蚓激酶的药理作用研究进展＊

蚓激酶,是从蚯蚓（地龙）中提取的一种蛋白水解酶,具有良好的纤维蛋白溶解活性,在抗血栓及缺血性心脑血管疾病中有着较好的疗效。目前开发的蚓激酶纳米靶向给药系统或蚓激酶与其他药物的联合应用,可进一步提高蚓激酶的生物利用度和安全性,已广泛应用于溶栓、抗肿瘤等疾病的治疗,疗效显著。本文就蚓激酶的相关组分及蚓激酶在溶栓、心脑血管、抗肿瘤、心脑血管保护等方面的药理作用进行综述,为其进一步的开发利用提供依据。     

普恩复胶囊临床应用

普恩复胶囊（蚓激酶胶囊）是从特种蚯蚓中提取的一种多酶复合物,具有抗栓、溶栓、降低血液粘度、抑制血小板聚集亢进作用的生物制剂。其副作用小,安全,疗效确切,使用方便,不仅广泛应用于心脑血管疾病的临床治疗中,也应用于其他疾病的治疗。现综述如下。１治疗心脑血...     

蚓激酶最新研究进展

蚓激酶是从蚯蚓蛋白粗提物中分离出的多组具有纤溶酶活性的蛋白质。大量的动物实验、临床研究表明,蚓激酶纤溶活性强、稳定性好、药理作用广泛、副作用小,是较为理想的溶栓药物之一,但其利用仍存在一系列问题。对蚓激酶的药理作用及临床应用等方面的研究进展进行综述,为蚓激酶的进一步开发利用提供参考。     

蛋白质药物发生作用的机制

中国科学院生物物理研究所研究员赫荣乔等针对二类新药蚓激酶进行的基础研究证明：蛋白质药物摄入人体后，能以整分子状态被小肠上皮层吸收进入血液，并具有酶的部分活性和功能。这项研究可以佐证，传统医药中的许多动物药对人体是有效的。 蚓激酶是从蚯蚓（中药地龙）中提取的一种蛋白酶。中医应用地龙治疗脑血管病等。长用以来，人们怀疑蛋白质进人人体后是否会像吃肉一样被肠胃消化掉，难以发挥药效。而赫荣乔等的研究揭示了蚓激酶在消化道整分子吸收入血的过程。他们发现，蚓激酶的空间结构特别容易伸缩，因而专一性较宽，遗传基因的表…     

蚓激酶的研究与临床应用

蚓激酶作为中药地龙(即蚯蚓)的主要抗凝、溶栓成分,经动物实验及临床观察证实具有良好的纤溶、抗凝、溶栓和改善血流变等药理作用,并取得了较理想的结果。与同类药物比较,蚓激酶具有不良反应小、安全性高、疗效较显著、生产成本低等优势。国内外的学者对蚓激酶进行了大量的研究,现就蚓激酶基本的理化性质、生化方面、作用机制、临床应用等的研究成果做一简要综述,总结其中存在的问题并对前景作出展望,以期能有助于今后对蚓激酶的进一步研究开发和利用。     

正交试验优选PEG修饰蚓激酶脂质体的制备工艺

目的:优选蚓激酶脂质体的制备工艺。方法:在单因素试验的基础上进行正交试验优化,采用薄膜蒸发法制备蚓激酶脂质体和PEG修饰蚓激酶脂质体,以药物包封率为指标,优化工艺参数。结果:蚓激酶的用量为1 mg、大豆卵磷脂的用量为96 mg、胆固醇的用量为24 mg、水浴时间为120 min、磷酸盐缓冲溶液的pH 5.6,mPEG 2000的用量为2.5 mg时,蚓激酶脂质体和PEG修饰蚓激酶脂质体的包封率分别为25.8%和26.1%,12 h体外累积释放率分别为98%和79%。结论:该制备工艺简单可行,包封率高。     

从瘀论述蚓激酶疗效的研究进展

地龙有清热定惊、活血祛瘀、通络平喘利尿等功效,用于治疗瘀证。蚓激酶是地龙主要的活性成分,具有抗凝溶栓、抗纤维化、抗肿瘤、抗炎及抗氧化等作用。纳米负载蚓激酶颗粒作为可靶向溶栓可达到“精准化瘀”。本文从瘀出发,阐述蚓激酶在“有形之瘀”和“无形之瘀”的应用及研究进展,为蚓激酶临床应用和新药研制提供参考。     

蚓激酶脂质体的制备及质量评价

目的优选蚓激酶脂质体的制备工艺。方法采用薄膜超声分散法制备蚓激酶脂质体,以包封率为指标通过正交试验法优选制备处方和工艺,并考察制备脂质体的包封率、形态、粒径分布、Zeta电位及在体外释放规律。结果卵磷脂100mg、胆固醇20mg、蚓激酶1mg、PBS 15mL、pH6.6时包封率最高,电子显微镜下为囊状小球,测得3批蚓激酶脂质体的平均包封率为30.5%,平均粒径424 nm,Zeta电位为-49.68 mV,体外释放符合一级动力学释放规律。结论采用薄膜分散法制备蚓激酶脂质体工艺简单,包封率适宜,体外释放迅速。     

蚓激酶的诱变实验研究

蚓激酶的诱变实验研究蚓激酶是从蚯蚓中提取的具有溶纤或栓活性的一种酶性成分，具有明显的防止血液凝集、抑制血栓形成的作用，如果血栓形成，还具有溶血栓作用。诱变性试验结果表明：鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验为阴性，该药可能不诱发基因突变；小鼠骨髓红细胞微核试验...     

蚓激酶联合银杏达莫治疗急性脑梗死临床观察

目的评价蚓激酶胶囊联合银杏达莫注射液治疗急性脑梗死的疗效和安全性。方法将116例急性脑梗死患者随机分为治疗组和对照组各58例，治疗组口服蚓激酶胶囊并静滴银杏达莫注射液，对照组静滴复方丹参注射液，均以14d为1疗程；观察两组患者治疗前后的凝血、纤溶、血液流变学指标，并评价患者的神经功能缺损程度和临床疗效。结果治疗组各项实验室指标均有明显改善，对照组则部分改善；神经功能缺损两组均有改善，但治疗组改善更为明显；两组患者均未出现明显不良反应。结论蚓激酶胶囊联合银杏达莫注射液治疗急性脑梗死有较好的疗效，且安全性好。     

基于CiteSpace的近20年蚓激酶相关研究的文献计量学分析＊

目的 采用知识图谱及文献计量学方法总结蚓激酶相关研究的脉络、热点和发展趋势。方法 检索2001年至2020年中国知网数据库（CNKI）中蚓激酶相关研究文献。应用CiteSpace软件对作者、机构和关键词进行共现、聚类、突现分析，并绘制知识图谱。结果 共纳入文献508篇，发表4篇文献及以上的作者有13人，其中以扈荣良和张守峰发文最多；主要研究机构以黑龙江中医药大学为主。共有373个关键词被纳入，其中“蚓激酶”出现频次最高（274次），中心性最高（0.68）；关键词聚类分析形成了12个聚类标签；共得到6个突现词，其中突现强度最大的关键词是“临床观察”（6.0717），突现时间最近的关键词是“疗效”（2010-2016年）。结论 通过关键词共现、聚类、突现分析得到，蚓激酶相关研究的热点主要集中在药物制备工艺研究、细胞与分子基础研究、动物实验与临床研究三个方面。这些方面的深入研究需要影响力大的作者进行沟通交流，加强机构间的合作，并大力开展蚓激酶相关研究，加强领域内研究人员的科研培训，从而促进该领域的发展。     

蚓激酶肠溶胶囊的处方与制备工艺研究

目的:制定蚓激酶肠溶胶囊的处方与制备工艺,制备蚓激酶肠溶胶囊。方法:首先以流动性和吸湿性为指标,以淀粉、糊精、微晶纤维素、羧甲基纤维素钠为辅料进行制粒考察,以胶囊内容物的流动性、胶囊的崩解时限做指标,通过正交试验筛选辅料的用量,采用紫外分光光度法测定辅料对蚓激酶鉴别反应有无干扰。结果:最终选定以淀粉和微晶纤维素为辅料,制备工艺流程为:以淀粉、微晶纤维素为辅料,蚓激酶原料药过80目筛总混30min,称量混合后制粒,减压干燥,过50目筛整粒,填充于肠溶胶囊壳中。结论:制定了蚓激酶肠溶胶囊的处方与制备工艺。     

蚓激酶对缺血再灌注大鼠脑内 JAK-STAT 通路的作用

 目的 研究大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后脑组织 JAK1 和 STAT1 蛋白及 mRNA 的表达以及给予蚓激酶（ lumbrokinase ）后二者的变化。 方法 线拴法制备大鼠大脑中动脉阻塞模型,随机分为蚓激酶高剂量组（ 1.2 mg·kg^-1 ）、蚓激酶中剂量组（ 0.6 mg·kg^-1 ）、蚓激酶低剂量组（ 0.3 mg·kg^-1 ）、阳性药脉络宁组（ 1.1 mL·kg^-1 ）、模型组和假手术组。再灌注开始时给予蚓激酶,连续给药 3 d ,用免疫荧光染色法检测 JAK1,STAT1 蛋白的表达,半定量 RT-PCR 方法检测 JAK1 mRNA,STAT1 mRNA 的表达。 结果 模型组 JAK1, STAT1 蛋白和 mRNA 的表达均较假手术组显著升高;蚓激酶 1.2 mg·kg ^-1 组和蚓激酶 0.6 mg·kg ^-1 组 JAK1 蛋白和 mRNA 的表达均高于模型组;蚓激酶 1.2 mg·kg^-1 组 STAT1 蛋白和 mRNA 的表达均低于模型组。 结论 JAK1 有抗神经细胞凋亡作用, STAT1 有促进神经细胞凋亡作用,蚓激酶可能通过增加脑组织 JAK1 蛋白和 mRNA 表达、减少 STAT1 蛋白和 mRNA 的表达起到对脑组织的保护作用。     

蚓激酶胶囊治疗缺血性中风急性期随机对照试验的系统评价

目的：系统评价蚓激酶胶囊治疗缺血性中风急性期的疗效及安全性。方法：搜集蚓激酶胶囊治疗缺血性中风急性期随机对照试验文献，筛选合格研究，应用Jadad评分法进行质量评价，运用异质性检验、Meta-分析、漏斗图分析、敏感性分析等方法统计相关数据。结果：15项研究符合纳入标准，Jadad评分显示所有研究得分均低于3分，属低质量文献。Meta-分析结果显示，总有效率比较的合并优势比（OR值）：3．65，95％的可信区间（CI值）为（2．42，5．49）；神经功能缺损评分比较的合并WMD：-3．92，95％CI为（-5．34，-2、49）；副作用皮肤瘙痒发生率比较的PetoOR及95％CI为7．36（1．26，42．86）。结论：Meta-分析结果显示蚓激酶胶囊治疗缺血性中风急性期，可改善神经功能缺损状况，但有导致皮疹瘙痒的可能性。由于纳入研究质量普遍较低等因素影响，降低了该系统评价结论的可靠性。要进一步验证蚓激酶胶囊治疗缺血性中风急性期的疗效及安全性，尚需进行设计合理、执行严格、多中心大样本且随访时间足够的随机对照试验。     

正交试验法优选蚓激酶提取工艺研究

目的:优选蚓激酶提取工艺参数。方法:以赤子爱胜蚓为原料,通过正交试验法,以酶的活性为指标,考察缓冲液p H值、第一次盐析和第二次盐析的饱和度对提取效果的影响,得到蚓激酶粗品经凝胶层析、离子交换层析、透析、超滤等工序制备高活性蚓激酶。结果:在缓冲液p H7.5,第一次盐析硫酸胺饱和度为40%,二次饱和度为80%时,蚓激酶比活达3327 u/mg。结论:该提取工艺稳定性好,酶活性高。     

蚓激酶抗脂质过氧化研究

目的 研究蚓激酶抗脂质过氧化作用.方法 采用邻苯三酚自氧化法、Fenton反应法检测蚓激酶对于体外超氧阴离子自由基(O2-·)、羟自由基(·OH)的清除作用以及对小鼠心和肝组织的超氧阴离子自由基(O2-·)以及羟自由基(·OH)的清除作用.结果 蚓激酶可以有效清除O2-·、·OH等自由基,并对小鼠心和肝组织的超氧阴离子自由基(O2-·)以及羟自由基(· OH)有清除作用.结论 蚓激酶具有抗氧化的作用.     

蚓激酶的提取工艺改进研究

[目的]改进蚓激酶的提取工艺。[方法]从新鲜蚯蚓中经提取、分离和纯化3个工序制备蚓激酶。以酶的活性为指标,依序对比4种溶剂提取方法,4种沉淀分离方法和2种层析纯化方法,得出较优工艺,并运用分级沉淀除杂和凝胶层析除盐进行工艺改进。[结果]优选出缓冲液提取,乙醇分级沉淀分离,DEAE-Sepharose FF和Sephadex G-75层析纯化的蚓激酶提取新工艺,制得蚓激酶酶活28 000μ/mg,高于旧工艺。[结论]改进后的工艺制备的酶活高,操作简单,适合于工业化生产。     

斑点免疫印迹法快速测定地龙炮制品中蚓激酶及其水解产物

目的测定参环毛蚓、秉氏环毛蚓、日本杜拉蚓和天锡杜拉蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物,建立斑点免疫印迹法评价相应生药材药效成分明确的中药炮制品质量新方法。方法以兔抗蚓激酶单抗为一抗,应用斑点免疫印迹法对地龙炮制品中蚓激酶及其水解产物作定性检测,杂交信号应用Quantity One软件作定量分析。结果现行中药材参环毛蚓与山东产地方品种:秉氏环毛蚓、日本杜拉蚓、天锡杜拉蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物的质量分数分别为125.23、118.34、81.05、72.13μg/g。结论秉氏环毛蚓炮制品中蚓激酶及其水解产物与现行地龙炮制品参环毛蚓无显著差异,理论上可作为广地龙的替代品。斑点免疫印迹法简便快捷,结果准确,无需大型设备,可用于地龙与类似中药材炮制品的品质评价。     

蚓激酶联合阿司匹林预防缺血性卒中复发的研究

目的:观察蚓激酶联合阿司匹林预防缺血性卒中复发的有效性及安全性.方法:87例康复期脑梗死患者分成对照组和治疗组,对照组单独服用肠溶阿司匹林75 mg/d,治疗组再加用蚓激酶180万单位/d,随访6个月,观察缺血性卒中的复发率及出血事件发生率,并于治疗30 d时进行神经功能缺损评分及临床疗效评价.结果:蚓激酶联用阿司匹林组缺血性卒中的复发率为4.4%,效果优于阿司匹林,后者单独使用的复发率为11.9%(P＜0.05),联合使用不增加出血危险.蚓激酶与阿司匹林合用可显著改善患者神经功能,临床总有效率为86.7%,优于阿司匹林单独使用61.9%的有效率(P＜0.05).结论:蚓激酶联合阿司匹林能有效预防缺血性卒中复发,副作用较小、耐受性好.     

突发性耳聋的中成药治疗进展

本文介绍了蝮蛇抗栓酶、蚓激酶胶囊、复方丹参注射液等中成药在治疗突发性耳聋中的应用及作用机理，为突发性耳聋的药物治疗提供参考。