丙泊酚对人子宫平滑肌细胞Ca2+跨膜内流和肌浆网钙释放功能的影响

目的观察丙泊酚对足月产妇子宫平滑肌细胞Ca2+跨膜内流和肌浆网Ca2+释放功能的影响,探讨其抑制子宫平滑肌收缩功能的可能机制。方法取正常孕足月待产的子宫平滑肌组织,胶原酶消化法培养子宫平滑肌细胞。①40个孔板中活性良好的子宫平滑肌细胞随机等分为4组(n=10):对照组(C组)、低浓度丙泊酚组(P1组)、中浓度丙泊酚组(P2组)、高浓度丙泊酚组(P3组),用Fluo-3AM钙荧光指示剂染色后,分别给予Hank液、10μmol/L丙泊酚(终浓度)、50μmol/L丙泊酚、250μmol/L丙泊酚处理20 min,然后加入40 mmol/L氯化钾,每个孔板在激光共聚焦显微镜下随机选定10个子宫平滑肌细胞,利用图形分析软件分析细胞内钙荧光强度,取钙荧光强度峰值的平均值反映子宫平滑肌细胞游离Ca2+浓度([Ca2+]i)。②再以20 mmol/L咖啡因代替氯化钾,其余处理及分组同前。结果①与基础值比较,各组加入丙泊酚后子宫平滑肌细胞[Ca2+]i差异无统计学意义(P>0.05),加入氯化钾后[Ca2+]i均升高(P<0.01);与C组相比,加入氯化钾后P1组子宫平滑肌细胞[Ca2+]i差异无统计学意义(P>0.05),P2组和P3组加入氯化钾后[Ca2+]i明显低于C组(均P<0.01),且P3组[Ca2+]i低于P2组(P<0.05)。②与基础值比较,各组加入丙泊酚后子宫平滑肌细胞[Ca2+]i差异无统计学意义(均P>0.05),加入咖啡因后[Ca2+]i升高(P<0.01);加入咖啡因后各组子宫平滑肌细胞[Ca2+]i差异无统计学意义(P>0.05)。结论丙泊酚可浓度依赖性地抑制足月产妇子宫平滑肌细胞电压依赖型钙通道开放而减少Ca2+跨膜内流,而对肌浆网Ryanodine型Ca2+释放功能无明显影响。     

硝苯地平和SK&F96365对环匹阿尼酸引起的平滑肌细胞质游离Ca2+ 浓度升高作用的影响

目的探讨介导Ca2+池操纵性Ca2+内流的Ca2+通道特性. 方法以Fura-2荧光探针测定细胞质游离Ca2+浓度([Ca2+]i). 结果 (1)10 μmol/L环匹阿尼酸(CPA)可触发大鼠主动脉平滑肌细胞[Ca2+]i的双相升高(峰值和持续相).(2)SK&F96365(5～40 μmol/L)以浓度依赖性抑制CPA触发的[Ca2+]i升高持续相.(3)1 μmol/L硝苯地平阻断电压依赖性Ca2+通道后,20 μmol/L SK&F96365仍能抑制CPA触发的[Ca2+]i升高持续相;而在20 μmol/L SK&F96365抑制CPA触发[Ca2+]i升高持续相后,1 μmol/L硝苯地平不能产生进一步的抑制作用. 结论电压依赖性Ca2+通道和Ca2+池操纵性Ca2+通道介导了Ca2+池操纵性Ca2+内流.     

硝苯吡啶的临床应用

<正> 硝苯吡啶,即心痛定,是心绞痛患者常用药之一,但是利用其系钙通道阻断剂,在临床上应用比较广泛。1.硝苯吡啶主要用于治疗心绞痛、心肌梗塞及高血压。 因钙离子是心肌和血管平滑肌兴奋—收缩偶联中不可缺少的关键物质。钙转运阻断药选择性地阻断细胞膜上的离子慢通道,抑制细胞外Ca~(2+)内流使心肌和血管平滑肌细胞内缺乏足够的Ca~(2+),导致心肌收缩力减弱,心输出量减少,窦房结慢反应细胞受抑制使心率减慢,血管平滑肌松弛,血压下降,Ca~(2+)内流被阻断,则交感神经兴奋时释放递质减少,而表现为抗交感神经     

血管紧张素Ⅱ受体基因敲除对跨膜钙内流的作用

目的　观察血管紧张素Ⅱ受体亚型 (AT1a)基因敲除对跨膜钙内流的影响。方法　培养AT1a基因敲除及其野生型对照小鼠的主动脉血管平滑肌细胞 (VSMC)和应用荧光倒置显微镜及钙荧光指示剂Fura 2 /AM动态观测VSMC的钙离子 [Ca2 ]i变化。结果　在血管紧张素Ⅱ (AngⅡ )刺激下钙内流显著增加 ,AT1a 敲除组VSMC钙净增值为 ( 2 0 4± 2 2 )nmol/L、基础 [Ca2 ]i为 ( 10 8± 9)nmol/L野生型对照VSMC钙净增值为 [( 194± 19)nmol/L ,基础 [Ca2 ]i为 ( 110± 7)nmol/L](P <0 0 1) ,应用钙通道阻滞剂硝苯啶和三磷酸鸟苷 γs能明显抑制AngⅡ介导的细胞钙增加 ,但G抑制蛋白的阻断剂百日咳毒素却能明显增强AngⅡ介导的细胞钙增加。结论　AT1a基因敲除后 ,AngⅡ介导的钙内流主要通过L 型钙通道 ,并受百日咳毒素的调节。     

钙通道阻滞药在围术期的应用

钙通道阻滞药（CCBD）阻滞心肌和血管平滑肌细胞兴奋-收缩耦联作用,抑制心肌收缩力及血管平滑肌收缩,抑制窦房结和房室结的自律性和传导性,其药理机制不断明确,CCBD在围术期与麻醉药、肌松药及心血管药物的相互作用的相关问题不断探索与扩展,在临床应用中具有一定的发展前景.     

5-羟色胺对培养胃底平滑肌细胞内游离钙动员的影响

目的　研究 5 - HT诱导胃底平滑肌细胞内钙动员的机制 .方法　采用 Ca2 +指示剂 Fluo- 3/ AM作为细胞内钙离子的荧光探针负载培养的胃底平滑肌细胞 ,共聚焦技术检测细胞内钙荧光强度的变化 .结果　基础状态下 SFSMC[Ca2 + ]i 荧光强度 (FI)为 2 6 4± 15 ,5 - HT 10μmol· L- 1 使荧光强度的变化 ΔFI为 16 .5± 2 .6 ;细胞外无钙时 ,5 - HT升高[Ca2 + ]作用被减弱 ,但除去细胞外钙 ,并使用内罗啶 (ryan-odine)孵育后 ,5 - HT 不再引起荧光强度的变化 ;10μmol· L- 1 米安舍林 (mianserin)可部分拮抗 5 - HT升高[Ca2 + ]i 的作用 ,赛更定 (cyprohetadine)不能抑制 5 - HT升高的胞内钙 ;Mn92 0 2和拉西地平 (lacidipine)均能完全抑制 5 -HT升高 [Ca2 + ]i 的作用 .结论　 5 - HT可通过促进外钙内流及钙池 (SR)释放使 [Ca2 + ]i 升高 ;在胃底平滑肌 5 - HT升高胞内钙部分通过 5 - HT2 受体 ,而不是通过 5 - HT1 C受体 ;5 -羟色胺通过 L型钙通道促外钙内流 ;二氢吡啶类钙拮抗剂能通过阻滞 L 型钙通道 ,而完全抑制 5 - HT促胞内钙升高的作用     

钙通道阻滞剂在消化系统疾病的应用

钙通道阻滞剂能选择性地阻滞细胞膜的慢通道，抑制Ca2＋内流进入细胞，因而也影响许多脏器的平滑肌。它首先用于治疗心血管疾病，随后又应用于神经、呼吸等系统。近年来对其在消化系统疾病的作用已引起临床工作者的兴趣。本文将介绍钙通道阻滞剂在消化系统疾病的应用近况1食管疾病1．1贲门失弛缓症：本病是一种食管神经肌肉功能障碍性疾病，主要特征为吞咽时食管下端括约肌失去舒张功能，不能正常舒张，以致食物难以通过而滞留于食管内。临床以食物反流、咽下困难及胸骨后疼痛为主要表现。钙通道阻滞剂能阻断Ca2＋膜内流和细胞内钙的释放，…     

甲状腺手术前应用钙通道阻滞剂预防术中高血压

甲状腺手术应用颈丛阻滞后往往出现高血压,有的甚至出现高血压危象、脑血管意外.钙通道阻滞剂可阻断心肌、血管平滑肌细胞的钙离子内流,从而抑制心肌收缩力,减少心搏量,并扩张周围血管,因而具有降血压作用.同时,钙通道阻滞剂还可以对抗局麻药的心肌毒性作用[1].笔者将硝苯吡啶或尼莫地平作为术前用药,以观察颈丛麻醉后甲状腺手术患者血压、心率变化情况.     

钙预处理联合钙通道拮抗剂对未成熟心肌的保护作用

目的:观察预处理和钙通道拮抗剂及两者联合应用后对未成熟心肌的保护作用.方法:选取周龄为2～3周的新西兰大白兔32只随机分为4组:缺血再灌注组(I/R),钙预处理组(CP),钙通道拮抗剂组(CCB)及钙预处理+钙通道拮抗剂组(CP+CCB).建立Langendorff离体心脏模型,各组分别采用不同的处理方法,记录观察心脏功能指标以及其它各项生化指标.结果:与其他组相比,钙预处理+钙通道拮抗剂(CP+CCB)组能明显改善左心室收缩功能(P＜0.01),降低心肌酶的水平,减轻心肌的水肿程度,显著升高ATP及SOD活性(P＜0.01),明显减少心肌细胞内Ca2+及MDA的含量(P＜0.01或P＜0.05).结论:钙预处理联合钙通道拮抗剂可增强对未成熟心肌缺血再灌注损伤的保护作用,机制可能是:激活PKC,抑制T型钙离子通道,减少心肌Ca2+内流,减轻心肌细胞Ca2+超载;提高机体抗氧化活力及清除体内自由基能力.     

5-羟色胺对心肌细胞内游离钙浓度的影响

目的　观察 5 -羟色胺 (5 - HT)对新生大鼠心肌细胞内游离 Ca2 + 浓度的影响 ,并探讨其作用机制 .方法　培养 SD大鼠 (1～ 3d)心肌细胞 ,应用特异性 Ca2 +荧光指示剂 Fluo- 3/AM负载细胞 ,激光共聚焦显微镜检测游离 Ca2 + 浓度 .结果　 5 - HT在 10 - 6 ,10 - 5,10 - 4 m ol· L- 1 时均可升高心肌游离Ca2 + 浓度 ,且随剂量增加而加强 ;二氢吡啶类钙通道阻断剂lacidipine可部分拮抗 5 - HT的作用 ;心肌肌浆网内钙释放通道 ryanodine受体调节剂 ryanodine,在 10 - 5mol· L- 1 时也可部分拮抗 5 - HT的作用 ;用 EGTA络合细胞外液中游离Ca2 + ,5 - HT升高心肌游离 Ca2 + 作用明显减弱 ;此外 ,5 - HT二型受体 (5 - HT2 R)阻断剂赛庚定具有显著抑制 5 - HT升高心肌游离 Ca2 + 的作用 .结论　 5 - HT具有升高心肌游离 Ca2 + 的作用 ,其机制可能与细胞外 Ca2 +经 5 - HT2 R或二氢吡啶类钙通道进入细胞以及肌浆网内钙释放有关     

萹蓄黄酮苷对大鼠离体胸主动脉的舒张作用与机制

目的 探讨萹蓄黄酮苷(FP)对大鼠离体胸主动脉的舒张作用与机制.方法 以大鼠胸主动脉为标本,观察FP对去氧肾上腺素(PE)预收缩血管的舒张作用及其在血管内皮、平滑肌细胞中的作用.结果 在内皮完整血管上,FP能浓度依赖性地降低去氧肾上腺素(PE 1.0×10-5 mol/L)或氯化钾(KCl 6.0×10-2 mol/L)预收缩血管的张力;去内皮、加入一氧化氮合酶抑制剂L-N-硝基精氨酸甲酯(L-NAME)、 亚甲蓝(MB)及ODQ(GC阻断剂)对FP的舒血管作用没有影响;并且不受吲哚美辛、格列苯脲、四乙基铵、阿托品和普萘洛尔等药物的影响;在无钙K-H灌流液(含10-4 mol/L EGTA)中,FP可明显抑制PE引起的血管环收缩作用,而且可使CaCl2量效曲线下移.与控制组相比差异有显著性,P<0.01.结论 FP能够舒张由PE和KCl引起的血管收缩.舒张血管作用可能是抑制胞外Ca2+经血管平滑肌上的电压依赖性钙通道内流及胞内内质网Ca2+释放,从而抑制细胞内钙离子浓度升高.     

钙拮抗剂的分类及在治疗高血压中的应用

钙拮抗剂又称钙通道阻滞剂 ,能抑制跨膜钙内流及细胞内的钙释放 ,降低细胞内游离钙浓度及其利用率 ,抑制ＡＴＰ酶的活性 ,降低心肌收缩力 ,使平滑肌细胞松弛 ,血管扩张 ,降低外周血管阻力[1] 。自从 2 0年前出现钙拮抗剂以来 ,它们已成为治疗高血压的最重大进展之一。由于老药新剂型的开发 ,新化合物不断出现 ,尤其是近年来有越来越多的证据表明短效二氢吡啶类钙拮抗剂对某些病人有严重的副作用 ,因此 ,在应用钙拮抗剂时必须十分谨慎。钙拮抗剂的分类方法较多 ,最近由于Ｔｏｙｏ -Ｏｋａ等提出一种新的分类方法 ,该分类体系是根据化学性质将…     

环匹阿尼酸对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞内钙浓度的影响

目的研究环匹阿尼酸(CPA)对大鼠远端肺静脉平滑肌细胞(PVSMC)细胞内钙浓度([Ca2+]i)的影响及可能机制。方法原代培养大鼠远端PVSMC,并通过形态学和免疫荧光染色鉴定,利用荧光显微镜和InCyte细胞内钙浓度检测系统观测高钾(60 mmol/L KCl)溶液及CPA对PVSMC的[Ca2+]i影响。结果原代培养的PVSMC表现出典型血管平滑肌细胞生长特征,并对平滑肌α-actin免疫荧光染色呈阳性反应;高钾溶液使PVSMC的[Ca2+]i显著升高,5μmol/L硝苯地平能完全阻断PVSMC的[Ca2+]i对高钾溶液的反应;10μmol/LCPA能使含5μmol/L硝苯地平的无钙Krebs溶液孵育的PVSMC的[Ca2+]i短暂小幅升高,恢复细胞外Ca2+至2.5 mmol/L后,10μmol/L CPA能使含5μmol/L硝苯地平的Krebs溶液孵育的PVSMC的[Ca2+]i迅速升高。结论 CPA能够使大鼠远端PVSMC的[Ca2+]i升高,其机制可能与Ca2+从肌浆网释放,并诱发细胞外Ca2+通过钙池操纵性钙通道(SOCC)内流有关。     

沙丁胺醇对大鼠支气管平滑肌细胞容量性钙内流的影响

目的:观察沙丁胺醇对正常和IL-13刺激的大鼠支气管平滑肌细胞(rBSMC)胞质Ca2+信号的影响,探讨沙丁胺醇治疗哮喘的作用机制。方法:体外培养大鼠支气管平滑肌细胞,利用共聚焦显微镜测定胞质Ca2+水平,观察沙丁胺醇作用后正常和IL-13刺激后的rBSMC的钙池Ca2+释放和容量性Ca2+内流(CCE)的变化。结果:IL-13 10μg/L处理24 h后,rASMC的Ca2+释放和Ca2+内流均高于正常对照组;10μmol/L沙丁胺醇不影响正常rASMC的Ca2+释放,但是显著抑制CCE;10μmol/L沙丁胺醇对IL-13刺激后的Ca2+释放和CCE的上升均有抑制作用。结论:沙丁胺醇可以抑制Th2细胞因子刺激后的气道平滑肌细胞的容量性Ca2+内流,从而降低胞质Ca2+水平。提示容量性CCE在气道高反应性的发生以及beta 2受体激动剂的治疗效应中具有重要作用。     

二氢吡啶类钙拮抗剂的测定方法及其药代动力学研究概况

钙离子广泛参与人体细胞代谢 ,在许多生物反应过程中 ,起着重要作用[1] 。钙拮抗剂又称钙离子通道阻滞剂 ,能抑制细胞外钙内流和 (或 )内钙释放 ,降低心肌收缩力 ,降低外周血管阻力 ,从而使血压下降。二氢吡啶类钙拮抗剂 (ｄｉｈｙｄｒｏｐｙｒｉｄｉｎｅｃａｌｃｉｕｍａｎｔａｇｏｎｉｓｔｓ)是 2 0世纪 6 0年代后期 ,研究开发的一类新型药物 ,该类药物化学结构属于 1,4 二氢吡啶的衍生物 ,具有很强的扩张血管作用 ,是目前临床上常用的钙拮抗剂 ,主要用于治疗高血压等心脑血管疾病。近年来 ,又开发和上市了如尼群地平(ｎｉｔｒｅｎｄｉｐ…     

二氢吡啶类钙通道阻滞剂的研究进展与合理应用

早在18世纪后期,钙离子内流可引起肌肉收缩已为人所知,但对其进入细胞的机制尚不清楚,1971年药理学家发现血管扩张药普尼拉明(Prenylam ine)和维拉帕米(Verapam il)的冠脉舒张作用和对心脏的负性肌力作用是抑制钙离子(Ca2 )经电压调控的钙离子通道(Calcium Channel)内流而产生的,且此作用可被增加细胞外Ca2 浓度而逆转,故将这一类药命名为钙通道阻滞剂(Calcium Channel B locker,CCB),又称钙拮抗剂(Calcium Antagonists)。1钙通道阻滞剂的概述CCB问世30余年来,发展十分迅速,其品种已从第1代的3种原始型药(维拉帕米、硝苯地平和地尔硫…     

疏肝饮提取物对大鼠结肠平滑肌收缩的抑制作用

目的：研究疏肝饮（SGY）提取物对大鼠结肠平滑肌收缩的影响,并探讨其与钙通道的关系。方法：应用常规的离体张力测定方法,观察不同浓度的SGY提取物对乙酰胆碱（ACh）、氯化钾（KCI）和细胞内钙耗竭后外钙内流引起的大鼠结肠平滑肌收缩的作用。结善：SGY提取物能够抑制ACh、KCI和细胞内钙耗竭后外钙内流引起韵大鼠结肠平滑肌收缩。结论：疏肝饮具有抑制大鼠结肠平滑肌收缩的作用,机制可能涉及通过阻断电压门控钙通道（VDC）、受体操纵性钙通道（ROC）和钙库调控性钙通道（SOC）抑制胞外Ca^2＋内流,同时涉及抑制胞内Ca^2＋的释放。     

肾上腺素β3受体调节大鼠逼尿肌舒张的机制

目的探讨肾上腺能β3受体(β3-AR)调节逼尿肌舒张的机制。方法应用激光共聚焦显微镜观察不同浓度β3-AR激动剂BRL37344A对氯化钾和咖啡因诱发的大鼠逼尿肌细胞钙荧光强度的变化,流式细胞仪测定β3-AR激活后细胞内CaM活性变化。结果较高浓度(1×10-6mmol/L及1×10-4mmol/L)的BRL37344A分别使氯化钾诱发的细胞内钙荧光强度的峰值下降了18.2%和28.3%,而低浓度BRL37344A对氯化钾诱发的细胞钙离子跨膜内流无显著影响;不同浓度的BRL37344对咖啡因诱发的细胞肌浆网内储存钙的释放均无明显影响(P>0.05)。β3-AR激活后细胞内活性CaM含量明显增加。结论 BRL37344A抑制电压门控钙通道的开放,减少钙离子跨膜内流。Ca2+-CaM信号传导途径参与了β3-AR介导逼尿肌细胞舒张调节过程。     

用^45Ca研究红花对大鼠胸主动脉Ca^2＋内流的影响

用45Ca跨膜流动测定结果：红花提取物浓度为5、50、500μg／ml时，不影响大鼠主动脉静息状态下Ca2＋内流；对去甲肾上腺素（NE：1．2×10-6mol／L）和高钾溶液（KCl：100mmol／L）引起的Ca2＋内流，则具有不同程度的阻滞作用，并具有剂量－效应关系（即红花提取物浓度增高，Ca2＋内流相应减少）。红花与钙拮抗剂verapamil的作用规律相似。说明能阻滞血管平滑肌细胞膜上的受体操纵钙通道（ROC）和电压依赖钙通道（PDC），是红花治疗冠心病的机理之一。     

毛冬青甲素对兔主动脉平滑肌钙内流的影响

本文用核素45Ca示踪法观察了毛冬青甲素对兔主动脉平滑肌钙离子跨膜流动的影响。结果显示:毛冬青甲素(10~(-4)mol/L)对正常营养液的主动脉平滑肌钙离子内流和外流均无明显影响(p>0.3),但对高钾(140mmol/L)或去甲肾上腺素(10~(-5)mol/L)引起的主动脉平滑肌钙离子内流却有抑制作用(p<0.01)。结果提示毛冬青甲素对平滑肌细胞膜上的电位依赖性钙通道和受体操纵性钙通道均有拮抗作用。