肾脏谷胱甘肽代谢系统及其毒理学意义

谷胱甘肽 (GSH)主要在肝脏合成 ,经肠肝和肾肝循环运送到肾脏 ,经肾小球滤过后 ,可被位于肾小管细胞刷状缘的降解酶水解为氨基酸 ,重吸收后再合成GSH ,但主要是在肾小管细胞基底膜侧经载体介导以完整的三肽形式吸收。在细胞内有两个重要的GSH池 ,一个是细胞浆 ,一个是线粒体 ,线粒体不能合成GSH ,细胞浆GSH通过线粒体内膜的有机阴离子载体转运到线粒体内 ,在保护细胞免受氧化损伤中起重要作用。肾近曲小管细胞和远曲小管细胞对氧化损伤的敏感性不同 ,与细胞内GSH的含量不同和线粒体内膜的阴离子载体对GSH的转运能力的不同有关。GSH代谢系统具有解毒和活化的双重毒理学意义     

铅中毒性肾病国内研究进展

铅主要损害人体的神经、造血及消化系统,肾亦为铅作用的靶器官。经呼吸道、消化道进入人体内的铅,分布于肝、肾、脾、肺、脑中,其中以肝、肾含量最高,最后较稳定地沉积于骨内。肾是机体排泄代谢产物的主要器官,进入体内的铅主要经肾及肠道排泄。铅在肾的亚细胞分布顺序为:基质>线粒体>微粒体>核。肾近曲小管含有丰富的线粒体,因此,铅对肾小管的     

谷胱甘肽作为脂质过氧化损伤指标的研究

谷胱甘肽（GSH）是广泛存在于细胞内的小分子三肽化合物,它参与细胞内氨基酸转运、糖代谢和DNA合成调节,在拍抗外源性毒物。氧自由基损伤。调节税体免疫功能、维持细胞蛋白质结构和功能、抑制细胞凋亡等方面发挥着住要作用[1]。多年来,人们试图根据GSH被氧化还原的程度失评估氧自由基脂质过氧化损伤,并取得了不少进展;一、谷眈甘肽的一般生理特性GSH由谷氨酸、半眈氨酸和甘氨酸组成,是细胞内呈液态、含流基最为丰富的一类化合物,半脱氨酸a氨基＿k的一SH为该分子化合物活性中心。GSH在不问脏器浓度不同,以肝内最高,依次为脾…     

应用铈细胞化学方法镉诱发氧自由基对肾脏的损伤

目的 研究镉及其诱发的氧自由基对肾脏的急性损伤。方法 应用民镜细胞化学及能量色散谱分析技术。结果 镉离子可进入到肾近曲小管上皮细胞内,肾组织内有氧自由基的过量 产生,基 于血管内皮细胞,肾近曲小管上皮细胞的线粒体,微绒毛及其底膜等部位。肾近曲小管上皮细胞及细粒体可发生肿胀及内皮细胞脱落等病变。结论 镉离可导致氧自由基的大量形成,从面对肾脏造损伤。     

应用铈细胞化学方法观察镉诱发氧自由基对肾脏的损伤

目的研究镉及其诱发的氧自由基对肾脏的急性损伤。方法应用电镜细胞化学及能量色散谱分析技术。结果镉离子可进入到肾近曲小管上皮细胞内。肾组织内有氧自由基的过量产生，其主要位于血管内皮细胞，肾近曲小管上皮细胞的线粒体，微绒毛及基底膜等部位。肾近曲小管上皮细胞及线粒体可发生肿胀及内皮细胞脱落等病变。结论镉离子可导致氧自由基的大量形成，从而对肾脏造成损伤。     

窒息后新生儿心肌线粒体的损伤

新生儿窒息缺氧对心肌线粒体的损伤在心脏损害的过程中起着重要的作用。心肌线粒体是产生内源性自由基的主要场所，氧自由基攻击导致膜流动性下降，影响线粒体功能和膜内酶活性。心肌细胞缺血缺氧时细胞内钙超载继发线粒体钙超载，使线粒体内膜钙离子依赖小孔开放，线粒体心肌细胞缺血缺氧时细胞内钙超载继发线粒体钙超载，使线粒体内膜钙离子依赖小孔开放，线粒体膜电位降低和氧化磷酸化脱偶联。缺氧缺血时心肌线粒体内一氧化氮活酶（NOS）类似物活性增强，NO产生增多，抑制线粒体呼吸链复合物活性和正常电子流，增加超氧阴离子的形成，导致心肌线粒体NO产生增多，抑制线粒体呼吸逻复合活性和正常电子流，增加超氧阴离子的形成，导致心肌线粒体呼吸链功能受损，最终使ATP合成受阻，心肌能量供应不足，出现窒息新生儿心脏损害的临床表现。     

尿N—乙酰—β—D—氨基葡萄糖苷酶对诊断汞镉铅肾损害的意义

汞,镉,铅等重金属都对肾脏有毒性作用,主要影响肾近曲小管,但临床表现潜隐,早期不易发现.尿醇是新近发展起来的反映肾小管上皮细胞损伤的敏感指标.N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)是存在于细胞溶酶体中的一种糖苷水解酶,体内以肾脏含量最丰富,在肾内又以肾近曲小管含量最多.肾近曲小管上皮细胞损伤时,尿中NAG 活性迅速增加,可比较灵敏地反映肾小管上皮细胞的损伤.本实验目的在于研究尿NAG 对汞、镉、铅所致肾脏损伤的诊断意义.     

镉对肾小管上皮细胞钙黏蛋白的影响

目的 探讨镉对原代培养的肾小管上皮细胞毒作用的早期环节。方法 采用筛网分离法分离Wistar大鼠肾小管上皮细胞;分别用10、20和50μmol/L的CdCl2溶液培养细胞0、1、2和4h,测定细胞活力、细胞内ALP活性、GSH含量、细胞外液LDH活性及上皮细胞钙黏蛋白（E-cadherin）表达。结果 不同浓度的CdCl2作用培养细胞后,可造成细胞内ALP活性下降,并表现出明显的剂量-反应关系和时间-反应关系;50μmol/L CdCl2作用细胞2h时,细胞外液LDH活性已明显高于对照组;4h时细胞内GSH含量与对照组比较显著下降;而10 μmol/L的CdCl2作用细胞2h,即可使肾小管上皮细胞钙黏蛋白在胞浆表达减少。结论 在肾小管上皮细胞没有发生氧化损伤时,Cd^2＋就可干扰肾小管上皮细胞钙黏蛋白依赖的黏附连接;镉对肾小管上皮细胞钙黏蛋白依赖的黏附连接的损伤可能是镉毒性的最早表现之一。     

窒息后新生儿心肌线粒体的损伤

新生儿窒息缺氧对心肌线粒体的损伤在心脏损害的过程中起着重要的作用。心肌线粒体是产生内源性自由基的主要场所 ,氧自由基攻击导致膜流动性下降 ,影响线粒体功能和膜内酶活性。心肌细胞缺血缺氧时细胞内钙超载继发线粒体钙超载 ,使线粒体内膜钙离子依赖小孔开放 ,线粒体膜电位降低和氧化磷酸化脱偶联。缺氧缺血时心肌线粒体内一氧化氮活酶 (NOS)类似物活性增强 ,NO产生增多 ,抑制线粒体呼吸链复合物活性和正常电子流 ,增加超氧阴离子的形成 ,导致心肌线粒体呼吸链功能受损 ,最终使ATP合成受阻 ,心肌能量供应不足 ,出现窒息新生儿心脏损害的临床表现。     

镉在大鼠肝亚细胞颗粒中的形式

镉摄入后主要蓄积在肝和肾。大部分蓄积镉集中在细胞浆的可溶部分并同金属硫蛋白相结合,仅少量分布在线粒体和溶酶体内。然而给大鼠饮含CdCl_2的水,用电镜可观察到肾近曲小管细胞线粒体肿胀及溶酶体增加。大鼠喂以含CdCl_2的食物,肝线粒体呼吸控制受抑。这些变化究竟是溶酶体金属硫蛋白降解释放镉离子或由镉硫蛋白所引起有待研究。本文研究了镉在肝线粒体和溶酶体内的形式。     

纳米硫化镉对人肾小管上皮细胞氧化损伤的影响

目的探讨纳米硫化镉(n Cd S)对人肾小管上皮细胞(HKC)氧化损伤的影响及其机制。方法首先应用噻唑蓝(MTT)实验观察暴露于生理盐水(对照组)和不同剂量浓度纳米Cd S(处理组)处于对数生长期的人肾小管波细胞(HKC)存活率的影响。检测细胞内的丙二醛上(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物还原酶(GSH-Px)和超氧化歧化酶(SOD)含量,并采用蛋白质印迹法观察纳米Cd S对细胞的NF-κB蛋白的表达情况。结果随着n Cd S对HKC细胞染毒剂量的增加,细胞存活率逐渐降低(P0.05);细胞内GSH、GSH-Px和SOD含量显著降低(P0.05),MDA、NF-κB蛋白表达量逐渐升高(P0.05)。结论 n Cd S可能通过影响HKC内MDA、GSH、GSH-Px、SOD产生和NF-κB蛋白表达,从而导致HKC抗氧化系统的损伤而发挥氧化损伤作用。     

康丽亭与心血管疾病的保健

L－Carnitine（三羟—4氮—三甲基胺丁酸），是一种具备多种生理功能的化合物，主要存在于心肌、骨骼肌和肝、肾等处，其最基本的功能是作为载体，运载长链脂肪酸通过线粒体内膜，进入线粒体基质进行p氧化产生能量（ATP）。在人类，康丽亭由蛋氨酸、赖氨酸在肝、肾、脑合成，其合成前体为6N—三甲基赖氨酸为供体，在一系列肝酶作用下，辅以抗坏血酸，毗多辛、烟酸、铁等参与合成。康丽乎也存在于动物食品和乳制品（特别是肉类）中，而蔬菜、谷类和水果极微或无，已能在肠腔中主动吸收。人体每天康丽亭的需要量尚不清楚，已知体内每天合成…     

甲醛吸入对小鼠不同组织器官谷胱苷肽水平的影响

目的　探讨经不同浓度甲醛吸入对小鼠不同组织器官的氧化损伤作用及其分子机理。方法　用 1m g/ m3和 3m g/ m3的甲醛气体对小鼠进行染毒处理 ,测定吸入甲醛后 5种器官 (脑、心、肝、肺、肾 )的谷胱苷肽 (GSH)含量。结果　吸入 1mg/ m3甲醛的小鼠 ,心、肺、肝、肾的 GSH含量明显下降 (P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,其中心最为严重 ;吸入 3mg/ m3甲醛的小鼠 ,所试全部器官的 GSH水平均显著下降 (P<0 .0 0 1,P<0 .0 1,P<0 .0 5 ) ,脑、心、肾最为严重 ,肺次之 ,肝较轻。结论　气态甲醛对机体的各组织器官均有氧化损伤作用 ,是一种全身性毒物。     

BSO抑制GSH的合成对小鼠睾丸支持细胞排铅能力的影响

目的 探讨使用丁硫氨酸-亚砜胺(L-Buthionine-sulfoximine,BSO)抑制谷胱甘肽(glutathione,GSH)合成对小鼠睾丸支持(TM4)细胞排铅能力的影响.方法 体外培养小鼠TM4细胞株,选择对数生长期细胞暴露于浓度为20μmol/L乙酸铅(PbAC)溶液24h,用GSH合成抑制剂BSO抑制GSH合成,观察低GSH水平下TM4细胞排铅能力变化.采用还原型GSH试剂盒检测各试验组细胞内还原型GSH浓度;采用原子吸收分光光度法检测各排铅时间点(脱离铅环境后第0、1、3、6、9、12 h)细胞内铅残留量,并计算铅相对残留量,以检测细胞排铅能力.结果 GSH检测结果显示,BSO组细胞内GSH水平明显低于对照组,BSO(25)组与溶剂对照组比较差异有统计学意义(P=0.000),PbAc (20)+BSO (25)组与PbAc(20)组比较差异有统计学意义(P=0.001);排铅试验结果显示,在同一排铅时间点,BSO组与对照组细胞内铅相对残留量不同,BSO组在排铅时间点第1、3、6、9、12 h铅相对残留量均高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 BSO能抑制TM4细胞合成GSH,细胞内GSH含量不足会降低细胞内重金属铅的外排转运.     

线粒体与氧化损伤

线粒体不仅是细胞内物质和能量代谢的主要细胞器,也参与调控细胞内氧化还原水平。文章基于近期研究总结了细胞内各种氧化损伤,以及线粒体与这些氧化损伤的关系。     

α-亚麻酸对高糖损伤LLC-PK_1细胞的保护作用及其机制探讨

目的建立猪肾近曲小管上皮细胞(LLC-PK1)的高糖损伤模型,观察α-亚麻酸(ALA)对高糖损伤LLC-PK1细胞的保护作用并探讨其作用机制。方法 CCK-8试剂盒测定葡萄糖对LLC-PK1细胞增殖的影响,流式细胞术测定不同浓度ALA干预高糖损伤LLC-PK1的凋亡率和活性氧(ROS)含量。结果高糖环境可以抑制体外培养的LLC-PK1细胞的增殖,形成体外高糖损伤模型;经适当浓度(50～100μmol/L)的ALA干预后,前干预组和持续干预组细胞的凋亡率显著低于阳性对照组(P<0.05);当ALA浓度为10～100μmol/L时,持续干预组LLC-PK1细胞内ROS含量显著低于阳性对照组(P<0.05),当ALA浓度为50μmol/L时,前干预组LLC-PK1细胞内ROS含量显著低于阳性对照组(P<0.05)。结论高糖损伤LLC-PK1模型为研究DN肾小管上皮细胞的防治干预提供了良好的体外研究平台,ALA有望成为预防肾小管高糖损伤的保护剂,减少活性氧的产生可能是ALA保护肾小管上皮细胞的作用机制之一。     

二氧化硫对大鼠肝线粒体的损伤作用

二氧化硫 (SO2 )是一种常见的大气污染物 ,主要通过人和动物的呼吸系统进入机体 ,并以SO2 -3 和HSO-3 形态随血液分布全身而发挥生物学作用。SO2 吸入可引起小鼠各种组织器官的氧化损伤作用[1] ,但有关SO2 对亚细胞组分的影响尚未见报道。在真核生物中线粒体是进行氧化磷酸化的细胞器 ,是细胞内能量供应的场所 ,同时线粒体的氧化磷酸化极易产生自由基 ,是自由基产生的主要途径[2 ] 。我们以大鼠肝线粒体为材料 ,研究SO2 吸入后大鼠肝线粒体及SO2 体内衍生物亚硫酸盐对分离线粒体损伤的影响 ,从亚细胞水平来阐明SO2 的毒作用机制。一…     

甘草甜素和齐墩果酸对镉中毒肾损害的影响

目的 观察甘草甜素（GL）和齐墩果酸（OA）对大鼠亚慢性镉中毒性肾损害组织病理形态的影响。方法中光镜、电镜下观察CdCl2组、CdCl2＋GL组、CdCl2＋OA组大鼠肾组织内肾小球、肾近曲小管的病理改变。结果 光镜下，CdCl2＋GL组、CdCl2＋OA组大鼠肾小球充血、肿胀、纤维化、肾近曲小管上皮细胞肿胀的程度较CdCl2组明显减轻，范围有所缩小。超微结构观察示药物共处理组肾小球内组分、肾近曲小管细胞内线粒体等亚细胞组分的病变显轻于CdCl2组。结论 GL、OA对大鼠亚慢性CdCl2中毒性肾损伤的病理形态损伤有改善作用。     

冬虫夏草提取液对糖尿病小鼠肝线粒体氧化磷酸化功能保护作用

[目的]用四氧嘧啶(Alloxan)建立实验性糖尿病小鼠模型,并同时用冬虫夏草提取液进行保护,探讨冬虫夏草提取液对糖尿病小鼠肝线粒体氧化磷酸化功能的保护作用.[方法]从线粒体水平测定:①以琥珀酸(S)为底物的呼吸控制:态3呼吸速率(R3)、态4呼吸速率(R4)、呼吸控制比(RCR)和磷/氧比(P/O);②H+-ATPase合成活力;③测定O2·-的生成量;④SOD活性及GSH含量. [结果]糖尿糖小鼠ATP合酶活性显著降低45.99%;O2·-含量增加35.8%;线粒体呼吸链RCR、P/O显著降低(P<0.01),State4显著增高(P<0.01);线粒体SOD活性,GSH含量显著降低,P<0.001,用虫草提取液进行保护,各项指标均有显著恢复. [结论]证明实验性糖屎病小鼠肝功能损伤是氧化性损伤,氧化应激又是该损伤的结果,其原因与电子漏增加为主,从而导致质子漏增加,自由基生成量增多,ATP合酶活性下降,无效耗氧增加、线粒体受损;同时也证明了虫草提取液能有效的拮抗由糖尿病引起的肝线粒 .'体的氧化损伤.     

顺铂对ERCC1在293细胞中表达的影响

顺铂所致肾损害的主要部位是外髓外侧带的Ｓ3段近端肾小管。顺铂在近端肾小管上皮细胞内的浓度是血浆中的 5倍 ;在细胞内 ,胞浆、线粒体、细胞核、微粒体内均可见到高浓度的顺铂〔1〕。Ｐｏｉｒｉｅｒ等的研究表明 ,接受顺铂治疗的病人以及实验动物 ,在给予顺铂后 ,肿瘤组织、骨髓、肾脏、肝脏、脾脏、淋巴结、外周神经和脑内都有Ｐｔ-ＤＮＡ加合物的广泛形成〔2〕;Ｂｅｒｇｓｔｒｏｍ等发现Ｐｔ -ＤＮＡ加合物水平与顺铂肾毒性相关〔3〕。说明肾小管细胞内Ｐｔ-ＤＮＡ加合物的形成 ,在肾毒性中可能起重要作用。本研究通过在肾细胞中过表达…