入肝门静脉动脉化对大鼠肝脏损害的初步研究

目的：初步研究入肝门静脉完全动脉化加门腔分流术对大鼠肝脏的损害程度。方法100只肝硬化造模大鼠随机分为A组（n=40）,入肝门静脉完全动脉化（PVA）＋门腔分流（PCS）;B组（n=40）,仅行门腔完全分流;C组（n=20）,门静脉阻断30 min＋右肾切除。分别将各组大鼠术前和术后1、2、4、8周的肝组织切片行肝细胞诱导型一氧化氮合成酶（iNOS）免疫组织化学染色,然后进行图像分析。各取8只正常大鼠,分别于PVA术前及术后4、8周行肝组织切片,马松染色后分析正常大鼠PVA手术前后肝脏纤维增生情况。结果（1）A组2只（5%）大鼠肝脏切片中常规HE染色可见汇管区明显扩张,小叶间静脉内径显著扩张,静脉壁增厚明显,壁内可见红染的纤维增生。（2）大鼠刚完成肝硬化造模时,肝细胞胞质的iNOS表达至峰值,3组平均IOD达600583±32828;3组大鼠术后均较术前有明显下降,差异有统计学意义（P＜0.01）;术后4周内, A组仍明显高于B、C两组,差异有统计学意义（P＜0.01）;至术后8周时,3组iNOS表达差异无统计学意义。（3）正常大鼠肝间质胶原纤维染色在术前及术后4、8周的总累积光密度值差异无统计学意义。结论术后8周内,PVA不会导致正常大鼠肝间质纤维化增加,可使部分肝硬化大鼠汇管区及小叶间静脉壁纤维化;PVA对肝细胞的损害主要集中在术后4周内,待肝脏对新的血流动力学改变及其相应的影响达到稳态后,PVA对肝脏的损害则不明显。     

兔肝匀浆诱导免疫性大鼠肝纤维化模型的建立

目的 建立一种新的免疫损伤性大鼠肝纤维化模型的制作方法.方法 将Wistar大鼠,雌性,随机分为正常对照组(8只),人血白蛋白肝纤维化模型组(15只),兔肝匀浆肝纤维化模型组(15只).免疫攻击8周后处死大鼠,取血清检测肝功能生化指标、肝组织羟脯氨酸;评价病理学分级.结果 与正常对照组比较,兔肝匀浆组大鼠肝脏重量显著增...     

骨髓间充质干细胞定向分化肝细胞及肝内移植研究

目的 观察体外诱导骨髓问充质干细胞分化及肝纤维化形成环境中移植情况。方法 首先行骨髓间充质干细胞提取、分离和培养，加入肝细胞生长因子（HGF，20μg／L）和表皮生长因子（EGF，1．5mg／L）诱导定向分化。肝纤维化形成的大鼠随机分成2组，每组10只。使用5-溴脱氧尿苷（BrdU）标记诱导的骨髓间充质干细胞，经门静脉向肝纤维化形成的SD大鼠肝脏移植，对照组用BrdU标记未经诱导的骨髓间充质干细胞。2周后通过免疫组织化学方法检测大鼠肝脏标记细胞的分布及BrdU^＋／ALB^＋细胞数量。结果 体外诱导骨髓间充质干细胞定向分化的细胞CK8及ALB表达阳性。移植2周后大鼠肝脏均可检测到BrdU标记细胞，与对照组相比诱导后骨髓问充质干细胞组BrdU^＋／ALB^＋细胞数较多，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论 经体外诱导骨髓间充质干细胞能分化为肝细胞，移植在大鼠肝纤维化形成环境中，白蛋白表达细胞数更多。     

氧化低密度脂蛋白在慢性梗阻性黄疸大鼠肝脏中的表达与意义

目的 探讨氧化低密度脂蛋白在慢性梗阻性黄疸大鼠中的表达与肝脏纤维化的关系.方法 60只SD大鼠被随机分成对照组（A组）和慢性梗阻性黄疸组（B组）两组,每组每时段6只.分别于造模后第1、2、3、4、5周抽取大鼠静脉血检查肝功能,显微镜目镜刻度下测量大鼠胆总管直径,免疫荧光法检测氧化低密度脂蛋白在肝脏的表达,放射免疫法检测肝纤维化三项,光学显微镜观察肝组织的病理改变.第4周行胆总管十二指肠吻合再通.结果 慢性梗阻性黄疸组大鼠术后总胆红素升高,胆总管直径扩张,组织病理学检查显示肝细胞变性,并有纤维增生性改变.与对照组比较,慢性梗阻性黄疸组肝组织氧化低密度脂蛋白的表达增强,肝纤维化三项术后第3周起明显升高.胆总管与十二指肠端侧吻合再通后黄疸缓慢消退.术后第3周氧化低密度脂蛋白的表达及肝纤维化三项差异有统计学意义（P 〈 0.05）.结论 慢性梗阻性黄疸大鼠肝组织氧化低密度脂蛋白的表达增强,与肝脏的纤维化的程度相关.     

选择性、非选择性NOS抑制剂及L-精氨酸对创伤性休克大鼠的影响

目的探讨一氧化氮合酶（NOS）抑制剂及L-精氨酸（L Arg）对创伤性休克大鼠的治疗作用。 方法建立创伤性休克大鼠模型，随机分为对照组、左旋硝基精氨酸甲酯（L NAME）处理组、氨基胍（AG）处理组及L-精氨酸（L Arg）处理组，分别于复苏后1，4，7h检测血清一氧化氮（NO）浓度，复苏后1h检测骨骼肌、肝脏、小肠的组织氧分压，监测血液动力学变化并记录存活时间。 结果与对照组相比，L NAME可显著降低血清NO浓度，而对组织氧分压及12，24h存活率无显著影响；AG仅在休克后期使NO浓度明显降低，而对早期NO的合成与释放无显著作用，AG可提高肝脏、小肠的组织氧分压，提高休克模型12h存活率；应用L Arg可显著提高血清NO浓度，并可明显改善肝脏、小肠的组织氧分压，显著提高12，24h存活率。 结论选择性NOS抑制剂AG及L Arg更能改善创伤性休克动物模型的预后。     

谷氨酰胺和精氨酸对荷瘤大鼠肿瘤生长的影响

本研究旨在探讨谷氨酰胺 (Gln)、精氨酸 (Arg)及联合应用Gln和Arg对肿瘤生长的影响。一、材料与方法1.荷瘤大鼠动物模型的制备 :SD大鼠 40只 ,体重 ( 2 0 0± 2 5 )g。于大鼠右后肢跟部皮下接种 0 .1ml含 10 7个 /ml的Walker 2 5 6癌肉瘤细胞悬液。2 .动物分组及处理 :肿瘤接种第 6天 ,大鼠随机分为 4组 :A组 (对照组 )每日腹腔注射 1.5ml生理盐水 ;B组 (Ala Gln组 )腹腔注射 1.5mlAla Gln(每日0 .4g/kg体重 ) ,Ala Gln用费森尤斯公司产品力肽 ;C组 (Arg组 )腹腔注射 1.5mlArg(每日 1.0g/kg体重 ) ;D组 (Ala Gln+Arg组 )腹腔注射 1…     

大鼠肝缺血／再灌注后肝组织一氧化氮和不同亚型一氧化氮合酶的变化

目的探讨一氧化氮（NO）和一氧化氮合成酶（NOS）在肝缺血／再灌注（I／R）过程中的变化和作用。方法健康雄性SD大鼠24只，随机分为3组（每组8只）：①正常对照组，术中只分离肝周围韧带，不做肝门阻断及再灌注。②I/R组，进行45min的部分肝门阻断及60min的再灌注。③L-精氨酸（L—Arg）组，缺血前20min经阴茎背静脉注射L—Arg（300mg／kg），余同②组。实验结束后，取下腔静脉血2ml，并迅速切取缺血肝组织。检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、门冬氨酸转氨酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）；测定肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、黄嘌呤氧化酶（XOD）、一氧化氮（NO）和一氧化氯合成酶（NOS）等指标；观察光镜和电镜下肝组织学变化。结果与正常对照组相比，I／R组iNOS升高，NO降低；L-Arg组NO、eNOS均高于I／R组。2、3组比1组大鼠的肝组织病理损害重、肝功能差，L—Arg组病理损害较I／R组明显减轻、肝功能改善。结论NO对大鼠肝I／R损伤具有保护作用．不同亚型NOS的变化参与其中。     

肝纤维化兔最低肺泡有效浓度

背景七氟醚广泛应用于外科手术患者,其可能会影响肝功能和肝血流。然而,肝纤维化对七氟醚最低肺泡有效浓度（minimum alveolar concentration,MAC）的影响仍不清楚。因此我们设计了这个研究,以测定肝纤维化兔的MAC。方法30只雄性新西兰白兔,体重约2．5kg,随机分为两组：肝纤维化组（n=20）和正常对照组（n=10）。肝纤维化组兔用50％的四氯化碳处理12周,以诱导肝纤维化。麻醉前测定血清总蛋白、白蛋白、球蛋白、总胆汁酸、丙氨酸氨基转移酶、门冬氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶、总胆红素、直接胆红素和间接胆红素浓度。两组麻醉诱导和维持均用七氟醚。实验中运用标准的钳尾技术来测定兔自主呼吸时的七氟醚MAC。麻醉后处死兔子,取出肝脏做病理检查。结果肝纤维化组经过12周四氯化碳处理后,20只兔子中有14只存活;对照组10只兔子有9只存活。肝纤维化组存活的14只兔子均发展为中至重度的肝纤维化。其中14只兔子中有3只兔子由于其他疾病或对疼痛刺激无反应而被排除。与对照组相比,肝纤维化组的球蛋白、门冬氨酸氨基转移酶和γ-谷氨酰转肽酶的水平显著增高。然而,白蛋白和碱性磷酸酶的水平明显低于对照组。七氟醚麻醉期间,两组动物平均动脉血压、心率、呼气末二氧化碳和温度均稳定。肝纤维化组的七氟醚MAC显著低于对照组（3．52％和4．10％,P=0．018）。结论肝纤维化兔的七氟醚MAC显著降低。     

干预肾素- 血管紧张素- 醛固酮系统不同环节对肝纤维化大鼠肿瘤坏死因子-α 的影响

目的 探究干预RAAS系统的不同环节对大鼠肝组织中肿瘤坏死因子-α的影响。方法 选取50 只SD大鼠，随机分为对照组、模型组以及3个治疗组（卡托普利组、氯沙坦组、螺内酯组），每组10只。 对照组腹壁皮下注射橄榄油，其余组别的大鼠给予40% CCL4腹壁皮下注射；第2天开始，3个治疗组分别 给予卡托普利60 mg/kg、氯沙坦10 mg/kg、螺内酯100 mg/kg治疗，模型组与对照组给予等量的生理盐水， 1次/d，第8周处死，取材后，通过Real Time-PCR检测大鼠肝组织肿瘤坏死因子-αmRNA表达；病理染 色，观察大鼠肝组织的病理学改变。结果 3个治疗组的肝纤维面积比较，差异有统计学意义（P ＜0.05）； 3个治疗组大鼠的肝纤维面积与模型组比较，差异有统计学意义（P ＜0.05）；对照组、3个治疗组的大鼠 肝纤维面积均低于模型组，差异有统计学意义（P ＜0.05）；3个治疗组肝组织中TNF-α mRNA的表达比 较，差异无统计学意义（P ＞0.05）；3个治疗组肝脏组织中TNF-α mRNA的表达低于模型组，差异有统 计学意义（P ＜0.05）；模型组、3个治疗组肝脏组织TNF-α mRNA的表达高于对照组，差异有统计学意 义（P ＜0.05）。结论 干预RAAS系统不同环节均可抑制肝纤维化形成，可能与抑制肿瘤坏死因子-α的表 达有关。     

经肝动脉灌注平阳霉素碘油乳剂对兔正常肝脏组织的影响

目的：探讨平阳霉素碘油乳剂（PLE）经肝动脉灌注对兔正常肝脏组织的影响。方法：14只4～5个月龄日本大耳白兔，体重（2.5±0.2）kg，按注入生理盐水或PLE的量分为假手术组、实验A组（低剂量组）和实验B组（高剂量组）。各组兔均开腹穿刺肝动脉，按分组剂量注入PLE。术后1，2，4，6周取病理切片，HE染色，光镜下观察肝脏组织学改变;免疫组织化学（免疫组化）染色标记血小板衍化生长因子B链（PDGF-B），并行图象分析。结果：A组HE染色肝细胞呈一过性水样变，变性在2周时最重，至6周已明显减轻。B组HE染色2周时肝细胞明显水样变，4周时可见汇管区纤维组织增生，6周时部分肝组织出现明显假小叶结构。免疫组化染色显示，PDGF-B在肝细胞胞膜及纤维间隔中有明显表达。结论：经肝动脉灌注PLE可导致正常肝脏组织产生不同程度的肝纤维化;PDGF-B参与了肝纤维化的病理过程。     

血管紧张素Ⅱ受体拮抗剂抗纤维化及对Ⅰ型胶原基因表达影响的实验研究

目的　研究血管紧张素Ⅱ (angiotensinⅡ )Ⅰ型受体 (AT1)拮抗剂losartan对肝硬化大鼠Ⅰ型胶原 (TypeⅠcollagencolⅠ )基因表达的影响及抗纤维化作用。 方法　 4 1只雄性SD大鼠被随机分为 4组 :对照组 (10 )、模型组 (11)、及治疗组 (2 0 )———早期和中期各 10只 ,除对照组外所有大鼠均给予 5 0 ?l4灌胃 ,3ml/(kg·5d)一次 ,共 9周。治疗组 :早期组同时给予血管紧张素受体拮抗剂losartan灌胃 ,中期组于造模中期 (5周 )开始给药 ,用量 10mg/(kg·d)至处死前。实验结束后 ,处死取肝脏液氮冻存及福尔马林固定标本 ,分别行HE及Masson染色 ,光镜下观察组织学改变 ,图像分析系统测量胶原面积。免疫组化及RT PCR检测Ⅰ型胶原蛋白及mRNA的表达。结果　光镜下组织学检查纤维化分级、图像分析系统测量胶原面积losartan治疗组低于模型组 (P <0 0 5 )。与模型组相比 ,Losartan治疗组使Ⅰ型胶原蛋白及mRNA的表达明显降低 (P <0 0 1)。结论　Losartan对CCl4诱导的大鼠肝纤维化有良好的防治作用。     

黄芪对糖尿病肾病大鼠肾间质Wnt/β-catenin及TGF-β_1信号通路表达的影响

目的：观察黄芪（AM）对糖尿病肾病（DN）大鼠肾间质中Wnt/β-catenin信号通路及转化生长因子-β1（TGF-β1）表达情况的影响,探讨其抗糖尿病肾病肾间质纤维化的作用机制。方法：采用单次空腹腹腔注射60mg/kg链脲佐菌素（STZ）制备糖尿病大鼠模型。4周后测定24h尿蛋白排泄量,以24h尿蛋白定量≥30mg确定DN大鼠模型成功（n=48）。48只DN大鼠随机分为4组：DN模型组（DN组）、黄芪治疗组（DA组）、DN模型组＋氯沙坦治疗组（DL组）、DN模型组＋黄芪联合氯沙坦治疗组（AL组）,每组12只。选取12只健康雄性wistar大鼠作为正常对照组（N组）。连续给药12周后,记录大鼠体重,并检测血清尿素氮（BUN）、肌酐（Scr）及24h尿蛋白定量;处死大鼠,留取肾组织行HE及Masson染色观察肾间质病理改变,采用免疫组织化学技术及实时荧光定量PCR（FQ-PCR）检测肾间质中Wnt4、β-catenin及TGF-β1蛋白及mRNA的表达。结果：与N组比较,12周末DN组大鼠24h尿蛋白定量、血清BUN、Scr水平明显增高,差异有统计学意义（P〉0.05）。与N组比较,12周末DN组、DA组、DL组和AL组肾间质Wnt4、β-catenin及TGF-β1蛋白表达量明显增加（P〈0.05）。DA组、DL组和AL组作两两比较,AL组24h尿蛋白定量、血清BUN、Scr、Wnt4、β-catenin及TGF-β1下降更为明显,差异有统计学意义（P〈0.05）。DA组与DL组相比各指标差异无统计学意义（P〉0.05）。FQ-PCR结果显示wnt4、β-catenin和TGF-β1mRNA在各组大鼠肾组织中的表达与Wnt4、β-catenin及TGF-β1蛋白表达趋势一致。结论：黄芪可以降低24h尿蛋白定量,减轻肾间质病理损伤,下调wnt4、β-catenin及TGF-β1在肾间质中的表达,提示黄芪可能通过下调Wnt4、β-catenin及TGF-β1在肾间质中的表达,延缓DN大鼠肾间质纤维化的进程,而发挥肾脏保护作用。     

三七总皂苷对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织BMP-7及TGF-β1/samds信号传导通路的影响

目的:观察三七总皂苷(PNS)对单侧输尿管梗阻(UUO)大鼠肾组织骨形成蛋白-7(BMP-7)及TGF-β1/Smads信号传导通路的影响。方法:将50只雄性Wistar大鼠随机分为5组:假手术组、模型组、肾康注射液组(对照组)、PNS低剂量组(低剂量组)、PNS高剂量组(高剂量组),每组10只,除假手术组,其余各组用UUO法建立肾间质纤维化动物模型,术前1d起各组给予相应浓度和剂量的药物,术后第14天处死所有大鼠,检测大鼠血肌酐(Scr)和尿素氮(BUN)变化,梗阻侧肾组织行HE染色、PAS染色和Masson染色,观察肾组织病理变化并半定量计算肾小管损伤指数(TII),免疫组化法检测BMP-7、TGF-β1、Smad2、Smad7在肾组织的表达。结果:与模型组相比,PNS和肾康注射液能明显降低UUO大鼠术后14dScr、BUN(P<0.05);对梗阻侧肾组织HE染色、PAS染色进行TII评分发现,2个试验组大鼠肾小管损伤指数显著低于模型组(P<0.01);Masson染色观察发现,2个实验组大鼠肾小管间质病变明显轻于模型组;免疫组化法染色并对其灰度值测定发现,与模型组相比,2个试验组大鼠TGF-β1、Smad2在肾组织的表达下调(P<0.01),BMP-7、Smad7在肾脏组织的表达上调(P<0.01)。结论:PNS可能通过干预BMP-7/Smads/TGF-β1信号转导通路抑制了TGF-β1信号的细胞内转导,而起到抗肾间质纤维化的作用。     

Peritoneal dialysis fluid-induced changes of the peritoneal membrane are reversible after peritoneal rest in rats.

BACKGROUND: Peritoneal dialysis (PD) is associated with functional and structural alterations of the peritoneal membrane. However, the (ir)reversibility of these pathological changes of the peritoneum is not understood fully. METHODS: In an experimental PD model, rats (n = 15) received daily 10 ml conventional glucose containing PD fluid, via peritoneal catheters connected to implanted subcutaneous mini vascular access ports. After 5 weeks of treatment, the first group of animals (PDF; n = 10) was sacrificed, while peritoneal catheters of the remaining group of rats (PD-rest; n = 5) were removed 1 week later. The latter group (PD-rest) was sacrificed 12 weeks after removing catheters. At both time points, untreated rats were included as controls. Cellular and morphological parameters were analysed by light and electron microscopy. RESULTS: Rats exposed to PD fluid for 5 weeks showed a severe angiogenesis in various peritoneal tissues. Peritoneal rest resulted in a significant reduction in blood vessel density in visceral (mesentery, P<0.05), but not in parietal peritoneum. Five weeks' exposure to PD fluid resulted in a profound fibrosis in the parietal peritoneum, whereas the degree of fibrosis was significantly reduced in the PD-rest group (P<0.02). Daily exposure to PD fluid induced a higher number of mast cells in the omentum compared with untreated rats, whereas peritoneal rest normalized the increased mast cell density completely (P<0.03). Likewise, continued PD fluid instillation evoked a strong omental milky spot response, which was returned to the control level after peritoneal rest (P<0.009). Furthermore, the number of mesothelial cells on the liver was significantly increased in rats treated with PD fluid, whereas animals from the PD-rest group had a lower number of mesothelial cells, although this was not statistically significant (P = 0.08). Finally, as evidenced by electron microscopy, daily exposure to PD fluid resulted in severe damage to the mesothelial cell layer covering the peritoneum, whereas this cell layer was completely recovered after peritoneal rest. CONCLUSIONS: We show that PD fluid-induced cellular and morphological alterations of the peritoneal membrane are generally reversible.     

不同剂量寻骨风致大鼠慢性肾间质纤维化初探

目的:观察马兜铃科中药寻骨风水煎剂引起大鼠慢性肾间质纤维化与剂量的关系并探讨其发病机制。方法:将雌性Wister大鼠随机分5组:(1)正常对照组(NC组,n=8):给予蒸馏水2 ml/d灌胃;(2)马兜铃酸对照组(AA组,n=16):给予马兜铃酸制剂5 mg.kg-1.d-1腹腔注射;(3)寻骨风高剂量组(XGFH组,n=16):给予寻骨风水煎液27 g.kg-1.d-1灌胃;(4)寻骨风中剂量组(XGFM组,n=16):给予寻骨风水煎液13.5 g.kg-1.d-1灌胃;(5)寻骨风低剂量组(XGFL组,n=16):给予寻骨风水煎液2.7 g.kg-1.d-1灌胃。各组在45 d、90 d时分别处死8只大鼠,处死前测体重、采血、留尿,做肾功能,尿潜血、MA/Cr、TF/Cr及尿NAG/Cr检查,处死后测肾重,留取肾组织行HE、PAS染色,做LN、FN、TGF-β1、MMP-2、TIMP-2免疫组化检查。结果:90 d后AA组、XGFH组、XGFM组大鼠体重和肾重较NC组均有下降(P<0.01或P<0.05),AA组、XGFH组、XGFM组MA/Cr、TF/Cr、NAG/Cr、Scr和BUN明显高于NC组(P<0.05或P<0.01)。光镜检查XGFH组用药45 d后,出现肾小管上皮细胞肿胀,管腔缩小,小管间质增生;AA组、XGFM组肾小管上皮细胞发生空泡变性;XGFH组用药90 d后,肾小管上皮细胞坏死,肾小管萎缩,肾间质出现灶性纤维化。AA组、XGFM组肾脏近曲小管上皮细胞明显肿胀,管腔变小,小管间质增生,部分发生纤维化;XGFL组肾组织未见明显损害。免疫组化显示AA组、XGFH组、XGFM组肾小管和间质上MMP-2的表达下调,而TGF-β1、TIMP-2、LN、FN的阳性表达较NC组明显上调(P<0.05)。结论:XGFH组、XGFM组和AA组均导致了实验大鼠肾小管间质的损害,而且病变的程度与用药剂量相关,XGFH组肾小管间质损害程度最严重,90 d内造成了大鼠肾间质纤维化,同时我们证实了慢性马兜铃酸肾病大鼠肾间质纤维化的发生同致纤维化因子TGF-β1和抑制细胞外基质降解因子TIMP-2的过度表达导致FN、LN胶原纤维在肾间质的过度增殖有关。     

左归丸对5/6肾大部切除模型并肾性骨病大鼠骨代谢指标的影响

目的:探讨左归丸对5/6肾大部切除模型并肾性骨病大鼠骨代谢的影响。方法:SPF级Wistar大鼠进行5/6肾大部切除并给予高磷饮食诱导肾性骨病模型。造模大鼠分为模型组、左归丸组、骨化三醇组,并设假手术组。左归丸与骨化三醇治疗4周、12周时,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、血清碱性磷酸酶(ALP)、血清全段甲状旁腺激素(iPTH)、血钙(Ca2+)、血磷(P3-);药物干预12周麻醉处死大鼠,双能X线测量大鼠股骨骨密度(BMD)。结果:12周时,模型组大鼠出现了Scr、BUN、ALP、iPTH、磷升高,血Ca2+下降。左归丸能明显降低Scr、BUN水平,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05);与骨化三醇组比较差异有统计学意义(P<0.01,P<0.05)。左归丸组大鼠ALP、iPTH、血磷水平与模型组比较明显下降(P<0.05),血钙水平明显升高(P<0.01),左归丸组大鼠骨密度与模型组比较明显改善(P<0.01)。结论:左归丸通过调节钙磷代谢及参与成骨细胞代谢,对iPTH有直接的抑制作用,能改善肾性骨病的骨营养不良。     

脾切除对肝纤维化大鼠肝脏PDGF-B表达及血清PDGF-BB水平的影响

目的 研究脾切除对肝纤维化大鼠肝脏PDGF-B表达和血清PDGF-BB水平的影响,探讨脾切除在肝纤维化治疗中的作用.方法 大鼠皮下注射CCl4,建立65只肝纤维化大鼠模型.于建模开始、肝纤维化期以及肝硬化期三组切除大鼠睥脏,并设立同期假手术组作为对照组.第一、二组及其对照组于建模后第10周,第三组及其对照组于建模后12周分别取大鼠肝脏和血液标本.用免疫组化SABC法测定肝脏PIGF-B的表达.HE染色检测肝纤维化,用双抗体夹心ELISA法测定血清PIGF-BB水平.结果 各切脾组PDGF-B阳性细胞A值(光密度值)明显低于其对照组;各切脾组血清PDGF-BB含量明显低于其对照组.根据HE染色,建模开始时切脾再行肝纤维化诱导,肝纤维化进程缓慢;建模第5周切脾后,肝脏病理状态比对照组明显缓解;肝硬化期切脾后,肝脏炎性改变和纤维化程度有一定减轻.结论 早期脾脏切除对实验性肝纤维化有一定延缓作用.脾切除后PDGF水平的下降可能是造成该延缓的机制之一.

Abstract：

Objective To explore the effects of splenectomy on hepatic fibrosis and on the expression of PDGF-B in the liver and PDGF-BB in the serum of rats with hepatic fibrosis. Methods By hypodermic injection CCl4, we established 65 rat models with hepatic fibrosis, splenectomies were performed in the three groups at different phases: before hypodermic injection CCl4 (A group), five weeks after hypodermic injection CCl4 (B group), and ten weeks hypodermic injection CCl4 (C group). The control groups were established at the same time, with samples of the livers and serum of the rats taken in different phases. The expressions of PDGF in the liver were detected by immunohistochemistry technique and the degree of hepatic fibrosis was detected by HE staining. The serum levels of PDGF-BB were analyzed by ELISA technique. Results Absorbance values of PDGF-B in the experimental group were significantly lower than the control groups (P＜0. 05). Serum levels of PDGF-BB of the rats after splenectomy were significantly lower than those in the control groups (P＜0.05). HE and Masson's staining showed that the progression of Hepatic fibrosis was slow in the A group. Hepatic pathologic state was significantly relieved in the B group and the inflammation and fibrosis was relieved in the C group. Conclusion Earlier period splenectomy could delay the proceeding of experimental hepatic fibrosis. After splenectomy the decline in the level of PDGF may be one of the mechanisms causing the delay.     

后肾间充质细胞移植治疗大鼠慢性阿霉素肾病

目的 探讨大鼠胚胎后肾间充质细胞（MMC）尾静脉移植对慢性阿霉素（ADR）肾病大鼠的治疗作用。 方法 90只雌性SD大鼠被随机分为阿霉素肾病组（n=40,间隔3周2次尾静脉注射阿霉素0.25 mg/100 g）、MMC移植组（n=40,于第2次阿霉素注射后8周,尾静脉注射5×106～7×106 MMC）、对照组（n=10）。于细胞移植后第8周杀鼠,留取肾组织行病理学分析;免疫组织化学检测肾组织Ⅳ型胶原、基质金属蛋白酶2（MMP-2）、基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达;Western印迹及RT-PCR分别对MMP-2、MMP-9的蛋白及基因表达进行半定量检测。 结果 MMC移植组和阿霉素肾病组肾小管损伤指数及肾小球硬化面积差异无统计学意义（P > 0.05）。与阿霉素肾病组比较,细胞移植组肾组织Ⅳ型胶原沉积减少,MMP-2蛋白及基因表达下调,MMP-9蛋白及基因表达升高,差异均有统计学意义（均P < 0.05）。 结论 MMC移植对阿霉素大鼠肾组织纤维化有潜在的治疗作用,MMP降解途径的激活可能在其中发挥了作用。     

Combination therapy with angiotensin-converting enzyme inhibitor and oral adsorbent of uremic toxins can delay the appearance of glomerular sclerosis and interstitial fibrosis in established renal failure

BACKGROUND/AIM: Angiotensin II plays a central role in the progression of chronic renal failure (CRF), and administration of angiotensin-converting enzyme inhibitor (ACEI) in rats delays the progression of CRF. However, ACEI has little effect on CRF progression in rats with established CRF. We therefore examined whether combination therapy with ACEI and oral adsorbent for uremic toxins in the gastrointestinal tract has the desired effect. METHODS: Rats subjected to subtotal nephrectomy were given enalapril at 20 mg/kg (n = 10, group E), AST-120 at 5 g (n = 10, group A), enalapril and AST-120 together at the same doses (n = 10, group EA), or no treatment (n = 10, group C) 8 weeks after the operation. The substances were administered in 100 g rat chow. All animals were pair-fed, and all were killed after 8 weeks of pair-feeding. RESULTS: Body weight did not differ between groups during the study. Blood pressure at week 8 was significantly lower in groups E and EA than in groups C and A (p < 0.05). Urinary protein excretion level and renal plasma flow rate at week 8 were significantly less in groups E and EA than in group C (p < 0.05, p < 0.01). The glomerular filtration rate at week 8 was significantly higher in group EA than in group C (p < 0.05). The glomerular sclerosis index and interstitial fibrosis area at week 8 were significantly less in group EA than in group C (p < 0.01). CONCLUSION: ACEI and AST-120 in combination can delay progression of established CRF in rats by inhibiting the appearance of glomerular sclerosis and interstitial fibrosis.