低频脉冲超声干预膝骨关节炎模型兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达

背景:研究表明,低频脉冲超声能促进全层关节软骨缺损修复,延缓实验性早期骨关节炎的病变进展。水通道蛋白3存在于关节软骨及滑膜上,并在骨关节炎的发病机制中发挥重要作用。目的:探讨低频脉冲超声对实验性膝骨关节炎兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3表达的影响。方法:成年新西兰兔左后膝关节用管型石膏固定于伸直位制动6周制备实验性兔膝关节骨关节炎模型,造模成功后随机分为两组:实验组予以低频脉冲超声治疗(频率为1MHz,功率为2.0W),1次/d,15min/次;对照组不接受超声治疗。分别于治疗后2,4,8周,采用免疫组织化学方法观察兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达。结果与结论:随着造模后时间的延长,各组兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达均有所增加;与对照组比较,实验组兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3表达明显降低(P<0.01)。说明低频脉冲超声能降低实验性兔膝骨关节炎关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达,从而缓解关节肿胀,延缓软骨及滑膜的退变,具有软骨及滑膜保护作用。     

低频脉冲超声与关节软骨损伤修复

外伤或疾病所致的关节软骨损伤在临床上十分常见。由于软骨组织自身修复能力很差,关节软骨损伤后的修复一直是骨科、矫形外科及运动医学界的难点。近年来人们发现低频脉冲超声辐照对损伤软骨具有促修复作用,可望发展成为一种极具应用前景的促进关节软骨损伤修复的新手段。本文拟就关节软骨损伤修复的研究概况及低频脉冲超声辐照在关节软骨损伤修复中的作用做一扼述和探讨。     

退变关节软骨中水通道蛋白的表达差异及其意义

目的研究水通道蛋白-3（AQP-3）在退变关节软骨与正常关节软骨中的表达及分布差异,探讨其与关节软骨退变的关系及意义。方法取13例关节置换病例退变关节软骨样本作为退变组,取同期外伤性无退变游离关节软骨12例作为非退变组,应用免疫组织化学法检测AQP3的表达及分布差异。结果免疫组化染色显示AQP3在退变组和非退变组关节软骨中的分布具有明显差异,退变组AQP3在关节软骨中的量明显高于非变应组,组间差异有统计学意义（P〈0.01）。结论AQP3存在于关节软骨组织中,并在退变关节软骨中高度表达,推测其与软骨退变及骨性关节炎的发生、发展具有密切相关性。     

体外冲击波疗法对膝骨关节炎患者下肢功能及关节软骨的影响

目的 观察体外冲击波疗法（ESWT）对膝骨关节炎（KOA）患者的下肢功能、安全性及关节软骨的影响。 方法 将符合纳入标准的63例KOA患者根据治疗方法的不同按随机数字表法分为ESWT组（32例）和对照组（31例）。2组均给予常规膝关节肌力训练,每日3组训练,每组10次,连续训练4周;ESWT组辅以体外冲击波疗法,压力2.5 bar,频率8.0 Hz,频次2000,每周1次,共4次;对照组患者除冲击波压力设置为0.2 bar,其余治疗步骤及治疗参数与ESWT组保持一致,共治疗4周。分别于治疗前、第5周及第12周,测评和比较2组患者的视觉模拟评分法（VAS）、西安大略和麦克马斯特大学骨关节炎（WOMAC）指数、奎森指数评分及膝关节软骨磁共振检查T2值,并记录患者可能出现的不良反应。 结果 ESWT组在第12周的VAS分值［（2.3±1.1）分］,WOMAC指数［（11.3±6.8）分］和奎森指数［（3.9±2.7）分］分别较组内治疗前［（5.3±0.8）、（31.6±7.2）和（10.6±2.4）分］有明显改善（P<0.05）,亦显著优于对照组在第12周时的各个评分［（4.3±1.1）、（24.5±10.1）和（8.7±3.5）分］,组间差异有统计学意义（P<0.05）。ESWT组在第12周的T2值［（49.2±5.6）ms］与组内治疗前［（49.1±5.5）ms］比较,差异有统计学意义（P<0.05）,但与对照组第12周的T2值［（49.1±5.8）ms］比较,差异无统计学意义（P<0.05）。研究过程中2组均未出现严重不良反应,2组出现不良反应的频次没有明显差异（P>0.05）且均在第12周时前消失。 结论 ESWT可明显改善KOA患者的下肢功能,且其对膝关节软骨的影响在安全的范围内。     

低强度脉冲聚焦超声治疗对膝骨关节炎患者疼痛和关节功能的改善作用及其安全性

目的 探究低强度脉冲聚焦超声治疗对膝骨关节炎患者疼痛和关节功能的改善作用及其安全性。方法前瞻性研究,选取2018年3月至2019年3月达州市中西医结合医院收治的120例膝骨关节炎患者,按照随机数字表法将患者分为双氯芬酸钠组和联合治疗组,每组各60例。双氯芬酸钠组患者给予口服双氯芬酸钠缓释片,联合治疗组患者在口服双氯芬酸钠缓释片的基础上给予低强度脉冲聚焦超声治疗。比较两组患者治疗前后疼痛视觉模拟评分(VAS)、Lequence指数、Lysholm评分、生活质量量表SF-36评分以及不良反应。结果 治疗前,两组患者的疼痛VAS评分、Lequence指数、Lysholm评分和SF-36评分差异均无统计学意义(P 0. 05);治疗后,双氯芬酸钠组和联合治疗组患者的疼痛VAS评分、Lequence指数均低于同组治疗前,Lysholm评分和SF-36评分均显著高于同组治疗前,差异均具有统计学意义(P 0. 05);治疗后,联合治疗组患者的疼痛VAS评分、Lequence指数均低于双氯芬酸钠组,Lysholm评分和SF-36评分均显著高于双氯芬酸钠组,差异均具有统计学意义(P 0. 05);双氯芬酸钠组和联合治疗组患者治疗过程中均有2例患者出现胃肠道不良反应,如恶心、呕吐,两组患者治疗过程中均未出现超声波毒性现象。结论 在口服双氯芬酸钠缓释片的基础之上给予低强度脉冲聚焦超声治疗膝骨关节炎患者可以有效地缓解疼痛,改善关节功能,是一种安全有效的治疗方案。     

骨关节炎滑膜中尿激酶型纤溶酶原激活物表达与关节软骨破坏程度的相关研究

目的探讨骨关节炎滑膜的uPA表达与关节软骨破坏的关系及可能的作用途径。方法采用免疫组织化学法检测骨关节炎滑膜的uPA表达，利用关节镜观察关节软骨的破坏情况并分度。结果17例Ⅱ度软骨破坏组uPA表达阳性10例，阴性7例；23例Ⅲ度软骨破坏组uPA表达阳性21例，阴性2例。结论骨关节炎滑膜中uPA的表达与关节软骨破坏程度有关。     

早期非负重康复运动对膝骨关节炎大鼠关节软骨YKL-40表达的影响

目的观察非负重游泳运动对膝骨关节炎大鼠膝关节软骨YKL-40表达的影响,探讨非负重游泳运动防治膝骨关节炎的机制,为临床采用非负重游泳运动防治膝骨关节炎提供理论依据。方法将40只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组,每组10只,对照组大鼠不予以任何干预,模型组与实验组大鼠采用木瓜蛋白酶注射法建立膝骨关节炎模型。对实验组进行为期6周的非负重游泳运动后,对所有大鼠膝关节软骨进行肉眼及光镜下观察形态改变并评分、免疫组化法观察YKL-40的表达情况。结果模型组、实验Ⅰ组、实验Ⅱ组大鼠膝关节软骨大体观评分分别为:4.10±0.74,2.90±0.74,2.10±0.57;改良Mankin评分分别为:6.17±0.16,4.69±0.18,2.95±0.15;YKL-40表达的AOD值分别为:0.33±0.02,0.29±0.02,0.26±0.03。三组大鼠膝关节软骨大体观评分、改良Mankin评分、YKL-40表达的AOD值均逐渐降低(P<0.05)。结论早期康复运动可以改变YKL-40在膝骨关节炎大鼠膝关节软骨细胞中的表达,能够延缓膝骨关节炎大鼠膝关节软骨的进一步退变。     

水通道蛋白3表达及催乳素浓度与羊水量异常相关性

目的研究水通道蛋白3(AQP3)表达及催乳素浓度与羊水量异常的相关性,为临床防治羊水量异常提供依据。方法选取汕头大学医学院附属粤北人民医院2014年5月至2016年4月收治的74例行选择性剖宫产健康单胎孕妇作为研究对象,入院后均接受超声检查,并根据超声检查羊水指数(AFI)进行分组。26例AFI≤50 mm的羊水过少组孕妇为观察组A,36例AFI>50 mm且<250 mm的羊水量正常组孕妇为对照组(B组),12例AFI≥250 mm的羊水过多组孕妇为观察组C;采集三组产妇外周血、胎盘标本,外周血采用电化学发光法检测催乳素含量,胎盘组织采用免疫组织化学法检测羊膜上皮细胞、胎盘滋养细胞、绒毛膜滋养细胞的AQP3表达水平。观察并比较三组孕妇外周血催乳素浓度及羊膜上皮细胞AQP3表达水平。结果羊膜上皮细胞、胎盘滋养细胞、绒毛膜滋养细胞上均有AQP3表达。羊膜上皮细胞的AQP3表达水平由低到高依次为:观察组A<对照组<观察组C,差异有统计学意义(P<0.05);三组孕妇母血内催乳素浓度差异无统计学意义。催乳素浓度与羊水量异常无明显相关性。结论 AQP3在羊膜上皮细胞的表达可能对羊水膜内吸收的调节具有重要影响,可能是羊水量增多时的代偿改变;而母体外周血催乳素浓度对羊水量异常无显著性影响。     

水通道蛋白1和3在腰椎间盘退变组织中的表达

背景：腰椎间盘退变由多种因素引起,水通道蛋白变化规律在腰椎间盘退变中的作用研究较少。目的：比较正常腰椎间盘组织及退变腰椎间盘组织中水通道蛋白1、水通道蛋白3的表达。方法：收集大理学院附属医院骨科手术切除腰椎爆裂骨折患者腰椎间盘组织15份,退变椎间盘组织15份,应用苏木精-伊红染色、免疫组织化学染色方法观察水通道蛋白1、水通道蛋白3的表达,测量平均吸光度值。结果与结论：苏木精-伊红染色结果显示对照组椎间盘组织结构清晰,胶原纤维走形清楚,组织轻微水肿无黏液样变,病例组组织结构模糊紊乱,胶原纤维增生粗大、走行紊乱,组织炎性水肿严重、坏死黏液样变。免疫组织化学方法显示病例组水通道蛋白1、水通道蛋白3平均吸光度值明显低于对照组（P〈0.01）,提示水通道蛋白1、水通道蛋白3减少可能是腰椎间盘退变因素之一。     

超声引导下隐神经脉冲射频联合关节注射治疗膝骨关节炎的临床疗效观察

目的：探讨彩超引导下隐神经脉冲射频联合膝关节注射干预膝骨关节炎病人的临床疗效。方法：选取2019年3月至2021年3月疼痛科收治的符合纳入标准的62例膝骨关节炎病人,按随机数字表分为试验组和对照组,每组31例,试验组病人接受彩超引导下隐神经脉冲射频联合膝关节注射治疗,对照组给予局部痛点注射联合膝关节注射治疗。比较两组病人治疗前、治疗后1周、1月、3月、6月视觉模拟评分法(visual analogue scale, VAS)评分和Lysholm膝关节评分,观察治疗后有无并发症。结果：两组病人治疗后Lysholm评分高于同组治疗前,VAS评分低于同组治疗前。治疗后6个月,试验组VAS评分(0.4±0.3)低于对照组(1.1±0.6),Lysholm膝关节评分(93.0±2.8)显著高于对照组(80.7±3.5),说明两组治疗后膝关节疼痛均有不同程度的缓解,膝关节功能有所改善,且试验组治疗效果优于对照组,两组病人治疗后均无并发症发生。结论：彩超引导下隐神经脉冲射频联合膝关节注射治疗,可有效减轻膝关节疼痛,改善其功能,为临床以膝内侧痛为主的膝骨关节炎病人提供了新的路径。     

高脂饮食兔膝关节软骨的变化

背景：血清胆固醇水平增高与人群中骨关节病发病率增高呈正相关,而对于高脂饮食是否参与关节软骨退变过程从而诱发骨关节炎,目前尚不清楚。
　　目的：观察经高脂喂养后新西兰兔膝关节软骨形态学改变,探索饮食在关节软骨退变过程中的作用。
　　方法：将新西兰兔40只随机分为2组：对照组饲以基础饲料,高脂组饲以高脂饲料(20%猪油混合80%的基础饲料)。每4周末抽取空腹血样,测三酰甘油、总胆固醇水平。饲养28周后,取兔膝关节行大体观察后,取股骨髁部软骨行扫描电镜观察。
　　结果与结论：与对照组相比,高脂组血清三酰甘油、总胆固醇水平均显著升高(P<0.05)。扫描电镜观察发现,高脂组髁软骨表面粗糙,陷凹变浅,排列杂乱,形态不规则,大小不均,软骨表面呈局灶性剥脱改变,排列变得不规整,孔隙不均匀,软骨表面出现断裂空洞。进一步放大倍数观察可见软骨表面小山峰样结构变浅、变平,孔隙基本消失。结果证实,长期高脂饮食可诱发和加重软骨损伤,提示其可能参与了骨关节炎的发生发展。     

兔膝关节软骨缺损对关节退变的影响

目的:探讨软骨损伤与关节退变之间的关系,以及持续被动运动治疗在其中的作用.方法:新西兰大白兔15只共30个膝关节随机分为3组,采用在关节软骨上钻孔的方法建立软骨损伤模型,术后按照不同的处理分为假手术组、对照组和持续被动运动(CPM)组,各组采取相应的处理方法.术后12周处死实验兔并进行关节软骨大体评分、HE染色评分和MMP-3免疫组化染色.结果:A组软骨表现正常.B组软骨在肉眼观察、病理学表现和MMP-3阳性细胞分数改变上均显示有明显退变.C组的各项指标均与A组接近而与B组差异有显著性意义(P＜0.05).结论:人为造成兔膝关节软骨缺损,可以进展成为骨关节炎(OA).软骨缺损后早期给予CPM治疗8h/d,连续4周,在12周后可有效减缓OA的发生.     

低强度脉冲超声波对兔膝骨性关节炎软骨整合素-FAK-MAPKs信号通路蛋白表达的影响

目的:观察低强度脉冲超声波(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)对兔膝骨性关节炎(osteoarthritis,OA)软骨中整合素-FAK-MAPKs力化学细胞信号转导通路相关蛋白表达的影响。方法:18只成年新西兰大白兔随机平均分成3组,分为正常对照组(normal control,NC),OA模型组(OA group,OA),OA模型照射组(O+L)。OA组接受右侧后肢前交叉韧带切断(ACLT)处理术后4周接受LIPUS假辐射,O+L组同样手术处理,术后4周接受LIPUS辐射,NC组仅切开关节囊。LIPUS作用6周后,处死实验动物,取右后肢,采用HE染色行改良Mankin评分比较各组胫骨平台关节表面病理学改变。同时,采用Western blot技术检测Ⅱ型胶原,MMP-13,整合素β1的蛋白表达水平以及FAK、MAPKs家族蛋白(p38、ERK1/2、JNK)磷酸化水平。结果:1组织学观察及Mankin评分:LIPUS干预后,OA软骨表层轻微不平整,染色轻度缺失,可见软骨细胞增殖;Mankin评分,NC组:4.67±0.57;OA组:10.57±2.55;O+L组:7.66±1.74。与NC组相比,OA组、O+L组Mankin评分明显增高,但OA组增高更为明显(P0.05);与OA组相比,O+L组Mankin评分明显降低(P0.05)。2Ⅱ型胶原、MMP-13含量:LIPUS干预后,II型胶原含量较NC组升高,MMP-13含量有明显下降。3整合素β1-FAK-MAPKs信号通路相关蛋白表达:LIPUS干预使整合素β1、磷酸化FAK表达增高;同时MAPKs信号通路相关蛋白ERK1/2、p38磷酸化水平明显下降,而JNK磷酸化水平无明显变化。结论:LIPUS可以减轻骨性关节炎软骨ECM损伤程度,与LIPUS产生机械应力使关节软骨中细胞表面应力受体之一整合素β1及其下游分子黏着斑激酶FAK磷酸化表达增高,进一步下游的磷酸化p38,ERK1/2表达下调有关。LIPUS的机械效应可经力化学转导途径作用于OA关节软骨,为治疗骨性关节炎提供一种新的思路。     

高糖高脂饮食对兔膝关节软骨形态的影响

背景:血清胆固醇水平增高与人群中骨关节病发病率增高呈正相关.而对于高糖高脂饮食是否参与关节软骨退变过程从而诱发骨关节炎,其参与机制又是什么,目前尚不清楚.目的:观察经高糖高脂喂养后新西兰兔膝关节软骨形态学改变,探索饮食在关节软骨退变过程中的作用.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2008-01/09在中南大学湘雅医学院动物实验室完成.材料:健康成年雄性新西兰兔40只,体质量约2 kg.随机分为4组,每组10只.方法:①对照组饲以基础饲料作.②高糖组饲以高糖饲料(37%的蔗糖混合63%的普通饲料).③高脂组饲以高脂饲料(20%猪油混合80%的普通饲料).④高糖高脂组饲以高糖高脂饲料(37%蔗糖、10%猪油混合53%基础饲料).主要观察指标:每4周末抽取空腹血样,测血糖、三酰甘油、总胆固醇及胰岛素水平,记录体质量变化.28周后取兔膝关节行大体观察后,取股骨髁部软骨行甲苯胺蓝染色、透射电镜观察.结果:①与对照组相比,高脂组及高糖高脂组血糖、三酰甘油、总胆固醇水平都显著升高,而胰岛素水平先升高后显著降低,上述变化均有显著性意义(P＜0.05).高糖组上述指标均较对照组升高,但差异无显著性意义(P＞0.05).②光镜和透射电镜下,高脂饮食组和高糖高脂饮食组可见潮线消失、软骨细胞排列紊乱、胶原纤维断裂、软骨细胞固缩等形态变化,高糖组未见明显改变.结论:长期高脂饮食及高糖高脂饮食可诱发和加重软骨损伤,提示其可能参与了骨关节炎的发生发展.     

兔陈旧性关节软骨缺损模型的制备

背景:临床所见的骨性关节炎的软骨缺损大多为不规则的、深至软骨下的陈旧性骨缺损,但目前关节软骨缺损动物模型多为新鲜骨缺损.目的:观察制动时间和缺损大小对兔关节软骨陈旧性缺损的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2004-04/2006-05在南方医科大学创伤骨科组织工程实验室完成.材料:6周龄新西兰大白兔6只,随机分为6,12周观测组两组,每组3只 6侧膝关节.干预:无菌操作下显露两侧股骨髁关节面,用牙科钻打圆形孔,每孔直径4 mm,深度约3 mm,达软骨下骨,术毕下肢固定,笼中自由喂养,后膝伸直位制动12周复制的膝关节陈旧性软骨缺损模型.主要观察指标:制动6,12周模型取出关节软骨缺损区标本进行大体观察和组织学切片观察.结果:6只兔均进入结果分析.兔关节软骨及周围组织情况:12周时炎症反应较6周轻,纤维瘢痕化较6周明显;12周时出现增生性改变,尤其是关节周围的肌腱、关节囊、韧带、滑囊等结缔组织较6周时更易形成瘢痕、粘连、纤维化等陈旧性损伤组织学改变.12周后可见自行修复不完全,缺损明显.结论:构建的兔后膝股骨髁关节面软骨缺损直径4 mm,深度约3 mm,达软骨下骨,符合实验要求,适用于骨性关节炎的基础实验.     

低强度脉冲超声介导威灵仙干预兔膝关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原和转化生长因子β1的表达

背景：研究显示威灵仙可促进软骨细胞增殖,维持和促进软骨细胞合成蛋白多糖和Ⅱ型胶原;低强度脉冲超声能有效促进软骨细胞增殖、提高细胞膜的通透性,促进药物或基因的传递,从而提高药物的生物学效应。目的：观察低强度脉冲超声介导威灵仙对体外培养的兔膝关节软骨细胞增殖、Ⅱ型胶原及转化生长因子β1表达的影响,探讨低强度脉冲超声介导威灵仙在软骨损伤修复中的作用及机制。方法：体外分离培养兔膝关节软骨细胞,取处于对数生长期的2代细胞,随机分为4组：对照组,低强度脉冲超声组,威灵仙组,威灵仙＋低强度脉冲超声组,干预3 d后分别采用CCK-8比色法检测软骨细胞增殖情况,细胞化学染色法分析Ⅱ型胶原分泌情况及Western blot检测转化生长因子β1的表达情况。结果与结论：干预培养3 d后,与对照组比较,其他3组细胞数量均显著增加（P〈0.05）,威灵仙＋低强度脉冲超声组细胞数量最多;威灵仙＋低强度脉冲超声组软骨细胞Ⅱ型胶原表达面积、吸光度值均显著大于对照组（P〈0.05）,且其差值大于低强度脉冲超声组、威灵仙组与对照组差值之和;威灵仙＋低强度脉冲超声组转化生长因子β1表达水平显著,其相对灰度值显著高于其他各组（P〈0.05）。结果提示低强度脉冲超声、威灵仙均可促进体外培养兔膝关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原、转化生长因子β1的分泌,二者联用具有一定的协同作用。     

超声评估膝关节软骨退行性变的应用价值

目的:采用高频超声探查拟行关节镜手术及关节置换术的膝关节,评估超声对软骨退行性变的诊断效能。方法:选择2004-02/08在中山大学第三附属医院行膝关节镜手术患者36例37个膝关节及关节置换术患者4例4个膝关节。男13例,女27例,年龄8～75岁,病程1个月～20年。分别对每个膝关节的5个关节面,共计205个关节面的软骨进行高频超声探查,并将超声表现与关节镜结果及手术切除标本对照。结果:40例41个膝关节,均进入结果分析。超声诊断膝关节软骨退行性变的敏感性、特异性、准确性分别为64.9%,92.0%,76.5%。膝关节软骨退行性变超声表现为软骨表面毛糙、变薄或消失、局部隆起,回声改变和软骨下骨质改变等征象。结论:超声评估膝关节软骨退行性变具有一定的敏感性和较高的特异性,可作为诊断膝关节软骨退行性变的重要筛查手段。     

超声评估膝关节软骨退行性变的应用价值

目的：采用高频超声探查拟行关节镜手术及关节置换术的膝关节，评估超声对软骨退行性变的诊断效能。方法：选择2004-02／08在中山大学第三附属医院行膝关节镜手术患者36例37个膝关节及关节置换术患者4例4个膝关节。男13例，女27例，年龄8-75岁，病程1个月～20年。分别对每个膝关节的5个关节面，共计205个关节面的软骨进行高频超声探查，并将超声表现与关节镜结果及手术切除标本对照。结果：40例41个膝关节，均进入结果分析。超声诊断膝关节软骨退行性变的敏感性、特异性、准确性分别为64．9％，92．0％，76．5％。膝关节软骨退行性变超声表现为软骨表面毛糙、变薄或消失、局部隆起，回声改变和软骨下骨质改变等征象。结论：超声评估膝关节软骨退行性变具有一定的敏感性和较高的特异性．可作为诊断膝关节软骨退行性变的重要筛查手段。     

低强度脉冲超声对兔关节软骨损伤修复的影响

目的探讨低强度脉冲超声对兔受损关节软骨修复的影响。 方法于10只兔双侧股骨髁间窝软骨面处全层钻孔,作为动物模型。术后左后肢膝关节缺损处予以低强度脉冲超声辐射作为治疗组,右后肢膝关节予以假辐射作为对照组。于术后8周全部处死,行大体评分、组织学评分及修复组织中蛋白多糖含量测定。 结果治疗组大体评分、组织学评分及甲苯胺蓝染色光密度值均比对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论低强度脉冲超声能促进受损关节软骨修复,且修复组织类似透明软骨。