低频脉冲超声干预膝骨关节炎模型兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达

背景:研究表明,低频脉冲超声能促进全层关节软骨缺损修复,延缓实验性早期骨关节炎的病变进展。水通道蛋白3存在于关节软骨及滑膜上,并在骨关节炎的发病机制中发挥重要作用。目的:探讨低频脉冲超声对实验性膝骨关节炎兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3表达的影响。方法:成年新西兰兔左后膝关节用管型石膏固定于伸直位制动6周制备实验性兔膝关节骨关节炎模型,造模成功后随机分为两组:实验组予以低频脉冲超声治疗(频率为1MHz,功率为2.0W),1次/d,15min/次;对照组不接受超声治疗。分别于治疗后2,4,8周,采用免疫组织化学方法观察兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达。结果与结论:随着造模后时间的延长,各组兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达均有所增加;与对照组比较,实验组兔关节软骨及滑膜水通道蛋白3表达明显降低(P<0.01)。说明低频脉冲超声能降低实验性兔膝骨关节炎关节软骨及滑膜水通道蛋白3的表达,从而缓解关节肿胀,延缓软骨及滑膜的退变,具有软骨及滑膜保护作用。     

健膝强骨丸对膝骨关节炎家兔模型关节软骨病理改变的影响

背景：膝骨关节炎的病理学改变不可逆转,属中医“痹证”范畴,治疗目的是缓解或解除症状,延缓关节退变。健膝强骨丸方是武汉大学基础医学院荆州市第三人民医院的经验方,可补益肝肾,祛风散寒,除湿通络,强骨健膝。目的：观察健膝强骨丸对膝骨关节炎兔模型膝骨关节软骨的保护作用,及其对软骨细胞骨形态发生蛋白7表达的影响。方法：36只新西兰兔随机分为3组,每组12只,分别运用改良Hulth术制备兔膝骨关节炎模型。造模后第6周,给药组予健膝强骨丸0.1 g/kg 灌胃,模型组和正常对照组予等量生理盐水灌胃。给药4周后通过软骨Mankin’s 评分方法行兔膝关节软骨评分,电镜下观察软骨形态,免疫组化法检测膝关节软骨细胞骨形态发生蛋白7表达情况。结果与结论：给药组兔膝关节软骨病理退变程度较其他2组轻,膝关节软骨细胞骨形态发生蛋白7的表达量较其他2组高,差异有显著性意义（P＜0.05）。提示健膝强骨丸可增强膝骨关节炎模型兔关节软骨细胞骨形态发生蛋白7的表达,从而促进膝关节软骨再生,减少软骨变形坏死,达到治疗关节炎的目的。     

类风湿性关节炎关节滑膜组织中水通道蛋白1表达与透痹转气法的影响

背景：水通道蛋白在类风湿性关节炎关节软骨、滑液、滑膜细胞异常表达可能对类风湿性关节炎产生影响。 目的：实验拟观察透痹转气法对类风湿性关节炎疗效及对水通道蛋白1的影响。 设计、时间及地点：对比观察，于2005-09／2007-09在解放军广州军区广州总医院完成。 参试者：选择活动期类风湿性关节炎患者和膝关节骨关节炎患者各15例。类风湿性节炎组男5例，女10例，年龄20～66岁；骨关节炎组男4例，女11例，年龄56～75岁。透痹逐邪方药物组成：马钱子1g，掌牛仔15g，细辛3g，白蒺藜15g，全蝎3g，桂枝5g，竹沥10mL等。 方法：类风湿性关节炎组应用透痹转气法治疗，3个月为1个疗程，治疗2个疗程后观察临床疗效及肿瘤坏死因子α、C－反应蛋白、血沉等指标变化。骨关节炎组只进行治疗前的水通道蛋白1测定，未进行疗效观察及治疗后水通道蛋白1检测。 主要观察指标：类风湿性关节炎组治疗前、后及骨关节炎组治疗前关节滑膜水通道蛋白1基因表达。 结果：类风湿性关节炎组临床症状明显改善，与治疗前相比，炎症指标明显降低（P〈0.01，P〈0．05）；水通道蛋白1在膝关节滑膜细胞有表达，类风湿性关节炎组治疗前较治疗后及骨关节炎组水通道蛋白1基因表达明显增强（P〈0．05）。 结论：透痹转气法明显改善类风湿性关节炎患者的症状，降低炎症指标；水通道蛋白1高表达可能是类风湿性关节炎关节肿痛机制之一。     

壳寡糖对兔骨关节炎的治疗效果

目的 探讨关节腔内注射壳寡糖对兔骨关节炎的治疗效果及其作用机制.方法 新西兰兔12只,于右膝关节腔内各注射4 g/L的木瓜酶溶液0.3 mL,随机分为生理盐水对照组及20 g/L的壳寡糖实验组.自造模7 d后右膝关节开始给药,每周1次,共5周.于末次给药后7 d以空气栓塞法处死动物,关节软骨及滑膜组织以苏木精-伊红（HE）染色,光镜下观察其病理变化,免疫组织化学染色法检测膝关节软骨及滑膜组织肿瘤坏死因子α（TNF-α）的表达.结果 HE染色表明,实验组退变软骨及滑膜的病理变化轻于对照组,免疫组织化学染色法显示,实验组TNF-α的表达明显低于对照组.结论 壳寡糖能够明显降低骨关节炎滑膜、软骨组织中TNF-α的表达水平,延缓软骨的退变程度,可能成为一种新的骨关节炎治疗药物,值得进一步研究、开发和利用.     

高频超声在评价药物治疗膝骨关节炎病变中的应用价值

目的 超声对于膝骨关节炎药物治疗效果的评价.方法 对比膝骨关节炎患者行药物治疗前及治疗后的膝关节髌上囊积液、滑膜、软骨及骨质破坏的声像图的变化特征.结果 药物治疗后膝骨关节炎患者的膝关节滑膜厚度变薄,髌上囊积液量变少;膝关节滑膜的血流信号较治疗前减少;膝关节软骨及骨质破坏未见明显改变.结论 超声可以清晰的观察膝骨关节炎患者髌上囊积液、滑膜、软骨及骨质破坏等改变,为临床药物治疗膝骨关节炎的疗效提供较好的影像学评价依据.     

热矿泥浴对实验性兔膝骨关节炎的作用机制

目的观察热矿泥浴对实验性兔膝骨关节炎的作用及机制。方法新西兰兔右膝关节腔内注射木瓜蛋白酶,再随机分为泥浴组(12只)和对照组(11只)。泥浴组从造模第15天开始,每天给予热矿泥浴治疗1次,连续28d。实验结束时留取血清及关节灌洗液标本以备检测超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA);观察软骨的大体改变,取滑膜及软骨作组织病理学观察。结果泥浴组的软骨病变程度(包括软骨面的各种损伤及软骨细胞的增生、紊乱)和滑膜炎症程度(包括滑膜衬底细胞增生、滑膜下层肉芽组织及血管侵入、炎症细胞浸润等)均有显著减轻,关节灌洗液中的SOD和血清MDA显著升高。结论热矿泥浴能抑制骨关节炎的滑膜炎症,减轻软骨破坏,其机制可能与提高关节局部的抗氧化能力有关。     

热矿泥浴对实验性兔膝骨关节炎的作用机制

目的 观察热矿泥浴对实验性兔膝骨关节炎的作用及机制。方法 新西兰兔右膝关节腔内注射木瓜蛋白酶，再随机分为泥浴组（12只）和对照组（11只）。泥浴组从造模第15天开始，每天给予热矿泥浴治疗1次，连续28d。实验结束时留取血清及关节灌洗液标本以备检测超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）；观察软骨的大体改变，取滑膜及软骨作组织病理学观察。结果 泥浴组的软骨病变程度（包括软骨面的各种损伤及软骨细胞的增生、紊乱）和滑膜炎症程度（包括滑膜衬底细胞增生、滑膜下层肉芽组织及血管侵入、炎症细胞浸润等）均有显著减轻，关节灌洗液中的SOD和血清MDA显著升高。结论 热矿泥浴能抑制骨关节炎的滑膜炎症，减轻软骨破坏，其机制可能与提高关节局部的抗氧化能力有关。     

超声在老年膝关节软骨滑膜病变检查中的应用

背景：超声作为无创性检查手段应用于骨骼肌系统检查已得到广泛的认识与认可。目的：探讨超声检查在老年人膝关节退行性变中的临床应用价值。方法：选取60岁及以上连续就诊的膝关节疾病患者102例,204个膝关节,根据膝关节退行性变临床诊断标准,分为2组：膝骨关节炎组167个膝关节,非膝骨关节炎组37个膝关节。行膝关节超声探查,观察膝关节髌上囊、内侧滑囊、外侧滑囊积液深度、滑膜、血管翳、软骨情况。结果与结论：204个膝关节中,发生膝关节退行性变的有167膝,原发性膝关节炎91膝,非原发性膝关节炎76膝,退变率82%,膝骨关节炎组膝关节腔髌上囊、内测滑囊、外侧滑囊积液量显著多于非膝骨关节炎组,滑膜增生59膝,伴有血管翳形成23膝,软骨表面毛糙167膝,软骨变薄或丧失117膝。非膝骨关节炎组滑膜增生5膝,软骨表面毛糙27膝,软骨变薄或丧失4膝。结果提示超声作为一种影像学检查手段对评价老年人膝关节退行性变具有实际的应用意义。     

超声对软骨细胞凋亡、caspase-8和caspase-3表达的影响

背景：超声治疗能够缓解疼痛,改善膝骨关节炎患者的运动功能,但目前关于超声治疗的文献缺乏一致性。目的：进一步验证超声治疗的膝骨关节炎有效性。方法：24只兔子随机分为3组,正常组不干预;模型组兔行前交叉韧带离断诱导膝骨关节炎,不接受任何治疗;超声组兔建模后接受超声波治疗10min／次,1次／d,0．3W／cm2,1MHz,共治疗10次。采用苏木精一伊红染色进行兔关节软骨组织学观察,运用免疫印迹和RT-PCR技术检测兔软骨中的caspases3和caspases8的表达,TUNEL技术检测兔膝骨关节软骨细胞凋亡率。结果与结论：正常兔软骨组织软骨细胞呈柱状整齐的排列,模型中软骨层变薄,软骨细胞排列无序而少。超声治疗后软骨细胞重新排列,趋于整齐,细胞数增加。模型组为膝骨关节炎模型;与正常组比较,模型组和超声组改良Mankin评分较高,模型组和超声组软骨细胞凋亡指数更高,模型组高于超声组。与正常组比较,模型组和超声组caspase．3和caspase．8表达较高,超声治疗后两项指标表达下降。结果表明,超声可以改善软骨组织结构、降低caspase．3、caspase．8的表达,降低软骨细胞凋亡。提示超声治疗膝骨关节炎是有效的。     

低强度激光联合照射口咽部和犊鼻穴对实验性膝骨关节炎兔氧自由基代谢的影响

背景:目前激光照射治疗膝骨关节炎以局部照射为主、输出功率和信号较为单一,多次照射易产生生物适应而降低疗效.目的:探讨携带有针灸补泻信息的低能量激光联合多部位照射对实验性膝骨关节炎兔血清和滑膜组织中氧自由基代谢的影响.方法:向兔膝关节腔内注入木瓜蛋白酶制备兔膝骨关节炎模型.穴位照射组和联合照射组分别以低能量激光单独照射犊鼻穴或联合照射口咽部及犊鼻穴,10 min/d,5d为1个疗程,连续3个疗程.参照试剂盒方法测定血清一氧化氮、丙二醛水平和超氧化物歧化酶活性及膝关节滑膜组织丙二醛水平和超氧化物歧化酶活性;苏木精-伊红染色观察膝关节软骨组织形态学变化.结果与结论:兔膝骨关节炎后,软骨出现明显的病理损伤,血清一氧化氮、丙二醛水平均显著升高(P<0.01或P<0.05),超氧化物歧化酶活性显著降低(P<0.05).经激光穴位照射和激光联合照射后病理损伤有所减轻,血清一氧化氮、丙二醛水平均下降,超氧化物歧化酶活性升高,以联合照射组效果显著(P<0.05).兔膝关节滑膜组织中丙二醛水平和超氧化物歧化酶活性变化与血清中相一致.说明低能量激光联合照射口咽部和犊鼻穴能够纠正膝骨关节炎兔氧自由基代谢紊乱,减轻关节软骨细胞结构损伤,其效果优于激光单独照射犊鼻穴.     

两种治疗方法对兔膝骨关节炎软骨MMP-1的影响

目的:观察超声波及电针治疗对兔膝骨关节炎(KOA)软骨MMP-1表达的影响。方法:40只新西兰大耳兔随机分为正常组、模型组、超声波组和电针组。除正常组外,其余各组采用左膝伸膝位管型石膏固定6周制作KOA模型。模型成功后,超声波组实施3MHz脉冲式超声波治疗;电针组取梁丘、足三里(后三里)、血海、阳陵泉等穴,疏密波刺激,均每日1次。连续治疗14d后4组大耳兔均处死,光镜下观察左膝股骨内侧髁软骨及基质的HE染色改变,采用Mankin’s评分;免疫组织化学MMP-1测定。结果:与正常组比较,模型组、超声波组和电针组软骨及基质Mankin’s评分均明显升高(0.10±0.32与9.90±1.73、4.81±1.23、5.03±1.20,P<0.01),MMP-1表达也明显升高(13.89±3.10与54.65±9.27、31.64±6.69、34.87±4.23,P<0.01)。与模型组比较,超声波组和电针组两项指标均明显降低(P<0.01)。超声波组与电针组两项指标比较差异无统计学意义。结论:超声波和电针治疗均能降低KOA兔软骨中MMP-1的表达,达到治疗KOA的作用。     

低强度脉冲超声联合药物治疗创伤性膝关节骨性关节炎的临床研究

目的:观察低强度脉冲超声(low intensity pulsed ultrasound,LIPUS)联合药物治疗对创伤性膝关节骨性关节炎(traumatic knee osteoarthritis,TKOA)的临床治疗效果。方法:将60例TKOA患者随机分为联合组、对照1组和对照2组,20例/组。联合组:予LIPUS联合口服非甾体类抗炎药(NSAIDs)治疗;对照1组:予单纯LIPUS治疗;对照2组:予单纯口服NSAIDs治疗。分别在治疗前后,进行3组间的VAS评分、(Western Ontario and Mc Master universities osteoarthritis index,WOMAC)评分、(Lysholm knee score,LKSS)评分;并经MRI检查行ICRS标准分级,测量膝关节内外侧髁、髌软骨外侧、内侧软骨T2值。结果:经6周治疗后,三组VAS评分、WOMAC评分、LKSS评分均较治疗前有不同程度的改善,联合组疗效明显优于对照1组(P0.05)和对照2组(P0.05),对照1组优于对照2组,但无显著性意义(P0.05);三组MRI检查T2值结果无论与检查前比较,还是三组间比较均未见明显治疗效果(P0.05)。结论:LIPUS联合药物治疗可改善TKOA患者的临床症状和/或体征,可一定程度的提高患者的膝关节功能,但对依据MRI检查的TKOA患者膝关节软骨的损害或退变程度无明显关联性。     

红花注射液关节腔冲洗结合钩针松解治疗膝关节骨性关节炎

目的：探讨运用红花注射液膝关节腔冲洗结合钩针松解治疗膝关节骨性关节炎的临床效果。方法：将78例膝关节骨性关节炎患者随机分为治疗组和对照组,各39例。对照组患者关节镜手术中灌注液采用临床普遍采用的生理盐水进行膝关节腔灌注冲洗,治疗组患者采用目前临床使用广泛的活血通络代表药物红花注射液灌注冲洗膝关节腔灌注并结合钩针松解膝关节周围软组织粘连。结果：治疗组治疗后平均积分（89.250±13.236）分,对照组治疗后平均积分（66.750±12.250）分,两组比较差异有统计学意义（P〈0.01）,表明关节镜下红花注射液灌注冲洗治疗膝关节骨性关节炎疗效显著。结论：采用红花注射液膝关节腔冲洗改善微循环、缓解炎性改变、促进关节软骨及滑膜损伤组织的修复,并结合钩针松解膝关节周围软组织的粘连、调整膝关节力学平衡,以恢复膝关节功能活动,消除临床症状,该方法疗效显著,安全可靠。     

Extrusion of pyrophosphate into extracellular media by osteoarthritic cartilage incubates.

The distribution of calcium pyrophosphate mineral phase, almost exclusively confined to articular cartilage in chondrocalcinosis, and the high level of pyrophosphate (PPi) ion relative to serum in synovial fluid in patients with either chondrocalcinosis or advanced osteoarthritis led to an investigation of whether cartilage cells elaborate PPi ions. Incubates of articular cartilage from young rabbits but not from mature rabbits, as well as growth plates cartilage, released PPi into incubation media during a 4h period. Control rabbit ear cartilage and synovial membrane elaborated negligible amounts of PPi. The PPi was shown to be undialyzable but could be dissociated from the alkaline phosphatase by ultracentrifugation. In 16 patients with osteoarthritis, a substantial output of PPi by samples of articular cartilage from the knee was demonstrated. It is postulated that either rapid cell division and matrix synthesis found in the base of ulcerating osteoarthritic cartilage or remodeling calcified sites are the source of the PPi in such osteoarthritic cartilage. It is further hypothesized that this PPi output accounts at least in part for the elevated PPi levels found in synovial fluid of patients with osteoarthritis.     

低强度脉冲超声介导威灵仙干预兔膝关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原和转化生长因子β1的表达

背景：研究显示威灵仙可促进软骨细胞增殖,维持和促进软骨细胞合成蛋白多糖和Ⅱ型胶原;低强度脉冲超声能有效促进软骨细胞增殖、提高细胞膜的通透性,促进药物或基因的传递,从而提高药物的生物学效应。目的：观察低强度脉冲超声介导威灵仙对体外培养的兔膝关节软骨细胞增殖、Ⅱ型胶原及转化生长因子β1表达的影响,探讨低强度脉冲超声介导威灵仙在软骨损伤修复中的作用及机制。方法：体外分离培养兔膝关节软骨细胞,取处于对数生长期的2代细胞,随机分为4组：对照组,低强度脉冲超声组,威灵仙组,威灵仙＋低强度脉冲超声组,干预3 d后分别采用CCK-8比色法检测软骨细胞增殖情况,细胞化学染色法分析Ⅱ型胶原分泌情况及Western blot检测转化生长因子β1的表达情况。结果与结论：干预培养3 d后,与对照组比较,其他3组细胞数量均显著增加（P〈0.05）,威灵仙＋低强度脉冲超声组细胞数量最多;威灵仙＋低强度脉冲超声组软骨细胞Ⅱ型胶原表达面积、吸光度值均显著大于对照组（P〈0.05）,且其差值大于低强度脉冲超声组、威灵仙组与对照组差值之和;威灵仙＋低强度脉冲超声组转化生长因子β1表达水平显著,其相对灰度值显著高于其他各组（P〈0.05）。结果提示低强度脉冲超声、威灵仙均可促进体外培养兔膝关节软骨细胞增殖及Ⅱ型胶原、转化生长因子β1的分泌,二者联用具有一定的协同作用。     

体外冲击波治疗兔膝骨关节炎：白细胞介素1β及基质金属蛋白酶13的表达

背景：白细胞介素1β和基质金属蛋白13能促进软骨细胞的分解代谢,抑制软骨细胞的合成修复能力,引起细胞外基质的降解,在骨关节炎的发生中有十分重要的作用。 目的：观察体外冲击波对兔膝骨关节炎软骨细胞中白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13表达的影响。 方法：将30只新西兰兔随机分为治疗组、模型组、对照组,每组10只。治疗组和模型组均采用改良伸直位固定6周,制备兔膝骨关节炎模型。治疗组造模后给予体外冲击波治疗1次,能流密度0.1 mJ/mm2,冲击次数1000次。对照组不作任何处理。各组兔于治疗后4周处死,取膝关节液和关节软骨。苏木精-伊红染色和甲苯胺蓝染色法检测各组膝关节病理学形态改变,采用酶联免疫吸附法测定关节液白细胞介素1β水平,免疫组化法检测白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13的表达。 结果与结论：治疗组和模型组关节液白细胞介素1β水平较对照组明显增高（P 〈0.01）,治疗结束后治疗组关节液白细胞介素1β水平较模型组下降（P 〈0.05）。治疗组和模型组软骨组织Mankin评分较对照组明显增高（P〈0.01）,治疗结束后治疗组软骨组织Mankin评分较模型组下降（P〈0.05）。治疗组和模型组软骨细胞白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13阳性表达率较对照组明显增高（P〈0.01）,治疗结束后治疗组软骨细胞白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13阳性表达率较模型组下降（P〈0.05）。结果可见体外冲击波能下调膝骨关节炎软骨细胞白细胞介素1β和基质金属蛋白酶13的表达,促进Ⅱ型胶原和蛋白聚糖的合成,从而对膝骨关节炎起防治作用。