吉非替尼的合成

吉非替尼(商品名：易瑞沙,Iresa^TM)由阿斯利康公司研制,主要用于非小细胞肺癌治疗,是表皮生长因子受体(EGFR)抑制剂的新型抗肿瘤产品。其化学名为4-(3-氯-4-氟苯胺基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉基丙氧基)喹唑啉。     

阿霉素对模式生物斑马鱼中abcb4基因表达的影响

目的 选择斑马鱼作为实验对象,研究阿霉素(doxorubicin,DOX)对其abcb4基因表达的影响,进一步了解abcb4基因在斑马鱼多药耐药机制中可能的作用。方法 分别以2 mL/L二甲基亚砜（DMSO）,10 μmol/L DOX及含2 mL/L DMSO的10 μmol/L DOX对斑马鱼胚胎进行药物处理,另以Eggwater处理的胚胎作为对照组。将正常发育的4~16个细胞期斑马鱼胚胎,随机分入以上各组中,药物处理至120 hpf。收集药物处理下的斑马鱼不同时期胚胎运用实时荧光定量PCR和胚胎原位杂交技术,检测abcb4基因在斑马鱼中的表达变化情况。结果 相较于对照组,药物处理的斑马鱼胚胎abcb4基因mRNA表达水平升高(P<0.05),而abcb5基因mRNA表达情况则无明显变化。通过斑马鱼胚胎原位杂交,均在斑马鱼120 hpf胚胎小肠部位发现有abcb4基因阳性杂交信号,且药物处理的斑马鱼胚胎在脑及心脏部位发现abcb4基因阳性杂交信号。结论 DOX能诱导斑马鱼胚胎abcb4基因表达水平增高,对阐明abcb4基因在斑马鱼多药耐药产生机制中的作用具有重要意义。     

厄洛替尼治疗吉非替尼耐药的晚期非小细胞肺腺癌的临床观察

目的评价观察厄洛替尼对吉非替尼耐药的晚期非小细胞肺癌(non small cell lung cancer,NSCLC)腺癌患者的疗效和安全性。方法分析2008年6月至2009年12月共22例NSCLC腺癌患者,均口服吉非替尼并出现病情进展,改换为厄洛替尼,直到病情进展或不良反应不能耐受为止。观察疗效与不良反应以及疗效与临床特征之间的关系。结果厄洛替尼治疗22例吉非替尼耐药的进展期NSCLC患者,2例获得部分缓解(partial remission,PR),7例获得稳定(stable disease,SD),客观有效率为9%,疾病控制率为40.9%。获有效和稳定的9例患者中,7例曾在吉非替尼治疗中获益。厄洛替尼治疗的中位疾病进展期(time to progress,TTP)和中位总生存期(overall survival,OS)分别为82 d和192 d。厄洛替尼获益的9例患者较未获益的13例患者获得更长的TTP(112 vs 45.5 d,P<0.05)。厄洛替尼最常见的不良反应为皮疹。结论厄洛替尼可以作为治疗吉非替尼耐药的进展期NSCLC的药物选择,尤其是对于曾予以吉非替尼治疗可以获益的患者。     

吉非替尼致间质性肺炎CT影像分析

目的 提高对吉非替尼药物性间质性肺炎的认知。方法 报告1例双肺弥漫型肺泡癌患者服用吉非替尼并发间质性肺炎的临床和影像学表现及其治疗,并结合文献探讨疗效的影响因素。结果 病例经停用吉非替尼、吸氧、甲基泼尼松龙治疗1个月后症状明显缓解,CT显示病变炎性改变明显吸收。吉非替尼药物性间质性肺炎疗效和预后与该病发现早晚、患者年龄、性别、吸烟史、呼吸系统疾病史等密切相关。结论 早诊断、早治疗患者预后良好。定期影像学检查是早期发现的关键。     

吉非替尼耐药人肺腺癌细胞的建立及耐药机制的研究

目的建立吉非替尼耐药的人肺腺癌细胞株A549/GR,并初步探讨其生物学特性及其耐药机制。方法采用逐步增加吉非替尼剂量法诱导人肺腺癌细胞A549形成吉非替尼耐药的细胞株A549/GR;CCK-8法检测细胞的半数抑制浓度(IC50)及绘制细胞生长曲线,并计算耐药指数;显微镜下观察吉非替尼作用前后A549、A549/GR细胞形态学的改变;直接测序法检测EGFR基因在酪氨酸激酶区的基因突变;q RT-PCR法检测EGFR基因在m RNA水平表达的改变。结果 CCK-8法测得A549/GR细胞的耐药指数为6.00,显示成功建立了吉非替尼耐药的细胞模型,其倍增时间较亲代细胞缩短;形态学观察显示A549/GR细胞极性消失,有变长梭形的趋势;A549/GR细胞系EGFR基因酪氨酸激酶区未发现基因突变;q RT-PCR法显示A549/GR细胞EGFR基因在m RNA水平较亲代细胞轻度上调。结论成功建立吉非替尼耐药人肺腺癌A549/GR细胞模型,A549/GR细胞耐药性的产生与EGFR基因18-21外显子区域突变无关。     

吉非替尼二线治疗晚期肺腺癌疗效观察

目的:评价吉非替尼二线治疗晚期肺腺癌的疗效及不良反应.方法:32例晚期肺腺癌应用含铂类方案治疗失败后,口服吉非替尼250mg,1次/日,直至进展.30天后评价疗效及不良反应.结果:32例患者中,完全缓解(CR)1例,部分缓解(PR)18例,有效率(RR)为59.4%,稳定(SD)7例,疾病控制率(DCR)为81.35,进展(PD)6例.中位无疾病进展时间(PFS)7个月,1年生存率为56.3%,中位生存时间(OS)为13个月.不良反应主要为皮疹、腹泻,不影响治疗.结论:吉非替尼治疗晚期肺癌疗效好,不良反应能够耐受.     

吉非替尼治疗老年晚期肺癌的临床观察

目的探讨吉非替尼作为老年晚期肺癌一线治疗方案的可行性。方法 15例经病理学或细胞学证实的老年晚期肺癌初治患者口服吉非替尼250 mg/d,直至患者死亡或肿瘤进展或发生不可耐受的毒副反应,服药前和服药后每月复查胸部CT进行肿瘤评估,分析吉非替尼治疗15例老年晚期肺癌疗效、中位肿瘤进展时间以及对相关症状的控制。结果客观有效率为(CR+PR)53.3%,疾病控制率为(CR+PR+SD)86.7%,中位肿瘤进展时间(TTP)为5.4个月,中位生存期(MS)为11.1个月。与药物相关的主要不良反应为皮疹(10例)。结论吉非替尼一线治疗老年晚期肺癌显示出良好的耐受性和有效性。     

吉非替尼有关物质的合成

为控制吉非替尼的药品质量,建立吉非替尼原料药的质量标准,从吉非替尼的合成路线入手,分析并合成其中可能存在的4个有关物质:4-(3-氯-4-氟苯基)氨)-7-甲氧基喹唑啉-6-醇(A)、N-(3-氯-4-氟苯基)-6,7-二甲氧基喹唑啉-4-胺(B)、4-(3-氯-4-氟-苯基)氨基)-7-甲氧基喹唑啉-6-基)氧基)丙基)氨基)乙醇(C)和N-(3,4-二氯苯基)-7-甲氧基-6-(3-吗啉代)喹唑啉-4-胺(D),并经¹H NMR和MS确证结构。     

细胞自噬对吉非替尼抑制肺癌细胞增殖的影响

目的 探讨细胞自噬对吉非替尼（Gefitinib）抑制非小细胞肺癌（NSCLC）细胞增殖的影响。方法 采用Western blotting和LC3抗体检测自噬标志物LC3Ⅱ的含量,判断Gefitinib是否诱导NSCLC Calu6和H460细胞自噬。采用增强绿色荧光蛋白（EGFP）-LC3b质粒转染NSCLC细胞系Calu6和H460,再用40 μmol/L Gefitinib处理细胞48 h,观察绿色荧光蛋白（GFP）的分布情况。分别采用细胞自噬诱导剂依维莫司（Everolimus）、Gefitinib和Gefitinib联合Everolimus处理H460细胞,药物处理10 d后用结晶紫染色,显微镜下统计克隆数,计算不同药物刺激后细胞克隆形成数和药物对H460细胞的抑制率。结果 Western blotting检测显示,Gefitinib 40 μmol/L处理细胞48 h后,明显增加LC3Ⅱ的积累,绿色荧光呈散点状分布。经Everolimus、Gefitinib和Gefitinib联合Everolimus处理后,H460细胞克隆形成数差异有统计学意义（P<0.05）,其中Gefitinib联合Everolimus处理对H460细胞的抑制率最强,两者之间有协同作用。结论 Gefitinib能够诱导NSCLC细胞自噬,并且增加细胞自噬能增强Gefitinib对肺癌细胞增殖的抑制率。     

细辛脑对斑马鱼胚胎发育及运动行为的影响

目的：研究细辛脑对斑马鱼胚胎发育及运动行为的影响。方法以受精后3h（hpf）斑马鱼胚胎为实验模型,分别暴露于不同浓度（25、50、100、200和400μmol/L）细辛脑溶液中,以不加细辛脑为对照组,每隔24 h更换1次细辛脑溶液,分别在24、48、72和96 hpf等时间点用显微镜观察班马鱼胚胎发育形态,记录24 hpf胚胎自主抽动次数,48 hpf心率、畸形率和死亡率,72和96 hpf孵化率和死亡率,利用RT-qPCR检测96 hpf斑马鱼胚胎Sepn1基因表达情况,采用Noldus斑马鱼幼鱼行为视频跟踪系统评价细辛脑暴露对幼鱼运动行为的影响。结果细辛脑各实验组斑马鱼胚胎自主抽动次数随浓度增加而降低,100、200和400μmol/L组与对照组相比有极显著性统计学差异（P＜0.01）;细辛脑各实验组斑马鱼48 hpf心率显著降低,与对照组相比均有显著统计学差异（P＜0.01）;72和96 hpf斑马鱼幼鱼出现了脊柱弯曲、心包水肿、卵黄囊水肿等畸形形态;与对照组相比,100、200和400μmol/L组96 hpf孵化率均下降,具有显著性统计学差异（P＜0.01）;与对照组相比,400μmol/L组死亡率降低,有统计学差异（P＜0.05）;随着细辛脑浓度增加,96 hpf斑马鱼幼鱼运动速度和距离明显减小,200和400μmol/L组与对照组相比均有统计学差异（P＜0.05）;同时200和400μmol/L浓度组活跃度降低,与对照组相比具有显著差异（P＜0.01）;96 hpf时,细辛脑各浓度组胚胎Sepn1基因表达下降,其中100μmol/L组与对照组相比有统计学差异（P＜0.05）,而200和400μmol/L组与对照组相比差异更显著（P＜0.01）。结论细辛脑对斑马鱼胚胎和幼鱼有致畸作用,并且影响其运动行为,建议婴幼儿慎用细辛脑。     

多氯联苯暴露对斑马鱼脊柱形态及BMP-2?BMP-4基因表达的影响

目的:探讨环境有机污染物多氯联苯暴露对斑马鱼生存率?脊柱形态及骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)-2?BMP-4基因表达的影响?方法:以斑马鱼为模式动物,配制0.125?1.000 mg/L 2个不同浓度的多氯联苯对斑马鱼胚胎进行暴露处理,同时设空白对照,观察多氯联苯暴露对斑马鱼幼鱼存活率?脊柱形态及BMP-2?BMP-4基因表达的影响?结果:①低浓度(0.125 mg/L)多氯联苯暴露120 hpf对斑马鱼幼鱼的存活率?脊柱形态无明显影响;②高浓度(1 mg/L)多氯联苯暴露120 hpf后,斑马鱼存活率明显下降且存活的斑马鱼大多出现了脊柱弯曲畸形的现象;③低?高浓度的多氯联苯暴露120 hpf后BMP-2及BMP-4基因表达均较空白对照组明显降低(P < 0.05)?结论:不同浓度的多氯联苯暴露对斑马鱼骨骼发育均有一定的毒害作用,提示我们必须加强对多氯联苯等环境有机污染物的监测和控制?     

粒状头样蛋白2下调诱导上皮间质转化促进肿瘤细胞对吉非替尼耐药

目的 探讨粒状头样蛋白2（GRHL2）在肿瘤靶向治疗药物表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂（EGFR-TKI）吉非替尼获得性耐药中的作用和可能机制。方法 利用吉非替尼浓度逐步递增的体外诱导方法培养人结直肠癌细胞DiFi和人肺腺癌细胞HCC4006,获得吉非替尼耐药细胞株。通过RNA测序方法筛选在耐药细胞株与其亲代细胞中差异表达的基因并进行实时荧光定量PCR验证。使用pcDNA3.1-GRHL2质粒转染耐药细胞株使GRHL2过表达,用CCK-8法检测细胞对吉非替尼的敏感性。采用蛋白质印迹法检测耐药细胞株中上皮标志物E-cadherin和间质标志物Vimentin的表达变化,并通过CellMiner^TM数据库分析60株人肿瘤细胞系中GRHL2表达与E-cadherin和Vimentin表达的关系。结果 成功获得DiFi和HCC4006的耐药细胞株。通过RNA测序和实时荧光定量PCR验证发现GRHL2在耐药细胞株中表达下调,而在耐药细胞株中过表达GRHL2后细胞恢复了对吉非替尼的敏感性。蛋白质印迹分析表明耐药细胞株中上皮标志物E-cadherin表达下调,而间质标志物Vimentin表达上调;CellMiner^TM数据库分析表明GRHL2的表达与E-cadherin/Vimentin比值高度一致。结论 GRHL2表达下调通过诱导上皮间质转化介导肿瘤细胞对吉非替尼的耐药。     

hand2基因对斑马鱼胚胎发育影响的实验研究

  目的 观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况,验证显微注射吗啡啉修饰的反义寡核苷酸（Morpholino oligonucleotides,MO）使hand2 表达下调的有效性。观察hand2 表达下调后斑马鱼胚胎发育的异常表型,初步探讨hand2在斑马鱼胚胎发育中的作用,为利用斑马鱼开展hand2的功能研究提供线索。 方法 采用胚胎整体原位杂交的方法观察hand2在斑马鱼胚胎内的表达情况。利用向斑马鱼受精卵显微注射MO的方法使hand2 表达下调,并进行hand2 表达下调的效率验证。将斑马鱼单细胞受精卵分为四组进行显微注射,即对照MO（Con MO）注射组、hand2 MO注射组、hand2-GFP mRNA注射组和hand2-GFP mRNA+hand2 MO注射组。在荧光显微镜下观察hand2-GFP mRNA注射组和hand2-GFP mRNA+hand2 MO注射组的荧光表达情况以验证hand2 表达下调的效率。在显微镜下观察hand2 MO注射组斑马鱼胚胎的各器官发育情况并进行评定。 结果 hand2在斑马鱼胚胎的侧板中胚层、咽弓、心脏和鳍有较强表达。hand2-GFP mRNA注射组在8hpf（hours post fertilization）时胚胎有较强的荧光表达,而hand2-GFP mRNA+hand2 MO注射组胚胎几乎无荧光表达。与Con MO注射组相比,hand2 MO注射组斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节有明显的发育异常。 结论 向斑马鱼受精卵显微注射hand2 MO的方法可有效的使 hand2表达下调。hand2 在斑马鱼胚胎的心脏、血管、血细胞、鳍以及体节的发育过程中有重要作用。     

COX基因在斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达

目的克隆斑马鱼COX-1、COX-2a基因,研究其在斑马鱼胚胎早期发育中的表达情况。方法提取24 h斑马鱼胚胎的总RNA,制备DIG标记的COX-1、COX-2a RNA反义探针,整胚原位杂交研究COX-1、COX-2a在斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达。结果 COX-1在囊胚期和原肠胚期为弥散性表达,18 h集中表达在后部躯干,到24 h,COX-1在输尿管和远端脊索处有表达,24～36 h,头部表达量高,48 hCOX-1的表达弱。COX-2a在原肠胚期前不表达,在10.8 h开始表达,位于前端神经外胚层,在26 h,COX-2a在前脑、小脑和后脑有特异性表达。结论明确了COX-1、COX-2a基因在斑马鱼胚胎发育过程中的表达模式,为研究该基因功能提供了一定的理论基础。     

Nodal信号通路相关基因NOMO1在斑马鱼早期胚胎发育过程中的表达

目的:研究斑马鱼NOMO1基因在早期胚胎发育过程中的时空表达情况?方法:首先克隆斑马鱼NOMO1同源基因全长cDNA,然后运用半定量RT－PCR技术初步检测NOMO1基因在斑马鱼早期胚胎的表达情况,最后通过原位杂交技术检测NOMO1基因在斑马鱼早期胚胎发育过程中的时空表达情况?结果:通过半定量RT－PCR及原位杂交技术显示NOMO1从受精卵时期开始即有表达,在24 hpf(受精后24 h)之前,NOMO1基因表达广泛,并主要集中在中?内胚层?从24 hpf开始其表达主要集中于神经系统如前脑?中脑?小脑?脊索前板?眼和耳囊等处?在心脏处也有少量表达?结论:NOMO1基因对斑马鱼早期胚胎发育具有一定的作用,推测NOMO1基因影响早期心脏发育?     

Effects of PI3K inhibitor NVP-BKM120 on acquired resistance to gefitinib of human lung adenocarcinoma H1975 cells

The effects of class I PI3K inhibitor NVP-BKM120 on cell proliferation, cell cycle distri- bution, cellular apoptosis, phosphorylation of several proteins of the PI3K/AKT signaling pathway and the mRNA expression levels of HIFl-ct, VEGF and MMP9 in the acquired gefitinib resistant cell line H1975 were investigated, and whether NVP-BKM120 can overcome the acquired resistance caused by the EGFR T790M mutation and the underlying mechanism were explored. MTT assay was performed to detect the effect of gefitinib, NVP-BKM120, NVP-BKM120 plus 1 ~unol/L gefitinib on growth of H1975 cells. The distribution of cell cycle and apoptosis rate of H1975 cells were examined by using flow cytometry. The mRNA expression levels of tumor-related genes such as HIFI-a, VEGF and MMP9 were detected by using real-time quantitative PCR. Western blotting was used to detect the ex- pression level of phosphorylated proteins in the PI3K/AKT signaling pathway, such as Ser473-p-AKT, Ser235/236-p-S6 and Thr70-p-4E-BP1, as well as total AKT, $6 and 4E-BP1. The results showed that the NVP-BKM120 could inhibit the growth of H1975 cells in a concentration-dependent manner, and H1975 cells were more sensitive to NVP-BKM120 than gefitinib （IC50：1.385 vs. 15.09 ~mol/L respec- tively）, whereas combination of NVP-BKM120 and gefitinib （1 ~trnol/L） did not show more obvious ef- fect than NVP-BKM120 used alone on inhibition of cell growth （P〉0.05）. NVP-BKM120 （1 ~unol/L） increased the proportion ofH1975 cells in G0~G1 phase and the effect was concentration-dependent, and 2 ~maol/L NVP-BKM120 promoted apoptosis ofH1975 cells. There was no significant difference in the proportion of H1975 cells in G0-G1 phase and apoptosis rate between NVP-BKM120-treated alone group and NVP-BKM120 plus genfitinib （1 ~unol/L）-treated group or between DMSO-treated control group and gefitinib （1 Ixmol/L）-treated alone group （P〉0.05 for all）. It was also found that the mRNA expression levels of these genes were down-regulated by NVP-BKM120 （1 ~unol/L）, and NVP-BKM120 （1 ~tmol/L） or NVP-BKM120 （1 pmol/L） plus gefitinib （1 ~tmol/L） obviously inhibited the activation of Akt, $6 and 4E-BP1 as compared with control group, but single use of gefitinib （1 pmol/L） exerted no significant effect. These data suggested that NVP-BKM120 can overcome gefitinib resistance in H1975 cells, and the combination of NVP-BKM120 and gefitinib did not have additive or synergistic effects. It was also concluded that NVP-BKM120 could overcome the acquired resistance to gefitinib by down-regulating the phosphorylated protein in PI3K/AKT signal pathways in H1975 cells, but it could not enhance the sensitivity of H 1975 cells to gefitinib.     

Gefitinib获得性耐药产生时非小细胞肺癌上皮性标志EGFR及E-cadherin表达的变化

[目的]了解gefitinib获得性耐药产生时非小细胞肺癌上皮性标志EGFR及E-cadherin表达的变化。[方法]采用逐步递增药物浓度、间歇作用体外诱导法诱导人肺腺癌NCI-H1975细胞株gefitinib获得性耐药;倒置显微镜下观察亲本细胞株和耐药细胞株在gefitinib作用前后的细胞形态学变化差异;细胞计数法描绘耐药细胞株和亲本细胞株的生长曲线并计算群体倍增时间;免疫细胞化学法检测耐药细胞株及亲本细胞株的EGFR及E-cadherin蛋白表达状态,并比较二株细胞间两种蛋白表达的差异。[结果]历时6个月诱导建成人肺腺癌gefitinib耐药细胞株NCI-H1975/GR。Gefitinib作用后耐药细胞株NCI-H1975/GR的细胞形态变化与亲本株NCI-H1975有所不同;在gefitinib的作用下,NCI-H1975/GR细胞体积变小,部分细胞变为纺锤形;NCI-H1975/GR细胞株群体倍增时间延长7.14 h(P<0.05);免疫细胞化学结果显示:与亲本株比较,虽然耐药细胞株NCI-H1975/GR细胞细胞膜EGFR蛋白的表达无明显变化,但在细胞浆的表达明显增高;E-cadherin在细胞膜的表达明显降低。[结论]非小细胞肺癌产生gefitinib获得性耐药后EGFR蛋白在细胞浆积聚;而以E-cadherin为代表的上皮分化标记表达减弱。     

Daxx在斑马鱼胚胎发育中的作用及其机制研究

目的明确死亡结构域相关蛋白（Daxx）在斑马鱼胚胎发育过程中的时-空表达谱,并研究其作用与机制。方法利用原位杂交技术检测Daxx的表达谱;利用吗啉反义寡核苷酸介导的基因敲减技术敲低Daxx的表达,观测斑马鱼胚胎发育情况,并用pH3和TUNEL染色检测Daxx敲低后细胞增殖及凋亡的改变;通过Real—TimePCR实验研究Daxx影响细胞凋亡和胚胎发育的分子机制。结果敲低Daxx后斑马鱼胚胎细胞凋亡和畸形率显著增加,这一表型能被p53蛋白共敲低所恢复;在分子机制上,Daxx敲低可不同程度特异性激活bax、mdm2、p21和cyclinG1等p53下游多个基因的表达,Daxx富含酸性氨基酸的功能区介导rjj述过程。结论Daxx利用其自身结构域与p53作用,并特异调控其下游关键基因的表达,参与调节斑马鱼胚胎细胞凋亡和形念发育。     

CRISPR/Cas9介导TKI对非小细胞肺癌基因靶向吉非替尼耐药敏感性的影响及其机制

目的：探讨CRISPR/Cas9介导酪氨酸激酶抑制剂（TKI）对非小细胞肺癌基因靶向吉非替尼耐药敏感性的影响,并阐明其机制。方法：利用CRISPR/Cas9系统建立酪氨酸激酶（TKs）敲除A549细胞株,按照TKI表达情况分为A549、A549TKs^-/+和A549TKs^-/-细胞株。Western blotting法检测细胞株中P53、MDM2、Bcl-2和Bax蛋白表达水平,CCK-8法检测A549、A549TKs^-/+和A549TKs^-/-细胞活性,细胞划痕实验检测A549、A549TKs^-/+和A549TKs^-/-细胞株的细胞迁移情况,流式细胞术检测A549、A549TKs^-/+和A549TKs^-/-细胞凋亡率,克隆形成实验检测细胞集落形成情况。结果：CRISPR/Cas9系统成功建立了TKs敲出A549细胞株,A549、A549TKs^-/+和A549TKs^-/-细胞活性比较差异无统计学意义（P>0.05）;3种细胞凋亡率比较差异无统计学意义（P>0.05）,细胞迁移情况变化不大。经6 mol·L^-1吉非替尼干预72 h后,与A549细胞株比较,A549TKs^-/+和A549TKs^-/-细胞株的细胞活性降低（P<0.05）,细胞凋亡率升高（P<0.05）,细胞划痕愈合率明显降低（P<0.05）,细胞迁移能力明显减弱;与A549细胞株比较,A549TKs^-/+和A549TKs^-/-细胞株中P53和Bax蛋白表达水平降低（P<0.05）,MDM2和Bcl-2蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,细胞集落生成率明显降低（P<0.05）。结论：采用吉非替尼对敲除A549细胞株进行干预可以降低细胞活性和迁移能力,升高细胞凋亡率和吉非替尼耐药的敏感性。