CD34及CD105两种微血管标记物在瘢痕微血管构筑中的比较

背景:在瘢痕微血管构筑研究中,目前尚无可靠的瘢痕新生血管标记物。CD34和CD105是目前常用来标记微血管密度的一种方法,但两者又有各自特点。目的:比较CD34、CD105两种微血管标记物在病理性瘢痕微血管构筑方面的特征差异。方法:采用免疫组化的方法检测人正常皮肤、非病理性瘢痕、增生性瘢痕和瘢痕疙瘩内CD34、CD105的表达,采用图像分析软件测量阳性染色的微血管的内径、表达面积并分析以CD34、CD105标记的微血管的形态、分布特征。结果与结论:在所有标本内,CD34标记的微血管较为成熟,多表现为分支状、肝窦状及芽孢状,微血管内径平均值为(73.14±13.81)μm;CD105标记的微血管较为幼稚,多表现为圆形或镶嵌状,部分无管腔,微血管内径平均值为(27.91±5.86)μm。作为微血管标记物,CD105在标记瘢痕新生血管方面优于CD34,CD105可视作瘢痕新生血管可靠的标记物。     

转移瘤CD34及微血管表达的研究

目的：探讨CD34在转移癌微血管中的表达。方法对43例转移癌组织标本（转移癌组）及11例舌鳞癌癌组织标本（鳞癌组）采用免疫组织化学SP法进行CD34染色;采用Weidner法计算CD34标记的肿瘤组织微血管密度（MVD）。结果应用显微照相系统计数转移癌组标本微血管数目为2～6根,鳞癌组标本的微血管数目为14～19根,转移癌组CD34的表达明显低于鳞癌组（P＜0.01）。血管标记物标记的癌组织MVD值在男、女患者之间及在不同的转移瘤之间比较差异均无统计学意义（均P＞0.05）。结论 CD34是理想的血管内皮细胞标记物,转移瘤血管生成较原发肿瘤明显减少,与原发肿瘤血管生成有明显差异。     

瘢痕微血管构筑的研究进展

众所周知,任何修复过程都伴有血管的变化。采用碱性磷酸酶组化法及CD34组化法已成功地显示了瘢痕中微血管构筑,无论从瘢痕的临床表现、瘢痕的超微结构,还是治疗机制、手术时机的选择及治疗效果的观察上,无不与瘢痕的微血管构筑有关。     

瘢痕微血管构筑的研究进展

众所周知，任何修复过程都伴有血管的变化。采用碱性磷酸酶组化法及CD34组化法已成功地显示了瘢痕中微血管构筑无论从瘢痕的临床表现、瘢痕的超微结构，还是治疗机制、手术时机的选择及治疗效果的观察上，无不与瘢痕的微血管构筑有关。     

乳腺癌中CD146标记微血管密度的研究

目的利用CD146标记乳腺癌中微血管密度(MVD)并分析微血管生成情况与乳腺癌临床病理特征的关系。方法收集79例乳腺癌组织标本,利用免疫组化的方法检测乳腺癌中CD146标记的微血管密度及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达,分析微血管生成与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果 CD146在乳腺癌细胞及血管内细胞中表达,高MVD与乳腺癌的大小和淋巴结转移呈正有关,但与乳腺癌患者的年龄、组织学分级、ER、PR的表达情况无关。结论 CD146可作为MVD的一个评估标记物,并可作为评估肿瘤生长和转移的预测指标。     

CD34表达与乳腺癌浸润和转移关系研究

目的探讨乳腺癌浸润、转移过程中CD34表达及微血管密度的意义。方法采用免疫组织化学方法检测60例乳腺癌患者癌组织、癌旁2cm乳腺组织及距癌组织5cm以上正常乳腺组织中CD34的表达情况,检测3种组织中CD34标记的微血管密度。结果乳腺癌组织的微血管密度值（54．60±10．54）明显高于癌旁组织（33．05±7．70）和正常乳腺组织（25．40±5．71）,差异均有统计学意义（P〈0．01）。结论CD34阳性表达与乳腺癌血管生成有一定相关性。     

超声造影微血管成像对乳腺良恶性肿瘤微血管构筑的评价

目的 探讨乳腺良恶性肿瘤微血管构筑变化特征.方法 应用超声造影微血管成像(MVI)技术检测30例(33个病灶)乳腺恶性肿瘤、30例(34个病灶)乳腺纤维腺瘤微血管构筑变化特征,光、电镜观察瘤内新生血管显微结构及超微结构改变,免疫组化技术检测瘤内微血管密度(MVD).结果 造影后不均匀增强,充盈缺损,紊乱的血管网、血管扩张、血管迂曲征象在良恶性肿瘤有显著性差异(P<0.05).光镜下90.91%(30/33)乳腺恶性肿瘤中见坏死灶,间质中见弥漫分布粗细不均的新生血管,异常扩张的大血管和裂隙状的新生血管并存.乳腺纤维腺瘤均未见坏死灶,血管管径和分布均一.透射电镜下恶性组新生血管内皮细胞超微结构具有不同于正常血管内皮细胞的瘤性特征.恶性组MVD显著高于良性组(P<0.05).结论 实时超声造影MVI可以反映肿瘤血管的解剖和生理特征,造影后灌注模式的差异为乳腺良恶性肿瘤的鉴别诊断提供了重要依据.     

瘢痕微血管构筑与瘢痕形成及康复治疗相关性的研究进展

创伤修复后形成的瘢痕，尤其是增生性瘢痕是康复医学的难题。众所周知，任何修复过程都件有血管的变化，近年来，不断有学者报道瘢痕微血管构筑与瘢痕形成，发展康复防治之间的关系，综述如下。１增生性瘢痕与非增生性瘢痕微血管构筑形态学上区别增生性瘢痕与非增生瘢痕有关微血管构筑的形态学上区别，增生性瘢痕早期毛细血管的形成快而多，表现新生期活跃的特点，使瘢痕呈红色，以后随着胶原纤维由显著的旋涡状变成结节状，小动脉与毛细血管在结节周围也变得明显，后期结节被胶原纤维包围成包裹状，结节渐增大，真皮附件萎缩或被破坏，但到…     

瘢痕微血管构筑对瘢痕形成、发展及临床防治的基础研究

目的探讨瘢痕微血管构筑在瘢痕形成、发展及临床防治中的意义。方法利用CD34显示瘢痕的微血管构筑。结果增生性瘢痕微血管计数中央区为25.6±10.4/mm2,周围区为44.2±3.8/mm2,正常皮肤为18.6±2.2/mm2;小于或等于一年组的微血管密度为40.8±4.5/mm2,大于一年组为27.2±6.4/mm2;增生性瘢痕微血管计数周边区为44.2±3.8/mm2,萎缩性瘢痕周边区为22.8±2.7/mm2;不同类型瘢痕间、瘢痕不同区域及不同时期间微血管均有明显统计学差异(P<0.01)。结论增生性瘢痕明显高于萎缩性瘢痕内的微血管密度;瘢痕早期微血管密度高随着病程延长而逐渐减少;瘢痕交界处为较幼稚瘢痕,血管最为丰富,能代表整个瘢痕的生物学行为。     

骨髓基质细胞对微血管内皮细胞增殖、迁移、管腔化的影响

目的:观察骨髓基质细胞(BMSC)对微血管内皮细胞的增殖、迁移、血管新生的影响并探讨其作用机制.方法:体外培养BMSCs,通过体外BMSC/微血管内皮细胞共同培养模型,在倒置相差显微镜下,利用图像分析系统观察BMSCs条件培养基对微血管内皮增殖、迁移的影响,利用细胞外基质管腔形成实验评价BMSCs对微血管内皮细胞血管新生的影响.结果:BMSCs上清条件培养基、BMSCs/微血管内皮细胞共培养上清条件培养基与对照组比较可促进微血管内皮细胞增殖[(0.165±0.011)vs(0.170±0.008)vs(0.152±0.010),P＜0.05]、划痕修复能力[(1850.269±32.64)μm vs(2025.420±134.300)μm vs(1695.891±32.073)μm,P＜0.05]和管腔形成能力[(3.69±O.28)mm/mm2 vs(6.59±0.24)mm/mm2 vs(1.47±0.21)mm/mm2].结论:BMSCs分泌的因子可以促进微血管内皮细胞增殖、细胞迁移和血管新生.BMSCs移植治疗脑缺血,不仅通过神经保护起作用,也通过影响微血管内皮细胞,促进血管新生发挥治疗作用,改善神经功能.     

抗TGF-β1单克隆抗体对脐血CD34^＋细胞体外扩增作用的研究

为了探讨TGF—β1单克隆抗体对脐血CD34^＋细胞的扩增作用,本研究将分离纯化的脐血CD34＋细胞分为3组：①空白对照组：当天分选的新鲜脐血CD34＋细胞;②对照组：含SCF、FLT3-L、IL-3、IL-6四种因子组合的无血清液体培养体系中培养3天的脐血CD34＋细胞;③实验组：条件同对照组,但加入了TGF—β1单克隆抗体。3组均检测单个核细胞（MNC）计数,流式细胞术检测CD34和c—kit,计数混合集落（CFU—GEMM）、红系爆式集落（BFU—E）、粒系集落（CFU—GM）。结果显示：实验组MNC、CD34＋细胞、CD34＋c—kit＋细胞计数分别为[（2．35±0．25）×10^5、（1．16±0．29）×10^5、（1．09±0．26）×10^5],明显高于对照组[（1．25±0．13）×10^5、（0．55±0．19）×10^5、（0．51±0．2）×10^5],（P均〈0．01）。实验组CD34＋c—kit -亚群计数为（12．95±3．17）×10^3,明显高于对照组（1．71±0．83）×10^3,二者相比有显著性差异（P〈0．01）。实验组中早期集落CFU—GEMM、BFU—E的产率[（16．3±4．72）×10^3,（65．0±20．96）×10^3]明显高于对照组[（5．0±2．58）×10^3,（16．25±7．93）×10^3]（P〈0．01）,相对较晚期集落CFU—GM的产率在对照纽[（4．0±2．28）×10^3]和实验组[（6．33±2.85）×10^3]均高于空白组[（0．75±0．29）×10^3],但在对照组和实验组之间无显著性差异（P〉0．05）。此结果表明,TGF—β1单克隆抗体促进了脐血MNC和CD34＋细胞的扩增,且早期细胞CD34＋c—kit -细胞扩增更为突出;提高了早期集落CFU—GEMM和BFU—E的产量,而对相对较晚期的髓系集落CFU—GM的产量无明显影响。结论：TGF—β1单克隆抗体能协同其它生长因子有效扩增脐血CD34＋细胞,并保留一定量更早期的造血祖细胞,减轻了造血祖细胞分化的压力。     

CD146、血管内皮生长因子与前列腺癌血管生成关系的研究

目的探讨CD146、血管内皮生长因子（VEGF）在前列腺癌（PCa）中的表达及与肿瘤血管生成的关系。方法采用免疫组织化学法检测39例PCa和20例良性前列腺增生（BPH）组织中CD146、VEGF的表达情况,并检测CD34标记的肿瘤微血管密度（MVD）。结果 PCa组织中CD146的阳性表达率（82.05%）明显高于BPH组织（15.00%,P〈0.05）,其表达与PCa的病理分级无关（P〉0.05）,与临床分期有关（P〈0.05）。PCa组织中VEGF的阳性表达率（74.36%）明显高于BPH组织（10.00%,P〈0.05）,其表达与PCa的病理分级和临床分期有关（P〈0.05）。PCa中MVD（37.41±7.95）显著高于BPH（17.62±2.40,P〈0.05）,MVD与病理分级和临床分期显著相关（P〈0.05）。PCa中CD146阳性组及VEGF阳性组MVD（39.73±6.68、40.79±6.03）均高于CD146阴性组及VEGF阴性组（26.83±3.24、27.62±3.24,均P〈0.05）,CD146与VEGF的表达呈正相关（r=0.643,P〈0.05）。结论 CD146、VEGF在PCa中高表达并且与肿瘤血管生成密切相关。CD146、VEGF表达和微血管的形成在PCa的发生、浸润和转移中起重要作用。     

乳腺癌中LOX-5、CD34的表达及意义

目的检测乳腺癌中LOX-5及CD34的表达,分析LOX-5、CD34在乳腺癌中可能的作用及相互关系。方法采用免疫组化染色的方法共检测乳腺癌组织60例、乳腺纤维腺瘤组织及癌旁组织各20例中LOX-5与CD34的表达情况,分析其之间的相关性。结果以CD34标记的微血管密度(MVD)值在乳腺癌组(36.23±11.45)明显高于癌旁组(29.12±10.37)和乳腺纤维腺瘤组(30.01±9.58),且MVD值与LOX-5的阳性表达间存在正相关性。结论 LOX-5与以CD34标记的MVD值在乳腺癌组织中的表达呈正相关。提示LOX-5在乳腺癌发生、发展和微血管生成的过程中起到重要作用,因此,检测LOX-5蛋白的表达增高具有乳腺癌临床诊断和靶向治疗的意义。     

Endoglin (CD105) expression in the development of haemorrhoids

BACKGROUND: Conventional pathogenesis of haemorrhoid emphasized the anchoring connective tissue system, whereas the vascular changes were ignored. The aim of this study was to clarify vascular changes of haemorrhoid disease. MATERIALS AND METHODS: Forty-six samples of grade III and grade IV haemorrhoid tissue were selected for an in vitro study. We assessed the expressions in endoglin (CD105), an accessory protein in transforming growth factor-beta receptor complex, in CD34 and in vascular endothelial growth factor by using an immunohistochemical method. Microvascular density was calculated to correlate the expression of endoglin. RESULTS: Microvascular density was higher in haemorrhoid tissue than in normal anal and lower rectal tissues. CD34 was demonstrated in whole vessels in the haemorrhoids. However, endoglin, a proliferative marker of neovascularization, was present in only 25 of 46 (54%) haemorrhoidal vessels, and its immunoactivity was prominent in venules larger than 100 micro m. Thrombosis formation and stromal vascular endothelial growth factor was significantly associated with the presence of endoglin immunoactivity. CONCLUSION: The results of this study suggest that neovascularization is one important phenomenon of haemorrhoid disease, along with conventional venous dilatation and arteriovenous communication. In addition, thrombosis and stromal vascular endothelial growth factor might be important factors in promoting vascular proliferation.     

人脐带血内皮祖细胞与血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子共培养及其增殖和迁移能力

背景：目前组织工程心脏瓣膜再内皮化种子细胞主要来源于成熟内皮细胞,内皮祖细胞作为内皮细胞的前体细胞越来越受到人们的关注。目的：分离和扩增人脐带血内皮祖细胞,观测其体外生物学特性。方法：密度梯度离心法分离新鲜的脐血中单个核细胞,在含血管内皮生长因子和碱性成纤维细胞生长因子的培养液中培养扩增,通过形态学、免疫荧光和流式细胞仪等对贴壁细胞进行鉴定;并与脐静脉内皮细胞进行增殖和迁移能力比较。结果与结论：随着培养和诱导时间延长,贴壁细胞形态发生明显的改变,从小圆形变成梭形,逐渐分化成典型成熟内皮细胞的鹅卵石样形态,并可形成特征性的克隆;体外诱导7d后90%以上贴壁细胞呈Dil-ac-LDL和FITC-UEA-I双阳性;贴壁细胞流式细胞仪分析显示：培养7d的细胞VEGFR-2、CD34和CD133表达分别占（77.4±4.9）%、（52.4±6.6）%和（19.4±2.1）%,培养28d的细胞VEGFR-2和CD34表达分别占（81.1±7.4）%和（7.6±3.1）%,而未检测到CD133表达;人内皮祖细胞增殖和迁移能力明显高于人脐静脉内皮细胞（P〈0.05）,并且细胞数量可扩增达109L-1。结果显示用密度梯度离心法和贴壁筛选法,可从人脐带血分离、纯化内皮祖细胞;内皮祖细胞可诱导分化为内皮细胞,增殖和迁移能力都很强。     

缺氧诱导因子1α在人胰腺导管腺癌中的表达及其与微血管形成的关系

目的：探讨胰腺导管腺癌组织中缺氧诱导因子1α（hypoxia inducible factor 1α,HIF-1α）表达与血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）表达、微血管密度之间的关系及其临床意义。方法：运用免疫组织化学方法对2009年10月-2010年10月手术切除的43例胰腺导管腺癌标本和20例正常胰腺组织对照标本分别进行HIF-1α、VEGF和CD34检测,再结合肿瘤的临床和病理学特征进行相关分析。结果：HIF-1α、VEGF在胰腺癌组织中表达均显著高于正常胰腺组织（67．4％比10．0％和76．7％比35．0％,P〈0．01）,胰腺癌组织中的微血管密度（micro vessel density,MVD）计数也显著高于正常胰腺组织（21．95±7．83比11．95±3．90,P〈0．01）。HIF-1α表达与VEGF、MVD等呈正相关,且HIF-1α表达与肿瘤的直径、临床分期以及有无淋巴结或远处转移相关,而与肿瘤的部位和病理学分级之间无关。结论：HIF-1α在人胰腺导管腺癌中高表达,并与胰腺癌微血管形成以及胰腺癌的生物学行为关系密切,有望为胰腺癌的治疗和预后判断提供参考。     

脐带血重建造血潜能的母体及新生儿因素分析

脐带血作为一种备选的移植用造血干细胞,能否成功植入与输入受者体内的总有核细胞（total nucleated cells,TNC）数、CD34＋细胞数及粒-巨噬细胞集落形成单位（colony-forming unit-granulocyte-macrophage,CFU-GM）有关。本研究探讨影响脐带血造血潜能的母体及新生儿因素。按照广州脐血库标准化操作常规（SOP）,对脐带血样本进行筛选、处理、检测及冷冻,回顾性分析已保存的4615份脐带血样本的造血细胞参数及其与母体及新生儿特征的相关性。结果表明：脐带血采集量（Mean±SD：95.23±22.42ml;Median：91.85ml）与处理前TNC[Mean±SD：（1.34±0.49）×109;Median：1.25×109]及处理后TNC[Mean±SD：（1.21±0.42）×109;Median：1.14×109]、CD34＋细胞数[Mean±SD：（5.14±4.55）×106;Median：4.08×106]、CFU-GM[Mean±SD：（9.72±8.66）×105;Median：7.53×105]三者均显著相关（p〈0.001）。在供者因素中,只有婴儿出生体重与脐带血采集量及造血细胞参数均呈显著正相关（p〈0.001）,较大婴儿的脐带血在采集量、TNC、CD34＋细胞数及CFU-GM方面均呈现优势（p〈0.001）。母亲年龄与上述各项参数均无显著相关。孕龄与处理前/后TNC正相关（p〈0.001;p〈0.001）,与CD34＋细胞数呈负相关（p=0.04）,而与采集量及CFU-GM均无显著相关。剖宫产时采集的脐带血量虽然高于阴道分娩（Mean±SD：97.05ml±22.23mlvs.92.53ml±22.43ml;Median：94.08mlvs.88.82ml;p〈0.001）,但各细胞参数均低于阴道分娩（p〈0.001）。男婴脐带血的采集量和CD34＋细胞数高于女婴（Mean±SD：96.41ml±22.31mlvs.93.95ml±22.47ml;Median：93.27mlvs.90.14ml;p〈0.001）;[Mean±SD：（5.28±5.04）×106vs.（5.00±3.94）×106;Median：4.18×106vs.3.94×106;p=0.042]、但处理前TNC及处理后TNC均低于女婴[Mean±SD：（1.31±0.50）×109vs.（1.37±0.47）×109;Median：1.22×109vs.1.28×109;p〈0.001];[Mean±SD：（1.18±0.42）×109vs.（1.24±0.41）×109;Median：1.10×109vs.1.17×109;p〈0.001],二者CFU-GM的差异无统计学意义。结论：本研究数据有助于优化脐带血供者筛选及提高脐血库资源利用率。脐血库应侧重选择体重较大、阴道分娩的新生儿供者,优先处理采集量大、TNC高的脐带血样本。     

微血管密度与血管生成素2在结直肠癌中的表达及意义

目的探讨微血管密度(MVD)和血管生成素2(Ang-2)在结直肠癌中的表达和相互关系,以及它们在血管生成中的作用;探讨CD105作为新生血管标记物的临床价值。方法运用免疫组织化学技术检测CD105,Ang-2和CD34蛋白在80例结直肠腺癌组织和40例正常肠组织中的表达情况,并计算MVD,分析其表达与临床病理因素之间的关系。结果①MVD及Ang-2在结直肠癌组织与正常肠组织间表达有差异,差异具有非常显著性意义(P<0.01,P<0.01);②以CD105和CD34测得的MVD差异具有非常显著性意义(P<0.01);③Ang-2在结直肠癌中的表达与CD105的表达呈显著正相关(P<0.01),而与CD34的表达无关(P>0.05);④结直肠癌组织中以CD105测得的MVD和Ang-2的表达与浸润深度、淋巴结转移及Dukes分期有关,差异具有非常显著性意义(P<0.01);而与性别、年龄及分化程度无关(P>0.05)。结论①CD105和Ang-2均与结直肠癌血管生成有关,二者协同在结直肠癌生长、浸润及转移过程中发挥重要作用;②CD105在结直肠癌组织新生血管中有良好表达,以CD105测得的MVD可以被认为是与肿瘤生长、转移及预后有关的一项重要指标;CD105作为结直肠癌新生血管有价值的标记物,对于结直肠癌的早期诊断、判断预后和综合治疗具有重要临床意义。