银杏叶提取物抗大鼠肝纤维化的实验研究

目的 :探讨银杏叶提取物对实验性大鼠肝纤维化的预防及治疗作用机制。方法 :采用四氯化碳腹腔注射诱导的大鼠肝纤维化模型 ,60只Wistar大鼠分为 5组 :模型组、银杏叶干预组、银杏叶治疗组、银杏叶组 ,另设正常对照组 ,应用HE染色观察大鼠肝组织的改变及Von Gieson胶原纤维特殊染色观察肝纤维化程度 ,生化法检测肝功能丙氨酸氨基转移酶 (ALT)、天冬氨酸氨基转移酶 (AST)、白蛋白 (ALB)水平 ,硫代巴比妥酸 (TBA)法检测肝组织丙二醛 (MDA)的含量 ,免疫组织化学染色法检测肝组织I型胶原、转化生长因子 β1(TGF β1 )的表达。结果 :银杏叶干预及治疗组与模型组相比 ,肝组织结构明显改善 ,纤维化增生程度减轻 ,肝功能改善 ,肝组织内MDA的含量以及I型胶原、TGF β1 的表达均明显低于模型组 (P <0 .0 1 )。结论 :银杏叶提取物可通过其抗氧化作用抑制肝星状细胞激活和转化 ,降低I型胶原、TGF β1 的表达 ,从而抑制和逆转肝纤维化形成     

氯沙坦抗大鼠肝纤维化的研究

目的 :研究血管紧张素Ⅱ 1型受体拮抗剂氯沙坦对二甲基亚硝胺 (DMN)诱导的肝纤维化大鼠模型的疗效及可能的机制。方法 :制备DMN诱导的大鼠肝纤维化模型 ,同时应用氯沙坦灌胃 ,共 8周。肝组织进行常规HE及Masson三色染色。测定血清肝功能及透明质酸 (HA)。大鼠肝组织Ⅰ型胶原 (ColⅠ )、Ⅲ型胶原 (ColⅢ )及转化生长因子 βl(TGF β1)mRNA的水平用RT PCR方法检测。结果 :氯沙坦可明显改善肝纤维化的程度 ,降低血清ALT及HA的水平 (P <0 .0 1)。同时模型组ColⅠ、ColⅢ及TGF β1mRNA的水平明显高于正常对照组 ,氯沙坦治疗组明显低于模型组 (P <0 .0 0 1)。结论 :氯沙坦具有良好的抗肝纤维化作用 ,且能够抑制肝组织ColⅠ、ColⅢ及TGF β1mRNA的水平 ,从而发挥其抗肝纤维化的作用。     

日本血吸虫病肝纤维化诊断研究进展

机体感染日本血吸虫后 ,虫卵在肝脏沉积并释放可溶性抗原 ,刺激巨噬细胞释放一系列细胞因子 (TNF- α、TGF- β、IL- 1等 ) ,激活枯否细胞 (KC)、星状细胞 (HSC) ,使前胶原m RNA表达增加 ,促进胶原与非胶原细胞外间质 (L N、HA等 )合成、分泌 ,成纤维细胞增生 ,产生大量胶原纤维沉积于肝脏 ,沿肝内门脉小分支形成特征性的血吸虫性干线型肝纤维化 [1～ 3 ]。在血吸虫病肝纤维化早期及时祛除病因 ,肝纤维化多能终止或部分逆转。当肝纤维化进一步发展 ,可由干线型纤维化形成肝硬化 ,临床表现出晚期血吸虫病症状体征时 ,虽经彻底祛除病…     

三七总皂苷对肝纤维化大鼠胶原及TGF-β_1 mRNA表达的影响

目的从mRNA水平观察三七总皂苷对肝纤维化大鼠Ⅰ型前胶原及TGF-β1的影响。方法用四氯化碳复合因素诱导大鼠肝纤维化模型。同时给予三七总皂苷治疗,秋水仙碱治疗组作对照,病理HE染色观察纤维化程度分期,用RT-PCR进行Ⅰ型前胶原mRNA和TGF-β1mRNA的半定量检测。结果三七总皂苷能抑制肝纤维化大鼠Ⅰ型前胶原及TGF-β1的合成表达,减轻肝纤维化程度。结论三七总皂苷具有抗肝纤维化作用,干预大鼠肝纤维化可能与减少TGF-β1含量有关。     

日本血吸虫病肝纤维化的临床特点

目的通过检测有关细胞因子及病理学对肝组织标本从细胞、分子水平、组织超微结构等研究日本血吸虫病肝纤维化的发生、发展特点,并探讨合理的防治对策。方法晚期血吸虫病(晚血)包括切脾后、未达晚血标准的脾肿大者及晚血夹杂肝炎者分为A、B、C3组,除进行肝纤维化指标、生化检测和超声显像检测外,另对部分患者作淋巴细胞亚群、细胞膜CD35表达免疫学检测。部分患者作肝组织病理学的免疫组化检查。结果1212例中有94.06%的患者曾接受不同药物的病原治疗。血吸虫间接血凝试验、酶联免疫吸附试验1项或2项均为阳性者3组差异有显著性。肝纤维化4项指标测定中,层黏蛋白、透明质酸3组差异亦有显著性。超声显像肝实质分级3组差异亦有显著性。肝纤维化病理特征研究中,炎症与纤维化呈正相关。晚血肝纤维化时C-I、C-型胶原在肝汇管区、中央静脉、肝窦等部位含量均明显增加,肝窦本身出现扩张与狭窄两种病理改变。结论血吸虫病的病理不仅属窦前性改变,肝窦本身病变在肝纤维化的发生中起着重要作用。彻底杀虫治疗或切脾后,肝纤维化仍可继续发展,今后尚需加强随访与防治,减少晚血的发生与发展。     

Smads在日本血吸虫病小鼠肝纤维化形成过程中的表达

目的　从转录水平研究参与转化生长因子β1(transforminggrowthfactor beta 1,TGF β1)信号传导的Smads分子在日本血吸虫病小鼠肝纤维化形成过程中的表达。　方法　以日本血吸虫尾蚴感染BALB/c小鼠形成肝纤维化动物模型,分别于感染后第 8、12、16和24周取小鼠肝组织 ,作病理学检测,观察肝纤维化程度,采用逆转录聚合酶链反应(RT PCR)的方法检测模型组和正常组小鼠肝组织中Smad2、Smad3、Smad4和Smad7的mRNA水平。　结果　Smad 2mRNA水平在感染12周后表达下降(P<0.05),16周后恢复正常,2 4周后再次下降(P<0.05)。Smad 3mRNA水平在感染后 16周开始明显升高 ,达正常水平的2倍(P<0.05)。Smad4和Smad7的mRNA水平在肝纤维化形成过程中与正常组比较无明显差异。　结论　Smad3促进肝纤维化形成。Smad2对肝纤维化形成具有双效性 ,即感染初期属于促进因子 ,感染后期属于抑制因子。     

己酮可可碱对日本血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏TGF- β1和 、 型胶原表达的影响

目的　研究己酮可可碱 (pentoxifylline,PTX)对日本血吸虫病肝纤维化小鼠肝脏转化生长因子β1(TGF-β1)和 、 型胶原含量的影响。　方法　 4 0只血吸虫病肝纤维化小鼠均分 4组 ,对照组不作任何治疗。吡喹酮组 5 0 0mg/ (kg· d)治疗 2 d,高剂量 PTX组 36 0 mg/ (kg· d)治疗 8wk,低剂量 PTX组 180 mg/ (kg· d)治疗 8wk。应用免疫组化染色方法和多媒体彩色病理图文分析系统 ,观察不同剂量 PTX治疗前后肝脏 TGF-β1和 、 型胶原含量的变化。　结果　 PTX对 TGF- β1和 、 型胶原含量的影响与治疗剂量有关 ,高剂量 PTX组 TGF- β1和 、 型胶原含量明显低于对照组 (P<0 .0 1) ,而低剂量 PTX组与对照组之间差异无统计学意义 (P>0 .0 5 )。　结论　高剂量 PTX治疗血吸虫病肝纤维化小鼠可显著降低其肝脏 TGF-β1和 、 型胶原的含量。     

日本血吸虫诱导小鼠肝纤维化进程中TGF-β1和HSP47的作用机制研究

目的　观察在日本血吸虫诱导的小鼠肝纤维化进程中转化生长因子?β1（Transforming growth factor?β1, TGF?β1）和热休克蛋白47（Heat shock protein 47, HSP47）的动态表达,探讨其在日本血吸虫病肝纤维化发生发展中的作用。方法　将50只雌性ICR小鼠随机分成感染组和正常对照组,每组25只。感染组每只小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴（20 ± 1）条,对照组以不含尾蚴的去氯水处理。分别于感染后4、6、8、10周和12周等5个时间点,各取5只小鼠肝组织。应用酶联免疫吸附试验检测各小鼠血清中HSP47和TGF?β1含量,肝组织HE染色观察病理学改变,Masson染色观察胶原增生情况,应用实时荧光定量PCR检测肝组织TGF?β1、HSP47、I型胶原（α1）链COL1A1基因mRNA表达水平。结果　在日本血吸虫诱导小鼠肝纤维化过程中,小鼠血清HSP47和TGF?β1浓度和肝组织中TGF?β1 mRNA、HSP47 mRNA、COL1A1 mRNA表达水平均随纤维化进展而渐次升高。小鼠感染后6周,小鼠血清HSP47和TGF?β1含量分别为（179.26 ± 29.87） pg/mL和（22.37 ± 5.21） ng/mL,显著高于同期正常对照组小鼠的（150.29 ± 34.91） pg/mL和（18.54 ± 7.78） ng/mL（P均< 0.05）。肝组织HSP47 mRNA、COL1A1 mRNA、TGF?β1 mRNA表达水平分别为（0.86 ± 0.04）、（1.17 ± 0.06）和（0.64 ± 0.13）,均高于同期正常对照组小鼠的（0.23 ± 0.03）、（0.20 ± 0.02）和（0.38 ± 0.02）（P均< 0.01）。 结论　TGF?β1和HSP47在日本血吸虫诱导的小鼠肝纤维进程中的表达与肝纤维化进程一致,且随I型胶原的增多呈升高趋势;HSP47有望成为日本血吸虫病肝纤维化的新诊断标志物和治疗靶点。     

强肝胶囊治疗日本血吸虫病早期肝纤维化的临床研究

目的评估强肝胶囊治疗日本血吸虫病早期肝纤维化的效果及可能的副作用。方法138例日本血吸虫病早期肝纤维化病人随机分为试验组(68例)和对照组(70例)。试验组服强肝胶囊2.0g/次,每日2次,连续6个月,加维生素类和肝泰乐。对照组服用安慰剂加维生素类和肝泰乐等一般护肝药。在治疗前、治疗后分别进行肝脏B超、肝功能、血清肝纤维化四项指标,即透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)、Ⅳ型胶原(ⅣC)和层粘蛋白(LN)检查以及临床症状改善情况观察,比较试验组和对照组间结果有无差异。结果治疗前,试验组与对照组间各项指标差异均无显著意义(均为P>0.05)。治疗后的临床症状,试验组比对照组改善明显(P<0.01);试验组肝脏纤维化程度从Ⅱ级降到Ⅰ级的人数多于对照组,但差异无显著性(均为P>0.05);二组间转氨酶恢复正常的人数的比例的差异有显著意义(P<0.05);二组间肝纤维化四项指标值的差异有显著意义(均为P<0.05)。服药期间,未见严重药物不良反应。试验组一般副反应与对照组差异无显著性。结论强肝胶囊有减轻血吸虫病早期肝纤维化的作用,用药安全,可选择作为治疗血吸虫病早期肝纤维化的药物。     

日本血吸虫诱导小鼠肝纤维化进程中TGF-β1和HSP47的作用机制研究

目的　观察在日本血吸虫诱导的小鼠肝纤维化进程中转化生长因子?β1（Transforming growth factor?β1, TGF?β1）和热休克蛋白47（Heat shock protein 47, HSP47）的动态表达，探讨其在日本血吸虫病肝纤维化发生发展中的作用。方法　将50只雌性ICR小鼠随机分成感染组和正常对照组，每组25只。感染组每只小鼠经腹部皮肤感染日本血吸虫尾蚴（20 ± 1）条，对照组以不含尾蚴的去氯水处理。分别于感染后4、6、8、10周和12周等5个时间点，各取5只小鼠肝组织。应用酶联免疫吸附试验检测各小鼠血清中HSP47和TGF?β1含量，肝组织HE染色观察病理学改变，Masson染色观察胶原增生情况，应用实时荧光定量PCR检测肝组织TGF?β1、HSP47、I型胶原（α1）链COL1A1基因mRNA表达水平。结果　在日本血吸虫诱导小鼠肝纤维化过程中，小鼠血清HSP47和TGF?β1浓度和肝组织中TGF?β1 mRNA、HSP47 mRNA、COL1A1 mRNA表达水平均随纤维化进展而渐次升高。小鼠感染后6周，小鼠血清HSP47和TGF?β1含量分别为（179.26 ± 29.87） pg/mL和（22.37 ± 5.21） ng/mL，显著高于同期正常对照组小鼠的（150.29 ± 34.91） pg/mL和（18.54 ± 7.78） ng/mL（P均< 0.05）。肝组织HSP47 mRNA、COL1A1 mRNA、TGF?β1 mRNA表达水平分别为（0.86 ± 0.04）、（1.17 ± 0.06）和（0.64 ± 0.13），均高于同期正常对照组小鼠的（0.23 ± 0.03）、（0.20 ± 0.02）和（0.38 ± 0.02）（P均< 0.01）。 结论　TGF?β1和HSP47在日本血吸虫诱导的小鼠肝纤维进程中的表达与肝纤维化进程一致，且随I型胶原的增多呈升高趋势；HSP47有望成为日本血吸虫病肝纤维化的新诊断标志物和治疗靶点。     

热休克蛋白47在大鼠放射线肾小管间质损伤中的作用

目的:使用放射线肾病动物模型,研究HSP47在放射线肾小管间质损伤中的作用.方法:雄性Wistar大鼠分组如下:对照组(n=12);照射组(n=60),右肾切除后,分别给予左肾7、15、25Gy单一剂量的放射线照射.对各组大鼠进行9个月随访.结果:照射组动物早期发生肾功能不全和高血压,并同时产生炎症细胞浸润及肾间质纤维化.同对照组比较,受放射线照射的肾组织内可见HSP47表达增加.双重免疫染色表明,具有HSP47表达的细胞包括平滑肌肌动蛋白阳性的肌纤维母细胞(myofibroblast)和波形蛋白(vimentin)阳性的小管上皮细胞.而且,HSP47表达增加与肾间质内胶原沉积密切相关.结论:过度表达的HSP47通过表型变化的小管间质细胞在胶原装配、合成过程中起作用,并对放射线肾病小管间质纤维化的形成起着关键性作用.     

热休克蛋白47在肺纤维化胶原加工中的作用

热休克蛋白47(HSP47)是胶原结合分子伴侣,参与前胶原的加工、折叠、合成及分泌,起着质量控制作用.肺纤维化存在胶原异常聚集及HSP47表达增多.在各种不同类型肺纤维化中,HSP47表达上调,与胶原表达正相关,但不同类型肺纤维化HSP47表达水平各异.现就HSP47在肺纤维化胶原表达加工的作用综述如下.     

IFN-γ对日本血吸虫病肝纤维化小鼠Smads表达的影响

目的 从转录水平探讨参与TGF-β1信号转导的Smads在日本血吸虫感染的BALB/c小鼠形成肝纤维化过程中,以及IFN-γ治疗后的表达情况. 方法 BALB/c小鼠感染日本血吸虫尾蚴后第16周,将其随机分成3组:安慰剂组、吡喹酮治疗组和吡喹酮联合IFN-γ治疗组,治疗8周.分别在感染后第8周、12周、16周和24周,处死小鼠取肝脏组织,一部分进行天狼猩红染色,观察胶原沉积情况;另一部分提取总mRNA,通过RT-PCR检测Smad2.Smad3,Smad4和Smad7 mRNA的表达水平. 结果 肝纤维化模型在感染16周后形成.胶原表达随着感染时间的延长而增加.胶原表达在吡喹酮联合IFN-γ治疗组表达下降,而在安慰剂组和吡喹酮治疗组之间的差别无统计学意义.在肝纤维化形成过程中,Smad3 mRNA在感染16周时增加到正常水平的2倍;Smad2 mRNA的表达水平在感染12周时下降,在16周时,又恢复到正常水平;Smad4和Smad7 mRNA水平变化不明显.在联合治疗后,Smad7 mRNA水平明显增高,Smad2 mRNA保持在低水平上,Smad3 mRNA高于正常对照组,Smad4 mRNA水平仍无明显变化. 结论 Smad3 mRNA表达上调,Smad2 mRNA表达下调以及Smad7 mRNA的低水平表达可能导致小鼠肝纤维化的形成,IFN-γ可能通过诱导Smad7 mRNA表达上调,从而达到抗纤维化的作用.     

ICOS转基因小鼠感染日本血吸虫后HSCs活化效应及对肝纤维化的影响

目的 观察ICOS转基因小鼠感染日本血吸虫后原代肝星状细胞（HSCs）的活化效应,探讨ICOSL/ICOS信号介导HSCs活化在血吸虫病肝纤维化形成中的作用.方法 建立ICOS-Tg小鼠及野生型小鼠日本血吸虫模型,通过肝脏酶灌注法和密度梯度离心法分离感染前（0周）和感染后（4～9周）的小鼠原代HSCs,运用台盼蓝拒染法鉴定分离的原代HSCs成活率;应用其在328 nm波长紫外激发光下自发荧光特性以及在肝细胞中其特异性表达神经胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）鉴定分离的原代HSCs纯度;培养7d后,采用SYBR染料法实时荧光定量PCR检测原代HSCs中TGF-β1,Ⅰ、Ⅲ型胶原及α-SMA mRNA的表达变化.结果 分离的原代HSCs纯度达到90％,其成活率为95％.ICOS-Tg小鼠肝HSCs中α-SMAmRNA表达水平即HSCs的活化程度在感染后6、9周显著高于同时期野生型小鼠（P＜0.01）.ICOS-Tg小鼠肝HSCs中TGF-β1,Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA水平亦高于同时期野生型小鼠的水平,特别是在感染后6、9周呈显差异有统计学意义（P＜0.01～0.05）.结论 与野生型小鼠相比,感染日本血吸虫的ICOS-Tg小鼠肝HSCs活化增强,显著上调TGF-β1 mRNA、Ⅰ、Ⅲ型胶原mRNA及α-SMA mRNA的表达,提示在ICOS-Tg小鼠,ICOSL/ICOS信号的增强可明显上调HSCs活化促进肝纤维化的形成.     

紫七软肝片对大鼠肝纤维化湿热瘀毒证模型转化生长因子-β1和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1表达的动态影响

目的：探讨紫七软肝片对复合因素致大鼠肝纤维化湿热瘀毒证模型作用的动态影响。方法：采用复合因素（CCl4＋高脂饮食＋酒精）干预大鼠,分正常组、模型组、紫七软肝片治疗组和秋水仙碱对照组,分别观察第4周和8周大鼠肝纤维化相关指征的变化,检测其血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、Ⅲ型前胶原氨端肽（PⅢP）以及采用肝组织免疫组化检测其转化生长因子-β1（TGF-β1）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（TIMP-1）的动态表达情况。结果：模型组大鼠从4周和8周末HA、LN、PⅢP以及TGF-β1和TIMP-1均有不同程度的改变,并呈现动态加重的过程,而紫七软肝片和秋水仙碱均有明显的治疗作用,且紫七软肝片的作用更为明显（P〈0.05或P〈0.0l）。结论：抑制纤维组织增生、拮抗TGF-β1和TIMP-1表达等是紫七软肝片有效防治肝纤维化的重要机制。     

褪黑素对日本血吸虫致小鼠肝纤维化作用的影响

目的观察褪黑素(melatonin,MT)对日本血吸虫致小鼠肝纤维化的影响。方法建立日本血吸虫致小鼠分肝纤维化模型、分别测定血清及肝匀浆中的谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转基酶(AST)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物(GSH-px)含量,测定肝组织羟脯氨酸(HYP)含量,观察肝组织病理学的变化。结果 MT给药组(0.5、1.0mg·kg~(-1))能使模型小鼠降低的超氧化物歧化酶(SOD)、GSHpx活性明显升高;并能显著降低模型小鼠升高的MDA水平;肝组织HYP含量明显升高与感染对照组相比有差异显著(P<0.05);同时,MT能明显减轻肝脏炎细胞浸润及坏死程度;抑制胶原纤维的增生。结论 MT可能通过清除自由基等作用对日本血吸虫致小鼠肝纤维化有减轻作用。