气相色谱-质谱法检测蔬菜中有机磷类农药残留

目的建立气相色谱-质谱法定量检测蔬菜中17种有机磷类混合农药残留的方法。方法样品经乙腈提取,氨基固相萃取小柱净化,浓缩,经GC-MS检测,选择离子扫描(SIM)模式监测目标化合物的特征离子进行定性定量分析。结果 17种化合物在检测的范围内线性关系良好(r0.99),方法的检出限为0.001~0.020mg/kg(S/N=3)。在加标水平为0.04、0.08、0.40mg/kg时,方法的回收率为66.4%~99.3%,相对标准偏差为1.05%~6.81%。结论该方法特异度好、灵敏度高,适用于蔬菜中有机磷类农药的快速测定。     

西洋参、人参有机氯农药残留量快速检测研究

目的建立西洋参、人参有机氯农药残留量快速检测方法。方法样品用石油醚连续提取,采用DM-1701毛细管柱气相色谱测定,外标计算含量。结果农药六六六(BHC)、滴滴涕(DDT)、五氯硝基苯(PCNB)的9个异构体能有效分离,在1~200μg/L浓度范围内9个异构体测定的峰面积线性关系良好,相关系数r在0.9916~1.0000之间,检测西洋参、人参的总BHC、总DDT及PCNB农药残留量与中国药典法相符。结论本法能快速、准确、有效测定西洋参、人参的有机氯农药残留量。     

高效液相色谱法测定消毒乳膏中非法添加的抗真菌药物

目的 建立同时测定消字号乳膏中灰黄霉素、酮康唑、联苯苄唑、克霉唑、硝酸益康唑、硝酸咪康唑、盐酸萘替芬和盐酸特比萘芬等8种抗真菌药物的高效液相色谱法。方法 采用CAPCELL PAK C18(250 mm×4.6 mm×5μm)色谱柱分离,以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,220 nm波长检测,外标法定量消毒乳膏中非法添加的抗真菌药物成分。结果 8种抗真菌组分在0.06~20.86μg/mL范围内线性关系良好(相关系数r=0.999 9),检出限和定量限分别为1.95~6.95 mg/kg和5.85~20.86 mg/kg,平均加标回收率为92.92%~104.05%,相对标准偏差为1.25%~3.80%。市售的20批消字号乳膏中8批样品检出硝酸咪康唑,含量为8.8~23.7 mg/g, 1批样品检出酮康唑,含量为9.7 mg/g。结论 高效液相色谱法可同时测定消字号乳膏中非法添加的8种抗真菌药物。     

RP-HPLC-荧光法测定大鼠海马组织中5种氨基酸类神经递质

目的采用反相高效液相色谱(RP-HPLC)-荧光检测技术建立一种用于测定脑海马组织中5种氨基酸[天门冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、天冬酰胺(Aspa)、谷胺酰胺(Gln)、甘氨酸(Gly)]类神经递质的方法。方法采用甲醇∶水=1∶1提取大鼠脑海马组织中多种氨基酸类神经递质。用6-氨基喹啉基-N-羟基-琥珀酰亚胺氨基甲酸酯(AQC)柱前衍生RP-HPLC-荧光法测定海马组织中Asp、Glu、Aspa、Gln、Gly含量。结果 5种氨基酸类神经递质在15 min内完全分离,分离效果良好;在0.5~100.0μg/μL范围有较好的线性关系,相关系数(r)≥0.999 90;Asp、Glu、Aspa、Gln、Gly的检出限分别为0.05、0.068、0.037、0.05、0.02μg/μL。精密度[相对标准偏差(RSD)]为0.4%~2.5%,加样回收率为70.27%~128.20%,RSD均5%;8只正常大鼠海马组织中Asp、Glu、Aspa、Gln、Gly含量分别为38.98±9.66、126.42±34.06、216.00±0.75、90.44±33.75、(12.95±4.42)μg/g。结论 RP-HPLC-荧光法快速、准确、灵敏度高,适用于脑组织中氨基酸类神经递质含量的测定。     

固相萃取-反相高效液相色谱法同时测定血清中3种抗癫痫药物

目的　应用固相萃取-反相高效液相色谱法测定血清中抗癫痫药物。方法　用 ElutBond C18小柱预处理样品,甲醇为洗脱剂;采用 Waters Nova RC18 柱,流动相为甲醇∶水=45∶55;检测波长230nm,流速1ml/min,内标(苯乙酮)法定量。结果　苯巴比妥、苯妥英、卡马西平的浓度线性范围分别为4.1~62.6μg/ml(r=0.9968)、3.9~60.1μg/ml(r=0.9971)和 1.6~21.2μg/ml(r=0.9945),最低检测限分别为 0. 05μg/ml、0. 05μg/ml 和 0. 01μg/ml;相对回收率分别为 90. 6% ~103.6%、93.4%~118.3%和91.2%~101.1%;批内变异系数均小于 6.0%,批间变异系数均小于8.0%。结论　固相萃取-反相高效液相色谱法简便、灵敏、准确、稳定,适合于以上 3 种抗癫痫治疗药物的同时监测。     

HPLC法同时测定黄地安消胶囊中4种化学成分的含量

目的:建立同时测定黄地安消胶囊中葛根素、三七皂苷R_1、人参皂苷Rb_1、人参皂苷Rg_1含量的方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Agilent Eclipse plus C_(18)色谱柱,(4.6×250mm,5μm),流动相为乙腈和水,梯度洗脱,体积流量是1.0ml/min,进样量5μL,柱温30℃,检测波长分别为203nm和250nm。结果:葛根素在0.154~1.540μg、三七皂苷R_1在1.408~14.080μg、人参皂苷Rb_1在1.494~14.94μg、人参皂苷Rg_1在1.225~12.25μg浓度范围内分别与峰面积积分值呈良好的线性关系,r值分别为0.9991、0.9997、0.9999、0.9995。平均加样回收率分别为99.47%(RSD为2.42%)、98.38%(RSD为1.91%)、98.99%(RSD为1.63%)和97.57%(RSD为1.48%)。结论:该方法具有结果准确、样品处理简便、重现性好、实用性强,可用于黄地安消胶囊中葛根素及3种皂苷类成分含量的同时测定。     

高效液相色谱法同时测定血清色氨酸和犬尿氨酸浓度的方法建立及应用

目的建立一种高效液相色谱-紫外检测法同时测定血清中色氨酸(Trp)和犬尿氨酸(Kyn)浓度的方法。方法色谱柱采用Agilent Hypersil ODS(125.0mm×4.0mm,5μm),流动相为15mmol/L乙酸钠缓冲液(pH4.0)和乙腈95∶5(V/V),流速为0.8ml/min,柱温25℃,紫外检测λKyn=360nm,λTrp=278nm。结果Kyn和Trp的保留时间分别为3.3min和5.2min,线性范围分别为0.083~21.000μmol/L和2.650~678.000μmol/L,检测限分别为0.028μmol/L和0.053μmol/L,日内和日间相对标准偏差分别低于5%和10%,回收率分别为91.99%~113.89%和95.81%~118.82%。结论该方法简便、快速、特异,适合于临床检测。     

少量酸微波消解-AFS法测定禽蛋中砷和汞

目的建立少量酸微波消解-原子荧光光谱仪同时测定禽蛋中砷、汞的方法。方法采用1mL硝酸、对禽蛋样品用微波消解进行前处理,消解过的样品以硫脲-抗坏血酸作为还原剂,无需赶酸,直接用原子荧光光谱仪测定禽蛋中砷、汞水平。结果该方法检出限:砷0.10μg/L、汞0.022μg/L。线性范围:砷0~30μg/L,汞0~5.00μg/L,相关系数均大于0.999 6。样品加标回收率:砷92.1%~97.0%,汞92.5%~97.1%。结论该方法试剂用量少,简便快速。具有较高灵敏度、准确度、精密度,能够满足禽蛋样品中砷和汞同时测定的要求。     

高效液相色谱法检测复方消毒剂中苯扎溴铵、三氯生和三氯卡班

目的建立高效液相色谱(HPLC)仪测定复方消毒剂中苯扎溴铵、三氯卡班和三氯生含量的方法。方法样品经流动相稀释后采用C色谱柱分离,以65%乙腈+5%四氢呋喃+30%乙酸铵溶液(pH 4.0)为流动相,二级管阵列检测器在265 nm波长检测消毒剂中的苯扎溴铵、三氯卡班,在281 nm波长检测三氯生,外标法定量。结果苯扎溴铵、三氯卡班和三氯生分别在10.0~800.0、0.1~50.0和0.5~200.0μg/mL范围内有良好的线性关系(r>0.9995);方法检测限分别为3.0、0.02和0.1μg/mL;加标回收率范围为91.2%~102.2%,相对标准偏差(RSD)均小于5.0%(n=6)。结论建立的HPLC检测法可同时测定复方消毒剂中季铵盐、三氯卡班和三氯生。     

高效液相色谱法测定血浆中伏立康唑浓度的方法及应用

建立测定人血浆中伏立康唑浓度的高效液相色谱方法,分析临床应用效果,为个体化用药提供参考。35例患者静脉滴注伏立康唑150~300mg,q12h,监测伏立康唑谷浓度。色谱柱为COSMOSIL C18柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈:水(V:V=36:64),流速为1.0ml/min,柱温为40℃,检测波长为247nm。伏立康唑浓度在0.2~16.0μg/ml内呈良好的线性关系(r2=0.9994)。伏立康唑批内、批间精密度分别为为6.2%~10.6%和5.9%~12.5%,提取回收率为(85.32±10.55)%~(91.27±7.01)%,所有样品在考察条件下稳定。我院所监测的35例重症患者伏立康唑血样中,有22例(62.9%)患者伏立康唑谷浓度在1.5~4.0μg/ml之间。本法用于重症患者伏立康唑血药浓度监测快速、准确、重现性好,可为优化治疗方案提供依据。     

生物样品中铜的石墨炉原子吸收检测及其在肝豆状核变性诊断中的应用

目的建立诊断肝豆状核变性患者的生物样品中微量铜的石墨炉原子吸收检测方法。方法尿液和血清样品经1％HNOsub3/sub 稀释后,采用石墨炉原子吸收光谱标准曲线法直接测定。结果线性范围0~200 g/L,相关系数0.9997,方法检出限为1.4 g/L,回收率96.7％～99.2％,相对标准偏差1.0%~1.7％,经冻干人尿标样（GBW 09102）对照测定,其结果在允许范围内,相对误差为-1.2％。结论采用GFAAS法测定生物样品中铜,方法可靠、准确、灵敏,能适用于肝豆状核变性诊断中生物样品微量铜检测的要求。     

八味冠心宁胶囊中羟基红花黄色素A水平测定方法的建立

目的建立八味冠心宁胶囊中羟基红花黄色素A水平的测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Thermo C18柱(4.6mm×250.0mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-0.7%磷酸溶液(26∶2∶72,v/v),检测波长403nm,柱温30℃,流速1.00mL/min。结果羟基红花黄色素A在0.026 3~0.420 0μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999 99),平均回收率为98.78%,相对标准偏差(RSD)为0.59%。结论本研究所建立的方法简便、准确,可用于八味冠心宁胶囊中羟基红花黄色素A水平的测定。     

抗真菌药物对丝状真菌的体外抗菌活性研究

目的 了解两性霉素B(AMB)、伊曲康唑(ICZ)、伏立康唑(VRC)和卡泊芬净(CBF)对72株丝状真菌的体外抗菌活性,指导临床合理应用抗真菌药物.方法 MIC检测采用美国临床和实验室标准协会(CLSI)制订的用于产丝孢状真菌的体外药敏方案(M38-P)和(M38-A).AMB、VRC、ICZ在单独用药时分别取100%、100%、≥80%的生长抑制为MIC值,CBF在单独用药时取明确改变真菌菌丝形态的最低浓度作为最小有效浓度.分数抑菌浓度(FIC)评价体外联合效果,FIC=MIC<,联合>/MICA单独+MIC联合/MICB单独.结果 AMB、ICZ、CBF、VRC对72株丝状真菌的MIC90分别为8、4、2、8 μg/ml,AMB+ICZ、AMB+VRC、ICZ+VRC联合用药MIC的范围分别为0.125～16.97、0.245 2～1.25、0.062 5～8.25μg/ml.AMB+VRC对丝状真菌产生协同作用为20.0%～88.9%,优于AMB+ICZ的10.0%～62.5%和ICZ+VRC的20.0%～44.4%(P=0.007<0.05).结论 72株丝状真菌对4种常用抗真菌药物的体外抗菌活性有差异,AMB+VRC优于AMB+ICZ与ICZ+VRC,同样可作为直症感染治疗的联合用药.     

Treatment of postoperative emetic symptoms with granisetron in women undergoing abdominal hysterectomy: a randomized, double-blind, placebo-controlled, dose-ranging study

Background

Postoperative emetic symptoms (nausea, retching, and vomiting) frequently occur in women undergoing general anesthesia for abdominal hysterectomy. In a previous report by us, granisetron, a selective serotonin receptor antagonist, was more effective than the traditional antiemetics, droperidol and metoclopramide, for the treatment of postoperative emetic symptoms in this population.

Objective

The aim of this study was to determine the optimal dose of granisetron for the treatment of emetic symptoms following abdominal hysterectomy.

Methods

This randomized, double-blind, placebo-controlled, dose-ranging study was conducted at Toride Kyodo General Hospital (Toride, Japan). Female patients aged 33 to 66 years experiencing postoperative emetic symptoms after abdominal hysterectomy were eligible for the study. Patients received IV granisetron at 1 of 4 doses (10, 20, 40, or 100 μg/kg) or placebo; they were then observed for 24 hours. Emetic symptoms and the need for a rescue antiemetic were recorded by nursing staff, who were blinded to treatment assignment.

Results

A total of 100 patients (mean [SD] age, 45 [7] years [range, 33-66 years]) were enrolled (n = 20 in each group). No significant differences in patient demographic characteristics were observed between the groups. The number of patients in whom complete control of postoperative emetic symptoms, defined as being free of emetic symptoms and not needing rescue antiemetic medication for 24 hours after study drug administration, was established was significantly greater in 3 of the granisetron groups than in the placebo group (6 patients [30%]): granisetron 10 μg/kg, 7 patients (35%; P= NS); granisetron 20 μg/kg, 17 patients (85%; P = 0.001); granisetron 40 μg/kg, 17 patients (85%; P = 0.001); and granisetron 100 μg/kg, 16 patients (80%; P = 0.002). No clinically significant adverse events attributable to the study drug were observed in any group.

Conclusion

In this study of patients who experienced emetic symptoms after undergoing general anesthesia for abdominal hysterectomy, granisetron at doses ≥20 μg/kg was effective in the treatment of established postoperative emetic symptoms.     

高效液相色谱法测定血清中25-羟基维生素D3

目的建立测定血清25-羟基维生素D3[25（OH）VitD3]的高效液相色谱（HPLC）法，并评价其应用。方法血清经甲醇沉淀蛋白质，以二氯甲烷-正己烷溶液提取后进行HPLC分析。以25（OH）VitD3标准品外标法建立标准曲线，并检测47名正常健康儿童的血清25（OH）VitD3浓度。结果该方法在10～200μg／L浓度范围内线性关系良好（r=0．9971），日内变异系数（CV）为3．5％～4．4％，日间CV为3．9％～4.7％。方法回收率为93．4％～106．2％，提取回收率为88．8％～94．1％。正常健康儿童血清25（OH）VitD3夏季参考范围为14．8～34．5μg／L。结论本法具有快速、灵敏、准确和重复性好等优点，可用于临床实验室测定血清25（OH）VitD3浓度。     

LC-MS/MS方法检测血中甲基丙二酸含量及应用分析

目的 建立一种LC-MS/MS方法 测定血清MMA,用于MMA血症的诊断以及治疗效果的监测.方法 收集2009年4-12月205份健康体检者和146份患者血清,用液-液萃取方法 萃取样本,用自制饱和盐酸-正丁醇进行衍生,采用氮气吹干,色谱柱为Discovery C18(50 mm×2.1 mm,5 μm),流动相为甲醇和水(含0.1%甲酸,V/V),梯度洗脱,液相分离后进入串联质谱进行分析测定,选择性反应监测模式,以标准品制作标准曲线,同位素内标法定量,以血清样本测定2、25、80μg/L3个浓度的加样回收率,以质控样本测定准确度、精密度和稳定性.检测205份健康人血清,用于临床验证.数字表法随机抽取13份血清,测定结果 与德国MDI实验室进行比对,用配对t检验分析测定数据.结果 方法 线性范围2～100μg/L,标准曲线相关系数R2＞0.995.MMA衍生物保留时间为10.5 min,在此实验条件下丁二酸与MMA不互相干扰,批内RSD≤6.4%,批间RSD≤5.0%,回收率为96.42%～103.33%,检出限为1 μg/L,分析准确度94.2%～108.2%.样本常温放置至少6 h稳定、-20℃下至少可以存放70 d稳定、冻融10次稳定,衍生物在4 ℃下至少存放5 d稳定.溶血样本组与未溶血样本组测定值中位数(四分位数)分别为102.53(13.84～302.33)μg/L和39.52(11.94～203.08)μg/L,差异有统计学意义(T=8,P＜0.05).本实验室与德国MDI实验室测定结果 中位数(四分位数)分别为32.82(24.50～100.42)μg/L和32.20(26.65～93.30)μg/L,差异无统计学意义(T=7,P＞0.05).健康成年人(18～58岁)158名,血清MMA测定值(18.46±10.49)μg/L,健康未成年人(1～17岁)47名,血清MMA测定值(22.38±11.45)μg/L.结论 成功建立了LC-MS/MS方法 准确测定血清MMA浓度,样本前处理简单,方法 灵敏度高,特异性强,可重复性好,可以用于MMA血症的筛查、诊断和治疗效果的监测.     

成人不同浓度七氟醚诱导无肌松气管插管时瑞芬太尼的半数有效量

目的确定在不同浓度七氟醚复合瑞芬太尼诱导无肌松气管插管时瑞芬太尼的半数有效量（ED50）。方法 2009年7月-2009年11月择期手术患者60例,ASAI～II,年龄20～59岁,按照入室的顺序随机分为Ⅰ组（2%七氟醚组）和Ⅱ组（3%七氟醚组）,预冲8%七氟醚诱导,眼睑反射消失后,调节七氟醚呼气末浓度分别维持在2%或3%,同时按照序贯法注入瑞芬太尼,瑞芬太尼注射90s后气管插管。记录麻醉诱导前、患者意识消失时、插管前1min、插管后1min及插管后3min心率、平均动脉压的变化。结果 2%、3%的七氟醚复合瑞芬太尼诱导气管插管时瑞芬太尼的半数有效量（ED50）及其相对应的95%可信区间分别为0.585μg/kg及0.533～0.626μg/kg和0.492μg/kg及0.451～0.572μg/kg。结论 2%、3%的七氟醚复合瑞芬太尼诱导气管插管时瑞芬太尼的半数有效量及其相对应的95%可信区间分别为0.585μg/kg及0.533～0.626μg/kg和0.492μg/kg及0.451～0.572μg/kg。     

人血浆毒鼠强气相色谱-氮磷检测器检测及其临床应用

目的:利用气相色谱-氮磷检测器(GC/NPD)建立一种快速检测人血浆中毒鼠强(TET)的方法.方法:血浆中TET用乙酸乙酯作液液提取,毛细管气相色谱柱,GC/NPD法测定血浆中毒鼠强的浓度,以甲基1605为内标,内标法定量.结果:方法学显示毒鼠强与内标分离良好,不受样品中内源性物质干扰,在50～700 ng/mL范围内具有良好的线性关系(r＞0.99),最低检出浓度为5 ng/mL,最低检测限为10 ng/mL.血浆样本回收率的在70%以上.日内、日间精密度分别为RSD 3.5%～12.8%和6.5%～12.0%.结论:该本方法灵敏、稳定,能满足毒鼠强药物代谢动力学研究和临床检测的需要.     

Urinary galactitol and galactonate quantified by isotope-dilution gas chromatography-mass spectrometry

BACKGROUND: Measurements of urine galactitol have been used to monitor the adequacy of diet therapy in the treatment of galactosemia. We have devised a gas chromatographic mass spectrometry (GC/MS) isotope-dilution method for the simultaneous quantification of urine galactitol and another alternate pathway product, galactonate. METHODS: We prepared trimethylsilyl (TMS) derivatives and used D-[UL-13C]galactitol and D-[UL-13C]galactonate as the internal standard for GC/MS. Results obtained with this method were compared with those determined by the established GC method for galactitol and the NMR method for galactonate. Thirty-three normal urine specimens were analyzed by the isotope dilution technique for galactitol and galactonate. Results of galactitol in 6 of these urine specimens along with 18 from classic galactosemics and 19 variant galactosemics were compared with the established GC method. Results for galactonate in 15 urine specimens from galactosemics were compared to the established NMR technique. RESULTS: The method was linear up to 200 nmol with lower limits of detection of 1.1 nmol (1.75 mmol/mol creatinine) (Cr) and 0.8 nmol (1.28 mmol/mol Cr) for galactitol and galactonate, respectively. Intra- and Interassay imprecision ranged from 2.1-6.7% for galactitol and 3.5-8.0% for galactonate. The excretion of both metabolites was age dependent in both normal and galactosemics. In 12 normal urines from subjects under 1 year, values for galactitol ranged from 8-107 mmol/mol Cr, and in 7 over age 6, ranged from 2-5 mmol/mol Cr. Under 1 year, the range for galactonate was non-detectable to 231 and in the over 6 years group non-detectable to 25 mmol/mol Cr. In galactosemics under 1 year, the value for galactitol ranged from 397-743 and for galactonate 92-132 mmol/mol Cr while in nine patients over age 6 the range was 125-274 mmol/mol Cr for galactitol and 17-46 mmol/mol Cr for galactonate. CONCLUSIONS: The GC/MS method enables the simultaneous determination of urine galactitol and galactonate and is precise and useful over the wide range of concentrations needed to assess the galactose burden in patients with galactosemia.