结直肠癌中肿瘤相关巨噬细胞及基因表型的分析研究

目的结直肠癌(Colorectal cancer,CRC)中肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)CD68~+及CD163~+的检测及与基因表型的关系。方法免疫组化方法检测41例CRC肿物,癌旁5 cm(M5)、10 cm(M10)。不典型增生(Atypical hyperplasia,AH)组织CD68~+及CD163~+的表达,采用病理切片扫描仪细胞计数。对41例CRC肿物进行基因检测。结果CRC患者CD68~+及CD163~+检测肿物组织高于癌旁5 cm、10 cm(P0.01);肿物与不典型组织比较差异无统计学意义(P0.05);癌旁组织M5与M10比较差异无统计学意义(P0.05);回归分析提示CD163~+表达与K-ras基因突变有显著性关系(P0.05)。CD68~+及CD163~+的表达与B-raf基因突变、MSS(微卫星稳定型)、淋巴结转移、脉管癌栓、神经侵犯无相关性(P0.05)。结论 CD68~+及CD163~+在结直肠癌肿物间质中高表达,并高于癌旁组织,与AH表达无相关性。CD163~+在肿物的表达与K-ras基因突变有相关性。     

CD68、CD163阳性巨噬细胞在食管癌组织浸润及对预后的影响

目的 探讨CD68+/CD163+巨噬细胞在食管癌组织浸润及其对预后的影响.方法 应用免疫组化方法检测CD68+、CD163+巨噬细胞在食管癌组织的浸润,比较CD68、CD163阳性巨噬细胞浸润密度及对食管癌患者预后的影响.结果 食管癌组织CD68、CD163阳性巨噬细胞浸润密度较癌旁正常组织明显增多(t=21.379...     

贲门癌组织中CD3+T细胞的数量与临床病理指标间的关系

目的 探讨贲门癌中CD3+T细胞数量与贲门癌临床病理指标间的关系.方法 用免疫组化Elivision法对42例贲门癌、18例癌旁组织以及12例正常贲门黏膜组织中的CD3+T细胞进行染色,并分析其与临床病理指标间的关系.结果 (1)标本中CD3+T细胞平均数量从高到低依次为癌旁组织,癌组织和正常黏膜(P<0.05).(2)贲门癌中CD3+T细胞平均数量与患者的年龄、性别、肿瘤的组织类型及分化程度无相关性(P>0.05).(3)贲门癌中CD3+T细胞平均数量与肿瘤浸润深度及淋巴结转移情况呈明显负相关(P<0.05).结论 CD3+T细胞的数量与肿瘤浸润深度和淋巴结转移情况呈负相关,CD3+T细胞可能在延缓贲门癌的病情进展方面起到一定作用.     

组织CD68+巨噬细胞与CD57+NK细胞对原发性食管癌生存状况的影响

目的：探究组织CD57+自然杀伤（natural killer,NK）细胞与CD68+巨噬细胞对原发性食管癌生存状况的影响。方法：回顾性分析2013年6月至2015年6月期间我院收治的96例原发性食管癌患者的临床资料。通过免疫组织化学染色法对患者CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞的浸润水平进行评估,分析96例患者CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞浸润情况、细胞浸润水平与病理特征的关系、CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞与TNM分期的关系、细胞浸润对原发性食管癌患者生存状况的影响。结果：原发性食管癌患者上皮组织中CD57+NK细胞高度浸润程度为64.58％,CD68+巨噬细胞为51.04％。原发性食管癌患者上皮组织中CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞浸润水平与患者的年龄、性别、肿瘤大小、N分期、T分期、TNM分期均无显著相关性（P＞0.05）。原发性食管癌患者CD57+NK细胞、CD68+巨噬细胞在TNM分期Ⅰ-Ⅱ期与Ⅲ-Ⅳ期上的比较,癌旁CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞计数无统计学差异（P>0.05）。Ⅰ-Ⅱ期患者癌中CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞计数分别为（8.35±5.36）个/HP和（39.43±14.05）个/HP,均明显高于Ⅲ-Ⅳ期患者[（5.34±4.55）个/HP、（20.18±9.62）个/HP],差异具有统计学意义（P<0.05）。采用 Cox模型（Forward：LR,引入α=0.05,剔除α=0.10）分析细胞浸润对原发性食管癌患者生存状况的影响。原发性食管癌患者肿瘤组织中CD57+NK细胞低浸润水平具有较高的死亡风险（P=0.046,RR=0.794,95％CI=0.633~0.996）;原发性食管癌患者肿瘤组织中CD68+巨噬细胞高浸润水平具有较高的死亡风险（P=0.000,RR=1.925,95％CI=1.364~2.717）。结论：CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞浸润水平能够反映机体免疫状态,CD57+NK细胞与CD68+巨噬细胞浸润水平检测在判断原发性食管癌患者的生存状况方面具有一定的临床价值。     

肿瘤相关巨噬细胞CD163在乳腺癌组织中的表达及对乳腺癌细胞生物学特性的影响

目的分析CD163巨噬细胞在乳腺癌组织中的表达及其对乳腺癌细胞增殖、侵袭能力的影响。方法收集2010年1月—2012年12月南京大学医学院附属鼓楼医院普外科收治的160例经病理学证实为乳腺癌患者的组织标本及其癌旁(距癌组织≥5 cm)正常组织标本,比较乳腺癌组织和癌旁正常组织CD163巨噬细胞表达情况,依据染色结果将CD163巨噬细胞分为高、低表达组,分析其与乳腺癌患者临床病理特征的关系,采用小分子干扰技术下调巨噬细胞MH-S中CD163的表达,与乳腺癌细胞MCF-7共培养,平板克隆实验观察细胞增殖能力,Transwell实验观察细胞侵袭能力,流式细胞术检测细胞周期。结果乳腺癌组织中CD163~+巨噬细胞浸润数量明显高于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(t=134.273,P<0.01);CD163~+巨噬细胞在不同年龄及肿瘤直径中的浸润数量差异无统计学意义(P均>0.05),而在不同分化程度、TNM分期及淋巴结转移间差异有统计学意义(χ~2=23.498、13.965、9.753,P<0.01)。正常表达CD163的MH-S共培养MCF-7细胞的增殖能力和侵袭能力均明显高于低表达CD163的MH-S共培养的MCF-7细胞(t=11.960、18.397,P<0.01);与siRNA-NC组相比,siRNA-FAM组的G1期MCF-7细胞所占的比例明显增高,差异具有统计学意义(t=6.398,P<0.01),而G2期细胞所占的比例明显降低,差异亦具有统计学意义(t=9.542,P<0.01)。结论乳腺癌组织中CD163~+巨噬细胞数量明显升高,与临床分期、淋巴结转移、分化程度密切相关,且CD163能够增强乳腺癌细胞增殖、侵袭能力。     

CD68-TAMs和CD105-MVD在喉鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:探讨以CD68标记的肿瘤相关巨噬细胞(CD68-TAMS)及CD105标记的微血管密度(CD105-MVD)在喉鳞癌组织的表达及临床意义。方法:回顾性研究经手术切除及病理检查确诊的喉鳞癌石蜡标本40例,并以20例癌旁正常组织(未被喉癌细胞浸润)作为对照组。采用免疫组织化学SP法检测CD68-TAMs和CD105蛋白表达情况和微血管密度MVD,采用Keplan-meier法分析CD68-TAMs和CD105-MVD表达与患者预后的关系。结果:喉癌组CD68-TAMS阳性表达率77.5%(31/40)明显高于对照组20.00%(2/20),两者比较差异有统计学意义(P<0.05),CD105-MVD喉癌组阳性表达率72.50%(31/40)明显高于对照组30.00%(6/20),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。CD68-TAMs表达与淋巴结转移、肿瘤分化程度、TNM分期有关(P<0.05),CD105-MVD表达与淋巴结转移、肿瘤分化程度有关(P<0.05)。CD68-TAMs和CD105-MVD呈正相关关系(r=0.528);CD68-TAMs表达...     

肿瘤相关巨噬细胞和幽门螺杆菌感染在各部位Ⅲ期胃腺癌患者预后中的意义

目的:分析肿瘤相关巨噬细胞(TAMs)标志物(抗原CD68和CD163)表达和幽门螺杆菌(Hp)感染对不同部位Ⅲ期胃腺癌患者预后的影响。方法:收集2012年1月—2014年12月天津医科大学肿瘤医院胃部肿瘤科300例确诊为Ⅲ期胃腺癌患者的病例资料（根据发生部位的不同,分为胃底贲门癌组、胃体癌组和胃窦癌组,各100例）。比较3组患者一般资料;免疫组化染色法检测患者的肿瘤组织中有无Hp感染、CD68+TAMs以及CD163+TAMs的分布情况;根据CD68+TAMs的浸润情况将胃腺癌分为Ⅰ型（癌巢边缘浸润数量多于癌巢）和Ⅱ型（癌巢浸润数量多于癌巢边缘）,利用Kaplan-Meier法分析Ⅰ型和Ⅱ型胃腺癌患者预后的关系。然后分析Ⅰ型和Ⅱ型胃腺癌患者的Hp阳性表达率以及两组临床病理特征的关系;分析部位、年龄、饮酒、中性粒细胞、分型和Hp感染之间的相关性;利用Kaplan-Meier法分析Ⅰ型和Ⅱ型不同部位胃腺癌患者Hp与预后的关系。结果:胃底贲门癌组患者肿瘤显著大于胃窦癌组和胃体癌组（t=5.972,P<0.05）;胃窦癌组患者饮酒人数多于胃体癌组（χ2=6.742,P<0.05）;CD68+和CD163+TAMs在胃窦癌癌巢的相对表达水平高于癌巢浸润边缘;在胃底贲门癌癌巢浸润边缘的相对表达高于癌巢;在胃体癌癌巢浸润边缘的相对表达高于癌巢,差异均有统计学意义（H=136.06、124.99、142.17、91.16,均P<0.01）;CD68+和CD163+TAMs在癌巢浸润边缘多者预后不良（χ2=6.289、4.153、5.979,均P<0.05）;Ⅱ型胃腺癌患者累计生存率和无病生存率较Ⅰ型高（χ2=4.950、5.601,均P<0.05）;肿瘤大小与年龄、发生部位有关系（r=-0.162、-0.115,均P<0.05）;分型与发生部位、中性粒细胞显著相关（r=0.745、0.231,均P<0.01）;Hp与发生部位、分型有关（r=0.141、0.110,均P<0.05）;发生在胃体和胃窦部、肿瘤<4 cm、无淋巴结转移、中性粒细胞水平高的Ⅱ型胃腺癌患者Hp阳性表达率高,且预后较好（χ2=20.168、2.365、19.247、18.972,均P<0.05）。结论:TAMs标志物（抗原CD68和CD163）在癌巢浸润数量多对不同部位的Ⅲ期胃腺癌均是有利因素,另外,Hp阳性也是预测胃体癌和胃窦癌的良好指标。     

口腔鳞状细胞癌外周血、癌组织及癌旁组织中CD4+T、CD8+T淋巴细胞上TIM-3的表达及临床意义

目的研究负性共刺激分子T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子-3(TIM-3)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)患者外周血、癌组织及癌旁组织中CD4~+T、CD8~+T淋巴细胞上的表达及其临床意义。方法选取2018年4月至2019年10月郑州大学第一附属医院收治的41例OSCC患者作为OSCC组,选取同期20例健康体检者作为对照组。通过流式细胞术检测CD4~+T、CD8~+T淋巴细胞上TIM-3的表达水平,进一步探讨其与OSCC患者临床病理特征的关系。结果 TIM-3在OSCC患者外周血CD4~+T、CD8~+T淋巴细胞上的表达水平高于对照组(P<0.05)。TIM-3在OSCC患者癌组织中CD4~+T、CD8~+T淋巴细胞上的表达水平高于癌旁组织(P<0.05)。有淋巴结转移的OSCC患者外周血中CD4~+T、CD8~+T淋巴细胞上TIM-3的表达水平高于无淋巴结转移的OSCC患者(P<0.05)。TIM-3在OSCC患者癌组织中CD4~+T、CD8~+T淋巴细胞上的表达水平与年龄、性别、部位、肿瘤大小、病理学分级、TNM分期、淋巴结转移无关(P>0.05)。结论 TIM-3在OSCC患者外周血和癌组织中CD4~+T、CD8~+T淋巴细胞上呈高表达,且OSCC患者外周血中CD4~+T、CD8~+T淋巴细胞上TIM-3的表达水平与淋巴结转移有关,TIM-3可能参与OSCC的发生发展,并有望成为OSCC新的生物标志物及免疫治疗的新靶点。     

CD44在口腔鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的：探讨正常口腔黏膜上皮组织、口腔鳞状细胞癌（OSCC）癌旁组织及OSCC组织中CD44的表达强度,为确定CD44作为OSCC基因治疗的参考指标提供依据。方法：应用免疫组织化学SP法检测65例OSCC患者OSCC组织、20例OSCC患者OSCC癌旁组织和10例正常口腔黏膜上皮组织中CD44的表达强度。结果：CD44在OSCC组织中的阳性表达率高于其在正常口腔黏膜上皮组织及OSCC癌旁组织中的阳性表达率 (P<0.05); CD44表达率随肿瘤分化程度降低而增高;CD44在有淋巴结转移的OSCC组织中的表达率高于无淋巴结转移组（P<0.05）;CD44在临床分期为晚期的OSCC组织中表达高于早期（P<0.05）;CD44表达率与患者的年龄、性别、肿瘤大小及部位无明显关联。结论:CD44在正常口腔黏膜上皮组织、OSCC癌旁组织和OSCC组织中表达强度不同,提示CD44的高表达可作为判定OSCC的恶性程度及预后的重要指标。     

生理状态下大鼠大网膜I型与II型乳斑内CD68、CD163阳性巨噬细胞数量对比研究

目的 对比研究生理状态下大鼠大网膜I型与II型乳斑内CD68、CD163阳性巨噬细胞的数量.方法 SD大鼠大网膜铺片,CD68、CD163双重标记,免疫荧光显微镜下观察计数CD68、CD163阳性巨噬细胞,对比分析I型与II型乳斑内CD68、CD163阳性巨噬细胞的数量.结果 I型与II型乳斑内均可见CD68阳性、CD163阳性巨噬细胞;I型乳斑内CD68阳性巨噬细胞与CD163阳性巨噬细胞数量比较差异无统计学意义（P﹥0.05）;II型乳斑内CD68阳性巨噬细胞与CD163阳性巨噬细胞数量对比差异无统计学意义（P﹥0.05）;I型与II型乳斑内CD68阳性巨噬细胞与CD163阳性巨噬细胞的数量基本相同.结论 生理状态下大鼠大网膜I型与II型乳斑内均存在CD68、CD163阳性巨噬细胞;均存在巨噬细胞的极化分型,主要以M2型巨噬细胞的形式存在,推断乳斑具有发挥降低炎症反应,发挥组织修复的功能.     

甲状腺乳头状癌中肿瘤相关巨噬细胞浸润及CD47表达的意义

目的 探讨肿瘤相关巨噬细胞浸润及CD47蛋白表达与甲状腺乳头状癌患者临床病理特征间的关系及意义.方法 收集大连市友谊医院2015—2019年间甲状腺乳头状癌手术切除标本65例,应用免疫组织化学方法检测所有标本中CD68+和CD163+肿瘤相关巨噬细胞浸润和CD47蛋白表达情况,分析肿瘤相关巨噬细胞浸润、CD47蛋白表达...     

肿瘤相关巨噬细胞在乳腺浸润性微乳头状癌中的浸润及意义

目的 研究肿瘤相关巨噬细胞（tumor associated macrophages,TAMs）在乳腺浸润性微乳头状癌（invasive micropapillary carcinoma,IMPC）中的浸润及意义.方法 采用免疫组织化学链霉亲和素生物素法（laballad streptavidin biotin method,LSAB）检测68例IMPC和72例浸润性导管癌非特殊型（invasive ductal carcinoma,not otherwise specified,IDC-NOS）中TAMs标记物CD68、CD163的表达,并探讨其与临床病理学特征的关系.结果 CD68、CD163主要表达于IMPC及IDC-NOS间质中浸润的巨噬细胞的胞膜或胞质内,癌巢内偶有表达.IMPC组瘤内间质CD68的表达率（47/68,69.1％）明显高于IDC-NOS组（37/72,51.5％）,差异具有统计学意义（P =0.022）.而瘤内间质CD163在2组间的表达无统计学意义（P =0.682）.IMPC中瘤内间质CD68的表达与病理学分期、组织学分级、淋巴结转移、脉管侵犯及Ki67的表达呈正相关（P＜0.05）,而与ER的表达呈负相关（P =0.037）.Kaplan-Meier单因素生存曲线分析显示,IMPC中瘤内间质CD68表达与无进展生存期（progression free survival,PFS）呈负相关（P =0.027）.结论 IMPC间质中CD68标记的TAMs可能在IMPC高侵袭、高转移的恶性生物学行为中发挥了重要的作用.     

肿瘤相关巨噬细胞与高危型人乳头状瘤病毒感染宫颈癌的临床相关性

目的探讨肿瘤相关巨噬细胞与高危型人乳头状瘤病毒（hr-HPV）相关宫颈癌的发生发展的相关性。方法收集112例宫 颈组织临床样本,包含16例正常宫颈组织,55例宫颈上皮内瘤变和41例宫颈鳞状细胞癌,运用免疫组织化学法检测宫颈组织切 片中的CD163+巨噬细胞的表达水平,并对免疫组织化学法检测结果与临床数据进行统计学分析。结果免疫组化结果显示： CD163+巨噬细胞的细胞密度随着宫颈组织恶性变的程度增加而增多,且相关性分析示两者呈正相关（P=0.000）。同时,CD163+ 巨噬细胞的细胞密度在hr-HPV型宫颈癌中明显上调（P<0.05）。临床资料统计结果发现：CD163+巨噬细胞与宫颈癌的淋巴结转 移和FIGO分期有显著相关性（P=0.005,P=0.004）。结论CD163+巨噬细胞的表达与宫颈组织恶性变的程度成正相关,hr-HPV 感染与巨噬细胞中CD163的表达水平有显著相关性。CD163+巨噬细胞可作为hr-HPV感染所致宫颈癌发生发展的前瞻性预测 因素。     

细胞黏附分子CD44S、CD44V5在口腔鳞癌中的表达及意义

目的探讨口腔鳞癌(OSCC)中细胞黏附分子CD44S、CD44V5的表达及其临床意义。方法应用免疫组化SP法检测12例(新鲜标本)正常口腔组织(NOT)及59例(20例为新鲜标本)手术切除的OSCC中细胞黏附分子CD44S及CD44V5的表达。RT-PCR法检测12例NOT及20例OSCC中CD44SmRNA的表达。结果 CD44S、CD44V5和CD44SmRNA在OSCC中的阳性表达率明显高于其在NOT中的表达,且差异有统计学意义(P<0.05)。CD44S和CD44V5的表达与肿瘤的病理分级、临床分期及淋巴结转移有关,而在性别、年龄及肿瘤大小方面的差异无统计学意义。结论 CD44S和CD44V5的异常表达与OSCC的病理分级、临床分期及淋巴结转移密切相关,其可作为预测OSCC侵袭和转移潜能的指标。     

胃癌手术前后外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的变化及临床意义

目的：检测CD4^＋CD25^＋调节性T细胞（Treg）在胃癌手术前后外周血中的变化,探讨Treg在肿瘤免疫中的作用。方法：收集初治胃癌患者38例作为研究对象,同时收集20例健康人外周血作为正常对照组。检测手术前3d和手术后14d外周血中CD4^＋CD25^＋Treg比例及T细胞亚群,将各检测结果结合临床、病理指标进行统计学分析。结果：胃癌患者术前外周血中Treg比例显著高于术后比例以及对照组（P均〈0．01）。胃癌患者术前外周血CD8^＋T细胞比例明显低于术后比例以及对照组（P均〈0．01）。术前外周血CD8^＋T细胞比例与Treg比例呈负相关（P〈0．05）。胃癌患者术前外周血中Treg比例在不同淋巴结转移情况和TNM分期之间差异具有统计学意义（P〈0．05）,其与淋巴结转移和TNM分期呈正相关（P〈0．01）。胃癌患者手术后Treg比例较术前下降,且下降程度与浸润深度、淋巴结转移、远处转移、TNM分期、分化程度、病理分型以及手术方式无相关性。结论：Treg可能通过抑制CD8^＋T细胞的增殖及功能,促进肿瘤细胞的生长和发展。Treg与肿瘤的侵袭、淋巴结转移有关,提示Treg在一定程度上可作为检测疾病进展的免疫学指标。     

口腔鳞癌中TF的表达与巨噬细胞的关系

目的:探讨人类口腔鳞状细胞癌(oral squanous cell carcinoma,OSCC)中组织因子(tissue factor,TF)的表达与肿瘤相关巨噬细胞(tumor associated macrophages,TAMs)间的关系.方法:采用免疫组化SABC法分别检测TF和CD68(标记巨噬细胞)在42...