丹参酮类化合物对NB4细胞的增殖抑制与构效关系探讨

目的比较丹参酮类化合物对人急性早幼粒细胞白血病NB4细胞的体外增殖抑制作用,并探讨其分子结构与细胞毒性之间的关系。方法采用改良MTT法测定不同浓度的丹参酮类化合物与细胞共培养一定时间后对NB4细胞的增殖抑制作用;采用倒置显微镜观察其细胞形态。结果供试丹参酮类化合物均能有效抑制NB4细胞的增殖,其抑制作用呈明显的时间和剂量依赖性。与NB4细胞共培养24 h后,二氢丹参酮Ⅰ与丹参酮Ⅰ的IC50值分别为1.86、3.62μg·mL-1,丹参酮ⅡA和隐丹参酮的IC50值均大于10μg·mL-1;共培养48 h后二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、隐丹参酮的IC50值分别为0.65、1.41、1.83、5.41μg·mL-1;72 h后的IC50值分别为0.28、0.33、0.45、2.59μg·mL-1。结论 4种丹参酮类化合物对NB4细胞均具有增殖抑制作用,作用强度大小依次为二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、隐丹参酮,提示丹参酮类化合物的A环为芳环时可增强细胞毒性,C环的呋喃环结构可能影响其细胞毒性。     

丹参酮Ⅱ_A对HeLa宫颈癌细胞凋亡的影响

目的:探讨丹参酮ⅡA对HeLa宫颈癌细胞凋亡的影响及其作用机制。方法:应用MTT比色法检测不同浓度丹参酮ⅡA对HeLa宫颈癌细胞的增殖抑制,采用烟酸己可碱33258染色法观察丹参酮ⅡA对HeLa细胞凋亡的影响,并用半定量逆转录聚合酶链反应法检测用药后Bcl-2和bax基因mRNA的表达水平。结果:丹参酮ⅡA对HeLa细胞增殖的抑制作用呈剂量依赖性;它能促使HeLa细胞发生凋亡;用药48h后Bcl-2基因mRNA的表达水平明显降低,而bax基因的表达则无明显变化。结论:丹参酮ⅡA对HeLa细胞的增殖具有显著的抑制及诱导凋亡作用。     

红三叶异黄酮对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用

目的探讨红三叶异黄酮对人宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及其作用机制。方法以MTT法检测红三叶异黄酮20、40、80μg/m L分别在24、48、72 h对人宫颈癌HeLa细胞增殖作用的影响,并在倒置显微镜下观察HeLa细胞形态学改变。流式细胞仪检测红三叶异黄酮20、40、80μg/m L对HeLa细胞凋亡的影响。实时荧光定量PCR仪检测红三叶异黄酮20、40、80μg/m L对HeLa细胞凋亡中调节基因Bax、Bcl-2表达水平的影响。结果红三叶异黄酮对人宫颈癌HeLa细胞的增殖抑制作用,表现为时间、浓度的相关性。红三叶异黄酮对HeLa细胞的形态学改变,表现为随药物浓度增加细胞固缩变小,并出现凋亡小体。流式细胞仪检测分析显示红三叶异黄酮能引起HeLa细胞凋亡,并随药物浓度的增加而明显,当红三叶异黄酮达到一定有效浓度时,诱导其细胞凋亡。通过调节Bax mRNA与Bcl-2 mRNA的表达,促进抑制HeLa细胞增殖,能使Bax表达上升、Bcl-2表达下降,且呈剂量相关性。结论红三叶异黄酮对人宫颈癌HeLa细胞的增殖具有抑制作用,并呈一定的剂量和时间相关性,提示通过调节Bax mRNA与Bcl-2 mRNA的表达,促进抑制HeLa细胞增殖。     

藏红花素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞协同抑制作用的研究

目的 探索藏红花素联合顺铂对人宫颈癌HeLa细胞的协同抑制作用及相关调控机制。方法 取对数生长期人宫颈癌HeLa细胞,设置空白对照组（DMSO）、藏红花素组（400 μg·mL^-1）、顺铂组（5 μg·mL^-1）、联合组（藏红花素400 μg·mL^-1+顺铂5 μg·mL^-1）。干预48 h后,CCK-8检测HeLa细胞增殖抑制率,采用CompuSyn软件计算藏红花素与顺铂的联合指数（CI）,Annexin V-FITC染色法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期分布,Western blotting检测激活型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Cleaved Caspase-3）、B细胞淋巴瘤/白血病-2（Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、细胞周期素D1（Cyclin D1）、周期蛋白依赖激酶2（CDK2）的表达。结果 与顺铂组比较,联合组细胞增殖抑制率显著升高（P<0.05）,CI为0.68,具有中度协同效应;细胞凋亡率显著升高（P<0.01）,G₀/G₁期细胞比例显著升高（P<0.05）,而G₂/M期比例显著降低（P<0.01）,Cleaved Caspase-3、Bax蛋白表达水平及Bax/Bcl-2比值均显著升高（P<0.05）,Cyclin D1、CDK2蛋白表达水平显著降低（P<0.01）。与空白对照组比较,藏红花素组G₀/G₁期细胞比例显著升高而G₂/M期比例显著降低（P<0.01）,Cleaved Caspase-3、Bax表达水平及Bax/Bcl-2比值均显著升高（P<0.01）,Cyclin D1、CDK2表达水平显著降低（P<0.05）。结论 藏红花素联合顺铂可协同抑制人宫颈癌HeLa细胞的增殖和生长,其作用机制可能与调控凋亡相关蛋白的表达从而促进细胞凋亡、阻滞细胞周期进程有关。     

丹参酮ⅡA与丹参酮ⅡA磺酸钠对HepG2细胞的抑制作用

目的 比较丹参酮ⅡA与丹参酮ⅡA磺酸钠对人肝癌HepG2细胞的体外增殖抑制作用.方法 采用改良MTT法测定丹参酮ⅡA与丹参酮ⅡA磺酸钠对HepG2的增殖抑制作用,倒置显微镜下观察两者对HepG2细胞的形态学影响.结果 3.4～27.2 μmol·L~(-1)丹参酮ⅡA对HepG2细胞有明显的增殖抑制作用,并呈时间和剂量依赖性,而对应各浓度丹参酮ⅡA磺酸钠对HepG2细胞均无增殖抑制作用.结论 丹参酮ⅡA对HepG2细胞具有显著增殖抑制作用,其与丹参酮ⅡA磺酸钠在抗肝癌的药效方面可能存在差异.     

褪黑激素对HeLa细胞生长的影响

目的　研究褪黑激素对体外培养的人宫颈癌 (HeLa)细胞活性的影响。方法　MTT测定褪黑激素的抗肿瘤活性 ;电镜观察药物对肿瘤细胞形态学的影响 ;流式细胞仪检测药物对肿瘤细胞周期的影响。结果　高浓度 (2mmol·L- 1 )褪黑激素可抑制HeLa细胞的生长 ,使细胞倍增时间TD 延长 ,细胞杀伤率达 6 1 0 %。用此浓度作用 3天 ,可使S期细胞的比例减少 ,细胞形态学发生非特异性改变 ,有较多的坏死细胞和少量凋亡细胞。结论　高浓度褪黑激素抑制HeLa细胞增殖 ,可能与抑制细胞的S期有关     

黄酮类化合物对细胞色素P450 CYP1A2的抑制作用及其构效关系研究

利用本实验室已建立的体外肝微粒体模型， 测定36个黄酮类单体化合物对人细胞色素P450 CYP1A2的抑制活性， 并使用三维定量构效关系方法研究化合物的分子结构参数与其抑制活性之间的关系。CoMSIA模型证实黄酮类化合物的结构参数与其CYP1A2抑制活性存在明显的相关性(模型的相关系数R²为0.948)， 且有良好的预测能力(交叉验证相关系数q²为0.630)， 同时使用“留五法”证实模型的稳定性和可靠性。结果表明， 相对于黄酮， α-萘黄酮的π-π共轭体系更有利于提高化合物的抑制活性。根据获得的模型的三维等势图， 在α-萘黄酮基础上， 6、3′、4′位引入带正电基团或是疏水基团，同时5位引入带负电基团，能有效改善化合物的CYP1A2抑制活性。     

姜黄素对子宫颈癌HeLa细胞的抑制作用

目的：探讨姜黄素对子宫颈癌HeLa细胞的抑制作用及其机制。方法：以细胞培养，镜下观察细胞形态学改变和计数法测定生长曲线；用^3H-脱氧胸苷掺入法测定对DNA合成的影响，以MTT比色法检测给药后HeLa细胞的增殖抑制情况。结果：姜黄素作用HeLa细胞后，癌细胞生长延缓并萎缩，胞质粗糙，有大量颗粒状物堆积，而且药物浓度越大，形态学改变越明显；生长曲线测定、^3H-脱氧胸苷掺入法及MTT比色法实验结果显示，姜黄素对HeLa细胞的增殖和生长有显著的抑制作用并呈明显的时间一剂量依赖关系，当姜黄素浓度为20μg／ml以上时，其对HeLa细胞的掺入抑制率高于5-Fu 20μg/ml对该细胞的掺入抑制率。结论：姜黄素对HeLa细胞具有直接杀伤作用，其机制可能通过干扰细胞代谢，改变细胞外膜的性质抑制肿瘤细胞增殖。     

SUMO-1基因siRNA抑制肝癌细胞SMMC-7721生长的研究

目的:研究SUMO-1基因siRNA沉默人肝癌细胞SMMC-7721中SUMO-1基因表达的效果及对SMMC-7721生长的影响.方法:将人工合成的针对SUMO-1基因的siRNA片段转染体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721,采用RT-PCR、Western blot方法在mRNA及蛋白水平检测siRNA沉默肝癌细胞中SUMO-1基因的效果.通过MTT、流式细胞仪及TUNEL试验检测SUMO-1基因沉默后对肝癌细胞生长的影响.结果:人工合成的针对SUMO-1基因的siRNA片段能显著地抑制SMMC-7721 中SUMO-1基因的表达,48 h抑制率可达73.43%.MTT结果显示肝癌细胞SMMC-7721转染SUMO-1 siRNA后生长明显受到抑制,流式细胞仪检测G_2期细胞明显增加,但TUNEL试验未发现凋亡细胞.结论:SUMO-1 siRNA沉默肝癌细胞SMMC-7721 中SUMO-1基因效果良好,SUMO-1基因控制SMMC-7721的生长,SUMO-1基因是肝癌生长的一个重要的调控因素.     

The Effects of Fluoride on Cell Growth of Two Human Cell Lines and on DNA and Protein Synthesis in HeLa Cells

Abstract: The effect of sodium fluoride on the growth of two continuous human cell lines, i.e. HeLa cells and human conjunctiva clone 1–5C-4 cells, was studied. The growth of HeLa cells and clone 1–5C-4 cells was arrested nearly completely by the addition of 0.95 and 1,90 mM of sodium fluoride, respectively. DNA synthesis in HeLa cells, determined by incorporation of ³H-thymidine, was not affected appreciably for the first 24-hr period after the addition of sodium fluoride. Markedly reduced incorporation, however, occurred during the next 24-hr period. Thus, there was a discrepancy between the immediate cessation of cell division and the delayed suppression of DNA synthesis. On the other hand, a suppressive effect of sodium fluoride on protein synthesis determined by ¹⁴C-leucine incorporation was evident already during the first 24-hr period. The results indicate that the inhibition of protein synthesis is the main cause of growth inhibition.     

蜗牛多糖对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用

目的 探讨蜗牛多糖对人肝癌细胞株SMMC-7721的抑制作用. 方法将不同浓度的蜗牛多糖分别与人肝癌细胞SMMC-7721共同培养24,48,72 h后,采用噻唑蓝法测定吸光度值(A),评定蜗牛多糖对肝癌细胞株的增殖抑制作用;流式细胞术测定其对肝癌细胞周期的影响. 结果 不同浓度的蜗牛多糖作用SMMC-7721细胞24,48和72 h后,各组与细胞对照组比较,A值差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01),并显示出对时间和剂量的依赖性,蜗牛多糖对SMMC-7721细胞的半数抑制浓度分别为0.293,0.032和0.011 mg.mL^-1. 流式细胞术结果 表明,蜗牛多糖能将肝癌细胞株SMMC-7721阻滞在细胞的G2/M期. 结论 蜗牛多糖对肝癌细胞株SMMC-7721的增殖有一定的抑制作用.     

丝裂霉素C联合原花青素对人膀胱癌BIU87细胞的生长抑制作用

［摘要］目的探讨丝裂霉素C（MMC）与葡萄籽提取物原花青素（grape seed procyanidin extract, GSPE）联合应用对人膀胱癌BIU87细胞的生长抑制作用。方法采用噻唑蓝（MTT）比色法测定MMC和GSPE单独和联合应用时对人膀胱癌BIU87细胞生长的抑制作用,并应用Chou Talalay联合指数法定量分析药物之间的相互作用效果。结果MMC、GSPE单独应用时,BIU87细胞生长的抑制作用随药物浓度的增加而增加,中效浓度分别为15.422,195.865 μg&#8226;mL 1。MMC与GSPE联合应用时,作用效果表现为在低浓度（0%＜fa＜37%）时呈协同作用（CI＜1）,高浓度（37%＜fa＜100%）时呈拮抗作用（CI＞1）,中效浓度为109.496 μg&#8226;mL 1 （其中MMC 8.111 μg&#8226;mL 1,GSPE 101.385 μg&#8226;mL 1）。结论MMC和GSPE相互作用的效果在低浓度时呈协同作用,高浓度时呈拮抗作用。     

雌、孕激素对人子宫内膜癌细胞体外生长的影响研究

目的探讨雌二醇(E2)、孕酮(P)对人子宫内膜癌细胞体外增殖及凋亡的影响。方法体外培养子宫内膜癌细胞,采用流式细胞仪观察不同浓度E2、P和E2+P对细胞周期及细胞凋亡率的影响、MTT比色法观察HEC-1B细胞的增殖。结果流式细胞仪分析,E2组细胞周期S期比例上升,凋亡率下降;P组和E2+P组G0/G1期上升,S期下降,细胞凋亡率上升;MTT结果显示,随着孕酮浓度的增加,E2对HEC-1B细胞有明显促生长作用(P<0.01),P和E2+P对细胞生长有明显抑制作用(P<0.01),增殖抑制率与浓度呈正相关(P<0.05)。结论 E2对HEC-1B细胞具有促进增殖作用;P则抑制HEC-1B细胞增殖,并诱导其凋亡;E2+P显示了抑制增殖、诱导凋亡的作用增强。足量的P可拮抗E2对内膜癌细胞的促增殖作用。     

紫杉醇对膀胱癌EJ细胞株增殖抑制及诱导凋亡的作用

目的:探讨紫杉醇体外抑制膀胱癌E J细胞株及诱导凋亡的作用。方法:体外培养膀胱癌E J细胞株,以不同浓度紫杉醇处理12~72h后,通过M TT法测定细胞生长抑制作用,采用电镜观察和DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞凋亡。结果:紫杉醇能抑制E J细胞的生长,并在一定剂量和时间范围内呈现出明显的时间、浓度依赖关系。电镜下凋亡细胞体积缩小,染色质浓缩致密,并沿核膜分布形成花瓣形。电泳见出现典型的凋亡DNA梯形带。结论:紫杉醇能抑制膀胱癌E J细胞株的生长,诱导凋亡可能为其抗肿瘤作用机制之一。     

赖氨大黄酸对HeLa细胞周期的影响及其机制

目的探讨赖氨大黄酸对HeLa细胞周期的影响及其机制。方法 MTT法检测赖氨大黄酸对HeLa细胞增殖的影响;流式细胞技术检测活性氧水平和细胞周期变化;显微镜下观察HeLa细胞形态变化;Western blot法检测p53和p21蛋白表达。结果赖氨大黄酸剂量依赖性地抑制HeLa细胞增殖,IC50约为83μmol·L-1。随着赖氨大黄酸剂量的增加,HeLa细胞中活性氧水平增加,并出现S期和G2期阻滞,以及细胞空泡样变性。通过Western blot研究发现赖氨大黄酸处理后的p53蛋白磷酸化水平呈剂量依赖性地增加,同时下游周期相关蛋白p21表达水平也随之增加,而p53蛋白表达水平未出现显著地剂量依赖性变化。结论赖氨大黄酸通过增加HeLa细胞中活性氧水平,引起细胞周期相关蛋白p53的磷酸化水平和p21蛋白表达水平增加,引起HeLa细胞出现空泡样变性,并诱导S期和G2期阻滞。     

姜黄素抑制子宫颈癌HeLa细胞的作用

目的：探讨姜黄素抑制子宫颈癌HeLa细胞的作用及其机制。方法以细胞培养，镜下观察细胞形态学改变和计数法测定生长曲线；用3H-脱氧胸苷掺入法测定对DNA合成的影响，以MTT比色法检测给药后HeLa细胞的增殖抑制情况。结果姜黄素作用HeLa细胞后，癌细胞生长延缓并萎缩，胞质粗糙，有大量颗粒状物堆积，而且药物浓度越大，形态学改变越明显；生长曲线测定、3H-脱氧胸苷掺入法及MTT比色法实验结果显示，姜黄素对HeLa细胞的增殖和生长有显著的抑制作用并呈明显的时间一剂量依赖关系，当姜黄素浓度为20μg／ml以上时，其对HeLa细胞的掺入抑制率高于5一Fu20μg／ml对该细胞的掺入抑制率。结论姜黄素对HeLa细胞具有直接杀伤作用，其机制可能通过干扰细胞代谢，改变细胞外暌的性质抑制肿瘤细胞增值。     

蟾毒灵对人脑胶质瘤U251细胞生长增殖的影响

摘 要 目的：探讨蟾毒灵(Bufalin)对人脑胶质瘤U251细胞生长增殖的影响。方法: 采用四甲基偶氮蓝（MTT）比色法检测Bufalin对人脑胶质瘤U251细胞增殖的影响;倒置显微镜观察各组细胞数目、形态及活性的变化;膜联蛋白（AnnexinV）碘化丙啶（PI）标记法检测其对细胞凋亡的影响。结果: 不同浓度Bufalin对U251细胞增殖活性具有不同程度的抑制作用,在0.001～10 μmol·L^-1浓度范围内呈剂量和时间依赖性;与对照组相比,Bufalin给药组对U251细胞的凋亡率均显著增高（P<0.01）。结论:Bufalin可显著抑制U251细胞的生长增殖,并在一定范围内呈浓度和时间依赖性,诱导其凋亡。