抗药性与敏感性德国小蠊乙酰胆碱酶的活性比较

目的研究德国小蠊抗药性与乙酰胆碱酯酶活性的关系。方法采用化学比色方法对敏感品系和抗性品系的德国小蠊分别测试乙酰胆碱酯酶,对比两者的测定值,分析抗性品系和敏感品系德国小蠊乙酰胆碱酯酶的差异。结果敏感品系和抗性品系德国小蠊的乙酰胆碱酯酶活性分别是2.863和5.609,抗性品系德国小蠊酶活性显著高于敏感品系,两者酶活性比值为1.96。结论乙酰胆碱酯酶活性与德国小蠊抗药性有关。     

实验动物品系数据库的建立

目的基于国内外部分实验动物数据库和文献,收集整理世界上现有的200多种共计26 000多个品系的实验动物数据,建立关系型检索数据库,使其成为世界上最大最全的实验动物品系数据库。方法构建基于My SQL数据库软件的中小型数据库,建立检索界面、录入界面和数据库接口。结果本文建立了实验动物品系数据库,已经收录小鼠品系数据21 596条;大鼠品系数据2062条;猴品系数据13条;地鼠品系数据2条;犬品系数据5条;兔品系数据5条。以后会逐步完善数据,实现实验动物品系数据库的定期更新。讨论该数据库的建立方便我国科研人员查阅和使用国内外实验动物品系资源,为引进欧美日等发达国家的实验动物品系资源提供链接。     

淡色库蚊有机磷抗性品系在生物学特性方面的不相适应性研究

本文在淡色库蚊的敌百虫、双硫磷和毒死蜱三种抗性品系筛选的基础上，通过抗性品系和敏感品系的吸血、繁殖、存活和发育等生物学特性的测定和比较，组建实验种群生命表、分析抗品系的适合度，结果表明：三种抗性品系的吸血率。产卵率和发育速率和敏感品系相比都有所降低；抗敌百虫品系，抗双硫磷品系和抗毒死蜱品系相对敏感品系分别具有０．５４２、０．６３１和０．６１８的适合度。     

德国小蠊乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶活力与抗药性的关系

目的 了解德国小蠊乙酰胆碱酯酶和羧酸酯酶活力与抗药性的关系。方法 分光光度法。结果 (1)德国小蠊R品系的AchE活力较之S品系的为高,对毒扁豆碱的敏感性则均低于S品系;(2)Rp品系的Km和Vmax值明显高于S品系,其它品系的情况或低于S品系或差异不明显;(3)德国小蠊R品系的α—NA CarE的活力均高于S品系,其对TPP的敏感性则均低于S品系;(4)除Rc和Rz品系雄虫外,其它的Km值均明显高于S品系,而各抗性品系的Vmax值均明显高于S品系。结论 (1)AchE对有机磷的不敏感性是造成德国小蠊对有机磷产生抗药性的重要因素之一;AchE结构上的变化可能是德国小蠊抗药性形成的分子机理。(2)德国小蠊对有机磷的抗性与α—NA CarE活力升高有关,α—NA CarE活力的升高可能是其基因扩增的结果。     

山东平邑金银花三个品系RAPD分析及绿原酸含量分析

目的：分析山东平邑金银花3个品系的遗传信息和绿原酸含量,为金银花品系的研究开发提供科学数据。方法：运用RAPD分析技术和HPLC方法采集数据。结果 ：金银花3种品系的RAPD遗传距离结果是：新品种与鸡爪花的遗传距离较近,在聚类分支图上归为一类;毛花与鸡爪花的遗传距离稍远。绿原酸含量结果 ：毛花品系〉新品种〉鸡爪花品系。结论：山东平邑金银花的新品种从遗传距离上分析与鸡爪花品系的亲缘关系较近,与毛花品系的稍远;新品种的绿原酸含量介于毛花品系与鸡爪花品系之间。     

两品系豚鼠屈光状态和眼球径的发展和比较

【摘要】 目的 了解断奶后Zmu-1:DHP和DHP两个品系豚鼠屈光状态和眼球径的发展规律。方法 首先进行3周龄两品系豚鼠屈光检测,然后选择Zmu-1:DHP品系豚鼠12只,DHP品系8只,按品系分成两组。在4-12周龄,每隔一周检测屈光度、眼轴长和角膜曲率等参数。结果 3周龄,327只Zmu-1:DHP品系豚鼠,屈光度为-5.19?.92 D,近视率达85.1%;而117只DHP品系豚鼠屈光度为2.13?.40 D,近视率仅为22.6%。4-12周龄,Zmu-1:DHP品系豚鼠近视不断加深,屈光参差>1.5D;DHP品系豚鼠屈光发育稳定。T-检验,Zmu-1:DHP品系豚鼠眼轴长度、玻璃体腔深度显著高于DHP品系,视力低于DHP品系。多因素方差分析,Zmu-1:DHP品系豚鼠散光随时间变化显著（P＜0.01）,而DHP品系不显著（P=0.07）。相关性分析,Zmu-1:DHP品系豚鼠屈光状态与眼轴长相关系数为-0.79（P＜0.01）、与玻璃体腔深度相关系数为-0.75（P＜0.01）;而DHP品系相应相关系数为-0.19（P=0.09）和-0.34（P＜0.01）。结论 Zmu-1:DHP品系豚鼠近视高发,正视化过程难以完成,其近视与眼轴长度和玻璃体腔深度高度相关。     

基因表达谱芯片对果蝇七氟醚麻醉及敏感相关基因的筛选和分析

目的 采用基因表达谱芯片筛选果蝇七氟醚麻醉及敏感相关基因,并对其基因功能进行分析.方法 以七氟醚敏感、耐药和野生品系黑腹果蝇为实验材料.将果蝇分为两组:七氟醚诱导组,包括三品系果蝇(敏感IS,野生IH,耐药IR);对照组(未经麻醉药干预),包括三品系果蝇(敏感S,野生H,耐药R).采用基因表达谱芯片方法,在各组各品系间进行比较,筛选出果蝇七氟醚麻醉及敏感相关基因.结果 以IH品系为对照,IS品系检测到差异表达基因532个,IR品系171个.其中在敏感品系中参与糖类代谢过程的基因都下调表达,而在耐药品系都上调表达.IS品系对比S品系检测到差异表达基因57个,IH品系对比H品系检测到13个,IR品系对比R品系检测到12个.其中有16个基因在敏感品系与耐药品系表达相反.基因FBgn0010388在各品系七氟醚诱导组都上调表达.结论 三品系果蝇七氟醚诱导后在基因上确实存在差异,且敏感多于耐药品系;其中敏感和耐药品系变化相反的16个基因成为敏感相关基因的可能性较大.敏感品系诱导组比较对照组差异表达基因数最多,野生品系次之,耐药品系最少.FBgn0010388可能与七氟醚麻醉关系密切.     

敌敌畏抗性淡色库蚊酯酶B1、A2探针制备及应用

目的制备敌敌畏抗性品系淡色库蚊酯酶B1、A2探针,并应用于抗性品系及敏感品系的检测. 方法分别设计酯酶B1、A2上下游引物,5‘端地高辛标记,PCR法制备DNA探针,分子杂交检测各个品系淡色库蚊. 结果摸索出合适的区分抗性与敏感品系的探针浓度,在该浓度下各品系杂交点的阳性率有差别.应用酯酶B1探针检测各品系蚊虫,抗敌敌畏品系的阳性率为40.0%,抗残杀威品系的阳性率为23.3%,抗氯氰菊酯品系的阳性率为18.3%,敏感品系的阳性率为11.7%;应用酯酶A2探针检测各品系蚊虫,抗敌敌畏品系的阳性率为43.3%,抗残杀威品系的阳性率为25.0%,抗氯氰菊酯品系的阳性率为21.7%,敏感品系的阳性率为15.0%. 结论应用酯酶B1、A2探针能够区分抗性品系,因此能够用于抗性的测定.从而为抗有机磷类杀虫剂媒介昆虫基因检测的实用性和抗性分子生物学机制的研究打下基础.     

中华按蚊不同株转铁蛋白基因表达水平的比较研究

定量RT-PCR 分析表明,中华按蚊溴氰菊酯抗性品系的转铁蛋白转录水平比敏感品系高11.5 倍,现场采集品系比敏感品系高8.3 倍.不同发育阶段的基因表达差异分析表明,成年雌蚊转铁蛋白mRNA 的表达水平最高,其次是三龄幼虫和卵.中华按蚊溴氰菊酯抗性品系和本地收集的菌株有3 到4 倍的增加相比,和敏感品系相比,中华按蚊溴氰菊酯抗性品系和现场采集品系的转铁蛋白表达水平均有3 到4 倍的增加.这些结果表明,转铁蛋白的表达水平与中华按蚊溴氰菊酯的抗性水平的提高有同步性,提示转铁蛋白对中华按蚊溴氰菊酯对杀虫剂的抗性形成具有一定的作用.     

转铁蛋白基因在三种淡色库蚊体内表达量的比较分析

目的进行不同品系蚊转铁蛋白基因表达量的分析。方法据二维电泳获得肽段序列设计引物扩增基因片段,荧光定量PCR检测在淡色库蚊抗性品系品系、敏感品系、现场采集品系蚊体内的表达水平差异。结果成功扩增淡色库蚊转铁蛋白基因片段,荧光定量PCR表明转铁蛋白基因在抗性品系蚊体内的表达量是敏感品系的13.52倍,现场品系是敏感品系的7.48倍。结论淡色库蚊转铁蛋白基因可做为新的抗性检测及治理基因靶标。     

我国小型猪品系资源状况初浅分析

小型猪正逐渐成为生命科学研究中的重要实验动物。我国具有独特和丰富的小型猪资源,我国小型猪品系或资源涉及资源品系、封闭群、近交培育品系等。本文就我国的小型猪品系资源状况进行了介绍和初步分析。     

微卫星DNA分析国内24个近交系小鼠遗传状况

目的利用微卫星位点对国内24种近交系小鼠进行遗传状况分析。方法用前期筛选的富含多态性和等位基因数多的30个小鼠微卫星位点,合成荧光标记引物,对近交系小鼠基因组DNA进行PCR的扩增,经STR扫描对各近交系小鼠品系进行基因分型。结果在24个近交系小鼠品系中,有16个品系在品系内在30个位点上均具有相同基因型。而在不同品系间同一位点具有多态性,可初步对不同品系进行鉴别区分。其余品系内个别动物存在多态性。结论所选位点可以参考用于近交系小鼠遗传质量检测分析,并进行初步品系检测鉴定。     

不同品系黄连产量和质量的研究

目的考察和比较湖北黄连GAP基地选育的3个不同品系黄连(大花叶、无光叶、小花叶)的产量和质量。方法采用田间随机区组设计,连续3年采集3个品系黄连根茎样品,分别以烘干法测定其质量,用紫外分光光度法和高压液相色谱法分别测定其总生物碱和盐酸小檗碱的量。结果在考察的3个品系药材样本中,各品系三年生黄连产量没有显著差异(P>0.05),在四年生和五年生黄连中,大花叶和无光叶品系产量均明显高于小花叶品系(P<0.05);在三年生、四年生、五年生黄连中,各品系总生物碱和盐酸小檗碱的量无明显差异(P>0.05)。结论大花叶和无光叶品系的黄连产量高、质量合格,可作为黄连规范化种植的种子基原。     

三种家蝇酚氧化酶基因表达差异研究

目的进行不同品系家蝇酚氧化酶基因表达量差异的分析研究。方法根据酚氧化酶基因序列设计引物扩增基因片段,荧光定量PCR检测在家蝇抗性品系、敏感品系、现场采集品系家蝇体内酚氧化酶的表达水平差异。结果酚氧化酶基因在抗性品系蝇体内的表达量是敏感品系的13.38倍,现场品系是敏感品系的6.24倍。结论家蝇酚氧化酶基因可作为新的抗性检测及治理基因靶标。     

实验动物遗传质量的控制重点在遗传监测

在生物医学研究领域中使用适当品系的实验动物,将可提供最有价值的无外来遗传和环境变异的资料。选供研究的动物,应在微生物学规定的环境中生产,饲以标准化的饲料,具有明确的遗传背景。规定的环境是:执行定期的微生物群落检测,以检定是否出现已知的病原体。遗传学规定的实验动物品系,是指那些已知的发育特性、生化特性、免疫学特性或者其他可遗传的特性已被鉴定的品系。在深入研究或进行验证时,选用遗传学和微生物学上明确的动物就更加重要了。近交系实验动物遗传质量控制须包括:1.每个品系遗传概貌的结构;2.进行常规检测,证明品系和亚品系的遗传概貌是否符合;3.签发品系和亚品     

IRE-BP 1基因在三种淡色库蚊体内表达量的比较分析

目的进行不同品系淡色库蚊铁离子应答元件结合蛋白1基因表达量的分析。方法据二维电泳获得肽段序列设计引物扩增基因片段,荧光定量PCR检测在淡色库蚊抗性品系、敏感品系、现场采集品系蚊体内的表达水平差异。结果成功扩增淡色库蚊铁离子应答元件结合蛋白1基因片段,荧光定量PCR表明该基因在抗性品系蚊体内的表达量是敏感品系的8.22倍,现场品系是敏感品系的5.17倍。结论淡色库蚊铁离子应答元件结合蛋白1基因可做为新的抗性检测及治理基因靶标。     

人类疾病模型小鼠的标准化维持方法研究

目的研究人类疾病模型小鼠的可遗传生物学特性,建立品系的标准化维持方法。方法选用FVB TgN、MRL Mpj和SAMP1Ka三个疾病模型小鼠品系作为代表性实验对象,通过测定生长曲线、RAPD同工、酶电泳、行为学试验等方法,找出三个品系相对于各自对照品系的不同特征,并建立了标准化检测指标作为维持方法的依据。结果MRL Mpj的生长曲线相对于对照品系有明显的统计学差异;FVB TgN、MRL Mpj、SAMP1Ka等三个品系的RAPD图谱在阳性引物及扩增出的条带方面均不一致;同工酶电泳的结果表明不同品系的个体之间表型不完全相同;行为学试验更从多方面直观地显示了各品系的不同特征。结论人类疾病模型小鼠除了用常规检测方法外,还应建立各品系在生长曲线、RAPD、同工酶电泳、行为学试验等方面的特殊检测方法,及时检测模型小鼠品系的独特性状并作为保种依据,以避免遗传漂变的发生。     

用荧光半定量RT-PCR检测蚊溴氰菊酯抗性

目的:建立蚊对菊酯类杀虫剂抗性的PCR检测方法。方法:应用荧光半定量RT鄄PCR,检测经SSH结合cDNA芯片分离鉴定的淡色库蚊对溴氰菊酯抗性相关基因NYD鄄Tr在抗性品系与敏感品系中的表达水平。结果:经荧光半定量RT鄄PCR检测,NYD鄄Tr进入指数期的循环数抗性品系早于敏感品系,抗性品系组比敏感品系组先进入指数增长期。结论:以NYD鄄Tr作为靶基因,荧光半定量RT鄄PCR可区分淡色库蚊对溴氰菊酯抗性品系与敏感品系,亦即可检测淡色库蚊溴氰菊酯抗性。     

Zmu-1:DHP豚鼠的随机扩增多态性DNA分析

目的：研究Zmu-1：DHP豚鼠基因组DNA的遗传多态性及其遗传概貌，探讨随机引物PCR(RAPD—PCR)在豚鼠遗传质量检测中运用的可行性。方法：用RAPD—PCR法，对新培育的Zmu—1：DHP豚鼠和对照品系DHP豚鼠的基因组DNA进行PCR扩增。结果：从40条随机引物中，筛选出2条呈多态性的引物，分别是第S1202号和第S1219号引物。Zmu—1：DHP品系的扩增产物无多态性变化，而且其条带与多数DHP品系的个体相同。少数DHP品系的个体呈多态性变化，并找到该品系增加和缺失的特征性条带各一种。结论：Zmu—1：DHP品系的基因纯合性及个体一致性较DHP品系高。二个品系的DNA序列存在较少差异，说明豚鼠品系间遗传结构比较接近。一旦选定具有多态性的引物，RAPD—PCR法可以区分豚鼠品系，适用于豚鼠遗传质量检定。     

大鼠(Rattus Norvegicus)无白蛋白基因(Aualbumia)和盖帽基因(Hooded)的连锁

1977年由Sprague—Dawley大鼠建立了一株无白蛋白大鼠突变品系(NAR)。无白蛋白基因是常染色体隐性遗传的。以“a|b”作为基因符号、生化特征是白蛋白量极低和血脂过多症。突变鼠血浆中的总蛋白水平和Sprague-Dawley对照鼠相似,球蛋白补偿性增加。本试验用无白蛋白大鼠NAR(随机交配品系)同已知毛色基因的大鼠abh品系,近交大鼠ACI品系及无盖帽基因的IS品系(Agout—Nonhooded)进行杂交,