黄芪不同提取部分抗Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒的实验研究

本文报道8种黄芪提取部分即AⅠ、AⅢ,AⅣ、AⅦ、AⅧ、AⅨ、AⅩ在VeroE_6细胞中对Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSV-1和HSV-2)的作用。细胞病变(CPE)抑制试验结果表明,AⅠ、AⅥ和AⅦ对HSV-1有抑制作用,AⅠ和AⅥ对HSV-2有抑制作用。AⅥ在体外不能直接灭活HSV-1,但能抑制已感染细胞的病毒复制。     

单纯疱疹病毒性角膜炎与Ⅰ型变态反应的关系

对34例单纯疱疹病毒性角膜炎(HSK)患者血清 IgE 水平进行了测定,结果发现在急性朗增高(195.34±42.90Iu/ml),恢复期下降(111.31±20.80Iu/ml),结果提示 IgE 参与了 HSK 的免疫病理过程,与Ⅰ型变态反应有着密切关系。另外,对其它各类免疫球蛋白(Ig)产生的动力学也做了观察。     

夏枯草抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的实验研究

使用人胚肌皮单层细胞培养技术对中药夏枯草提取物抗I型单纯疱疹病毒作用进行了研究。结果：夏枯草提取物的无毒界限为≤1000μg/ml；四种给药途径中，同时给药途径，治疗给药途径，管外给药途径的最低有效量分别为50μg/ml,100μg/ml,250μg/ml；预防给药途径无效。     

黄芪抗小鼠及家兔Ⅰ型单纯疱疹病毒的实验研究

本文报道了黄芪、黄芪和无环鸟苷联合在小鼠体内抗Ⅰ型单纯疱疹病毒脑内感染及局部应用黄芪治疗家兔Ⅰ型单纯疱疹性角膜结合膜炎的效果,并和无环鸟苷进行了比较。结果表明黄芪对受10或30LD_(50)Ⅰ型单纯疱疹病毒感染的小鼠均有治疗效果,并证实黄芪有增强无环鸟苷抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的作用。局部应用可以控制角膜结合膜病变的发展。但黄芪抗Ⅰ型单纯疱疹病毒的效果不及无环鸟苷。     

HSV特异性转移因子治疗复发型HSVK的临床观察

利用单纯疱疹病毒特异性转移因子联合无环鸟苷滴眼液治疗４０例复发型单纯疱疹病毒性角膜炎患者，总有效率为１００％，治愈率为８６．６％。采用红细胞Ｃ３ｂ受体花环试验研究红细胞免疫功能的变化。其结果，１０例正常人与４０例治疗前患者比较（Ｐ〈０．０１），两组有显著性差异，４０例患者，治疗前与治疗后两组有显著差异（Ｐ〈０．０１）。表明ＨＳＶＫ患者治疗前免疫功能低下，用ＨＳＶ特异性转移因子治疗后，红细胞免疫功能     

人胃癌转移因子特异活性的体外鉴定

用培养的人MGc 803胃癌细胞免疫小鼠,取小鼠脾制备人胃癌特异性小鼠TF(小鼠Sp-TF);用手术摘除胃癌组织标本所提抗原免疫山羊,同法制备人胃癌特异性羊TF(羊Sp-TF)。以经改进的~3H-Leu白细胞移动抑制试验(~3H-Leu LMI法)为指标检测和比较其活性,结果表明,小鼠Sp-TF具有机抗原特异活性,羊Sp-TF具有同样的抗原特异活性。     

扇贝糖胺聚糖对Ⅰ型单纯疱疹病毒的抑制作用

目的 研究扇贝裙边糖胺聚糖(SS-GAG)不同浓度及不同作用时间对Ⅰ型单纯疱疹病毒(HSV-Ⅰ)的抑制作用.方法 以HSV-Ⅰ SM44株感染非洲绿猴肾细胞(Vero细胞),观察病毒感染后的细胞变性反应(CPE),并检测不同浓度SS-GAG及不同作用时间对HSV-Ⅰ复制的抑制作用.结果 与病毒对照组相比,SS-GAG各浓度组(100、50、25 mg/L)能有效保护经HSV-Ⅰ感染的Vero细胞,使细胞活性增强(F=27.54,P<0.01);并减弱HSV-Ⅰ导致的病变效应,抑制病毒的复制,并且随着药物作用时间的延长,药物抗病毒效应逐渐增加, 最高达88.64%.结论 SS-GAG体外具有明显的抗HSV-1病毒作用.     

人疱疹病毒6型的分离与鉴定

研究我国的人疱疹病毒６型与疾病的关系。应用淋巴细胞分离培养技术，对４例临床确诊为婴儿玫瑰疹患者的外击血淋巴细胞作病毒分离，并应用间接免疫荧光试验作鉴定。结果；３例出现细胞病变，表现为细胞肿大，呈气球状。     

乙型肝炎特异性转移因子的制备及鉴定

[目的 ]探索羊脾乙型肝炎特异性转移因子的更高效的制备方法 .[方法 ]用乙型肝炎疫苗辅以福氏完全佐剂免疫绵羊 ,在细胞介导免疫应答的高峰期放血 ,从羊脾脏和白细胞透析物中制备乙型肝炎特异性转移因子 .用一系列理化性状及药典规定项目对制品进行检定 ,并采用小鼠皮肤试验检定制品的特异性活性 .[结果 ]经检定表明符合生物制品标准 ,并证实该乙型肝炎特异性转移因子具有抗原特异性 ,能在体外转移对乙型肝炎病毒的免疫性 .[结论 ]制备的乙型肝炎特异性转移因子是一种可用于治疗乙型肝炎的安全有效的免疫调节剂     

Effects of HSV-1 Specific Transfer Factor on ~3H-Leu Incorporation of Mouse Spleen Cells

The specific transfer factor(TFHSV-1)obtained from mouse spleensimmunized with herpes simplex virus type Ⅰ(HSV-1)was used in the experimentof ~3H-Leu incorporation of mouse spleen cells.It was observed that TFHSV-1increased obviously ~3H-Leu incorporation of mouse spleen cells in the presence ofHSV-1 antigen.The TFHSV-1 became inactive after incubation at 80℃ for onehour.It was found by UV monitoring and free amino acid analysis that theabsorbance value of inactive TFHSV-1 rose,and the peptides in the heated TFHSV-1degraded partially.This structural change might be closely related to theinactiveness.On the other hand,TFHSV-1 increased non-specifically ~3H-Leuincorporation of mouse spleen cells induced by ConA.These results show that TFHSV-1 has both antigen-specific and non-specificeffects on increasing the protein synthesis of the lymphocytes from mouse spleensin vitro.Some peptides in TFHSV-1 may be the active component responsible for itsantigen-specificity.The ~3H-Leu incorporation method used here is a sensitiveassay for the antigen-specificity of TF in vitro.     

乙型肝炎病毒特异性转移因子制备方法的改进

[目的 ]进一步探索羊脾乙型肝炎病毒特异性转移因子的制备方法 ,以制备出更高效的乙型肝炎病毒特异性转移因子 .[方法 ]用乙型肝炎疫苗辅以佐剂对羊进行全程免疫 ,然后从羊脾中提取乙型肝炎病毒特异性转移因子 ,通过研究不同的冻融次数及透析液量等因素 ,观察其对乙型肝炎病毒特异性转移因子含量的影响 .[结果 ]乙型肝炎病毒特异性转移因子的制备质量与免疫佐剂加入与否、制备时冻融次数及透析液量有关系 .[结论 ]用改良的制备方法可获得更高质量的乙型肝炎病毒特异性转移因子 .     

蚀斑法定量测定HSV-2病毒颗粒的优化实验条件

目的 建立稳定易操作的HSV-2蚀斑技术,为纯化和定量测定HSV-2毒株的感染性研究提供依据。方法HSV-2病毒悬液接种至Hela细胞单层,分别经37℃吸附和室温吸附60min,用含0．75％琼脂糖或0．75％羧甲基纤维素RPMI 1640液覆盖,3d后用1％结晶紫染色5min,记数蚀斑数量,在挑取蚀斑接种扩增及保祓的同时,应用PCR法对蚀斑培养物进行鉴定。结果 蚀斑经1％结晶紫染色在Hela细胞单层上呈紫色,多为圆形,着色深,散在分布,与周围区域界限明显。用琼脂糖和羧甲基纤维素覆盖下所形成的蚀斑大小及形状不同,但病毒滴度差异无显著性（P〉0.05）。经室温和37℃吸附的病毒滴度差异亦无显著性（P〉0．05）。结论 建立了简便易行的蚀斑形成测定方法,可准确滴定HSV-2病毒感染数量和感染力。     

阴茎癌病因中人乳头瘤病毒和疱疹病毒Ⅱ型相关性研究

目的 :探讨阴茎癌病毒病因中人乳头瘤病毒 (HPV)和疱疹病毒Ⅱ型 (HSV 2 )的可能作用。方法 :应用聚合酶链反应技术对正常包皮组织和阴茎癌中HPV和HSV 2DNA进行检测 ,分析两者的相关性。结果 :正常包皮和阴茎癌组织中HPV和HSV 2DNA阳性率分别为 4 1.6 7%、33.33%和 4 .16 %、31.2 5 % ,阴茎癌与正常包皮组织中HPVDNA检出率无显著差别 (P >0 .0 5 ) ,但HSV 2在阴茎癌中的检出率与正常包皮组织比较有显著差别 (P <0 .0 5 )。此外有 10例阴茎癌组织中同时存在HPV和HSV 2DNA序列 ,正常包皮组织却只有 1例。结论 :阴茎癌的病毒病因可能是多因素的 ,HPV和HSV 2均与阴茎癌有关 ,两者在阴茎癌的发生过程中或许起协同作用     

HSV-1载体中介lacZ基因导入大鼠中枢神经系统及其表达的研究

目的 研究用HSV-1载体将外源基因导入大鼠中枢神经系统的方法。方法 将HSV-1载体接种于大鼠嗅神经末梢，在不同时间取各部位脑组织检测lacZ基因表达产物β-半乳糖苷酶活性，并观察大鼠脑组织局部及全身的病理学和免疫学变化。结果接种HSV-1载体后2d在嗅球中检测到β-半乳糖苷酶活性，接种后4d在嗅球、嗅前神经核、蓝斑、杏仁核、海马、颞叶皮质、间脑以及最后区均检测到β-半乳糖苷酶活性，并持续10周以上；脑组织及全身各脏器未见病理学及免疫学改变。结论HSV-1载体可通过大鼠嗅神经通路将外源基因导入中枢神经系统并在其中表达。     

HSV-1载体中介IacZ基因导入大鼠中枢神经系统及其表达的研究

目的研究用HSV-1载体将外源基因导入大鼠中枢神经系统的方法.方法将HSV-1载体接种于大鼠嗅神经末梢,在不同时间取各部位脑组织检测lacZ基因表达产物β-半乳糖苷酶活性,并观察大鼠脑组织局部及全身的病理学和免疫学变化.结果接种HSV-l载体后2 d在嗅球中检测到β-半乳糖苷酶活性,接种后4 d在嗅球、嗅前神经核、蓝斑、杏仁核、海马、颞叶皮质、间脑以及最后区均检测到β-半乳糖苷酶活性,并持续10周以上;脑组织及全身各脏器未见病理学及免疫学改变.结论 HSV-1载体可通过大鼠嗅神经通路将外源基因导入中枢神经系统并在其中表达.     

HSV-2糖蛋白D在昆虫-杆状病毒表达系统中的表达及免疫原性分析

目的：在昆虫细胞中表达2型单纯疱疹病毒（HSV-2）糖蛋白D（gD2）胞外区基因,检测其免疫原性。方法：以HSV-2病毒基因组为模板,PCR扩增得到gD2片段,构建至杆状病毒质粒Bacmind中,转染sf9细胞,包装重组杆状病毒,收集后连续感染sf9细胞,收获第4代重组杆状病毒（P4）,通过Western blotting法鉴定蛋白表达情况,采用空斑实验检测重组病毒滴度,将P4代重组病毒作为种子大量感染sf9细胞,上清经镍柱亲和层析进行纯化,将纯化后的蛋白在第0、2和4周免疫BALB/c小鼠（gD2组）,以PBS作为阴性对照（PBS组）,ELISA检测小鼠血清中gD2特异性IgG滴度。结果：PCR鉴定和DNA测序,重组表达质粒gD2-Bacmind构建正确,空斑实验检测重组病毒滴度为2.0×10⁹ pfu·mL^-1,纯化的gD2重组蛋白在相对分子质量37000处出现目标条带,纯度达90%以上。第6周gD2组小鼠免疫血清中gD2特异性IgG抗体滴度Log10平均值达到4.34,与PBS组比较差异有统计学意义（P<0.01）。结论：利用昆虫-杆状病毒表达系统表达的gD2胞外区蛋白具有良好的免疫原性,可作为HSV-2疫苗的候选。