全自动毛细管电泳仪在新生儿α珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用

目的 探讨全自动毛细管电泳仪在新生儿α珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用价值.方法使用全自动毛细管电泳仪对45 863例新生儿脐血标本进行血红蛋白(Hb)电泳分析,检测HbA、HbF、HbA2和异常Hb的含量,对筛查表型阳性的病例召回进行基因分析.结果 45 863例新生儿脐血标本中检测出巴特血红蛋白(Hb Bart′s)阳性者2 964例,筛查阳性率6.46%(2 964/45 863);召回其中1 278例行基因分析,1 173例确诊为α珠蛋白基因缺失,符合率91.8%.确诊病例以标准型为主,占64.4%;基因分型以--SEA/αα最为常见.静止型的Hb Bart′s含量95%置信区间为0.13%~0.97%,标准型Hb Bart′s含量95%置信区间为1.28%~5.92%,HbH病Hb Bart′s含量95%置信区间为8.32%~30.28%,Hb Bart′s水肿胎Hb Bart′s含量高于80%.结论 全自动毛细管电泳分析技术与基因分析有良好的一致性,根据Hb Bart′s含量的多少可初步进行α珠蛋白生成障碍性贫血的临床分型.     

滤纸干血片法毛细管电泳Hb Bart′s带筛查新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血的应用价值评价

目的评估滤纸干血片毛细管电泳技术检测Hb Bart′s带在新生儿期筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血的临床应用价值。方法对2 987例新生儿足跟血标本应用滤纸干血片毛细管电泳技术检测Hb Bart′s带水平并同时做基因分析,采用四格表法分析Hb Bart′s带对α-珠蛋白生成障碍性贫血的筛查价值。结果共检出Hb Bart′s带阳性标本131例,筛查阳性率为4.39%(131/2 987)。经基因分析,共检出2类6种α-珠蛋白生成障碍性贫血基因共226例。Hb Bart′s带对α-珠蛋白生成障碍性贫血诊断敏感度为50.00%(113/226),假阳性率为0.65%(18/2 761);特异性为99.35%(2 743/2 761);假阴性率(即漏诊率)为50.00%(113/226);其中Bart′s带对H病的筛查敏感度高达100.00%,标准型α-珠蛋白生成障碍性贫血的筛查敏感度为90.99%(101/111),对-α(3.7)/αα、-α(4.2)/αα静止型及非缺失型α-珠蛋白生成障碍性贫血的筛查敏感度较低。结论滤纸干血片毛细管电泳Hb Bart′s带在新生儿期筛查α-珠蛋白生成障碍性贫血有很高的特异性。对H病及标准型α-珠蛋白生成障碍性贫血亦有较高的筛查敏感度,但是对静止型及非缺失型α-珠蛋白生成障碍性贫血的筛查价值有限。     

滤纸干血片毛细管电泳技术检测HbA在筛查新生儿β-地中海贫血中的应用价值

目的探讨滤纸干血片毛细管电泳技术在新生儿β-地中海贫血(简称β-地贫)筛查中的应用价值。方法对2 987份新生儿足跟血标本应用滤纸干血片毛细管电泳技术检测血红蛋白(Hb)A并同时做基因分析,采用四格表分析Hb A对β-地贫的筛查价值。回顾性分析2012年7—12月在广东省中山市出生的180 106份新生儿足跟血标本,应用滤纸干血片毛细管电泳技术检测Hb A含量,对β-地贫筛查表型阳性的病例(Hb A8.6%)召回进行基因分析。结果 2 987份新生儿足跟血标本中,基因确诊β-地贫携带者94例。经四格表分析,Hb A8.6%作为诊断β-地贫的切值时,其敏感性为26.60%(25/94),假阳性率为1.18%(34/2 893),特异性为98.82%(2 859/2 893),假阴性率为73.40%(69/94),阳性预测值为42.37%(25/59),阴性预测值为97.64%(2 859/2 928)。回顾性分析180 106份新生儿足跟血滤纸干血片标本,检测出β-地贫表型阳性(Hb A8.6%)者4 539例,筛查阳性率为2.52%(4 539/180 106);其中在召回的1 149例新生儿中经基因分析确诊为β-地贫基因携带者510例,重型β-地贫16例。Hb A筛查与基因确诊的符合率为45.78%(526/1 149)。进一步分析其临床表型与Hb A含量的关系,重型β-地贫Hb A含量明显低于β-地贫基因携带者,差异有统计学意义(P0.05)。结论滤纸干血片毛细管电泳技术检测Hb A在新生儿期筛查β-地贫有很高的特异性(98.82%)及阴性预测值(97.64%)。可以根据Hb A含量的多少初步判断β-地贫的严重程度,特别对重型β-地贫的早期筛查和诊断有很好的临床指导意义。     

新生儿干血斑β地中海贫血筛查方法的研究

目的探讨全自动毛细管微量血红蛋白电泳技术在新生儿β地中海贫血筛查中的应用价值,并寻求有效的筛查方法。方法使用Sebia全自动毛细管电泳仪对145904例新生儿滤纸干血斑标本进行血红蛋白(Hb)电泳;对95059例标本的电泳分析结果以HbA界值法判读β地贫筛查结果,对50845例标本的电泳分析结果以HbA值结合HbA2/HbA比值的综合分析法判读β地贫筛查结果,召回筛查阳性者进行地贫基因诊断;随机对600份标本的电泳结果同时以上述两种方法判读β地贫筛查结果,同时进行基因检测作为β地贫诊断的金标准,统计比较两种判读方法的差异。结果 HbA界值法筛查出的1580例阳性标本中经基因检测确诊为β地贫的有716例,确诊符合率45.32%,假阳性率为54.68%;综合分析法筛查出的1266例阳性标本中930例经基因检测确诊为β地贫,符合率73.46%,假阳性率为26.54%。同时对600例新生儿干血斑分析结果表明,HbA界值法和综合分析法的敏感度和特异度分别是54.55%、90.91%和97.58%、99.31%,两者的筛查准确性分别为96%和99%。统计结果表明,综合分析法的敏感度、阳性预测值和筛查的准确性显著高于HbA界值法.结论新生儿干血斑标本经毛细管血红蛋白电泳后,利用包含HbA、HbA2组分的含量及HbA2/HbA比值的综合分析法判读电泳结果,筛查新生儿β地贫,灵敏度和准确性显著提高,假阳性率明显降低,值得推广应用。     

新生儿血红蛋白对地中海贫血筛查准确性分析

目的探讨新生儿脐带血与出生1～3d外周血血红蛋白组分与表达量对地中海贫血的筛查准确性。方法收集2016年1月至2017年6月在该院出生,并进行珠蛋白基因筛查的新生儿220例,应用毛细管电泳分析脐带血或外周血血红蛋白组分。结果 220例新生儿中脐带血组146例,外周血组74例,两组血红蛋白电泳结果一致。以基因检测结果为确诊标准,α-地中海贫血77例,其中电泳检测出Hb Bart′s条带63例,未检出Hb Bart′s条带均为静止型α-地中海贫血。以Hb Bart′s条带作为电泳筛查α-地中海贫血的标准,其灵敏度为81.81%(63/77),对轻型α-地中海贫血灵敏度达100.00%(61/61),特异度为100.00%(108/108)。基因检出β-地中海贫血34例与健康新生儿108例,两者血红蛋白F(HbF)百分比采用ROC曲线分析。轻型β-地中海贫血的截断值为86.65%,其灵敏度为94.12%(32/34),特异度为84.26%(91/108)。结论新生儿通过Hb Bart′s条带筛查α-地中海贫血,通过HbF筛查β-地中海贫血都有较好的灵敏度和特异度。     

珠蛋白生成障碍性贫血HbCS-H病的筛查与诊断现状

目的对非缺失型α珠蛋白生成障碍性贫血(后简称地贫)血红蛋白(Hb)CS-H病表型及基因型的表现特点和防控现状进行分析,以加强产前筛查医务工作者对HbCS-H病的诊断水平和防控意识。方法采用全血细胞分析仪、Sebia Capillarys2型毛细管电泳仪检测地贫表型;采用跨越断裂点聚合酶链反应(GAP-PCR)和聚合酶链反应(PCR)反向点杂交技术(RDB)检测国内常见的3种缺失型α地贫(αα/--SEA、αα/α3.7、αα/α4.2),3种常见α地贫点突变(αCS、αQS、αWS)和17种β地贫点突变基因。结果 104 361例地贫筛查者中,毛细管电泳出现CS条带的296例(0.28%),包括CS型、CS+H+Bart′s型、CS+H型、CS+HbE型、CS+异常Hb条带型等5种表现形式。其中,24例电泳出现CS+H+Bart′s型,2例出现、CS+H型异常条带,全部26例患者经基因确诊为HbCS-H病,基因型均为--SEA/αCSα。选取30例电泳无CS条带者作为对照,均未能检测到CS基因。结论 HbCS-H病患者所携带的SEA和CS基因分别来自父母双方;单纯携带SEA或CS者,血液学表现为轻微异常或正常。毛细管电泳能有效分离出CS条带,提高对电泳筛查报告单的解读能力,正确应用基因确诊手段,发现有可能出生HbCS-H患儿的高危家庭并进入产前诊断,对防控HbCS-H患儿的出生有重要意义。     

全自动毛细管电泳仪在成人珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用评价

目的 探讨全自动毛细管电泳仪在成人珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用价值.方法 使用法国Sebia公司的Capillarys2全自动毛细管电泳仪对18 003例成人血标本进行血红蛋白电泳分析,检测HbA,HbF,HbA2和异常血红蛋白含量,对筛查表型阳性的病例召回进行基因分析.结果 18 003例成人标本筛查出α珠蛋白生成障碍性贫血表型阳性者2 226例,筛查阳性率12.36％,其中召回1 070例行基因分析,626例为α珠蛋白基因缺失,符合率58.50％;β珠蛋白生成障碍性贫血表型阳性者1 329例,筛查阳性率7.38％,其中召回733例行基因分析,710例为β珠蛋白基因突变,符合率96.86％.结论 全自动毛细管电泳作为一种新型液相分离技术,具有快速、灵敏度高、分辨率高等优点,能对HbA2进行准确的定位及定量,可初步区分α,β珠蛋白生成障碍性贫血,有效筛出高危患者,全自动毛细管电泳分析技术与基因分析有良好的符合性,为珠蛋白生成障碍性贫血的诊断提供重要依据.     

深圳地区血红蛋白G的分子特征与血液学表型

目的分析深圳地区异常血红蛋白G(HbG)病的分子特征和血液学表型,进一步认识异常血红蛋白病的类型,为地中海贫血筛查提供参考数据。方法收集我院进行毛细管电泳法检测的72397例样本,对检出异常血红蛋白者采用Sanger测序法进行DNA测序鉴定,并分析其红细胞参数,采用跨越断裂点聚合酶链反应(Gap-PCR)法和PCR结合反向点杂交(PCR-RDB)法检测并进行地贫基因分型。结果共检出6种HbG,均为杂合子,发生率为0.047%,位于α链异常的为Hb G-Honolulu和Hb G-Waimanalo;位于β链异常的为Hb G-Taipei、Hb G-Coushatta、Hb G-San José和Hb G-Siriraj。除1例Hb G-Honolulu合并β地贫(IVS-Ⅱ-654杂合突变)表现为轻型地贫特征,其余各类型HbG单纯杂合子的血液学表型均正常。新生儿Hb G-Taipei的毛细管电泳结果为HbA(8.6±2.4)%、HbF(89.1±3.1)%和Hb G-Taipei(2.3±0.6)%;Hb G-Coushatta结果为HbA 12.0%、HbF 83.7%和Hb G-Coushatta 4.1%。结论深圳地区HbG以杂合子多见,单纯HbG杂合子可表现为血常规正常,用毛细管电泳分析可发现携带者;合并地贫时可表现为地贫表型,临床应注意鉴别成人和新生儿HbG的毛细管电泳特征。     

武汉地区新生儿β-地中海贫血筛查及其影响因素分析

目的:了解武汉地区新生儿β-地中海贫血筛查情况,探讨滤纸干血斑全血Hb A电泳的影响因素.方法:对99 275例新生儿滤纸干血斑进行毛细管电泳,分析Hb A、Hb A2和Hb F等含量,按各组份的比例判读β-地中海贫血筛查结果,对疑似β-地中海贫血新生儿,将其召回进行地中海贫血基因检测.结果:在99 275例新生儿中,...     

脐血血红蛋白电泳在新生儿珠蛋白生成障碍性贫血诊断中的临床应用

目的本文就脐血血红蛋白电泳在新生儿珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)诊断中的临床应用进行讨论和说明。方法选取百色市人民医院2013年4月1日至2015年5月1日的1 148例脐血标本进行详细讨论和分析。对1 148例脐血标本分别采用脐血血红蛋白电泳和红细胞渗透脆性试验(简称一管法)的筛查方式。对进行产前检查的1 148例脐血标本进行脐血血红蛋白电泳检测,并观察检查后1 148例脐血标本地贫类型分布及一管法的筛查溶血率。结果经过一管法筛查后发现,其溶血率大于60%,1 148例脐血标本中有402例脐血标本检出Hb Bart′s,其中α-地贫的静止型共29例,标准型108例,血红蛋白H病共12例,Hb Bart′s水肿共5例。结论对于α-新生儿地贫的诊断使用脐血血红蛋白电泳进行检测,能够有效地进行判断,而且操作方便,但是对于β-新生儿地贫的诊断还需要进一步研究。     

足跟血干血斑毛细管电泳技术在新生儿期静止型α-珠蛋白生成障碍性贫血筛查中的应用价值

目的 探讨足跟血干血斑毛细管电泳技术在新生儿期静止型α-珠蛋白生成障碍性贫血(以下简称"地贫")筛查中的价值.方法 回顾性分析2018年5月至2021年2月于该院治疗的182例静止型α-地贫患儿临床资料.分析足跟血干血斑毛细管电泳检测用于静止型α-地贫筛查的检出率,以及新生儿期各种静止型α-地贫患儿血红蛋白(Hb)Bart's水平.结果 新生儿期静止型α-地贫检出率为58.24％.5种静止型α-地贫中,αWSα/αα型的检出率为0.00％,-α3.7α/αα型的检出率为38.71％,-α4.2α/αα型的检出率为44.00％,αCSα/αα型的检出率为95.45％,αQSα/αα型的检出率为80.00％.除αWSα/αα型外,其余4型静止型α-地贫Hb Bart's水平比较差异有统计学意义(P<0.05).αCSα/αα型患儿Hb Bart's水平高于αQSα/αα、-α4.2α/αα、-α3.7α/αα、αWSα/αα型患儿(P<0.05).结论 足跟血干血斑毛细管电泳检测用于新生儿期α-地贫筛查,对于区分缺失与突变的静止型α-地贫有一定价值,有助于αCSα/αα型α-地贫的早期诊断.     

深圳地区血红蛋白Q-Thailand的表型和基因型分析

目的分析深圳地区血红蛋白(Hb)Q-Thailand的基因型和表型的关系,为Hb疾病的筛查提供参考数据。方法收集该院72397例标本,分为成年男性、成年女性及新生儿,采用毛细管电泳法对Hb Q-Thailand进行筛查,对筛查阳性者采用Sanger测序法进行DNA测序鉴定,采用跨越断裂点PCR法和PCR结合反向点杂交法进行珠蛋白生成障碍性贫血基因分型检测,并分析其红细胞参数。结果深圳地区人群Hb Q-Thailand的携带率为0.039%。成年男性Hb Q-Thailand合并-α4.2杂合缺失的Hb、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白量(MCH)、Hb Q-Thailand和HbA2+变异体分别为(144.0±5.0)g/L、(80.7±2.1)fL、(27.1±0.1)pg、(26.6±3.3)%和(2.3±0.3)%;成年女性分别为(121.0±13.2)g/L、(76.7±3.1)fL、(25.7±1.6)pg、(28.5±0.9)%和(2.5±0.3)%;新生儿Hb电泳分析结果为HbA(13.7±4.1)%、HbF(64.9±4.1)%、Hb Q-Thailand(21.0±2.7)%和Hb Bart′s(0.4±0.1)%。结论深圳地区Hb Q-Thailand以杂合子常见,并与-α4.2缺失型珠蛋白生成障碍性贫血连锁遗传,临床需重视其表型与基因型的规律,以进行产前筛查和遗传咨询。     

清远地区新生儿珠蛋白生成障碍性贫血筛查结果分析

目的分析清远地区新生儿珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)筛查和基因诊断情况,为早期治疗和遗传咨询等干预措施及地贫防治政策的制定提供依据。方法应用法国Sebia Capillarys全自动毛细管电泳仪对2015年5月至2016年3月清远地区出生的新生儿进行滤纸干血斑血红蛋白成分分析,初筛阳性者召回抽静脉血应用裂口-聚合酶链式反应(Gap-PCR)和聚合酶链反应(PCR)结合反向点杂交技术进行地贫基因确诊。结果 1 056例初筛阳性者标本中共检出地贫908例,符合率为85.90%。α-地贫确诊符合率为95.05%(691/727),β地贫确诊符合率为65.00%(208/320),α-地贫筛查符合率显著高于β地贫,筛查为HbE的13例新生儿中共召回9例,全部确诊为HbE杂合子,筛查符合率100.00%。确诊为α-地贫650例,检出率为61.60%,其中静止型210例(19.90%)、标准型408例(38.60%)、血红蛋白H病32例(3.00%);检出β地贫204例,检出率为19.30%;α-地贫复合β地贫41例(3.90%),重型β地贫4例(0.35%),异常血红蛋白9例(0.85%)。结论通过新生儿滤纸干血斑进行血红蛋白成分分析可有效筛查出地贫患儿,值得推广应用,清远地区属于地贫高发区,在该地区开展新生儿地贫筛查很有必要,从而提高出生人口素质。     

毛细管电泳法筛查新生儿血红蛋白E

目的探讨毛细管电泳仪在新生儿血红蛋白E(Hb E)筛查中的应用价值。方法对7 312例新生儿脐带血标本进行检测,将筛查出Hb E条带的标本进行珠蛋白生成障碍性贫血(简称地贫)基因分析。结果新生儿Hb E筛查阳性标本21份,阳性率为0.29%。21份标本Hb E含量百分比为(3.73±1.74)%。经过地贫分析均为Hb E杂合子,其中3份合并有α地贫。结论虽然新生儿Hb E所占百分比较低,但毛细管电泳仪灵敏度高,适合用来筛查新生儿Hb E。     

河源市新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血筛查及基因型分析

目的分析河源市新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血筛查结果,探索该地区新生儿α-珠蛋白生成障碍性贫血基因型分布特征.方法采用毛细管电泳检测160 370例新生儿干血斑标本Hb Bart's水平;召回筛查阳性新生儿,检测珠蛋白生成障碍性贫血基因;随机同时检测202例标本的Hb Bart's水平与珠蛋白生成障碍性贫血基因.结果筛...     

α-地中海贫血特征的免疫学诊断

从血液学检查诊断α-地中海贫血-2特征常常是不可能的,因为其红细胞形态学和MCV都是正常的。新生儿时期以后,用普通的电泳和层析法亦不能检出Hb Bart′s。本文用免疫学方法证明HbBart′s,是对新生儿期以后的地中海贫血提供了一个诊断性筛选方法。从Hb Bart′s胎儿水肿患者获得Hb Bart′s,反复注入家兔体中使产生抗血清。用双向免疫扩散,免疫电泳和毛细管沉淀试验,证明它仅对Hb Bart′s是特异的。用等体积Hb溶液(2.5～5.0g/dl)和抗Hb Bart′s血清滴入微量血球压积管,试管用聚乙烯塞塞住,4℃或室温放置过夜,管底出现沉淀即为阳性。在Hb Bart′s含量比较多的病例中。于一小时     

中国人群少见血红蛋白H病的分子遗传学特征分析

目的 分析由少见基因类型导致的血红蛋白H病家系的分子遗传学特征.方法 采用标准的血液学分析技术检测先证者及家系成员红细胞参数,包括RBC、Hb、MCV、MCH、MCHC和RDW,进行表型诊断.利用SPIFE快速自动电泳分析系统检测其血红蛋白组分Hb A、HbA2、Hb F、Hb H和Hb Bart＆#39;s.采用反向斑点杂交技术诊断α-地中海贫血基因非缺失突变,利用gap-PCR扩增特异位点序列并对扩增序列进行克隆测序,明确突变位点.结果 先证者母亲MCV、MCH均降低,Hb A2为2.39％且亨氏小体阳性,基因检测结果为α泰国型缺失杂合子.先证者父亲各红细胞参数正常,但RDB检测结果为携带αCS点突变.先证者及其弟表现为中重度小细胞低色素贫血,蛋白电泳结果显示他们均有Hb H和Hb Bart＆#39;s带,先证者Hb H为1o.8％,Hb Bart＆#39;s为7.51％,其弟Hb H为14.78％,Hb Bar（s为9.11％,基因检测结果证实该姐弟均为HbH病患者,遗传了母亲的α泰国型缺失片段和父亲的αCS点突变,故α地中海贫血型别为THAI/ααcs.结论 首次报道中国人群少见的H病类型THAI/α αcs地贫基因类型是中国人群少见的H病类型,丰富了中国人群α珠蛋白基因突变谱.     

胎儿巴特(氏)血红蛋白定量分析在产前诊断α-地中海贫血中的价值

目的通过对胎儿脐血行血红蛋白(Hb)电泳检查,探讨胎儿巴特(氏)血红蛋白(HbBart′s)定量分析在α-地中海贫血(简称:α-地贫)产前诊断中的价值。方法于妊娠中晚期对夫妻双方均为α-地贫携带患者抽取胎儿脐带血行Hb电泳分析。对胎儿羊水样本行α-地贫3种缺失型基因和3种非缺失型基因检测。结果胎儿Hb-Bart′s定量分析对重型、中间型及轻型α-地贫检出的灵敏度、特异度和诊断符合率高,误诊率及漏诊率较基因检测低;而对静止型α-地贫检出的灵敏度、特异度及诊断符合率较低,误诊率、漏诊率基因检测较高。结论胎儿HbBa-rt′s定量分析对产前诊断α-地贫具有简便、快速且经济、准确的优点,结合家族史可作为孕娠中、晚期α-地贫产前诊断的常规方法 ,基因诊断结合HbBart′s定量分析有利于提高α-地贫的诊断准确率。     

中山市北部地区新生儿脐血α-地中海贫血筛查报告

目的:调查中山市北部地区新生儿α-地中海贫血的基因携带率及探讨对新生儿进行α-地中海贫血筛查的必要性.方法:采用法国Sebia全自动电泳仪对2002年4月至2003年7月共1192份新生儿脐血标本进行电泳,并对Hb区带进行扫描定量分析.结果:调查的1192例标本中,检出Hb Barts 37例(男婴:17例,女婴:20例),阳性率为3.10%,其中静止型α-地贫12例(1.00%),标准型α-地贫23例(1.93%),HbH病2例(0.17%).此外,还发现异常血红蛋白病3例(0.08%),疑为β-地中海贫血7例.结论:在地中海贫血高发地区宜将Hb电泳作为常规筛查方法,普遍开展新生儿脐血血红蛋白病筛查,这对优生优育,提高人口素质具有重要意义.     

潮州地区2 320例新生儿α-地中海贫血基因检测分析

目的:检测潮州地区2 320例新生儿α-地中海贫血基因携带情况,分析基因类型及分布特征。方法:对2014年6月~2015年4月在本院出生的2 320例新生儿进行α-地中海贫血筛查。采集新生儿足跟血制成干血斑滤纸片,送广东省妇幼保健院医学遗传中心(地中海贫血诊断中心),采用PCR-杂交法对标本进行检测。结果:筛查干血斑滤纸片共2 320例,确诊α-地中海贫血160例,其中2例合并β-地中海贫血,检出率6.9%。结论:(1)潮州地区α-地中海贫血发生率低于南宁、阳江、梅州,但还需注重加强筛查及防治;(2)新生儿干血斑滤纸片筛查地中海贫血基因技术,操作方便,费用相对较低,可作为常规筛检方法,尤其适用于基层单位,且广泛开展新生儿血红蛋白病筛查,对优生优育,提高人口素质具有重要意义。