3种B族链球菌筛查方法在孕晚期筛查中的应用

目的比较3种B族链球菌(GBS)的筛查方法在孕晚期孕妇GBS筛查中的临床应用价值。方法收集2017年9月至12月在厦门市妇幼保健院产科门诊产检的35～37孕周孕妇阴道/直肠拭子样本1 027例,用GBS运送增菌显色培养法、GBS运送增菌显色培养基联合哥伦比亚血琼脂培养法、GBS运送增菌显色培养基联合产胡萝卜素/β-γ乙型链球菌二分格营养琼脂培养法3种方法进行GBS筛查,分析GBS检出率差异;另选2018年5—6月分离的227株阳性菌株,采用质谱分析进行验证。结果 3种方法GBS检出率分别为8.67%、12.76%、13.63%。GBS运送增菌显色培养基联合血平板法和联合二分格培养法GBS检出率明显高于单独GBS运送增菌显色培养法(P0.05),但前两者检出率差异无统计学意义;GBS运送增菌显色培养基及二分格培养法检出的GBS菌株经质谱分析验证,符合率为98.7%。结论 GBS运送增菌显色培养联合产胡萝卜素/β-γ乙型链球菌二分格营养琼脂培养法能提高GBS检出率,且操作及判读较为简便,适合孕晚期GBS筛查。     

妊娠末期B族链球菌检测方法的评估

目的对妊娠末期孕妇B族链球菌(GBS)的检测方法进行评估。方法对产检的300例妊娠末期孕妇的生殖道分泌物样本分别用肉汤增菌转种血平板法、GBS筛查培养基法及聚合酶链反应(PCR)进行GBS检测,对各方法进行评估。结果肉汤增菌转种血平板法和GBS筛查培养基法的GBS阳性检出率分别为5.3%和7.0%,二者差异无统计学意义(P0.05);PCR GBS阳性检出率为9.6%,与2种细菌培养法阳性检出率差异有统计学意义(P0.05)。结论 PCR是妊娠末期孕妇常规检测GBS感染的首选方法,可用于孕妇临产前的快速检测。     

孕晚期B族链球菌三种筛查方法比较及临床应用

目的 比较3种B族链球菌的筛查方法，探讨孕晚期孕妇Ｂ族链球菌筛查的临床应用。 方法 收集2017年9月-12月在厦门市妇幼保健院产科门诊35-37孕周孕妇阴道/直肠拭子样本1027例，用GBS运送增菌显色培养法、GBS运送增菌显色培养基联合哥伦比亚血琼脂培养法、GBS运送增菌显色培养基联合产胡萝卜素/β-γ乙型链球菌二分格营养琼脂培养法3种方法进行GBS筛查，分析GBS检出率差异，阳性菌株采用质谱分析进行验证；回顾分析2018年上半年采用GBS运送增菌显色培养基联合二分格培养法进行孕晚期孕妇GBS筛查情况。结果 3种方法GBS检出率分别为8.67%、12.76%、13.63%，GBS运送增菌显色培养基联合血平板和联合二分格GBS检出率明显高于单独GBS运送增菌显色培养法（P<0.05），但两者之间无统计学差异；GBS运送增菌显色培养基及二分格检出GBS菌株经质谱分析验证符合率为99%；孕晚期GBS阳性率与孕妇年龄、高危状态无统计学差异。结论 GBS运送增菌显色培养联合产胡萝卜素/β-γ乙型链球菌二分格营养琼脂培养能提高GBS检出率，且操作及判读较为简便，适合孕晚期GBS筛查。     

早产孕妇阴道中B族链球菌的快速检出与鉴定法

B族链球菌(GBS)是新生儿尤其是早产儿传染病的主要病因.在这些婴儿中,由于早期感染GBS(包括败血症和呼吸道感染),死亡率可高达50%,因此,早期快速诊断孕妇的GBS感染对预防新生儿的GBS疾病是很重要的.作者介绍一种用选择性增菌肉汤(Lim GBS肉汤)和协同凝集试验(Phadebact GBS试验)快速检测早产孕妇GBS定植的状况.孕妇分娩时用灭菌棉拭子取阴道标本,将其接种到5ml Lim GBS肉汤中,36℃ 5%CO_2环境中培     

围产期B群链球菌感染及相关研究

目的该地区围产期妇女B群链球菌（GBS）感染情况及相关研究。方法围产期妇女和非妊娠妇女各500例,同时从阴道和直肠部位采样,用直接接种在血液培养基和经选择性肉汤培养基增菌后的方法进行GBS培养;凝集法做血清分型;K-B法进行药敏试验。对GBS感染潜在性影响因素（流产史、宫内节育器、妇科炎症）进行调查分析。结果 GBS共分离137株,其中围产期妇女72株（14.4%）,非妊娠妇女65株（13.0%）。必须经由肉汤增菌后方可分离出GBS的有59株（5.9%）,未发现仅从直接接种在血液培养基才分离出GBS的情形。阴道和直肠部位同时检出GBS的有46株（4.6%）,仅阴道部位检出GBS的有71株（7.1%）,仅直肠部位检出的有20株（2.0%）。GBS血清学分型主要为Ⅴ（38,27.7%）、Ⅲ（32,23.4%）、Ⅰa（22,16.1%）。药敏试验中,青霉素、氨苄西林的耐药率分别为5.8%、9.5%。在GBS感染潜在性影响因素中,妇科炎症患者与无妇科炎症者GBS检出率比较差异有统计学意义（P〈0.01）。该地区围产期妇女与非妊娠妇女GBS感染比较差异无统计学意义（P〉0.05）。结论改进培养方法可有效提高GBS筛检的阳性率;临床应重视GBS培养及药敏试验;菌株分型以Ⅴ、Ⅲ、Ⅰa为多见;妇科炎症与GBS感染关系密切相关。     

分离肠炎沙门菌价廉有效的方法

肠炎沙门菌是人类重要的致病菌。其中 ,鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌是欧美最常见的血清型。多数实验室将粪便直接接种于固体培养基和增菌肉汤 ,如亚硒酸盐肉汤。有人建议 ,只在疾病暴发时才使用增菌肉汤 ,以筛选无症状带菌者和临床确诊的病例。作者将 8717份粪便标本同时接种亚硒酸盐肉汤和木糖赖氨酸去氧胆酸钠 (xyloselysine deoxycholate XLD)琼脂 ,以评价经亚酸盐肉汤增菌后是否需要同时接种 XL D和煌绿琼脂平板。标本同时接种于 XLD平板和亚硒酸盐肉汤 ,孵育 12～ 18h后 ,将亚硒酸盐培养物转种于 XL D和煌绿平板。菌落形态与沙门菌…     

B族链球菌四种筛查方法的比较

目的评估B族链球菌肉汤增菌培养法(Todd-Hewitt型,T-H)、直接培养法、液体显色培养法及核酸环介导恒温扩增法(LAMP)在孕晚期妇女筛查中的临床应用。方法回顾性研究。采集2016年10月至2018年4月在广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心产科门诊产检妊娠35~37周孕妇直肠阴道分泌物标本969份,采用双盲法,以T-H肉汤增菌培养法为参考方法,分3个研究阶段先后比较直接培养法、液体显色培养法及LAMP法的检验性能。以敏感度、特异度、符合率、阳性预测值、阴性预测值及尤登指数为评价指标,一致性用Kappa检验。结果增菌培养法共检测标本969份,阳性90份(9.3%)。以增菌培养法为参考,敏感度从高到低依次为LAMP法[100%(25/25)]、直接培养法[81.5%(22/27),95%CI:65.8%~97.1%]、液体显色培养法[71.1%(27/38),95%CI:55.9%~86.2%];特异度则依次为直接培养法[100%(282/282)]、液体显色培养法[98.1%(455/464),95%CI:96.8%~99.3%]、LAMP法[94.0%(125/133),95%CI:89.9%~98.1%];符合率依次为直接培养法[98.4%(22+282)/309]、液体显色培养法[96.0%(27+455)/502]、LAMP法[94.9%(25+125)/158]。而直接培养法(0.889)、LAMP法(0.832)与增菌培养法的一致性Kappa值均≥0.75,液体显色培养法则为0.708。直接培养法有18.5%(5/27)的漏检率,LAMP法漏检率为零、假阳性率为6.0%(8/133),液体显色培养法的漏检率、假阳性率分别为28.9%(11/38)、1.9%(9/464)。结论本研究所比较的几种GBS筛查方法中,仅LAMP法与增菌培养法在敏感度、特异度及符合率上均具较好的一致性,而其他两种方法存在一定的漏检。临床实验室可根据实际条件、技术力量选择使用,或参照欧美指南推荐的孕晚期增菌培养筛查与产时核酸检测相结合,以最大程度满足临床需求。     

用支原体培养鉴定试剂同时检测假丝酵母菌

目的探讨用支原体培养鉴定试剂在作支原体培养鉴定的同时,同步进行假丝酵母菌的增菌培养及检测的可行性。方法同一个病人同时取两份标本平行操作,一份标本按照传统的方法接种于TTC-沙保罗琼脂培养基上,37℃48 h后观察结果。另一份标本接种于支原体培养鉴定试剂的液体培养基内,在作支原体培养鉴定的同时,保留培养瓶内剩余的培养液作假丝酵母菌的增菌培养,37℃24 h后用接种环挑取一环转种于TTC-沙保罗琼脂培养基上,37℃48 h后观察结果;同时再取一环于玻片上直接镜检。结果320例女性标本直接接种固体培养基阳性65例,液体增菌后直接镜检与转种固体培养基阳性均为85例;180例男性标本直接接种固体培养基阳性15例,液体增菌后直接镜检与转种固体培养基阳性均为22例。表明通过培养液的增菌培养,阳性检出率明显提高,增菌后直接镜检与转种固体培养基的阳性检出率是一致的。结论支原体培养液可以一基多用,同时用于假丝酵母菌的增菌培养,既节约了成本又节省了时间,还为临床医生多提供了一条诊断信息。     

改良麦康凯平板筛查肠道定植耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌的性能评价

目的建立一种运用改良麦康凯平板快速筛查肠道定植耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)的方法,并进行性能评价。方法分别制备含有终浓度为4μg/mL亚胺培南、4μg/mL美罗培南、2μg/mL厄他培南的改良麦康凯平板。选用临床连续分离45株CRE及30株非CRE菌株,检测改良麦康凯平板的敏感性及特异性,采用其中20株CRE菌株对改良平板的最低检测限进行评估。PCR方法检测CRE菌株耐药基因(TEM、SHV、NDM、KPC、OXA-48、VIM、IMP)。收集142例粪便样本评价改良平板的筛查性能,并与肉汤增菌法及CHROMagar KPC显色培养基进行比较。结果45株CRE菌株中TEM、SHV检出率分别为62.22%(28/45)和24.44%(11/45),NDM、KPC、OXA-48的检出率分别为62.22%(28/45)、15.56%(7/45)和13.33%(6/45),未检出VIM和IMP。45株CRE菌株在厄他培南改良平板上均生长,亚胺培南改良平板生长44株,美罗培南改良平板生长43株,敏感性分别为100%(45/45)、97.78%(44/45)和95.56%(43/45)。30株非CRE菌株在亚胺培南与美罗培南改良平板上均未生长,在厄他培南改良平板上生长2株,特异性分别为100%(30/30)、100%(30/30)和93.33%(28/30)。20株CRE中,接种菌液浓度为10⁵~10⁸ CFU/mL时,亚胺培南、美罗培南和厄他培南改良平板的检出率分别为70%(14/20)、65%(13/20)和100%(20/20);接种浓度为10⁵ CFU/mL以下时亚胺培南、美罗培南、厄他培南改良平板的检出率分别为10%(2/20)、10%(2/20)和95%(19/20)。亚胺培南、美罗培南改良麦康凯平板最低检测限大多分布在10⁵~10⁸ CFU/mL接种水平,而厄他培南改良麦康凯平板最低检测限集中分布于10²~10³ CFU/mL。142份粪便样本中,亚胺培南、美罗培南、厄他培南改良麦康凯平板分别筛查出3株、2株、4株CRE,均未检出非CRE菌株;肉汤增菌法检出5株CRE及2株非CRE;CHROMagar KPC显色培养基检出5株CRE及1株非CRE。3种改良平板与肉汤增菌法及CHROMagar KPC显色培养基筛查结果间差异均无统计学意义(P>0.05)。与亚胺培南和美罗培南相比,厄他培南平板筛查结果与肉汤增菌法、CHROMagar KPC显色培养基一致性更好,Kappa值分别为0.717和0.885。结论改良麦康凯平板筛查肠道CRE菌株敏感性和特异性高,且操作简便,价格低廉,对操作人员技术要求低。厄他培南改良麦康凯平板具有更低的检测限,且与肉汤增菌法及CHROMagar KPC显色培养基筛查结果有更好的一致性,更适合推广使用。     

孕妇B群链球菌携带情况及对新生儿结局的影响

目的筛查该院就诊孕妇B群链球菌(GBS)携带情况,并分析其耐药特征及对新生儿结局的影响。方法采集该院500例孕妇阴道拭子标本,并采用Todd-Hewitt肉汤培养基、哥伦比亚血平板(BAP)培养基及GBS显色(STRB)培养基进行培养,并对其分离的GBS菌株进行药敏试验。将确诊为GBS携带者76例纳入观察组,未携带GBS者424例纳入对照组。比较两组新生儿结局。结果该院孕妇GBS携带率为15.2%,观察组中新生儿败血症、新生儿肺炎、新生儿病理性黄疸发生率明显高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。两组中新生儿脑膜炎、新生儿窒息发生率比较,差异无统计学意义(P0.05)。GBS对青霉素、氨苄西林、奎奴普丁、利奈唑胺、万古霉素、替加环素等抗菌药物的敏感性达到了90%以上,而对环丙沙星(53.95%)、左氧氟沙星(50.00%)、红霉素(57.89%)、四环素(78.95%)等抗菌药物耐药性相对较高,且2016-2017年与2017-2018年所分离的GBS对抗菌药物的敏感性差异不大。结论孕妇GBS携带率较高,且容易感染母体及新生儿,建议把GBS筛查列入育龄期女性备孕及孕妇产前检测的常规项目,对GBS携带者尽早给予抗菌药物预防性治疗,以降低新生儿感染率和病死率。     

不同方法检测B群链球菌效果评价

目的分析显色肉汤法、金标免疫层析法(简称金标法)、乳胶凝集法在孕妇B群链球菌(GBS)定植筛查中的应用效果。方法同时采用细菌培养法、显色肉汤法、金标法、乳胶凝集法对1 300例孕35~37周孕妇阴道下端或肛周拭子进行GBS筛查。以细菌培养法作为金标准方法,评价显色肉汤法、金标法、乳胶凝集法的诊断性实验性能。结果显色肉汤法检出率为12.8%、金标法为11.5%、乳胶凝集法为12.1%、细菌培养法为12.0%,不同方法检出率比较差异无统计学意义(P0.05)。显色肉汤法准确度、灵敏度最高,分别为98.4%和98.6%;金标法特异度最高,为98.9%,但漏诊率达到14.7%;乳胶凝集法特异度为97.2%,阴性预期值为97.3%。结论与细菌培养法相比,3种方法筛查GBS的检出率相近。显色肉汤法准确、特异,检测系统独立,可作为孕妇GBS定植筛查和辅助诊断的常规方法。金标法检测速度快,可用于门诊大规模常规筛查。乳胶凝集法特异度较好,成本低,适合基层医院开展。     

使用增菌培养技术分离粪便中空肠弯曲菌

增菌培养基是含7%溶解的马血,万古霉素(10mg/L),多粘菌素B(5mg/L)和TMP(5mg/L)组成的半固体培养基。粪标本接种该培养基经过夜孵育后,再转种于选择性平板,然后在5%O_2、10%CO_2和85%N_2培养缸中,孵育48小时。     

围产期孕妇B群链球菌三种筛查方法的评估

目的评价Xpert GBS LB法、免疫层析法和普通培养法在围产期孕妇B群链球菌(group B streptococcus, GBS)筛查中的诊断效能及一致性。方法收集35～37周孕妇的生殖道或直肠拭子标本1063份,分别应用显色肉汤增菌培养法、Xpert GBS LB法、免疫层析法和普通培养法进行检测。以显色肉汤增菌培养法为"金标准",评价其他3种检测方法诊断效能并比较其检测结果的一致性。结果 1063例围产期孕妇生殖道或直肠标本使用Xpert GBS LB法检出阳性者251例(23.61%),免疫层析法检出阳性者261例(24.55%),普通培养法检出阳性者193例(18.16%)。与"金标准"比较,Xpert GBS LB法和普通培养法具有极高的一致性,免疫层析法的一致性中度。普通培养法特异性最高,Xpert GBS LB敏感性最高,而免疫层析法的敏感性和特异性均较差。结论 3种方法均适用于临床GBS筛查,其中Xpert GBS LB法和普通培养法与"金标准"显色肉汤增菌培养法具有极强的一致性,而Xpert GBS LB法还具有更高的敏感性,适用于GBS感染的快速诊断。     

无水乙醇对变形杆菌迁徙性生长的抑制效果评价

目的创建一种简便易行的抑制变形杆菌迁徙性生长的方法。方法用无水乙醇预处理营养琼脂平板(NUA)、哥伦比亚琼脂平板(CAN)和中国蓝平板(CBA),在平板中心点种奇异变形杆菌标准菌株,观察对该菌迁徙生长的抑制效果;分别划线接种4种标准菌种,培养24 h后进行鉴定和药敏试验。对照组:在未经乙醇处理的培养基中心点种奇异变形杆菌标准菌株。结果奇异变形杆菌于乙醇处理培养基37℃培养12、24、48 h均未出现迁徙生长现象。接种的4种标准菌株鉴定和药敏结果未发生改变。结论无水乙醇能有效地抑制变形杆菌的迁徙性生长现象,并且对常见的革兰阳性球菌、革兰阴性杆菌的生长特性和药敏结果无影响。     

粪便样本中志贺菌分离培养方法的优化

目的 优化从腹泻患者粪便标本中分离培养志贺菌的方法.方法 使用EC肉汤和志贺菌增菌液对129份粪便样本进行增菌培养,采用普通PCR方法检测ipaH基因,使用木糖赖氨酸去氧胆酸钠琼脂(XLD)培养基、麦康凯琼脂(MAC)以及沙门志贺菌培养基(SS)等选择性培养基分离培养志贺菌.使用志贺菌参考菌株,进行模拟增菌培养,利用荧...     

孕晚期阴道及肛周拭子不同方法检测B族链球菌和真菌的效果评价及耐药分析

目的 探讨不同方法检测孕晚期孕妇生殖道B族链球菌(GBS)和真菌的效果评价,并对分离培养出的GBS进行耐药性分析,为临床提供有效的预防和治疗依据。方法 选择2013年1月～2017年12月西安高新医院产科门诊孕晚期孕妇22 938例,采集孕35～37周孕妇阴道拭子和肛周拭子标本,按照随机分组原则,采用血琼脂培养法、显色培养法及聚合酶链反应(PCR)3种方法进行GBS检测,同时用前两种培养法进行真菌检测,并对分离出的368株GBS进行药敏试验。结果 22 938例孕妇中,6 782例采用血琼脂培养,检出GBS 105例(阳性率1.5%),检出真菌665例(阳性率9.8%); 5 957例采用显色培养法,检出GBS 263例(阳性率4.4%),检出真菌72例(阳性率1.2%); 10 199例采用PCR法,检出281例阳性(阳性率2.8%)。分离出368株GBS经定量药敏实验,其对氨苄西林、青霉素、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢曲松、利奈唑胺和万古霉素的敏感率均为100%; 对红霉素、克林霉素和左氧氟沙星的敏感率分别为17.9%,25.4%和66.7%。三种筛查GBS的方法比较,差异均有统计学意义(χ²=94.05,P<0.05),显色培养法的阳性率最高。两种培养方法对真菌的检测比较,差异有统计学意义(χ²=429.99,P<0.5),血琼脂培养法检出率较高。结论 显色培养法筛查GBS有望成为孕晚期孕妇检测GBS感染的一种首选方法,而血琼脂培养法则有利于对孕妇阴道真菌的检出,建议两种方法联合使用,以提高对GBS和真菌的检出率,减少因GBS和真菌引起的胎膜早破和新生儿感染。     

孕晚期阴道B族链球菌定植的两种筛查方法比较

  目的  比较传统阴道拭子培养法和阴道直肠拭子Lim次代接种法对孕晚期阴道B族链球菌(group B streptococcus, GBS)定植的筛查效果。   方法  2014年12月至2015年8月在北京协和医院产科门诊接受常规产前检查的1371名孕妇, 于孕35~37周同时采取传统阴道拭子培养法和阴道直肠拭子Lim次代接种法筛查GBS, 采用卡方检验比较并分析两种筛查方法的阳性率、检出率和假阴性率。   结果   1371名孕晚期妇女阴道GBS的定植率为8.0%, 传统阴道拭子培养法的检出率为41.8%, 假阴性率为58.2%;阴道直肠拭子的检出率为80.0%, 假阴性率为20.0%;两种方法检出率差异具有统计学意义(P < 0.001)。   结论  阴道直肠拭子Lim次代接种法对阴道GBS定植筛查的效率优于阴道拭子培养法, 二者联合应用可提高检出率, 避免漏诊。     

3岁以下儿童的A群链球菌感染

本文由美国某综合医院在1979年10月～1981年5月对758例3岁以下儿童进行了A 群乙型溶血性链球菌(GABHS)致上呼吸道感染病例的调查,主要采集鼻拭子、咽拭子、炎性分泌物或脓汁标本接种于含胰蛋白酶的5%羊血琼脂(TSBAP)平板,同时接种于一种选择性Q 培养基中,置37℃厌氧培养,Q 培养基的阳性者再转种于TSBAP上,于24、48小时观察菌落,挑取典型β溶血的菌落作     

福建省漳州市海、水产品霍乱弧菌污染状况调查分析

目的查明福建省漳州市海、水产品霍乱弧菌污染状况及菌型特征。方法 2008年5-10月采集养殖场及市场、餐厅销售的海、水产品,用涂抹法对其体表、腮部和泄殖腔取样后,直接接种于碱性蛋白胨水进行增菌,划线接种庆大琼脂平板分离培养。取纯培养物进行染色镜检,用霍乱弧菌混合多价、O139群及单价分型诊断血清做玻片凝集试验,阳性菌株进一步做试管凝集及系统生化鉴定;使用常规PCR检测霍乱弧菌肠毒素ctxA基因。霍乱弧菌检出率的比较用χ2检验。结果漳州市海、水产品霍乱弧菌带菌率为5.08%(26/512),其中小川型15株、稻叶型11株。蛙类带菌率最高为25.00%(13/52)。ctxA基因检测均为阴性。增菌6～8 h霍乱弧菌检出率为0.78%、增菌18～24 h为2.34%,两种增菌时间霍乱弧菌检出率的比较差异有统计学意义(P0.05);第一次增菌霍乱弧菌检出率为2.34%、第二次为5.08%,两次增菌霍乱弧菌检出率的比较差异有统计学意义(P0.05)。结论漳州市海、水产品存在霍乱弧菌污染,需采取相应的预防措施防止霍乱疫情的发生。本次通过对染菌样品培养条件进行对比实验证明,染菌样品最适增菌时间应为18～24 h并宜二次增菌。     

尿液中检出绿色气球菌一例

绿色气球菌多在败(菌)血症患者的血液中检出,我们从一例泌尿系感染患者的尿中分离出一株绿色气球菌,现报告如下。细菌鉴定留取中段尿,用接种环沾取离心沉淀物接种血琼脂和麦康凯琼脂平板,35℃24h 培养后,血平板上长出α-溶血,圆形光滑,灰白色小菌落,麦康凯琼脂平板上未生长。涂片染色为G 阳性球菌,四联状排列。触酶,氧化酶试验均阴性,OF 葡萄糖为发酵型。接种胆汁七叶苷培养基,35℃24h 后,培