IL-17、IL-5、IL-4、 IL-33等细胞因子在哮喘发病机制中的作用

目的 探讨白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-33(IL-33)、白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)等细胞因子在哮喘发病机制中的作用.方法 选择浙江省乐清市人民医院2011年2月～2014年8月收治的82例哮喘患者作为研究对象,根据患者的临床表现分为急性发作组(45例)、缓解期组(37例),并选取同期健康人群40例作为对照组,比较三组患者相关指标的差异及其相关性.结果 缓解期组呼气流量峰值(PEF)、第1秒用力呼气量(FEV1)、第1秒用力呼气量/用力肺活量(FEV1/FVC)、哮喘控制测试评分(ACT)均显著高于急性发作组(P＜0.01).急性发作组IL-17、IL-5、IL-4、IL-6、IL-8、IFN-γ、IgE值均显著高于缓解期组、对照组,IL-2显著低于缓解期组、对照组(P＜ 0.05);缓解期组IL-17、IL-5、IL-4、IL-8、IFN-γ、IgE值显著高于对照组,IL-2显著低于对照组(P＜0.05).三组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+测定值比较差异有高度统计学意义(P＜0.01),急性发作组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+值显著高于缓解期组、对照组(P＜0.05);缓解期组患者的CD3+、CD4+、CD4+/CD8+值显著高于对照组(P＜0.05).结论 哮喘患者的T细胞亚群、细胞因子与健康人群存在显著差异,急性发作期患者与缓解期患者的T细胞亚群、细胞因子、肺功能指标差异显著,提示免疫功能紊乱、炎症介质分泌增加与哮喘发作关系密切.     

喉癌中IL-17和IL-17R的表达及与临床病理的相关性分析

目的:探讨喉癌中白细胞介素-17(IL-17)及白细胞介素-17受体(IL-17R)的表达与临床病理的关系.方法:选择80例喉鳞状细胞癌患者为研究对象,选择80例声带息肉患者和80例健康人群为对照组.统计IL-17及IL-17R的表达情况,并对IL-17及IL-17R的表达与喉癌临床病理进行统计学分析.结果:喉癌组织IL-17及IL-17R的表达强度高于癌旁组织和声带息肉,差异有统计学意义(P＜0.05);喉癌组织IL-17及IL-17R的表达阳性率高于癌旁组织和息肉组织,差异有统计学意义(P＜0.01);但癌旁组织和息肉组织IL-17及IL-17R的表达阳性率比较,差异无统计学意义(P＞0.05);喉癌组织中IL-17及IL-17R的表达与原发灶分期、分化程度、淋巴结转移有关(P＜0.05);喉癌患者术前IL-17水平明显高于对照组,术后IL-17水平明显较术前下降,差异均有统计学意义(P＜0.01).结论:喉癌中IL-17及IL-17R可出现高表达;IL-17及IL-17R的表达与喉癌原发灶分期、分化程度、淋巴结转移密切相关;IL-17及IL-17R的表达参与了喉癌的发生及发展.     

IL-17在哮喘小鼠模型中表达及其对肥大细胞IL-6分泌的影响

目的 :研究白细胞介素(interleukin,IL)-17在哮喘小鼠模型中的表达,观察其对肥大细胞IL-6分泌的影响。方法:BALB/c小鼠随机分为对照组和哮喘组,分别用等量磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)和卵清蛋白(ovalbumin,OVA)干预,检测肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)中细胞总数及嗜酸性粒细胞(eosnophils,EOS)数验证模型的成功建立。应用逆转录-聚合酶链反应法、酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测两组小鼠肺组织中IL-17m RNA、BALF及血清中IL-17的表达差异。细胞实验分为对照组和IL-17组,分别予等量培养基和IL-17干预小鼠肥大细胞株(P815)后收集上清,用ELISA检测IL-6的水平。结果 :哮喘组BALF中细胞总数及EOS计数较对照组显著升高(P<0.05),模型建立成功。哮喘组肺组织中IL-17 m RNA、BALF及血清中IL-17表达较正常组显著升高(P<0.05)。细胞水平的研究发现IL-17组P815上清中IL-6表达较正常组显著升高(P<0.05)。结论 :IL-17在OVA诱导哮喘小鼠模型中表达升高。IL-17刺激肥大细胞分泌IL-6,可能在哮喘的发病中起促进作用。     

干细胞因子联合抗白细胞介素17A抗体对小鼠脑缺血预后的影响

目的 探讨干细胞因子(stem cell factor,SCF)联合抗白细胞介素-17A抗体(anti-IL-17A)对小鼠脑缺血预后的影响.方法 通过线栓法对C57BL/6小鼠建立大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,60 min后取出线栓,恢复右侧大脑中动脉血流,建立脑缺血再灌注模型.小鼠脑缺血再灌注后分别给予腹腔注射生理盐水(normal saline,NS)、anti-IL-17A、SCF、anti-IL-17A+SCF.观察各组小鼠MCAO术后脑梗死体积、脑组织病理损伤和脑水肿程度、神经功能评分、神经细胞凋亡和炎症反应等变化.结果 与NS组相比,其余各治疗组脑梗死体积、脑组织病理损伤和脑水肿均显著减轻(P＜0.05),神经功能评分得到明显改善(P＜0.05),神经细胞凋亡减少(P＜0.05),且anti-IL-17A+ SCF组显著优于anti-IL-17A组和SCF组(P＜0.05).此外,anti-IL-17A还能明显减少脑组织IL-17A和IL-1 β的表达(P＜0.05).结论 SCF联合anti-IL-17A能更好地改善脑缺血损伤和促进神经功能恢复.     

IL-17中和抗体对小鼠脊髓损伤的抑制作用及其机制

目的：探讨IL-17参与脊髓损伤后免疫炎症反应的作用机制,在细胞因子水平为临床治疗脊髓损伤提供新的靶点。方法雄性C57BL/6小鼠随机分为4组：模型组制作小鼠脊髓钳夹模型,假手术组只剪开硬脊膜不伤及脊髓, IL-17中和抗体组在脊髓钳夹1 h即刻尾静脉给予IL-17中和抗体,溶剂对照组在脊髓钳夹1 h尾静脉给予0.01μmol/L无菌PBS。小鼠后肢的行为学评分（mouse scale for locomotion, BMS）观察各组小鼠1～7 d后肢行为学变化,免疫组织化学技术观察各组小鼠脊髓损伤第7天脊髓NeuN神经元的形态学变化,实时荧光定量PCR检测脊髓损伤区第7天IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达变化。结果小鼠脊髓损伤后,行为学检测结果显示：假手术组小鼠BMS评分1～7 d均为9分,模型组、IL-17中和抗体组、溶剂对照组小鼠脊髓损伤第1天BMS评分为0分,随着时间的延长,各组小鼠的后肢运动功能均有改善,且IL-17中和抗体组小鼠后肢运动功能改善情况呈优于假手术组以外其他各组趋势。免疫组织化学染色显示：脊髓损伤后第7天,假手术组脊髓灰质内可见大量结构完整的NeuN染色阳性细胞;模型组和溶剂对照组小鼠脊髓灰质中,NeuN染色阳性细胞明显皱缩、突起消失,大量NeuN神经元呈细胞空泡状,数量大幅度减少;IL-17中和抗体组可见部分神经元细胞形态正常,具有完整的NeuN神经元胞体和分支的突触,且NeuN神经元染色阳性细胞数量回升。脊髓损伤后第7天实时荧光定量PCR显示：与假手术组相比,模型组、PBS溶剂对照组IL-1βmRNA显著升高（P＜0.01）;与模型组、PBS溶剂组相比, IL-17中和抗体组IL-1βmRNA明显下降（P＜0.05）;与假手术组相比,模型组TNF-αmRNA显著升高（P＜0.01）;与假手术组相比,PBS溶剂对照组TNF-αmRNA明显升高（P＜0.05）;与模型组相比, IL-17中和抗体组TNF-αmRNA表达明显下降（P＜0.05）;IL-17中和抗体组 IL-6 mRNA水平呈下降趋势,但各组IL-6 mRNA的表达未见统计学差异。结论 IL-17和IL-1β、IL-6、TNF-α共同作用加重了脊髓损伤的免疫炎症进程,抑制IL-17可减轻小鼠脊髓损伤。     

膝骨关节炎患者血浆中IL-17、IL-22的表达水平及其临床意义

目的 探讨膝骨关节炎（knee osteoarthritis,KOA）患者血浆中IL-17、IL-22的水平及其临床意义.方法 应用酶联免疫吸附法检测50例膝骨关节炎患者和50例正常对照者血浆中IL-17、IL-22水平,并分析二者间的相关性.结果 膝骨关节炎患者血浆IL-17、IL-22水平与正常对照组相比明显增高[（IL-17：（27.42±14.26） pg/ml vs（18.62±10.37） pg/ml;IL-22（45.29 ±23.42） pg/ml vs （29.16±15.71） pg/ml;P ＜0.05],差异均有有统计学意义（P＜0.05）;膝骨关节炎患者血浆中IL-17水平与IL-22水平之间呈正相关（r =0.652,P＜0.05）.结论 膝骨关节炎患者血浆IL-17、IL-22增高,可能参与了骨关节炎的发病过程.     

寻常型银屑病患者血清中IL-17的表达及紫草素对IL-17刺激HaCaT细胞分泌IL-6和IL-23的影响

目的：探讨寻常型银屑病患者血清中白细胞介素17（IL-17）的表达水平及IL-17刺激后HaCaT细胞分泌白细胞介素6（IL-6）和白细胞介素23（IL-23）的变化,阐明其临床意义及紫草素的干预作用。方法：以25名正常对照者、29例寻常型银屑病患者和不同组别HaCaT细胞（空白对照组、IL-17刺激24h组、IL-17刺激36h组、IL-17刺激48h组、紫草素+IL-17组、环孢素A+IL-17组和IL-17组）为研究对象,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（ELISA）检测寻常型银屑病患者血清IL-17水平和HaCaT细胞各组上清液中IL-6、IL-23水平;实时荧光免疫定量-聚合酶链式反应法（RT-PCR）检测各组HaCaT细胞中IL-6和IL-23p19 mRNA表达水平;采用细胞计数盒-8（CCK-8）法检测各组HaCaT细胞活力。结果：与正常对照组比较,银屑病组患者血清IL-17水平明显升高,以重度皮损银屑病组升高最为明显（P < 0.05）;IL-17刺激24、36和48h组HaCaT细胞及其培养上清中IL-6和IL-23水平及其mRNA表达水平均高于空白对照组（P < 0.01）;紫草素+IL-17组和环孢素A+IL-17组HaCaT细胞及其培养上清中IL-6和IL-23水平及其mRAN表达水平均低于IL-17组（P < 0.05）。与空白对照组比较,其他各组细胞活力差异无统计学意义（P > 0.05）。结论：银屑病患者血清IL-17表达水平升高,尤其是重度皮损银屑病患者血清IL-17表达水平升高明显,IL-17可促进HaCaT细胞分泌IL-6和IL-23,呈时间依赖性,紫草素可抑制IL-17的促炎症作用。     

桥本氏甲状腺炎患儿血清IL-17，IL-22的表达水平及意义

目的：检测桥本氏甲状腺炎(Hashimoto’s thyroiditis, HT)患儿外周血白细胞介素(interleukin, IL)-17、IL-22的表达水平,并探讨其在HT发病机制中的作用。方法：收集32例初诊未经治疗的HT患儿,并根据甲状腺功能将初诊的HT患儿分为甲状腺功能亢进组(HT-A组)、甲状腺功能正常组(HT-B组)、甲状腺功能减退组(HT-C组)3个亚组,另随机选择同期儿科门诊体检的20例儿童作为对照组。HT-A组予以甲巯咪唑治疗,HT-B组仅观察临床症状,HT-C组予以左甲状腺素钠治疗,随访6~9个月至甲状腺功能恢复正常。采用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunoabsorbent assay, ELISA)测定HT患儿治疗前后血清IL-17、IL-22的水平,化学发光法检测血清中甲状腺功能及抗甲状腺过氧化物酶抗体(thyroid peroxidase antibody, TPO-Ab)、抗甲状腺球蛋白抗体(anti-thyroglobulin antibody, TG-Ab)水平。结果：(1)HT患儿对症治疗前与治疗后血清IL-17、IL-22水平均较对照组明显升高(P＜0.01),但治疗前后IL-17、IL-22水平无明显变化(P＞0.05)。(2)HT患儿各亚组间血清IL-17水平差异有统计学意义(F=3.48, P=0.045),而IL-22水平差异无统计学意义(F=2.58, P=0.095)。(3)HT初诊组IL-17与IL-22水平呈正相关(r=0.75, P＜0.05),其IL-17、IL-22水平均与TPO-Ab、TG-Ab呈正相关(r=0.81、0.77、0.93、0.88, P＜0.05)。结论：HT患儿血清IL-17、IL-22表达水平明显增高,可能在HT的发生发展中发挥着重要作用。     

结核病人血清IL-7、IL-17的检测及其临床意义

目的 探讨白细胞介素7(IL-7),白细胞介素17(IL-17)在结核病免疫机制中的可能作用.方法 采用ELISA法测定41例新发结核未治疗病人,35例结核治疗好转病人IL-7、IL-17水平,并用20例正常健康人作对照.结果 结核未治疗病人组血清IL-7明显低于对照组(P＜0.01),结核治疗好转病人组血清IL-7则明显高于结核未治疗病人组(P＜0.01),而结核未治疗病人组血清IL-17明显高于对照组(P＜0.01),结核治疗好转病人组血清IL-17则明显低于结核未治疗病人组(P＜0.01).结核未治疗病人组和结核治疗好转病人组IL-7与IL-7均呈负相关(r=-0.3605,r=-0.2605,P＜0.001).结论 人体感染结核杆菌后,IL-7降低,IL-17增高,炎症加重,可能引起免疫功能失衡,是导致结核病的发病因素之一,但经过治疗后,IL-7升高,IL-17降低,炎症反应减轻,病情趋于好转.结核病患者血清IL-7、IL-17的检测可作为疾病辅助临床诊断和预后的指标.     

肺炎支原体感染患儿肺泡灌洗液中IL-17与IL-33表达水平及临床意义

目的 研究肺炎支原体（MP）感染患儿肺泡灌洗液（BALF）中白细胞介素-17（IL-17）、白细胞介素-33（IL-33）表达水平及临床意义。方法 选取2017年10月~2020年10月本院收治的105例MP感染患儿作为研究对象(观察组),根据临床肺部感染评分法（CPIS）分为轻度组（CPIS＜6分）55例和重度组（CPIS≥6分）50例,同时选取于同期住院的诊断为支气管异物并行纤支镜支气管异物取出术的患儿50例作为对照组,检测BALF中IL-17、IL-33表达水平和免疫球蛋白IgM、IgA、IgG水平,采用ROC曲线分析IL-17、IL-33对MP感染的预测价值,并分析BALF中IL-17、IL-33表达水平和免疫球蛋白IgM、IgA、IgG水平的相关性。结果 观察组BALF中IL-17、IL-33水平高于对照组（P＜0.05）;重度组BALF中IL-17、IL-33表达水平高于轻度组（P＜0.05）;ROC曲线分析显示,BALF中IL-17、IL-33水平联合预测MP感染患儿的敏感度核特异度均高于单独预测（P＜0.05）;观察组免疫球蛋白IgM高于对照组,IgA、IgG低于对照组（P＜0.05）;Spearman相关分析显示,BALF中IL-17、IL-33表达水平与免疫球蛋白IgM呈正相关性,与IgA、IgG呈负相关（P＜0.05）。结论 MP感染患儿BALF中IL-17、IL-33水平呈高表达,对MP感染的诊断和病情评估具有一定的指导意义,且与免疫球蛋白IgM、IgA、IgG水平具有一定的相关性。     

脊髓IL-33在关节炎大鼠痛觉过敏中的表达*

目的 研究佐剂诱导关节炎大鼠脊髓组织中白细胞介素-33（IL-33）的变化,探讨IL-33在关节炎大鼠痛觉过敏中可能的作用。方法 50只成年雄性SD大鼠,体重200～250?g,随机分为对照组（Sham组）与佐剂性关节炎组（CFA组）,每组25只。CFA组采用足底注射完全氟式佐剂（CFA）复制模型,术后第1、3、7、14及21天分别处死5只大鼠,观察各组大鼠行为学变化,检测机械痛阈和热痛阈,并采用Western blotting检测脊髓IL-33的表达。结果 CFA组大鼠自术后第3天起,各时间点的足趾和关节体积增大,与Sham组比较,差异有统计学意义（P?<0.05）,CFA组术后6?h即出现机械痛阈和热痛阈下降,并持续至术后21天,与Sham组比较,差异有统计学意义（P?<0.05）。CFA组第3天开始出现脊髓IL-33的蛋白表达水平升高,并持续升高至术后21天,与Sham组比较,差异有统计学意义（P?<0.05）。结论 CFA组大鼠出现机械痛敏和热痛敏,脊髓IL-33表达增加,IL-33可能在类风湿关节炎的痛觉过敏中起重要作用。     

miR-19a对慢性压迫性损伤大鼠神经病理性疼痛的影响及其机制

目的 观察miR-19a对慢性压迫性损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠神经病理性疼痛的作用,并探讨其潜在机制.方法 75只雄性SD大鼠按随机数字表法分为3组:假手术组,行假手术;CCI组,坐骨神经结扎法构建CCI大鼠模型;CCI+inhibitor组,CCI大鼠鞘内注射miR-19a inhibitor.于术前当天(0 d)和术后3、7、14、21 d观察机械缩足反射阈值(mechanical withdrawal threshold,MWT)和热刺激反射潜伏期(thermal withdrawal latency,TWL)的变化.采用RT-qPCR检测腰椎脊髓中促炎因子IL-6、TNF-α、IL-1β mRNA及JAK2和STAT3表达的变化,Western blot检测SOCS3蛋白水平的表达,荧光素酶报告基因技术验证miR-19a的靶基因.结果 与假手术组比较,CCI组大鼠脊髓的miR-19a表达显著上升(P＜0.05),MWT显著降低,TWL显著缩短(P＜0.05).与CCI组比较,CCI+ inhibitor组MWT显著升高,TWL显著延长(P＜0.05).RT-qPCR检测结果表明,CCI可显著促进促炎因子IL-6、TNF-α、IL-1β mRNA的表达;而与CCI组比较,CCI+inhibitor组IL-6、TNF-α、IL-1βmRNA表达水平均显著降低(P＜0.05).另一方面,与假手术组比较,CCI组大鼠术后脊髓中JAK2和STAT3 mRNA水平明显增加;与CCI组比较,CCI+ inhibitor组术后脊髓中JAK2和STAT3的表达显著降低(P＜0.01).荧光素酶报告基因检测结果表明JAK2/STAT3上游的负调控因子SOCS3是miR-19a的靶基因.Western blot检测结果表明CCI组大鼠脊髓中SOCS3水平较假手术组升高,且SOCS3水平在CCI术后第7天达到最高,而后呈下降趋势;与CCI组比较,CCI+inhibitor组SOCS3表达明显上升(P＜0.05).结论 miR-19a inhibitor能缓解CCI大鼠机械性触诱发痛和热痛觉过敏,该作用与SOCS3介导的JAK2/STAT3通路有关.     

IL-17调控IL-6/IL-6R/JAK1/STAT3信号通路影响喉癌细胞的侵袭和转移

目的 研究白介素(IL)-17通过IL-6/1L-6R/JAK1/STAT3信号通路调控人源性高分化喉癌细胞(Hep-2)侵袭、转移.方法 以Hep-2细胞为研究对象,设IL-17刺激剂0、1、50、100 ng/ml浓度组,Westem blot法检测不同分组在IL-17的刺激下,Hep-2细胞中IL-6、IL-6R、JAK1、p-JAK1、STAT3、p-STAT3的表达变化.迁移、侵袭实验观察IL-17的刺激对Hep-2细胞侵袭、迁移的影响.结果 Western blot实验中,在IL-17刺激下,1、50、100 ng/ml浓度组较0 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6、IL-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(p＜0.01),50、100 ng/ml浓度组较1 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6、1L-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(P＜0.01),100 ng/ml浓度组较50 ng/ml浓度组Hep-2细胞的IL-6R、p-JAK1、p-STAT3的表达明显增加(P＜0.01);各组间JAK1、STAT3的表达无明显变化.侵袭与迁移实验显示IL-17可以促进Hep-2细胞的侵袭和迁移.结论 IL-17可能通过IL-6/IL-6R/JAK1/STAT3信号通路促进Hep-2细胞的侵袭和转移.     

IL-17A抑制Th2细胞分化减轻哮喘小鼠气道嗜酸性粒细胞炎症

目的 研究IL-17A对哮喘小鼠Th2细胞分化及其相关炎症的作用.方法 24只C57BL/6J小鼠按随机数字表法分为对照组、哮喘组和IL-17A处理组(n=8).哮喘组和IL-17A处理组予以卵清蛋白(ovalbumin,OVA)致敏及激发.每次雾化激发前1h,IL-17A处理组给予重组小鼠IL-17A气道滴入.各步对照均予以生理盐水.末次激发后24h处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)行细胞总数及分类计数.ELISA检测BALF中IL-4、IL-5、IFN-γ、IL-17A的浓度.HE和PAS染色及半定量评分评估小鼠肺部病理变化.流式细胞术检测脾脏和支气管淋巴结Th细胞分化.免疫磁珠分选健康小鼠幼稚CD4+T细胞,用Th2极化培养基体外培养,并给予IL-17A或等量PBS干预,检测Th2细胞的增殖、凋亡和分化.结果 哮喘组较对照组,BALF中细胞总数、嗜酸性粒细胞数及其比例(P＜0.05)、IL-4、IL-5、IL-17A浓度均显著增高(P＜0.05),IFN-γ浓度显著下降(P＜0.05);支气管、血管周围炎症细胞浸润和杯状细胞化生明显加重(P＜0.01);脾脏和淋巴结Th2细胞分化比例显著增高(P＜0.05).IL-17A处理组较哮喘组,BALF中的细胞总数[(26.00±5.43)×104/mLvs(58.40 ±26.93)×104/mL,P＜0.05]、嗜酸性粒细胞数[(8.04±1.98)×104/mL vs(31.95±12.28)×104/mL,P＜0.05]及其比例[(29.93 ±3.03)％ vs(53.47 ±6.62)％,P＜0.01]显著降低,而中性粒细胞数及其比例无明显变化;BALF中Th2相关因子IL-4浓度[(9.86 ±2.77) pg/mL vs(28.13 ±4.62) pg/mL,P＜0.01]、IL-5浓度[(7.30 ±0.50) pg/mL vs(10.50±1.10) pg/mL,P＜0.01]均显著降低;支气管、血管周围炎症细胞浸润减轻,HE染色半定量评分降低[(2.00 ±0.51)vs(3.12 ±0.64),P＜0.05],杯状细胞化生减少[(0.80 ±0.45)vs(2.40 ±0.55),P＜0.01];脾脏[(2.24±0.44)％vs(4.82±1.83)％,P＜0.01]和淋巴结[(7.05±0.58)％vs(10.57±1.35)％,P＜0.05]中Th2细胞分化比例显著减少.极化培养的幼稚CD4+T细胞,予IL-17A干预后,诱导分化的Th2细胞比例显著减少(P＜0.05),而增殖和凋亡无显著变化.结论 IL-17A有抑制Th2细胞分化,减轻哮喘小鼠气道嗜酸性粒细胞炎症的作用.     

七氟烷后处理对氧自由基介导减轻兔脊髓缺血再灌注损伤的作用

目的 观察七氟烷后处理足否可以减轻兔脊髓缺血再灌注损伤以及氧自由基在其中的作用.方法 (1)雄性新西兰大白兔48只,随机分为6组(n=8):假手术组,仅行单纯手术操作但不阻闭腹主动脉;对照组,行单纯缺血再灌注,即阻闭腹主动脉20 min后进行再灌注;纯氧后处理组,在再灌注前5 min给予100%O2,持续13 min.七氟烷后处理组(Sevo0.5组/Sevo1.0组/Sevo1.5组),分别冉灌注前5 min给予0.5、1.0及1.5 MAC(肺泡气最低有效浓度)七氟烷处理,持续10 min,然后100%O2洗脱3 min.(2)雄性新西兰大白兔36只,随机分为4组(n=9).纯氧组及七氟烷组,分别接受纯氧和1.0MAC七氟烷后处理并于后处理前1h静脉注射生理盐水5 ml/kg,DMTU+七氟烷及DMTU+纯氧组,分别接受纯氧和1.OMAC七氟烷后处理并于后处理前1 h静脉注射10%二甲基硫脲(DMTU)5 ml/kg.再灌注48 h对所有动物的后肢运动功能进行评分并取脊髓行HE染色对行脊髓前角正常神经元计数.结果 (1)再灌注48 h,七氟烷后处理组后肢运动功能评分和脊髓前角正常神经元计数均显著高于对照组(P＜0.05),脊髓前角正常神经元计数Sevo1.0组明显多于Sevo0.5组和Sevo1.5组(P＜0.05).(2)再灌注48 h,七氟烷组、DMTU+七氟烷及DMTU+纯氧组的后肢运动功能评分和脊髓前角正常神经元计数均明显高于纯氧组(P＜0.05);脊髓前角正常神经元计数七氟烷组明显高于DMTU+七氟烷及DMTU+纯氧组(P＜0.05).结论 七氟烷后处理通过氧自由基介导减轻兔脊髓缺血再灌注损伤.     

大麻素1型受体过表达在实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中的作用

目的 探讨大麻素1型受体(cannabinoid 1 receptor,CB1R)过表达对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠神经功能的影响及其作用机制.方法 选取24只C57B/L6小鼠,采用MOG3s-55免疫诱导构建EAE小鼠模型,随机分为2组,一组采用质粒转染技术使小鼠脊髓组织CB1R过表达,另一组给予溶剂作为对照.观察对照组和CB1R过表达组EAE小鼠的神经功能缺损症状,采用蛋白质印迹法检测小鼠脊髓组织中CB1R蛋白的表达,采用酶联免疫吸附试验检测小鼠脊髓组织中细胞因子白介素(IL)-10、IL-17、ID6、肿瘤坏死因子α (TNF-α)的浓度.结果 免疫后第14、28天时CB1R过表达组EAE小鼠发生神经功能缺损的程度低于对照组(P＜0.05).与对照组相比,CB1R过表达组EAE小鼠脊髓组织中CB1R蛋白的表达水平升高(P＜0.01),IL-10的浓度升高(P＜0.05),而IL-17、ID6、TNF-α的浓度降低(P＜0.05,P＜0.01).结论 中枢神经细胞中CB1R的过表达能够延缓EAE的发生和发展,这种作用可能是通过免疫调节实现的.     

温病湿热证大鼠IL-17的变化及加味藿朴夏苓汤干预对其的影响

目的：观察温病湿热证大鼠血清、舌组织白介素17（IL-17）表达水平的变化,以及加味藿朴夏苓汤干预对其的影响,探讨IL-17在温病湿热证发病中的作用和意义.方法：96只大鼠随机分为正常组、模型组、干预组.多因素复合造模方法制备温病湿热证大鼠模型,干预组第25天起予加味藿朴夏苓汤治疗,连服7d.于造模后4,24,48,72h4个时点分批处死大鼠并取材.ELISA法检测大鼠血清IL-17的水平,SP免疫组化法检测舌组织IL-17的表达.结果：模型组大鼠血清和舌组织IL-17的表达水平在各时点均高于正常组（P ＜0.01）,随时点变化均呈逐渐下降趋势,在4h时最高;随病情加重模型组大鼠血清和舌组织中IL-17的表达水平均呈逐渐升高趋势,均与病情的严重程度呈正相关（血清：r =0.671,P＜0.01;舌组织：r=0.714,P＜0.01）.干预组大鼠血清和舌组织IL-17的表达水平随时点变化呈下降趋势,在各时点均低于模型组（P＜0.01）而高于正常组（P＜0.05,P＜0.01）;随病情加重干预组大鼠血清和舌组织IL-17的表达水平均呈逐渐升高趋势,血清中重度组与轻度、中度组比较差异均有统计学意义（P ＜0.01,P＜0.05）;在舌组织中各组间比较差异亦有统计学意义（P＜0.01,P＜0.05）,与病情的严重程度仍呈正相关（血清：r =0.476,P＜0.01;舌组织：r =0.546,P＜0.01）.结论：IL-17参与了温病湿热证的发生、发展过程,其表达水平与温病湿热证的病情严重程度密切相关.加味藿朴夏苓汤可降低温病湿热证大鼠IL-17的表达,抑制炎症反应而减轻病情严重程度.     

IL-23/IL-17轴因子在初诊Graves病患者治疗前后的变化

目的 检测IL-23/IL-17轴在Graves病(GD)患者外周血中的表达水平,以及1311I或抗甲状腺药物(ATD)治疗后的变化趋势.方法 收集初诊GD患者40例作为GD组,其中131I治疗组(20例)和ATD治疗组(20例);40例性别、年龄匹配的健康者设为对照组.使用ELISA法检测GD组治疗前后及对照组IL-17、IL-23水平.结果 ①两组比较,治疗前GD组血清IL-23、IL-17表达水平明显高于对照组(P＜0.05);②131I治疗后第6个月IL-23、IL-17的外周血水平较治疗前有明显降低(P＜0.05),仍明显高于对照组(P＜0.05).ATD组治疗前后差异无统计学意义.结论 IL-23、IL-17在初诊GD患者外周血中高表达,提示IL-23/IL-17轴可能参与Graves发病,同时放射性131 I治疗甲亢改善病情可能与IL-23/IL-17轴因子变化部分相关.     

电针刺激对糖尿病神经病理性疼痛大鼠脊髓p38MAPK的影响

目的：探讨电针刺激对糖尿病神经病理性疼痛大鼠痛阈的影响。方法128只雄性SD大鼠随机均分为4组（n＝32）：糖尿病神经病理性疼痛组（D组）造模成功后不给予治疗;电针刺激组（EA组）造模成功后给予电针治疗;假电针刺激组（A组）只将针灸针插入穴位,但不给予电刺激;假穴位电针刺激组（E组）将电针插入穴位右侧1 cm处,并给予电刺激,记录电针干涉前（T1）、电针干涉7 d（T2）、14 d（T3）及21 d（T4）大鼠的机械缩足反射阈值及血糖的水平;各时间点测定结束后,每组随机选取8只大鼠取L4－6脊髓,用Western blot的方法测定脊髓p38 MAPK表达水平,分析痛阈变化及p38 MAPK表达水平的相关性。结果与D、A、E组相比,EA组T2、T3、T4时间点痛阈均较高,差异有统计学意义（P＜0.05）;与D、A、E组相比,EA组T2、T3、T4时间点p38 MAPK活化水平均下降,差异有统计学意义（P＜0.05）;DNP大鼠痛阈及p38 MAPK变化呈负相关（r＝－0.942,P＜0.05）。结论电针刺激能提高糖尿病神经病理性疼痛大鼠的痛阈,其机制可能与抑制脊髓p38MAPK的表达有关。