宁夏无果枸杞芽提取物对老年小鼠小肠组织中FOXO1、β-catenin表达的影响

目的观察宁夏无果枸杞芽提取物（FLE）对衰老小鼠小肠上皮FOXO1、β-catenin表达的影响。方法将60只13月龄自然衰老昆明小鼠分为老年对照组和FLE低剂量组（FLE1组）、FLE中剂量组（FLE2组）、FLE高剂量组（FLE3组）,每组15只;另将15只6月龄昆明小鼠做为成年对照组。FLE1组、FLE2组、FLE3组分别用质量/体积百分比为5%、10%、20%FLE灌胃,0.2 m L·10 g^-1·d^-1,老年对照组和成年对照组灌胃等量生理盐水,连续8周。应用PCR技术与免疫蛋白印迹技术（Western-Blot）,检测小鼠小肠组织中FOXO1、β-catenin mRNA和蛋白表达。结果与成年对照组比较,老年对照组小鼠小肠组织中FOXO1、β-catenin mRNA与蛋白表达下调（P〈0.05）。与老年对照组比较,FLE1、FLE2 FOXO1、β-catenin mRNA表达无明显增加（P〉0.05）;FLE3组的FOXO1、β-catenin mRNA和蛋白表达均上调（P〈0.01）。结论高剂量FLE能够上调小肠组织中FOXO1、β-catenin mRNA和蛋白表达。     

宁夏无果枸杞芽提取物对自然衰老小鼠SOD、MDA及NCAM的影响

目的观察宁夏无果枸杞芽醇提取物(FLE)对老年小鼠学习、记忆功能、血浆和脑组织中超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及神经细胞黏附分子(NCAM)在海马和皮质表达的影响。方法将60只13个月龄自然衰老KM小鼠分为老年对照组和FLE低剂量组(FLE1组)、FLE中剂量组(FLE2组)、FLE高剂量组(FLE3组),每组15只;另将15只6个月龄KM小鼠做为成年对照组。FLE1、FLE2、FLE3组分别用质量/体积百分比为5%、10%、20%FLE灌胃,0.2mL.(10g.d)-1,老年对照组和成年对照组灌胃等量生理盐水,连续8周。用Morris水迷宫实验检测各组小鼠学习记忆能力;黄嘌呤氧化酶法测定血清和脑组织SOD活性,硫代巴比妥酸法测定MDA水平;免疫组化SP法检测小鼠脑组织中NCAM的表达。结果与成年对照组比较,老年对照组小鼠的空间搜索平台停留时间百分比降低,血清SOD活性降低,MDA水平提高(P<0.01),脑组织中NCAM表达下调(P<0.01)。与老年对照组比较,FLE2、FLE3组的学习记忆能力均提高、血清和脑组织中SOD活性均增加,MDA水平降低,脑组织中NCAMs表达均上调(P<0.05)。结论 FLE能够改善自然衰老KM小鼠的学习记忆能力,其机制可能与FLE的抗氧化和上调脑组织中NCAM表达有关。     

宁夏无果枸杞芽提取物对自然衰老小鼠学习记忆、MAO、GSH-Px及ChAT活性的影响

目的 观察宁夏无果枸杞芽提取物（FLE）对自然衰老小鼠学习、记忆功能,脑组织中谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、单胺氧化酶（MAO）、乙酰胆碱转移酶（ChAT）的活力的影响,探讨FLE抗衰老机制.方法 将60只13月龄自然衰老昆明小鼠分为老年对照组和FLE低剂量组（FLE1组）、FLE中剂量组（FLE2组）、FLE高剂量组（FLE3组）,每组15只;另将15只6月龄昆明小鼠做为成年对照组.FLE1组、FLE2组、FLE3组分别用质量/体积百分比为5％、10％、20％ FLE灌胃,0.2mL·（10·d）-1,老年对照组和成年对照组灌胃等量生理盐水,连续8周.用Morris水迷宫检测各组小鼠给药前后的学习记忆能力;分光光度法检测脑组织中GSH-Px、MAO和ChAT的活性;免疫组化方法检测小鼠大脑皮层和海马区的ChAT的表达.结果 给药后,与成年对照组比较,老年对照组小鼠逃避潜伏期延长、目标象限停留时间百分比缩短（P＜0.01）,脑组织中MAO活力增高,GSH-Px、ChAT活性降低（P＜0.01）;与老年对照组比较,FLE2组、FLE3组小鼠逃避潜伏期缩短、目标象限停留时间百分比延长（P＜0.01）,FLE3组脑组织中MAO活性降低、GSH-Px活性明显升高（P＜0.01）,FLE2及FLE3组脑组织中ChAT活性增高（P＜0.01）;FLE各组间比较,FLE3组治疗效果较FLE1组及FLE2组好（P＜0.01）.结论 较高浓度的FLE能够改善自然衰老昆明小鼠的学习记忆能力,其机制可能与FLE提高GSH-Px活性,降低MAO活性,发挥抗氧化作用以及上调脑组织中ChAT的活性,提高脑组织中乙酰胆碱含量有关.     

解耦联蛋白2对糖尿病小鼠心肌细胞凋亡相关蛋白表达的影响

目的:研究解耦联蛋白2(uncoupling protein2,UCP2)与糖尿病(diabetes mellitus,DM)小鼠心肌细胞凋亡的关系。方法:用雄性UCP2敲除小鼠(UCP2-/-)及C57BL/6小鼠建立糖尿病模型,各组分别饲养7天及28天。采用Hochest荧光染色观察糖尿病小鼠心肌细胞形态学的变化,Westernblot方法检测凋亡蛋白caspase3的表达。结果:①DM28天组Hochest染色细胞出现核固缩状和颗粒状荧光等典型的凋亡学特征。DM28天组较DM7天组染色质明显浓缩,荧光强度明显增加。UCP2-/-+DM7天组较DM7天组染色质浓缩减轻,颗粒状荧光减少;UCP2-/-+DM28天组较DM28天组染色质浓缩明显减轻,颗粒状荧光明显减少。②Western blot结果显示:UCP-/-+DM7天组cleaved-caspase3蛋白表达较DM7天组稍下降,无统计学意义(P>0.05);UCP2-/-+DM28天组cleaved-caspase3蛋白表达较DM28天组明显减少,(P<0.05)。结论:UCP2与糖尿病心肌细胞凋亡存在密切关系。     

松节藻醇提物对正常小鼠抗氧化活性的影响

目的 研究松节藻醇提物对正常小鼠抗氧化活性的影响。方法 通过单细胞微凝胶电泳法检测松节藻醇提物对H₂O₂ 诱导的正常小鼠淋巴细胞 DNA 损伤的防护作用,分别采用黄嘌呤氧化酶法、DTNB 直接法、TBA 硫代巴比妥酸法检测小鼠血清中的超氧化物歧化酶 (SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH-Px) 活性和丙二醛 (MDA) 的量。结果 松节藻醇提物对H₂O₂ 诱导的正常小鼠淋巴细胞 DNA 损伤具有一定的防护作用,并且能升高小鼠血清中 SOD 和 GSH-Px 活性,降低 MDA 的量。结论 松节藻醇提物具有一定的抗氧化活性。     

雌激素缺乏对心肌衰老、凋亡和心功能的影响

目的 通过手术去除双侧卵巢建立更年期小鼠模型探讨雌激素缺乏对心脏衰老、凋亡和心功能的影响,并讨论相关机制。方法 取8周龄雌性C57/BL6小鼠20只,按随机数字表法分为去卵巢组（OVX group）和假手术对照组（control group）（每组各10只）。去卵巢组通过手术去除双侧卵巢建立更年期模型。术后6个月行心脏超声（以下简称心超）检测评估心功能,心肌组织取材进行组织学检测和衰老、凋亡等相关指标检测。结果 与对照组比较,OVX组小鼠心肌纤维化和心/体重比均明显升高。二维心超结果显示OVX组小鼠较对照组小鼠室间隔厚度、舒张期左心室内径和容量显著增高。与对照组比较,OVX组小鼠β-gal阳性细胞率明显增加,P16、P19表达显著上调,而SIRT1、Bmi-1等抗衰老指标显著降低。与对照组比较,OVX组小鼠凋亡指标Bax、caspase-3等表达显著增加,抗凋亡指标Bcl-2表达明显降低。与对照组比较,OVX组小鼠抗氧化指标SOD1、SOD2表达均显著下降。结论 雌激素缺乏能够促进心肌纤维化、导致心肌细胞衰老和凋亡,其主要机制可能与降低SIRT1和Bmi-1的表达促进氧化应激等多种因素相关。     

大蒜素对衰老模型小鼠学习记忆及抗氧化能力的影响

目的 探索大蒜素对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆及抗氧化能力的影响。方法 健康雄性小白鼠50只,按数字表法随机分为5组（n=10）：正常对照组（C组）、模型对照组（D组）、大蒜素低剂量组（10 mg/kg,L组）、大蒜素中剂量组（20 mg/kg,M组）、大蒜素高剂量组（40 mg/kg,H组）。饲养1周后,大蒜素组和模型组腹腔注射D-半乳糖生理盐水溶液（100 mg/kg）,正常对照组腹腔注射同体积生理盐水;大蒜素组灌胃不同剂量的大蒜素,正常对照组和模型组灌胃同体积的生理盐水,持续42 d。实验结束后,采用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力,处死小鼠测定小鼠血清T-AOC,血清、肝、脑组织中的SOD、GSH-Px、CAT活性和MDA含量。结果 与模型组相比,大蒜素各剂量组逃避潜伏期时间明显缩短,120 s内穿过平台的次数和经过原平台象限的时间比率都显著增多（P<0.05或P<0.01）,小鼠血清中T-AOC显著升高,血清、脑、肝组织中SOD、GSH-Px、CAT活性均显著升高,MDA含量显著降低,差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。结论 大蒜素能改善D-半乳糖致衰老小鼠的学习记忆能力,其机制可能与增加抗氧化酶活性,清除自由基、提高抗氧化能力有关。     

卡托普利对糖尿病大鼠心肌细胞凋亡及相关蛋白表达的影响

目的:探讨血管紧张素转换酶抑制剂(ACEI)卡托普利对糖尿病(DM)大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的影响。方法:成年雄性SD大鼠30只,随机分为正常对照组(NC组)、DM组、卡托普利治疗组(Cap组),每组10只。应用链脲佐菌素(STZ)诱导构建DM大鼠模型,Cap组每日灌胃给予卡托普利50 mg/kg,其余两组给予等容积的0.9%氯化钠溶液。用药12周后,原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测计算心肌细胞凋亡指数(AI),Western blot法检测心肌Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白的表达,透射电镜观察心肌超微结构变化。给药期间动态观察测定大鼠行为、体质量及血糖水平的改变。结果:与NC组相比,DM组大鼠心肌细胞AI明显升高,Bcl-2蛋白表达减少,Bax、Caspase-3蛋白表达增加;电镜示心肌细胞超微结构呈明显损伤性变化。与DM组相比,Cap组心肌细胞AI明显降低,Bcl-2蛋白表达增加,Bax、Caspase-3蛋白表达减少;超微结构损伤不同程度减轻。结论:卡托普利可能通过上调Bcl-2表达,下调Bax表达,减少Caspase-3依赖性的心肌细胞凋亡,从而起到保护DM大鼠心肌细胞的作用。     

重楼水提物对肝癌细胞HepG2增殖及凋亡的影响

目的 探讨重楼水提物对人肝癌HepG2细胞株增殖和凋亡的影响.方法 以体外培养的肝癌HepG2细胞为研究对象,MTT法检测重楼对肝癌HepG2细胞增殖的抑制作用,流式细胞仪Annexin V/PI 双染法检测重楼对其凋亡的影响,ELISA法检测Bcl-2、Bax 蛋白表达的情况.结果 不同浓度重楼水提物能有效抑制HepG2细胞的增殖,且呈时间及浓度依赖性,作用效果在12 μg/ml时抑制效果最好（P〈0.01）.12 μg/ml重楼水提物作用HepG2细胞24 h、48 h后,结果表明HepG2随着重楼水提物作用时间的延长,细胞凋亡率增加,与阴性对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.01）.12 μg/ml重楼水提物作用HepG2 细胞24 h后,Bcl-2蛋白表达降低,Bax蛋白表达增加,与阴性对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论 重楼水提物能抑制HepG2细胞的体外增殖,抑制作用表现出时效关系,其机制可能与促进细胞凋亡、降低Bcl-2蛋白表达、增加Bax蛋白表达有关.     

枸杞多糖对小鼠耐缺氧及抗疲劳能力的影响

目的观察枸杞多糖(LBP)对小鼠耐缺氧及抗疲劳能力的影响。方法 240只小鼠随机分为4组(雌雄各半):LBP高剂量组(4 g·L-1)、LBP中剂量组(2 g·L-1)、LBP低剂量组(1 g·L-1)和对照组(蒸馏水),每组60只。按每日10 mL·kg-1剂量给小鼠连续灌胃15 d,然后分别进行常压耐缺氧实验、负重游泳实验、耐寒和耐热实验,检测运动后血乳酸和血尿素氮含量。结果 LBP高剂量组和中剂量组存活时间长于对照组,LBP高、中和低剂量组游泳时间均长于对照组,差别均有统计学意义(P<0.05)。LBP低剂量组和中剂量组血乳酸水平和血尿素氮含量均低于对照组(P<0.05),LBP高剂量组血乳酸水平和血尿素氮含量均明显低于对照组(P<0.01);LBP中、高剂量组耐寒能力和耐热能力均高于对照组(P<0.05,P<0.01)。结论 LBP可在一定程度上提高小鼠的耐缺氧及抗疲劳能力。     

心肌细胞凋亡对老年大鼠心脏功能的影响

目的 观察心肌细胞凋亡在老年大鼠心功能降低中的作用. 方法 将大鼠分为成年组（n=10）、老年组（n=10）以及广谱的caspase抑制剂Z-VAD-FMK组（n=10）.MS2000生物信号记录分析系统记录各组大鼠的心脏功能,用TUNEL和caspase-3活性检测各组大鼠的凋亡情况;并分析老年大鼠凋亡与心功能的关系. 结果 与成年大鼠相比,老年大鼠的心重/体重比显著下降,心肌收缩及舒张功能均明显降低,老年大鼠心肌细胞的凋亡明显增加.并且,caspase-3的水平与心肌收缩指数呈负相关（r=-0.772,P＜0.01）,与左室舒张压呈正相关（r=0.718,P＜0.01）.阻断老年大鼠心肌的凋亡后,心肌的收缩和舒张功能明显改善. 结论 心肌细胞凋亡在老年大鼠心功能下降中发挥着重要作用,提示临床可以通过抗凋亡措施来减少心肌细胞丢失进而延缓心功能的下降.     

枸杞多糖诱导雄激素不依赖型人前列腺癌细胞凋亡及相关基因表达的研究

目的 研究枸杞多糖对诱导人前列腺癌PC-3细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2和Bax表达的影响。方法 体外培养的人前列腺癌PC-3细胞经枸杞多糖作用后，采用MTT法测定细胞的增殖情况。采用TUNEL观察PC-3细胞凋亡的变化，用免疫组化法检测其Bcl-2和Bax蛋白的表达。结果 一定剂量的枸杞多糖可明显抑制PC-3细胞的生长，并能渍导人前列腺癌PC-3细胞凋亡，凋亡率为41．5％，同时PC-3细胞Bcl-2／Bax蛋白比值显著下降，呈明显的剂量／效应关系。结论 枸杞多糖能诱导人前列腺癌PC-3细胞的凋亡，其机制与调节人前列腺癌PC-3细胞Bcl-2和Bax蛋白表达有关。     

杜仲乙醇提取物对脑老化模型小鼠血中氧化应激指标的影响

目的：探讨杜仲对脑老化模型小鼠血中氧化应激指标的影响。方法皮下注射D-半乳糖建立小鼠老龄化模型,杜仲乙醇提取物灌胃给药。采用流式细胞仪测定不同组小鼠脑细胞凋亡率,采用ELISA试剂盒测定一系列氧化指标,包括丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、蛋白质羰基含量（PCO）和一氧化氮（NO）含量。结果流式细胞仪测定结果显示,与模型组相比,杜仲提取物组小鼠脑细胞凋亡率明显下降（P＜0.01）。ELISA测定结果表明,与正常组相比,杜仲组小鼠血中NO和SOD水平显著升高（P＜0.01）。与模型组相比,杜仲组小鼠血中MDA和PCO水平显著降低（P＜0.01）,而SOD水平显著升高（P＜0.01）。结论杜仲提取物可能通过有效减轻氧化损伤而发挥其抗脑老化作用。     

卡维地洛治疗心力衰竭对大鼠心肌细胞凋亡和Bcl-2、Bax蛋白表达水平的影响

目的 从细胞凋亡角度探讨卡维地洛治疗心力衰竭的机制。方法 采用结扎冠状动脉复制慢性心功能不全模型，观察卡维地洛治疗心力衰竭，对心肌细胞凋亡率、bcl-2、Bax蛋白表达水平的影响。结果 卡维地洛干预心功能不合可以剂量依赖地使心肌细胞凋亡率和Bax蛋白表达水平降低，使bcl-2蛋白表达水平增加。特拉唑嗪对心肌细胞凋亡和Bax、bcl-2的蛋白表达水平无影响。结论 抑制Bax蛋白表达水平，同时增加bcl-2蛋白表达水平，从而抑制心肌细胞凋亡，是卡维地洛治疗心力衰竭的重要机制之一。卡维地洛抑制心肌细胞凋亡的效应与α1－受体阻滞作用无关。     

心肌梗死后心衰大鼠心肌细胞凋亡和凋亡相关基因表达的变化

目的　探讨心肌细胞凋亡在充血性心力衰竭 (CHF)发生、发展中的作用 ,Bcl 2和Fas及其配体 (FasL)对心肌细胞凋亡的调控机制。方法　采用心肌梗死 (MI)大鼠模型 ,观察雄性Wistar大鼠MI后 2、4及 8周的血流动力学参数、心室重塑指标、心肌细胞凋亡、Fas、FasL和Bcl 2的mRNA和蛋白表达的改变。结果　MI后 4周大鼠出现平均动脉压、±dp dtmax下降 ,左室舒张末压、右室 体重比增高 ,MI后 8周上述改变更为明显 ;MI后心肌细胞凋亡指数、Fas及FasL的mRNA和蛋白表达逐渐升高 ,Bcl 2的mRNA和蛋白表达下调。结论　心肌细胞凋亡在MI后CHF发生、发展过程中起着重要的作用 ,Fas和FasL表达上调、Bcl 2表达下降介导MI后心肌细胞凋亡的发生。     

缬沙坦对缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因蛋白表达的影响

目的利用大鼠建立心肌缺血再灌注模型,在检测缺血再灌注细胞凋亡变化的同时,着重观察血管紧张素Ⅱ受体（AngⅡ？R）拮抗剂缬沙坦对缺血再灌注心肌细胞凋亡及相关基因蛋白表达的影响,了解AngⅡ？R拮抗剂在心肌缺血再灌注损伤中的作用及其机制,为AngⅡ？R拮抗剂治疗缺血性心脏病提供理论依据。方法 70只Wister大鼠随机分为3组,1组：假手术组（10只）;2组：缺血再灌注组（30只）;3组：缬沙坦组（30只）。取各组不同时间心肌组织切片,分别应用常规HE染色光镜观察心肌细胞的病理形态变化,免疫组化检测诱导细胞凋亡基因Bax、Fas及抑制细胞凋亡基因bcl-2的表达。结果与假手术组相比,心肌缺血再灌注组Bax和Fas基因蛋白表达明显增加（P〈0.01）,bcl-2蛋白表达减低（P〈0.01）。且随着心肌缺血再灌注时间的延长Bax和Fas基因蛋白表达更加明显。3组经缬沙坦干预后Bax和Fas基因蛋白表达显著减低,而bcl-2蛋白表达增加。结论心肌缺血再灌注时促进心肌细胞凋亡,相关基因蛋白表达增加。AngⅡ？R拮抗剂能够抑制缺血再灌注时心肌细胞凋亡,其机制与逆转Bax、Fas及bcl-2基因蛋白的表达有关。