系列PCR方法检测淋巴细胞白血病克隆性基因重排的选择应用

以１次、半巢式及多重ＰＣＲ方法扩增５８例淋巴细胞白血病ＩｇＨ及ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ克隆性基因重排。结果显示：多重ＰＣＲ和１次ＰＣＲ的敏感度为１０￣（－４）～１０￣（－５）水平；半巢式ＰＣＲ敏感度可达１０￣（－５）～１０￣（－６）水平。ＩｇＨ和ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ重排阳性率为６７．２％和６２．０％；半巢式ＰＣＲ检测ＩｇＨ重排阳性率为７０．７％。上述结果表明：多重ＰＣＲ可同时检测两对目的基因，适于初治病例检测，而对缓解病例的检测则需采用敏感度较高的半巢式ＰＣＲ方法。     

PCR对SSCP检测p53基因杂合性缺失的影响

对比观察了常规ＰＣＲ及半巢式ＰＣＲ对ＳＳＣＰ检测乳腺用ｐ５３基因杂合性缺失的影响。结果显示，半巢式ＰＣＲ能将石蜡包埋组织ｐ５３基因第４外显子ＤＮＡ片段ＰＣＲ扩增成功率由８２．５％提高到１００％，但应用半巢式ＰＣＲ产物对１３例杂合子病人ＳＳＣＰ分析显示，乳腺癌组织ｐ５３基因杂合性缺失由常规ＰＣＲ─ＳＳＣＰ检出阳性６例降低至１例。本研究结果表明，半巢式ＰＣＲ虽能提高ＰＣＲ的敏感性，但由于乳腺癌组织往往混杂有一些正常组织成分，二次ＰＣＲ扩增增加了正常组织ＤＮＡ对肿瘤组织ＤＮＡ的影响，因而不适用于乳腺癌ｐ５３基因杂合性缺失的研究。     

半巢式PCR检测多发性骨髓瘤外周血肿瘤相关B细胞

半巢式ＰＣＲ检测多发性骨髓瘤外周血肿瘤相关Ｂ细胞［吕鸣等．解放军医学杂志，１９９７；２２（４）∶２４４］以克隆性免疫球蛋白重链（ＩｇＨ）基因重排为骨髓瘤细胞基因标志，应用半巢式ＰＣＲ基因扩增技术检测多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者外周血肿瘤相关Ｂ细胞。结果２...     

系列PCR方法检测淋巴细胞白血病克隆性基因重排的选择应用

以１次、半巢式及多重ＰＣＲ方法扩增５８例淋巴细胞白血病ＩｇＨ及ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ－克隆性基因重排，结果显示：多重ＰＣＲ和Ｉ次ＰＣＲ的敏感度为１０－１０＾５水平；半巢式ＰＣＲ敏感度可达１０＾－５－１０＾－６水平。ＩｇＨ和ＴＣＲＶγＩ－Ｊγ重排阳性率为６７．２％和６２．０％；半巢式ＰＣＲ检测ＩｇＨ重排阳性率为７０．７％。上述结果表明，多重ＰＣＲ可同时检测两对目的基因，适于初治病例检测，而地缓解病例的检     

降钙素基因逆转录巢式PCR及其临床应用价值的研究

目的：建立逆转录巢式（ＲＴ－ｎｅｓｔｅｄ）ＰＣＲ方法扩增降钙素（ＣＴ）基因,探讨急性白血病诱导分化前后ＣＴ基因甲基化模式以及在微小残留病灶（ＭＲＤ）诊断中的临床价值。方法提取骨髓单个核细胞（ＢＭＭＣ）中的总ＲＮＡ,用逆转录酶合成ｃＤＮＡ,再以巢式ＰＣＲ扩增含有Ｍ位点的ＣＴ基因片段,并以Ｈｐａ Ⅱ酶切ＰＣＲ扩增终产物,分析ＣＴ基因的甲基化模式。     

用PTVS检测t（14；18）PCR产物的DNA序列

为确定聚合酶链反应（ＰＣＲ）和地高辛（ＤＩＧ）系统检测ｔ（１４；１８）的特异性，我们采用ＰＧＥＭ－Ｔｖｅｃｔｏｒ系统（ＰＴＶＳ）和双脱氧链终止技术克隆并测定了ＲＬ细胞系和一个ＮＨＬ患者－Ａｍｂｒｏｓｅｎ的ｔ（１４；１８）ＰＣＲ产物的ＤＮＡ序列。结果表明两者的ＰＣＲ扩增产物均为ｂｃｌ－２－ＪＨ融合基因片段，证实ＰＣＲ－ＤＩＧ系统是一种特异的检测ｔ（１４；１８）的方法。同时还表明用ＰＴＶＳ对ＰＣＲ。产物进行克隆测序优于直接用双脱氧法测序。     

PCR 技术在肺结核早期诊断的价值

ＰＣＲ技术在肺结核早期诊断的价值范艳琼（广西桂林市第三人民医院检验科桂林市５４１００２）关键词肺结核；ＰＣＲ技术；诊断肺结核在我国是一种常见的传染病，诊断此病一般常根据临床表现进行Ｘ线检查，直接痰涂片，培养及结核抗体试验等方法，但敏感度低，特异性差并...     

PCR对结核性胸水诊断价值的探讨

采用ＰＣＲ技术检测６７例胸水标本中的结核杆菌ＤＮＡ，并与细菌学检查（细菌培养）进行对比观察，结果表明：用ＰＣＲ方法检测结核性胸水中结核杆菌ＤＮＡ阳性的检测率达５２．２４％（３５／６７）；胸水细菌培养出结核杆菌者１３．４６％（７／５２），两者相比具有高度显著性（ｐ＜０．０１）。对３例大量的结核性胸水患者进行动态观察，经抗痨治疗２～３周后复查胸水ＰＣＲ仍为阳性。认为ＰＣＲ是敏感、快速、特异性的方法，对结核性胸水诊断和治疗具有实用价值。     

PCR技术检测生殖器疣标本中人乳头状瘤病毒DNA的研究（摘要）

ＰＣＲ技术检测生殖器疣标本中人乳头状瘤病毒ＤＮＡ的研究（摘要）王桂珍，董占双，刘凤芝，常玲（中国医科大学基础医学院微生物学教研室）（中国医科大学第二临床学院妇产科）李鲁平（沈阳市性病防治所）关键词人乳头状瘤病毒；ＰＣＲ；ＤＮＡ本研究用ＰＣＲ技术对１９...     

TT病毒在非甲～庚型和重型肝炎中感染的研究

我们根据日本报道的ＴＴ病毒（ＴＴＶ）ＤＮＡ序列［１］,设计合成两对特异性聚合酶链反应（ＰＣＲ）引物,用巢式ＰＣＲ（ｎｅｓｔｅｄＰＣＲ）对非甲～庚型和重型肝炎患者感染ＴＴＶ情况进行研究。对其中１份ＴＴＶＤＮＡ阳性的ＰＣＲ产物进行纯化、克隆、测序,...     

PCR与培养检测性传播疾病230例分析

ＰＣＲ与培养检测性传播疾病２３０例分析孙长华陈步凤阮月芹高梅兰宋向芹（附属医院检验科，滨州市２５６６０３）关键词ＰＣＲ；分离培养；性传播疾病在性传播疾病（ＳＴＤ）中，淋球菌（ＮＧ）是较常见的病原菌．近年来衣原体（ＣＴ）和支原体（ＵＵ）感染呈上升趋势，...     

应用PCR技术检测淋巴结病理切片中的IgCDR—Ⅲ基因重排

应用多聚酶链反应（ＰＣＲ）技术检测Ｂ细胞－非何杰金淋巴瘤（Ｂ－ＮＨＬ）的单克隆性ＩｇＣＤＲ－Ⅲ基因重排，ＰＣＲ扩增产物经琼脂糖凝胶电泳后为１００￣１２０ｂｐ的特异性ＤＮＡ区带。检测石蜡病理切片标本中非何杰金淋巴瘤（ＮＨＬ）１７／２３例、反应性增生２／５例发现单克隆性ＩｇＣＤＲ－Ⅲ基因重排；反应性增生３／５例及淋巴结转移癌４例未见单克隆性ＩｇＣＤＲ－Ⅲ基因重排。     

一步PCR快速扩增血清中HCVRNA

一步ＰＣＲ快速扩增血清中ＨＣＶＲＮＡ阎小君，肖乐义，李陕区，郭晏海，苏成芝，刘君，候瑜，陈远鑫（全军基因诊断技术应用研究所西安７１００３３）关键词聚合酶链反应；丙型肝炎病毒；核糖核酸中图号Ｑ５２３．３反转录巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测丙型肝炎病毒（...     

半巢式PCR一步法扩增伤寒患者单核细胞中伤寒沙门菌DNA

建立适用于临床检测血中伤寒沙门菌ＤＮＡ扩增方法。分离患者单核细胞，加热裂解制板ＤＮＡ，半巢式ＰＣＲ一步法扩增Ｓ．ｔｙｐｈｉ鞭毛基因。     

聚合酶链反应检测胃粘膜幽门螺杆菌假阳性假阴性观察

聚合酶链反应检测胃粘膜幽门螺杆菌假阳性假阴性观察自贡市第三人民医院（６４３０２０）余剑平重庆医科大学张玉洪杨致邦王丕龙自Ｈｏｓｈｉｎａ〔１〕首次采用ＰＣＲ检测幽门螺杆菌（ＨＰ）以来，文献大多报道ＰＣＲ检测ＨＰ具有很高的敏感性和特异性〔２～５〕，而对Ｐ...     

聚合酶链反应与镜检法对疟区人群调查结果的比较

目的：比较聚合酶链反应（ＰＣＲ）法与镜检法用于疟疾流行区人群调查的效果。方法：参照文献合成恶性疟原虫（Ｐｆ）与间日疟原虫（Ｐｖ）各一对特异性引物，用５％ｃｈｅｌｅｘ－１００提取滤纸血滴的疟原虫ＤＮＡ，进行ＰＣＲ检测，血片用吉氏染色，油镜下查全厚血膜，结果：ＰＣＲ法与镜检法检出疟区居民阳性带虫经分别为１３．４９％与７．０５％显示ＰＣＲ法比镜检示可提高带虫率６．４４％，人：ＰＣＲ法比镜检法有更高的准确     

正确评价PCR临床诊断的结果

正确评价ＰＣＲ临床诊断的结果张胜亮，张耀铮（检验系临床生化教研室）近年来ＰＣＲ（聚合酶链反应）已广泛应用于医学检验中，从理论上讲，这种方法具有较高的灵敏度和特异性，但在临床应用中则易出现较高的假阳性、假阴性等问题。欧洲病毒性肝炎专家小组向欧、美、日３...     

PCR影响因素初探（一）Mg~（＋＋），dNTP等对PCR扩增结果的影响及控制方法

为进一步提高聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术的特异性和敏感性，本文探索了ＰＣＲ反应体系中ＤＮＴＰ，Ｍｇ~，引物及Ｔａｑ酶等对ＤＮＡ扩增结果的影响及控制方法。结果表明上述因素对扩增结只有重要影响作用。通过实验确定上述成分的最佳浓度及采用ＤＮＡ杂支技术或序列测定技术检测ＰＣＲ产物，不仅将有助于进一步提高此反应的特异性和敏感性，而且亦将有助于扩大ＰＣＲ技术的应用范围。     

慢性肾衰血透患者输血传播病毒感染分析

目的 观察输血传播病毒（ＴＴＶ）和肝炎病毒在慢性肾衰（ＰＣＦ）血液的透析（ＨＩ）患中的流行情况和感染相关因素。方法 应用巢式，一聚合酶链反应（Ｎｅｓｔ－ＰＣＲ方法和双轨体夹心ＥＬＩＳ分水岭列ＣＲＦ血透患和２０８例西安地区职业血员及１２８例对照组血清ＴＴＶ ＤＮＡ，ＨＢＶ五项，并分析ＴＴＶ与输血次数、ＨＤ时间、员冢及其与各型肝炎病毒感染的关系。结果 （１）９０例ＣＲＦ血透患和２０８例职业献血员     

一种实用的基因组DNA提取方法及其应用

一种实用的基因组ＤＮＡ提取方法及其应用林长坤姜莉张励金春莲孙开来（基础医学院医学遗传学教研室，沈阳１１０００１）关键词氯化钠饱和溶液；基因组ＤＮＡ；多聚酶链式反应；杜氏肌营养不良随着聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术的创建，已建立多种方法来制备ＰＣＲ模板ＤＮ...