骨巨细胞瘤中成纤维样基质细胞体外钙化能力的研究

目的：探讨骨巨细胞瘤的组织来源。方法：在体外培养。Ｇｏｍｏｒｉ法碱性磷酸酶染色,生化检测细胞培养上清液中的碱酸酶含量,免疫组织化学染色检测骨钙素在成纤维样基质细胞中的表达。使用含Ｂ－甘油磷酸钠和ＣａＣｌ２的培养液,观察成纤维样基质细胞体外钙化能力。结果：成纤维样基质细胞中碱性磷酸酶和骨钙素呈阳性表达,在体外具有钙化能力,在细胞培养上清液中有碱性磷酸酶。结论：骨巨细胞瘤中的成纤维样基质细胞具有某些成     

骨巨细胞瘤中的多核巨细胞体外骨吸收研究

目的：比较破骨细胞与骨巨细胞中多核巨细胞的特点，明确后的性质和来源。方法：用倒置相差显微镜观察休外培养的多核巨细胞的一般形态及降钙素对它的影响，用骨片与多核巨细胞共培养法观察多核巨细胞的体外骨吸收功能，用扫描电镜观察同吸收陷窝，Ｇｏｍｏｒｉ染色观察多核巨细胞的酸性酸酸酶活性，结果：倒置相差显微镜下可见多核巨细胞核较多（２０个以上）胞浆周边不规则，有伪足样突起，胞闪内可可见较多大小不等的空泡；降钙     

骨巨细胞瘤的细胞生物学

目的 探讨骨巨细胞瘤中多核巨细胞和单核基质细胞的起源及在肿瘤中的作用,方法 应用免疫组织化学方法检测50例骨巨细胞瘤手术标本的增殖细胞核抗原（PCNA）、巨噬细胞抗原（CD68）、波形蛋白、抗糜蛋白酶（AACT）、抗胰蛋白酶（ACT）以及溶菌酶的表达和分布状况。结果 多核巨细胞主要表达CD68、AACT、ACT以及溶菌酶,无一表达PCNA;单核基质细胞可分为两种类型,以纤维母细胞型占优势,主要表达波形蛋白和PCNA;组织细胞型主要表达CD68、AACT、ACT以及溶菌酶。结论 多核巨细胞并非肿瘤细胞,它可能来自单核巨噬细胞系统,单核基质细胞中的纤维母细胞型为肿瘤的主要增殖成分,可能来自间充质。     

骨巨细胞瘤中的多核巨细胞体外骨吸收研究

目的：比较破骨细胞与骨巨细胞瘤中多核巨细胞的特点，明确后者的性质和来源。方法：用倒置相差显微镜观察体外培养的多核巨细胞的一般形态及降钙素对它的影响；用骨片与多核巨细胞共同培养法观察多核巨细胞的体外骨吸收功能，用扫描电镜观察骨吸收陷窝，Ｇｏｍｏｒｉ染色观察多核巨细胞的酸性磷酸酶活性。结果：倒置相差显微镜下可见多核巨细胞胞核较多（２０个以上），胞浆周边不规则，有伪足样突起；胞浆内可见较多大小不等的空泡；降钙素（１００μｇ·Ｌ－１）可抑制多核巨细胞的伪足样运动；多核巨细胞与灭活的骨片共同培养时可见骨吸收陷窝形成，扫描电镜下可见吸收陷窝底面有原纤维；Ｇｏｍｏｒｉ染色时可见多核巨细胞的酸性磷酸酶呈阳性。结论：证实了多核巨细胞具有破骨细胞的形态特征与骨吸收功能，可能来源于骨髓的破骨细胞前体细胞     

成纤维母细胞样基质细胞促进假体周围骨溶解

目的 探讨松动假体周围的假膜组织中成纤维母细胞样基质细胞在假体周围骨溶解中的作用.方法 从人工假体周围的假膜标本中分离成纤维母细胞样基质细胞并作体外培养,传代后与外周血单核细胞共培养,并向各组内分别加入骨水泥颗粒和破骨细胞形成抑制因子(OPG)等,检测是否有破骨细胞形成及其活性;并采用半定量RT-PCR法检测成纤维母细胞样基质细胞中核因子κ B受体活化因子配基(RANKL)和OPG等破骨细胞调节因子mRNA表达量的变化.结果 细胞共培养结束时观察到抗酒石酸磷酸酶(TRAP)和玻璃蛋白酶受体(VNR)阳性的多核细胞及骨吸收陷窝形成,这一过程可被OPG彻底阻断;骨水泥颗粒组骨吸收陷窝的数量较对照组增加.同时基质细胞表达RANKL和OPG mRNA,骨水泥颗粒组的表达量较对照组分别增加,并且RANKL/OPG的比率增大.结论 人工假体周围假膜中成纤维母细胞样基质细胞表达膜蛋白型及可溶性RANKL,支持破骨细胞分化及其骨吸收活性,从而促进假体周围骨溶解.     

骨髓基质细胞体外成骨能力的实验研究

目的 研究骨髓基质细胞(BMSc)的体外成骨能力，为骨组织工程研究提供细胞来源。方法 采用密度梯度离心法将兔BMSc自小量骨髓中分离培养，并观察第2代BMSc在地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠诱导条件下的生长及成骨分化情况。结果 BMSc呈成纤维细胞样表现，增殖能力强，在诱导条件下碱性酸酶活性明显增高，并出现矿化结节。结论 BMSc体外增殖能力强，成骨能力肯定。地塞米松、维生素C、β-甘油磷酸钠可促进BMSc向成骨细胞分化。     

IL—1α促进骨巨细胞瘤中破骨样细胞体外骨吸收研究

目的：比较骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞骨吸收的功能特点。方法：体外分离骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与骨片共同培养，观察ＩＬ－１α对多核巨细胞体外骨吸收的影响。结果：ＩＬ－１α可使多核巨细胞骨吸收陷窝的数目和面积增加；其作用随剂量增加而增强；ＩＬ－１α对多核巨细胞的促进作用具有长效性。结论：ＩＬ－１α具有促进多核巨细胞体外骨吸收作用，说明多核巨细胞与破骨细胞在骨吸收功能方面有相似性。     

骨巨细胞瘤内多核巨细胞的超微结构观察

本文观察了六例骨巨细胞瘤,探讨了多核巨细胞的超微結构改变,其组织发生有迹象表明由单核基质细胞融合形成的。根据形态特征、恒定存在和生物学行为综合分析,认为多核巨细胞也是骨巨细胞瘤的实质瘤细胞。     

IL-1α促进骨巨细胞瘤中破骨样细胞体外骨吸收研究

目的：比较骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与破骨细胞骨吸收的功能特点。方法：体外分离骨巨细胞瘤中的多核巨细胞与骨片共同培养，观察ＩＬ１α（５０μｇ／Ｌ，１００μｇ／Ｌ）对多核巨细胞体外骨吸收的影响。结果：ＩＬ１α可使多核巨细胞骨吸收陷窝的数目和面积增加；其作用随剂量增加而增强；ＩＬ１α对多核巨细胞的促进作用具有长效性。结论：ＩＬ１α具有促进多核巨细胞体外骨吸收作用，说明多核巨细胞与破骨细胞在骨吸收功能方面有相似性。     

四肢长骨骨巨细胞瘤32例手术治疗体会

骨巨细胞瘤生长活跃,对骨质侵蚀破坏性大,如得不到及时妥善的治疗,可造成严重残废而导致截肢。手术治疗是目前是最重要的治疗方法。2002年8月至2008年8月,我们收治32例四肢长骨骨巨细胞瘤,现报道如下。     

Natural history of giant cell tumour of the bone

The clinical presentation and behaviour of giant cell tumours of bone vary. The progression of the disease and metastases are unpredictable, but the overall prognosis is good. We describe the natural history and different clinical presentations of two cases of giant cell tumour of bone where the patients had refused the initial treatment and presented several years later with the disease.     

Effect of cytokines on in vitro bone resorption by cells isolated from giant cell tumor of bone

ＯｂｊｅｃｔｉｖｅＴｏｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｃｙｔｏｋｉｎｅｓｏｎｉｎｖｉｔｒｏｂｏｎｅｒｅｓｏｒｐｔｉｏｎｂｙｃｅｌｓｉｓｏｌａｔｅｄｆｒｏｍｇｉａｎｔｃｅｌｔｕｍｏｒｏｆｂｏｎｅ．ＭｅｔｈｏｄｓＭｏｎｏｎｕｃｌｅａｒｓｔｒｏｍ...     

Oncological and functional results following operation for giant cell tumour of bone

Objective:Giant cell tumours(GCT) represent one of the most common benign turnouts of bone. However, despite its benign nature they are aggressive lesions that have a tendency to recur. This study aims to report experience with the treatment of GCTs, and reviews the relationship between surgical management and clinical outcome. Methods:A retrospective review was performed with 70 patients (32 males and 38 females) who presented to our institution between 1991 and 2001 with GCT of bone. An evaluation of the oncological and functional results was conducted and patients were divided into three groups according to the treatment method; Group Ⅰ:(46 patients) intralesional curettage and adjuvant therapy and packing with filling materials. Group Ⅱ:(18 patients) en-bloc resection and arthrodesis or reconstruction. Group Ⅲ:(6 patients) amputation. Results:The mean follow-up period was 10 years (range, 5-15 years). The overall rate of local recurrence was 14%, 22% in Group Ⅰ, and only 4% in Group Ⅱ and Group Ⅲ According to the Musculoskeletal Tumour Society(MSTS) score for functional outcome, the mean overall score for Group Ⅰ was 27.9 (out of 30), 15.9 for Group Ⅱ. Of note, the 9 patients within Group Ⅱ who received endoprosthetic reconstruction, the mean overall MSTS functional score was 25.5. Conclusion:Intralesional curettage with adjuvant therapies and filling agents is often associated with a relatively high recurrence rate, however joint function is well preserved. Patients with more extensive, biologically aggressive, and/or recurrent tumours are best treated with en-bloc resection.     

骨髓基质细胞的体外培养和分化诱导

目的 :建立一种简单可靠的骨髓基质细胞 (BMSc)向成骨细胞转化的体外培养方法 ,探讨骨髓基质细胞向成骨细胞转化的机理。 方法:将兔 BMSc悬液进行体外培养 ,进行形态学观察和组织学检测。 结果:传代培养细胞的碱性磷酸酶 (AL P)阳性率达 80 %以上 ,表现为成骨细胞形态并形成钙结节。结论:地塞米松、β-甘油磷酸钠和维生素 C可促进 BMSc分化为成骨细胞 ,BMSc的分化和增殖是两个对立的状态。     

整合素α4在骨巨细胞瘤中的表达及临床意义

目的 研究骨巨细胞瘤组织中整合素α4的表达情况,探讨它与骨巨细胞瘤恶性度、侵袭性的关系及临床意义.方法 应用免疫组织化学方法 对48例骨巨细胞瘤组织进行整合素α4检测.结果 整合素α4 48例在骨巨细胞瘤( )的表达率为22.73%,( )的表达率为45.45%;骨巨细胞瘤Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级中整合素α4的阳性表达率( ～ )分别为100%、66.67%、43.75%.分化差、恶性度高的整合素α4阳性率明显低于分化好、恶性度低的,差异有显著性(P＜0.05),整合素α4阳性表达与骨肉瘤的侵袭性有密切关系.结论 整合素α4与骨巨细胞瘤的侵袭性、恶性程度有关,可作为骨巨细胞瘤诊断的辅助指标.     

人骨髓成骨细胞培养法的改良及其体外成骨能力

目的：探讨简便、易行的人达成骨细胞体外培养方法,研究骨髓基质在体外培养条件下的成骨能力。方法：抽取人骨髓组织,梯度离心后置于含１００ｍＬ／Ｌ小牛血清的ＤＭＥＭ培养液中,培养２４小时换液,稳定伟代后改用含地塞米松和β－甘油磷酸钠的条件增大２液,用倒置显微镜观察、组织化学染色、四环素荧光标记等方法进行观察。结果：传代细胞４天～５天即可传代,在条件培养液中２ＷＫ形成多层结构,并聚集成黑色结节。培养细胞Ａ     

人骨髓基质干细胞体外培养的生物学特性

目的　探讨在骨组织工程研究中作为种子细胞来源之一的骨髓基质干细胞体外培养后的生物学特性 .方法　获取人胎儿骨髓于含 10 0 m L· L- 1 胎牛血清的 DMEM培养液中培养 ;将骨髓基质干细胞向成骨细胞方向进行诱导 ,2～ 3wk后行钙化结节 Vonkossa和碱性磷酸酶 (AL P)钙钴染色 ;同时绘制诱导前后细胞的生长曲线、测定细胞内 AL P含量变化 ,并做统计学分析 .结果　骨髓基质干细胞经诱导后增殖速度变慢 ,但合成 AL P的能力明显增强 (P<0 .0 5 ) ;Vonkos-sa和 AL P染色呈阳性 .结论　骨髓基质干细胞取材方便 ,易于诱导为成骨细胞 ,作为骨组织工程的种子细胞应用前景良好 .     

不同浓度富血小板血浆对体外培养骨髓间充质干细胞增殖活性的影响

目的:探讨不同浓度的富血小板血浆(PRP)在不同时间段对体外培养骨髓间充质干细胞(MSCs)增殖活性的影响。方法:将体外培养的MSCs分为对照组(单纯血清培养组)和不同浓度的PRP组(0.5%,1.0%,1.5%),用四唑盐比色法(MTT)检测在不同作用时间(24h、48h、72h)对骨髓间充质干细胞增殖活性的影响。免疫组化方法检测细胞CD44、CD29、CD34的变化。结果:PRP中血小板浓度为全血的3.18倍,TGF-β和PDGF的浓度为全血的3.40倍;培养的细胞呈纤维状、克隆样生长;免疫组化表明CD29、CD44呈阳性表达,CD34呈阴性表达;MTT法显示不同浓度的PRP组在24h、48h、72h的平均吸光度(OD)值均高于对照组。结论:不同浓度的PRP在不同时间段可以促进骨髓间充质干细胞的增殖,并且随着浓度的增加PRP促进骨髓间充质干细胞增殖作用也增强。     

Study on the adoption of Schwann cell phenotype by bone marrow stromal cells in vitro and in vivo

To explore the possibilities of bone marrow stromal cells （MSCs） to adopt Schwann cell phenotype in vitro and in vivo in SD rats. Methods MSCs were obtained from tibia and femur bone marrow and cultured in culture flasks. Beta-mercaptoethanol followed by retinoic acid, forskolin, basic-FGF, PDGF and heregulin were added to induce differentiation of MSCs＇. Schwann cell markers, p75, S-100 and GFAP were used to discriminate induced properties of MSCs＇ by immunofluorescent staining. PKH-67-1abelled MSCs were transplanted into the mechanically injured rat sciatic nerve, and laser confocal microscopy was performed to localize the PKH67 labelled MSCs in the injured sciatic nerve two weeks after the operation. Fluorescence PKH67 attenuation rule was evaluated by flow cytometry in vitro. Results MSCs changed morphologically into cells resembling primary cultured Schwann cells after their induction in vitro. In vivo, a large number of MSCs were cumulated within the layer of epineurium around the injured nerve and expressed Schwann cell markers, p75, S- 100, and GFAP. Conclusion MSCs are able to support nerve fiber regeneration and re-myelination by taking on Schwann cell function, and can be potentially used as possible substitutable cells for artificial nerve conduits to promote nerve regeneration.