活动期SLE患者外周血淋巴细胞、单核细胞HLA-DR的表达

目的：探讨活动期SLE患者外周血淋巴细胞、单核细胞HLA-DR表达的变化。方法：应用双色荧光抗体标记流式细胞术检测活动期SLE患者外周血淋巴细胞、单核细胞HLA-DR表达的阳性百分率及荧光强度。结果：与正常对照组比较,活动期SLE患者外周血淋巴细胞HLA-DR表达的阳性率和荧光强度均显著升高（t=9.769,P〈0.001;t=11.184,P〈0.001）;而单核细胞HLA-DR表达的阳性率和荧光强度均显著降低（t=27.528,P〈0.001;t=67.522,P〈0.001）。结论：淋巴细胞HLA-DR表达的增高、单核细胞HLA-DR表达的降低与SLE的发病、发展有着非常密切的关系。     

IFN-γ促进人单核细胞向不典型成熟DC分化

目的: 研究IFN-γ对人单核细胞表型及分化的影响.方法: 采用免疫磁珠法从健康志愿者外周血单个核细胞(PBMCs)中特异性分选单核细胞, 以细胞因子IFN-γ、 TNF-α、 IFN-α刺激单核细胞后, 观察单核细胞生长特性, 并以流式细胞术检测单核细胞表面CD1a、 CD14、 CD80、 CD83、 CD86、 HLA-DR等分子表达.结果: 细胞因子IFN-γ、 TNF-α、 IFN-α对单核细胞形态、生长及表型转化有不同影响.IFN-γ促进单核细胞黏附聚集形成"细胞小岛结构", 刺激单核细胞形态向梭形及多角形转化; IFN-γ上调单核细胞表达CD80、 CD83、 CD86及HLA-DR分子, 同时下调CD14分子表达.结论: IFN-γ促进单核细胞向不典型的成熟DC方向分化.     

实时荧光定量反转录聚合酶链反应检测HLA-DRα基因mRNA表达

目的 建立实时荧光定量反转录聚合酶链反应（RT-PCR）法检测HLA-DRα基因mRNA表达。方法应用T-A克隆技术构建含HLA-DRα基因的载体作为标准模板,采用荧光Taqman方法及探针标记技术,建立实时荧光定量RT-PCR方法,制备标准曲线,检测牛膝多糖（ABPS）诱导人外周血单核细胞的HLA-DRα mRNA表达水平变化,并与半定量RT-PCR检测结果进行比较。结果实时荧光定量RT-PCR检测ABPS诱导人外周血单核细胞实验组HLA-DRα mRNA表达明显升高,而无ABPS诱导人外周血单核细胞对照组HLA-DRα mRNA表达没有改变,且半定量RT-PCR结果显示HLA-DRα出现类似的变化趋势。结论所建立的实时荧光定量RT-PCR用于检测HLA-DRα mRNA表达,结果用拷贝数表示,比半定量RT-PCR更灵敏、准确。     

重型乙型肝炎患者单核细胞HLA-DR分子表达及临床意义

目的:探讨重型乙型肝炎患者外周血单核细胞功能变化的特点及其意义.方法:应用流式细胞术(FCM)和酶联免疫吸附法对重型肝炎患者单核细胞HLA-DR分子的表达及外周血中白细胞介素.10(IL-10)的水平进行检测,并结合临床资料加以分析.结果:与正常对照组比较,慢性乙型肝炎、肝炎肝硬化、慢性重型肝炎患者外周血单核细胞HLA-DR的表达水平逐渐下降,尤其以慢性重型肝炎患者下降最为明显;而慢性重型肝炎患者外周血中IL-10的水平则明显升高,差异均具有统计学意义(P＜0.01).相关分析表明,HLA-DR的表达水平与凝血酶原活动度呈正相关(rs=0.61,P＜0.01).慢性重型肝炎患者死亡与存活组比较,前者HLA-DR水平明显降低;而IL-10水平明显升高,差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:外周血单核细胞HLA-DR的表达水平与慢性重型肝炎患者病情严重程度以及预后密切相关,检测外周血单核细胞HLA-DR分子水平有助于评价重型肝炎患者的免疫功能状态以及判断预后.     

正常成人活体肾脏肾实质体积CT-测量

目的:测定正常成人活体肾脏的肾实质体积(Renal Parenchyma Volume,RPV)95%的参考值范围,并探讨RPV与年龄、性别、身高和体重的关系,建立预测RPV的简单方程.方法:收集无肾脏病史并行腹部CT平扫的成人患者200例,应用CT图像和体积测量软件测量RPV.结果:左侧、右侧和双侧RPV的95%的参考值范围女性成人分别为(81.80,166.66)cm~3,(75.50,168.64)cm~3和(160.57,332.03)cm~3;男性成人分别为(102.57,193.71)cm~3,(102.57,188.31)cm~3和(208.01,379.15)cm~3.无论男女左侧RPV与右侧RPV无统计学差异(P＞0.05);男女同侧RPV有统计学差异(P＜0.001);男性不同年龄组及女性不同年龄组双侧RPV均尢统计学差异(P＞0.05);多元线性回归分析显示成人RPV与身高和体重有线性回归关系,而与年龄和性别无线性回归关系,采用逐步回归法得到:成人双侧RPV(cm3)=3.264×身高(cm)+1.060×体重(kg)-335.909.结论:(1)无论男女,成人左侧RPV与右侧RPV无统计学差异;(2)正常成人RPV主要与身高和体重相关,且受身高影响较大;(3)以身高和体重为变量可预测成人RPV.     

581例脐带血细胞各参数结果分析

目的了解脐带血血细胞各参数与正常成人静脉血血细胞各参数有无显著性差异.是否需要建立脐带血血常规正常参考范围.方法用美国COULTER-GENS全自动五分类血球计数仪对581例脐带血进行检测血常规和网织红各参数,并用统计学分析.结果脐带血各参数值与正常成人静脉血除血小板数量、单核细胞百分数、嗜酸性粒细胞百分数、嗜碱性粒细胞百分数无显著性差异外,各参数值有显著性差异(P＜0.01).结论脐带血应建立其本身的正常参考值,不能用成人静脉血血常规参考值代替.     

白细胞介素-18干预诱导的树突状细胞表型和活性研究

目的：研究白细胞介素-18（IL-18）干预诱导的树突状细胞（DC）的表型和活性。方法:自人外周血单核细胞诱导DC，第5 d起分为IL-18组、TNF-α组和IL-18+TNF-α组，分别加IL-18、TNF-α及IL-18+TNF-α促成熟，用ELISA法测定上清中IL-12含量；用流式细胞仪测定培养8 d DC的CD1a、HLA-DR、CD83及CD86的表达；用MTT法检测3组DC诱导T细胞增殖的作用。用ELISA法测定3组DC刺激T细胞分泌干扰素γ(IFN-γ)的量。结果:IL-18组与TNF-α组CD1a、HLA-DR、CD83及CD86表达无差异，IL-18+TNF-α组CD1a、CD83及HLA-DR阳性率高于IL-18组。IL-18+TNF-α组IL-12量高于IL-18组和TNF-α组(P＜0.05)。IL-18组与TNF-α组DC刺激T细胞增殖作用无差异，IL-18+TNF-α组DC的作用强于IL-18组和TNF-α组。IL-18组和TNF-α组IFN-γ量无显著差异，IL-18+TNF-α组IFN-γ的量高于IL-18组和TNF-α组(P＜0.05)。结论:IL-18干预诱导的DC高表达表面分子，具有明显的免疫刺激活性，IL-18与 TNF-α合用作用更强。     

健康成人远端复合肌肉动作电位时限及时间离散度分析

目的 探讨健康成人远端复合肌肉动作电位时限（DCMAPD）及时间离散度（TD）的定量检测,为周围神经脱髓鞘病变诊断提供依据。方法 选取120例健康志愿者,其中男56例,女64例,年龄20～84岁。将其按年龄20～29岁、30～39岁、40～49岁、50～59岁、60～69岁及>70岁分为6组。依次对所有志愿者的胫神经、腓总神经、正中神经、尺神经进行常规运动神经传导检测,分析不同年龄段和不同性别间远端复合肌肉动作电位时限（DCMAPD）和时间离散度（TD）的差异。结果 四条神经中仅腓总神经DCMAPD在不同年龄组差异具有统计学意义（P<0.05）,其余三条神经DCMAPD在不同年龄组间差异均无统计学意义（P>0.05）;正中神经、尺神经、胫神经和腓总神经DCMAPD和TD在不同性别间差异均无统计学意义（P>0.05）。结论健康成人DCMAPD值在正中神经、尺神经、胫神经中可不分年龄及性别采用统一的参考值,而腓总神经则按照50岁前后来区分参考值比较合理,TD值可不分年龄及性别采用统一参考值。     

眼部蠕形螨寄居患者结膜上皮ICAM-1和HLA-DR的表达和意义

目的:探讨眼部蠕形螨寄居患者结膜上皮ICAM-1和HLA-DR的表达和意义。方法:选择痤疮、脂溢性皮炎以及类固醇皮炎眼部蠕形螨检查为阳性的患者共58例为蠕形螨寄居组,另选50例无面部疾病眼部蠕形螨检查阴性的健康成人,作为正常对照组。用流式细胞术联合印迹细胞学检测细胞表面分子的方法检测结膜上皮细胞ICAM-1和HLA-DR的表达阳性率及荧光强度。结果:与正常对照组相比,蠕形螨寄居组患者结膜上皮细胞中ICAM-1和HLA-DR的阳性率和荧光强度均明显提高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:眼部蠕形螨寄居患者结膜上皮中ICAM-1和HLA-DR的表达增强。     

胰岛素依赖型糖尿病患者外周血单核细胞膜表面HLA-Ⅱ类抗原、白细胞介素2受体和铁传递蛋白受体的表达

本文作者用间接免疫荧光法检测了10例胰岛素依赖型糖尿病(IDDM)患者外周血单核细胞膜表面HLA-DR、DQ、DP抗原、白细胞介素2受体(IL-2R)、铁传递蛋白受体(TfR)的表达。术中应用了相应的单克隆抗体和FITC标记的第二抗体。结果表明,IDDM患者单核细胞膜表面HLADQ抗原、IL-2R和TfR的表达明显高于正常对照组,而HLA-DR、DP抗原的表达在IDDM组与正常对照组之间差异无显著性。推测HLA-DQ、IL-2R和TfR的异常表达在IDDM的发病机制中可能起一定作用。     

长沙地区健康人群血液流变指标变化规律的试验研究

目的测试不同性别、不同年龄组人体血液流变指标的变化规律。方法针对长沙地区成年人群（男性300例，女性300例），利用NDK3200-G全自动血液流变仪测定不同性别及不同年龄组人体血液流变指标的变化规律。结果血液在低切条件下呈现典型非牛顿流体特性，在高切条件下呈现牛顿流体特性；成年男性血液流变指标随年龄增大而降低，女性则相反；不同地区人群血液流变指标的统计结果存在一定差异。结论在医学检验及人工器官研究时，应根据不同地域、不同性别及不同年龄组来确定人体血液流变指标正常参考值。     

HLA-DR阴性的急性髓系非早幼粒细胞白血病

正正常髓系细胞分化成熟的过程中,人类白细胞抗原(简称HLA-DR)可表达在造血祖细胞,粒细胞、单核细胞及巨核细胞的前体细胞上,但在早幼粒细胞阶段往往缺乏,与之相一致的是绝大多数的早幼粒细胞白血病细胞上也缺乏HLA-DR     

正常成人活体肾脏肾实质体积CT-测量及相关因素研究

目的： 测定正常成人活体肾脏的肾实质体积（Renal Parenchyma Volume , RPV）95％的参考值范围，并探讨RPV与年龄、性别、身高和体重的关系，建立预测RPV的简单方程。方法： 收集无肾脏病史并行腹部CT平扫的成人患者200例，应用CT图像和体积测量软件测量RPV。结果： 左侧、右侧和双侧RPV的95%的参考值范围女性成人分别为（81.80，166.66）cm3，（75.50，168.64）cm3和（160.57，332.03）cm3；男性成人分别为（102.57，193.71）cm3，（102.57，188.31）cm3和（208.01，379.15）cm3。无论男女左侧RPV与右侧RPV无统计学差异（P＞0.05）；男女同侧RPV有统计学差异（P<0.001）；男性不同年龄组及女性不同年龄组双侧RPV均无统计学差异（P＞0.05）；多元线性回归分析显示成人RPV与身高和体重有线性回归关系，而与年龄和性别无线性回归关系，采用逐步回归法得到：成人双侧RPV（cm3)=3.264×身高（cm）+1.060×体重（kg）-335.909。结论：（1）无论男女，成人左侧RPV与右侧RPV无统计学差异；（2） 正常成人RPV主要与身高和体重相关，且受身高影响较大；（3）以身高和体重为变量可预测成人RPV。     

人外周血单核细胞分化为树突状细胞过程中核转录因子-κB p50的表达及柴胡皂苷a的影响

目的 观察人外周血单核细胞分化为树突状细胞(DC)过程中,核转录因子-κB p50(NF-κB p50)的表达以及柴胡皂苷a对单核细胞分化为树突状细胞的影响.方法 非连续密度梯度离心获取人外周血单核细胞;用含粒单细胞刺激因子(GM-CSF)、IL-4、肿瘤坏死因子(TNF-α)和柴胡皂苷a的RPMI-1640培养液分别对细胞因子组、柴胡皂苷组、联合培养组的单核细胞进行体外培养;应用倒置相差显微镜、瑞氏染色和CD14、CD83、HLA-DR、S-100的免疫细胞化学法鉴定单核细胞和DC;动态观察单核细胞分化为DC过程中不同时间点的NF-κB p50的表达,并进行图像分析.结果 CD14、CD83、HLA-DR、S-100免疫细胞化学法证实所获单核细胞和DC符合各自的形态和表型特征.在含GM-CSF和IL-4的RPMI-1640培养液培养7d时,单核细胞分化成未成熟DC(imDC);在含GM-CSF、IL-4和TNF-a的RPMI-1640培养液继续培养3d时,imDC分化为成熟DC(mDC),两者的细胞核内NF-κB p50表达具有显著性差异(P<0.05).单纯用只含柴胡皂苷a的RPMI-1640培养液培养单核细胞至7d时,可见其细胞核呈NF-κB p50阳性,但未见其分化为DC.若用含GM-CSF、IL-4和柴胡皂苷a的RPMI-1640培养液联合培养7d时,则该单核细胞分化为imDC;加入TNF-α后继续培养3d,imDC的细胞核呈NF-κB p50强阳性,免疫细胞化学法证实imDC已经分化为mDC.联合培养组细胞的表型表达均强于只加细胞因子组(P<0.05).结论 人外周血单核细胞分化为imDC和mDC过程中,细胞核内NF-κB p50表达逐渐增强.单纯用低浓度柴胡皂苷a不能刺激单核细胞分化为DC,但联合细胞因子GM-CSF、IL-4和TNF-α培养时,可使其分化为imDC和mDC.     

妊娠期高血压病患者血小板-白细胞聚集体检测的临床意义

目的:探讨妊娠期高血压病(HDCP)患者血小板-白细胞聚集体(PLA)表达百分率变化及临床意义.方法:采用流式细胞术分别检测38例妊娠期高血压病患者(妊娠期高血压病组)、30例正常妊娠晚期孕妇(正常晚孕组)和30例正常非孕妇女(正常非孕组)的血小板-中性粒细胞聚集体(PNA)和血小板-单核细胞聚集体(PMA)表达百分率...     

健康成人亮氨酸氨基肽酶参考值的调查

目的了解并逐步建立本地区健康成人血清亮氨酸氨基肽酶（LAP）的参考值。方法对体检健康者904例采用罗氏P800全自动生化分析仪测定血清LAP水平。结果经统计学分析,各年龄组间LAP水平比较差异有统计学意义（P〈0.01）,18～岁人群LAP检测结果最高为（43.67±8.17）U/L,而≥60岁人群最低为（35.75±7.41）U/L。男性LAP水平为（44.39±9.31）U/L,高于女性的（38.42±7.92）U/L,差异有统计学意义（P〈0.01）;取中间分布的95%可信限（x±1.96s）作为参考范围计算结果为：成人男性血清LAP参考值为（26～63）U/L,成人女性参考值为（23～54）U/L。结论建议不同性别使用不同的正常参考值,男性（26～63）U/L,女性（23～54）U/L。     

多发性硬化患者外周血白细胞粘附分子的表达

目的 :探讨多发性硬化 (MS)患者外周血白细胞粘附分子表达的水平及予甲基强的松龙 (MP)治疗后的变化。方法 :流式细胞仪测定 2 8例缓解复发型MS患者及 12例复发期MS予静脉MP治疗后外围血淋巴细胞和单核细胞细胞间粘附分子 3(CD5 0 )、细胞间粘附分子 1(CD5 4 )、整合素LFA 1β亚单位 (CD18)、非常晚抗原 4 (VLA 4 )α、β亚单位 (CD4 9d、CD2 9)和 (- )选择素 (CD6 2L)的阳性百分率。结果 :复发期MSCD4 9d和CD2 9在淋巴细胞和单核细胞、CD5 4和CD6 2L在单核细胞的阳性百分率高于缓解期MS和对照组 ,复发和缓解期MSCD5 4在淋巴细胞的阳性百分率高于对照组 ;MP治疗后 ,CD5 4和CD4 9d在淋巴细胞和单核细胞、CD6 2L在单核细胞的阳性百分率下降。结论 :MS患者外周血白细胞粘附分子的表达升高并可作为MS活动期的指标     

C反应蛋白与酶修饰低密度脂蛋白对树突状细胞成熟的影响

目的探讨在动脉粥样斑块硬化进程中C反应蛋白（CRP）和酶修饰低密度脂蛋白（E-LDL）对外周血中树突状细胞（DC）分化成熟的影响。方法梯度离心法分离人外周血单核细胞,用含rhGM-CSF和rhIL-4的Cellgro培养液培养5d,使其分化为DC。分别用CRP、E-LDL及CRP加E-LDL刺激DC48h后,采用流式细胞术检测DC表型（CD1a、CD80、CD86、HLA-DR）的表达,ELISA法检测DC上清液中IL-12、TNFα、IL-2和IL-10的含量,并进行比较。结果CRP抑制DC的CD1a、CD80表达及IL-12、TNFα分泌,E-LDL促进DC的CD1a、CD80、CD86和HLA-DR表达及IL-12、TNFα分泌,CPR加E-LDL结果与E-LDL类似。结论CRP抑制DC的活化,E-LDL可促进DC的分化成熟,E-LDL激活DC的作用强于CRP的抑制作用。     

多发性硬化患者淋巴细胞激活的临床意义

目的：探讨多发性硬化(MS)患者淋巴细胞的激活状态及临床意义。方法：流式细胞仪测定28例缓解复发型MS患者(复发期20例，缓解期8例)外周血(PB)、12例复发期脑脊液(CSF)及11例复发期MS患者予糖皮质激素治疗后淋巴细胞CD69和HLA-DR表达的阳性百分率。结果：复发期MS患者阳淋巴细胞HLA-DR 和CD3 ／HAL-DR 的百分率高于对照组和缓解期MS，缓解期MS患者CD3 /HLA-DR 的百分率高于对照组3复发期MS患者CSF中CD69 、HLA-DR 和CD3 ／HLA-DR 的百分率均高于PB；复发期MS患者CSF中CD69 的百分率与血脑屏障受损呈正相关；激素治疗降低复发期MS PB淋巴细胞HLA-DR 的百分率。结论：MS患者淋巴细胞激活涉及MS的发病机制并可作为MS活动期的一个指标。     

014 TNF-α对内皮细胞粘附分子NFκB表达的影响

目的: 目前认为动脉粥样硬化(AS)是一种炎症性疾病, 其致病因素多种, 细胞因子生长因子等在其发病机制中起着重要的作用. 因而通过TNF-α作用于内皮细胞(EC)后, 观察单核细胞对其粘附的变化, 粘附分子表达以及对调控粘附分子基因的转录因子(NFκB)变化, 以探讨TNF-α在AS发生早期细胞行为中的作用. 方法: 人脐静脉内皮细胞和γTNF-α(5 ng/ml)作用4 h后, 用细胞计数法测U937细胞以EC粘附率, 用ELISA法检测EC膜上粘附分子VCAM-1、 ICAM-1、 P-selectin的表达, 以及采用细胞免疫化学方法测定NFκB核转位百分率. 结果: U937细胞对γTNF-α作用的EC粘附明显增高, 其粘附率为41.30%±1.16%(n=7), 对照组为4.50±1.01%(n=7)(P<0.001), γTNF-α能明显上调EC膜上VCAM-1, ICAM-1及P-selectin表达, 并能明显增加NFκB的核转位其阳性细胞为99.42%±0.84%而对照组为28.93%±14.06%(P<0.001), 当采用银杏提取液事先处理EC而后再用γTNF-α作用, 能抑制U937对EC的粘附百分率, 且有量效依赖关系. 结论: γTNF-α明显促进NFκB核转位, 增强了对粘附分子基因调控, 明显增加EC膜上粘附分子表达粘附分子是细胞粘附分子基础, 增加了单核细胞等对EC粘附, 这为单核细胞迁移到内膜下成为巨噬泡沫细胞提供了前提, 而银杏提取液有明显抑制单核细胞对TNF-α处理的EC粘附作用, 为AS的发病机理和防治提供线索.