药耐药相关蛋白基因在原发性肝细胞癌中的表达及意义

目的 研究多药耐药相关蛋白(MRP)基因mrp在肝细胞癌(HCC)中的表达水平与其化疗疗效及甲胎蛋白(AFP)的关系。 方法采用SP免疫组织化学方法和聚合酶链反应技术对54例术前未化疗的未能切除的HCC、24例癌旁肝组织及12例肝炎后肝硬化组织中mrp编码的MRP和mRNA mrp的表达进行检测。术后所有病人常规化疗,分析mrp表达与HCC化疗疗效关系。并对其AFP阳性的38例HCC病人术后化疗,分析mrp表达与AFP变化的关系。 结果 MRP和mRNA mrp在3种组织中的mrp表达率分别为61.1％、25.0％、33.3％和77.8％、37.5％、41.7％; HCC组织中mrp表达显著高于其他组织中的mrp表达(x2=9.842,P<0.01;x2=13.956,P<0.01)。MRP及mRNA mrp阴性和阳性组HCC的化疗有效率分别为61.9％、30.3％和75.0％、33.3％,两组疗效差异有显著性(x2=5.242.P<0.05; x2=6.627,P<0.05);两组AFP有效率分别为62.5％、27.3％和87.5％、30.0％,mrp表达阴性组显著高于阳性组(x2=4.710,P<0.05;x2=8.566,P<0.01)。 结论 HCC多药耐药和mrp表达有关,HCC耐药起源于内源性多药耐药。检测mrp表达对肝癌的化疗耐药具有重要的指导意义;mrp表达可作为预测HCC化疗敏感性的参考指标。     

人肝癌多药耐药细胞株survivin蛋白的表达及意义

目的探讨人肝癌多药耐药细胞株survivin蛋白表达与肝癌细胞多药耐药的关系.方法用阿霉素(DOX)浓度梯度递增导法,建立人肝癌多药耐药细胞株(Bel-7402/DOX).用流式细胞仪检测肝癌细胞凋亡率,同时用蛋白印迹(Western blot)检测其survivin蛋白表达.结果随着培养液中 DOX 浓度的增加Bel-7402/DOX 的凋亡率逐渐增加,survivin蛋白的表达逐渐增强.结论Survivin蛋白的表达变化可能与人肝癌细胞获得性耐药有关.     

Nodal在肝细胞癌组织的表达与意义

目的研究上皮-间质转化现象调节基因Nodal在肝细胞癌中的表达及其意义。方法采用免疫组织化学染色法检测Nodal蛋白在肝癌组织、肝炎肝硬化组织和癌旁肝组织的表达。结果在95例肝细胞癌组织中,59例(62.1%)Nodal蛋白阳性,20例癌旁肝组织中4例(20.0%)阳性,12例肝炎肝硬化组织中2例(16.7%)阳性;Nodal蛋白表达的患者,肿瘤组织直径较大、血管侵袭率较高、Edmondson分级较高、TNM分期较晚(P<0.05)。结论Nodal与肝细胞癌的发生发展有关,可能作为肝细胞恶性变的重要预测指标。     

乳腺癌耐药相关蛋白在肝硬化及肝癌组织中的表达

肝癌对化疗药物的敏感性低,其多药耐药是肝癌治疗失败的主要原因.P-糖蛋白(P gP)在肝癌组织中高表达,可能是参与肝癌多药耐药的关键分子[1],然而抑制P-gp的活性,并不能有效逆转肝癌的多药耐药[2].因此,除了P-gp,可能有其他的多药耐药分子共同参与了肝癌的多药耐药.乳腺癌耐药相关蛋白(BCRP)是近年来发现的一个新的多药耐药分子,可排泄多种化疗药物[3-4].已有研究结果显示,BCRP在肝癌中有表达,并可能是肝癌干细胞的一种标志物[5-6].然     

Overexpression of P-glycoprotein in hepatocellular carcinoma and its clinical implication

INTRODUCTION Most advanced hepatocellular garcinoma (HCC) is insensitive to most anticancer drugs which might be related to the high frequency of expression of the multidrug resistance-1 ( MDR1 ) gene[1] and its product, P-glycoprotein (P-gp)[2]. P-gp expression may also be concerned with tumor progression and differentiation[3].     

Hedgehog信号通路在人肝细胞癌细胞系及肝癌组织中的表达与意义

目的探讨Hedgehog信号通路在人肝细胞癌细胞系及Shh基因在肝癌组织中的表达及意义。方法采用半定量RT-PCR法检测Hep3B和HCC-LM3细胞中Shh、Ihh、Ptch、Smo、Gli mRNA及21例肝细胞癌癌组织和癌旁肝组织中Shh mRNA的表达状况。结果Shh、Ihh、Ptch、Smo、Gli mRNA在两个肝癌细胞系中均有表达。其中,Shh、Gli1 mRNA在Hep3B细胞中的表达强度显著高于HCC-LM3细胞,而Gli2和Gli3的表达强度正相反;Ihh、Smo mRNA在Hep3B细胞中的表达强度高于HCC-LM3细胞,但两者间无显著性差异;Ptch mRNA在两个细胞系细胞中的表达无显著性差异;Shh mRNA在肝细胞癌癌组织中的阳性检出率为57.1%（12/21）,在癌旁组织中为4.8%（1/21）,两者间有显著性差异（P〈0.05）。其中,6例高分化、8例中分化和7例低分化肝细胞癌中Shh mRNA的阳性检出率分别为83.3%（5/6）、62.5%（5/8）和28.6%（2/7）,表现为随肝细胞癌由高到低的分化而呈显著性下降的趋势（P〈0.05）;Shh mRNA的表达强度在肝细胞癌癌组织之间、癌与癌旁组织之间无显著性差异。结论Hedgehog信号通路的异常激活参与了肝细胞癌的发生发展过程,Shh mRNA在部分高中分化肝细胞癌中表达上调,这或许为探讨肝癌的发生机制、早期诊断及治疗提供了新的依据。