中药饮片制川乌、制草乌中乌头碱、次乌头碱的HPLC测定

目的:建立一种测定中药饮片制川乌、制草乌中乌头碱、次乌头碱含量的高效液相色谱方法。方法:饮片粉碎成粗粉,用氨试液润湿,乙醚浸提14h,提取液挥弃乙醚,残渣以二氯甲烷溶解,定容至5mL,用0.01mol·L~(-1)H_2SO_4溶液1mL萃取等体积的二氯甲烷液,取水相进样20μL,以Kromasil C_(18)(250mm×4.6mm,5μm)为色谱柱,甲醇-水-氯仿-三乙胺(70:30:2:0.1)为流动相,检测波长230nm,柱温为室温。结果:乌头碱在9.63-96.26μg·mL~(-1),次乌头碱在24.2-242μg·mL~(-1)范围内,线性关系良好(进样量为20μL),方法加样回收率>96%,RSD<2%。结论:该方法准确,精密度高,分离效果好,操作简单。     

止痛擦剂中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱含量测定研究

目的 建立止痛擦剂中新鸟头碱、次乌头碱和乌头碱的含量测定方法.方法 采用HPLC法,色谱柱为Eclipse XDB-C18(250 mm×4.6 nm,5μm).以乙腈-四氢呋喃(25∶15)为流动相A,以0.1 mol·L-1醋酸铵溶液(每1000mL加冰醋酸0.5 mL)为流动相B,进行梯度洗脱.检测波长:235 ...     

高效液相色谱法测定草乌叶中新乌头碱、乌头碱和次乌头碱

目的 建立以高效液相色谱法同时测定蒙药草鸟叶中新乌头碱、乌头碱、次乌头碱的方法.方法 Extend-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.3 mol/L三乙胺(65:35),体积流量为0.8 mL/min,检测波长为235 nm,柱温为35℃.结果 经过方法学考察,本测定方法具有一定的专属性、准确性、重现性和可行性,新乌头碱、乌头碱、次乌头碱分别在1～5、0.35～1.75、0.5～2.5 μg呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为98.43%、98.98%、98.82%,RSD分别为1.38%、0.89%、1.03%.结论 本方法简便、准确、分离效果好、线性范围宽、灵敏度高,可用于本品的质量控制.     

高效液相色谱法在康复新胶囊中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱含量测定中的应用分析

目的:创建高效液相色谱法并对康复新胶囊中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱含量进行测定。方法:在氨水的基础上进行乙醚提取,利用OasisMCX固相萃取柱纯化提取液,分析柱是ZORBAX SB-C8(250mm×4.6mm,5μm),流动相是0.04mol·L-1三乙胺(磷酸调pH=3)-甲醇(50∶50),柱温是40℃,检测波长是235nm。结果:在0.002~1μg的范围里,新乌头碱、次乌头碱、乌头碱的线性关系相对较好,回收率超过90%,RSD在2%以下。结论:高效液相色谱法操作相对简便,准确率高,分离效果好,能有效测定康复新胶囊中新乌头碱、次乌头碱和乌头碱含量。     

HPLC梯度洗脱法同时测定活血镇痛膏中防己诺林碱、粉防己碱、新乌头碱、乌头碱和次乌头碱

摘 要 目的：建立同时测定活血镇痛膏中的防己诺林碱、粉防己碱、新乌头碱、乌头碱和次乌头碱含量的HPLC梯度洗脱法。 方法: 采用 Dikma C18色谱柱（200 mm×4.6 mm,5 μm）,以甲醇-乙腈（3∶1）（A）与0.06%二乙胺水溶液（B）为流动相,进行梯度洗脱,检测波长分别为280 nm（防己诺林碱和粉防己碱）、235 nm（新乌头碱、乌头碱和次乌头碱）,流速1.0 ml·min^-1,柱温30 ℃,进样量为10 μl。 结果: 防己诺林碱、粉防己碱、新乌头碱、乌头碱和次乌头碱5个成分的质量浓度分别在7.490～149.800、14.610～292.200、4.150～83.000、5.250～105.000、5.140～102.800 μg·mL^-1范围内呈良好线性关系,r分别为0.999 9,0.999 8,0.999 2,0.999 6,0.999 9;平均加样回收率（RSD）分别为99.87%（0.49%）,97.79%（1.11%）,96.97%（1.75%）,98.60%（1.50%）,97.94%（0.98%）（n=6）。结论:本文建立的HPLC梯度洗脱法能同时测定活血镇痛膏中的5个成分,该方法简便、稳定、可靠,可作为活血镇痛膏全面可靠的质量控制方法。     

HPLC测定伤科活血酊中次乌头碱的含量

目的　测定伤科活血酊中次乌头碱的含量。方法　采用HPLC法 ,以ZorbaxExtend -C18色谱柱 (5 μm ,4 .6mm× 2 5 0mm) ,流动相为甲醇 - 0 0 2 5mol·L-1磷酸二氢钾溶液 -乙腈 (6 0∶4 0∶2 2 ) (用三乙胺调pH 9 4 ) ,检测波长 2 32nm。结果　次乌头碱的浓度在 2 4 8～ 12 4 0 0 μg·ml-1范围内线性关系良好 (r =0 .9998) ,平均回收率 96 5 % ,方法精密度RSD =2 84 % (n =5 )。结论　所建方法准确、可靠 ,可用于该药品的质量控制。     

双向发酵对川乌指纹图谱及乌头碱类成分含量的影响

目的:观察川乌被19种药用真菌发酵后,乌头碱、新乌头碱、次乌头碱含量的变化及高效液相色谱(HPLC)指纹图谱的差异。方法:将川乌作为"药性基质",在一定的条件控制下,应用双向发酵技术,使其被槐耳、灵芝、红栓等19种药用真菌发酵,产生药材的"药性菌质",并采用反相高效液相色谱法对"药性菌质"和生药材中所含的乌头碱、新乌头碱和次乌头碱进行含量测定,比较其含量的变化及指纹图谱的差异。结果:在一定的时间范围内,大多数的菌株在川乌基质上的适应性良好,菌丝体生长旺盛,如代号A、C、D、E、F、M、Q、V、SW、い等真菌。发酵之后的川乌中乌头碱、新乌头碱及次乌头碱含量与生药材比较多数有明显的降低。结论:双向发酵后多数"药性菌质"中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱含量明显降低了,提示双向发酵是生物技术在中医药领域中应用的有益尝试。     

高效液相色谱法同时测定中药附子中乌头碱、中乌头碱和次乌头碱的含量

目的:探讨中药附子中乌头碱、中乌头碱和次乌头碱的高效液相色谱测定方法.方法:采用HypersilC18(4.6mm×250mm,5.0μm),以甲醇:0.05%磷酸溶液(三乙胺溶液调节pH值6.2)=60:40,检测波长为252nm,柱温为35℃,流速为0.8mL/min.结果:乌头碱回归方程为Y=1.285×103+0.324×102(r=0.9997),在0.261~1.559μg范围内呈较好的线性关系;中乌头碱回归方程为Y=3.354×103+0.015×102(r=0.9996),在0.526~2.031μg范围内线性关系良好;次乌头碱线性回归方程为Y=1.329×103-0.426×102(r=0.9999),在0.152~1.352μg范围内线性关系良好.结论:高效液相色谱法对中药附子中3种有效成分进行测定,方法简单易行,重现性好,精密度高,可作为附子质量控制的方法.     

反相高效液相色谱法同时测定乌头不同部位中新乌头碱和乌头碱含量

目的建立RP-HPLC同时测定中药乌头不同部位中新乌头碱和乌头碱的含量。方法采用Kromasil C18柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,以40 mmol乙酸铵缓冲液-乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL.min-1,检测波长230 nm,柱温30℃。结果新乌头碱、乌头碱分别在2.61～15.66μg、0.26～1.56μg呈良好的线性关系,加样回收率分别为100.4%（RSD=1.2%）,98.9%（RSD=0.71%）。结论该方法简便、准确,分离效果好,可用于附子中酯型生物碱的定量分析。     

RP-HPLC同时测定附子地上部分中新乌头碱和次乌头碱的含量

目的 建立RP-HPLC法,测定附子地上部分中新乌头碱和次乌头碱的含量.方法 采用Venusil ABS C18色谱柱(250 mm × 4.6 mm,5 μm),以乙腈-0.1% 乙二胺溶液为流动相,梯度洗脱,柱温30 ℃,流速 1 ml·min-1,检测波长230 nm.结果 新乌头碱、次乌头碱均得到较好分离,分别...     

液-质联用法同时测定大鼠血浆中的乌头碱、新乌头碱、次乌头碱及其药动学

目的:建立HPLC-MS分析方法同时测定大鼠血浆中的乌头碱、新乌头碱、次乌头碱含量,并用于研究大鼠口服附子煎液后乌头碱、新乌头碱、次乌头碱的药动学。方法:血浆经氨水碱化后用醋酸乙酯进行液-液萃取。色谱柱为Alltima C18柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-10mmol.L-1醋酸铵水溶液(75∶25)。质谱检测方式为选择性离子监测,选择监测的离子为m/z646.45(乌头碱),m/z632.38(新乌头碱),m/z615.64(次乌头碱)和m/z336.60(盐酸小檗碱,内标)。结果:血浆中乌头碱在0.05~5μg.L-1、新乌头碱在0.5~50μg.L-1、次乌头碱在2.5~250μg.L-1范围内线性关系良好,定量限为0.05μg.L-1,血浆中的平均提取回收率高于90%,批内和批间精密度均小于15%。结论:本法灵敏、可靠、简便,适用于乌头碱、新乌头碱、次乌头碱的药动学研究。     

Development and validation of a highly sensitive UPLC-MS/MS method for simultaneous determination of aconitine,mesaconitine, hypaconitine,and five of their metabolites in rat blood and its application to a pharmacokinetics study of aconitine,mesaconitine, and hypaconitine

1. A rapid, specific and sensitive method was developed for the simultaneous determination of eight Aconitum alkaloids: aconitine (AC), mesaconitine (MA), hypaconitine (HA), benzoylaconine (BAC), benzoylmesaconine (BMA), benzoylhypaconine (BHA), aconine and mesaconine in rat blood by ultra-performance liquid chromatography coupled tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS).

2. The UPLC-MS/MS system coupled with an electrospray ionization (ESI) source was operated in a positive mode via multiple-reaction monitoring (MRM). Samples were treated with methanol to remove protein prior to analysis by UPLC-MS/MS. The analytes were separated with a Waters C18 column (1.7 µm, 50?×?2.1?mm) and a gradient elution using acetonitrile and 0.1% formic acid-water as the mobile phases.

3. The linear response range was from 0.125 to 1000 nmol/L for these eight alkaloids and the correlation coefficients (r² values) were all higher than 0.997. The method was validated with respect to precision, accuracy, recovery, matrix effect, carryover effect and sample stability, and found to be within the acceptable limits.

4. The developed and validated method was successfully applied to simultaneously determine the eight Aconitum alkaloids in rats blood after intravenous administration of a mixture of AC, MA and HA.

     

Development and validation of a highly sensitive UPLC-MS/MS method for simultaneous determination of aconitine, mesaconitine, hypaconitine, and five of their metabolites in rat blood and its application to a pharmacokinetics study of aconitine, mesaconitine, and hypaconitine

A rapid, specific and sensitive method was developed for the simultaneous determination of eight Aconitum alkaloids: aconitine (AC), mesaconitine (MA), hypaconitine (HA), benzoylaconine (BAC), benzoylmesaconine (BMA), benzoylhypaconine (BHA), aconine and mesaconine in rat blood by ultra-performance liquid chromatography coupled tandem mass spectrometry (UPLC-MS/MS). The UPLC-MS/MS system coupled with an electrospray ionization (ESI) source was operated in a positive mode via multiple-reaction monitoring (MRM). Samples were treated with methanol to remove protein prior to analysis by UPLC-MS/MS. The analytes were separated with a Waters C18 column (1.7 μm, 50?×?2.1?mm) and a gradient elution using acetonitrile and 0.1% formic acid-water as the mobile phases. The linear response range was from 0.125 to 1000 nmol/L for these eight alkaloids and the correlation coefficients (r(2) values) were all higher than 0.997. The method was validated with respect to precision, accuracy, recovery, matrix effect, carryover effect and sample stability, and found to be within the acceptable limits. The developed and validated method was successfully applied to simultaneously determine the eight Aconitum alkaloids in rats blood after intravenous administration of a mixture of AC, MA and HA.     

高效液相色谱法测定心痛灵颗粒中次乌头碱含量

目的：建立高效液相色谱法测定心痛灵颗粒中次乌头碱的含量。方法：采用高效液相色谱法,色谱柱Agilent Extent—C18柱（250nm×4．6nm,5μm）,流动相为乙腈：0．05％二乙胺水（40：60）,波长240nm。结果：次乌头碱浓度O．009-0．144mg/ml呈良好的线性关系,平均回收率为96．16％,相对标准偏差为2．07％。结论：该方法准确、灵敏、重复性好,可用于心痛灵颗粒的质量控制。     

高效液相色谱法测定肤得乐凝胶剂中次乌头碱的含量

目的 建立肤得乐凝胶剂中次乌头碱的含量测定方法。方法 采用高效液相色谱法测定次乌头碱的含量，色谱柱为ODS柱；流动相为甲醇-0．1％三乙胺（80：20）；检测波长230nm。结果 次乌头碱在0．224～1．12μg范围内呈良好的线性关系，加样平均回收率为98．34％，RSD为2．30％。结论 本法简单，快速，结果准确，可作为该制剂的质量控制方法。     

RP-HPLC测定附片中的总酯型生物碱

目的 采用HPLC法测定附片中总酯型生物碱的含量.方法 采用Phenomenex Luna C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05.moL·L-1磷酸二氢钾-醋酸-异丙醇(67:173:4:4),流速1.0 mL·min-1,检测波长230 nm,柱温35℃.结果 苯甲酸0.016-0.080μg与峰面积的线性关系良好,平均回收率为97.6%,RSD=0.9%(n=5).结论 所建方法操作简便,结果可靠,可为附片中总酯型生物碱的含量测定提供参考方法.     

高效液相色谱法测定家兔血浆中的乌头碱浓度

目的建立家兔血浆中乌头碱浓度的高效液相色谱（HPLC）测定方法。方法采用Symmetry shield RP18（5μm,4.6×250mm）色谱柱,以乙腈-0.1%甲酸（68∶32）为流动相,流速为0.8mL.min-1,检测波长为235nm。结果乌头碱在0.05～8μg.mL-1范围内成良好的线性关系（r2=0.999）。样品的回收率在95%～108%,日内和日间RSD均小于5%。结论本方法准确、灵敏、简便,适用于家兔血浆中乌头碱含量的测定分析。