恶性疟原虫113肽抗原基因重组的减毒鼠伤寒沙门菌在家兔中免疫应答的研究

我们已经在减毒鼠伤寒沙门菌ＳＬ３２６１以融合蛋白的形式表达了人工合成的恶性疟原虫杂合１１３肽基因ＡＢ（ＧＺ－ＡＢ）。活菌以２×１０９ＣＦＵ经口服免疫新西兰家兔，用ＥＬＩＳＡ测定抗体水平，结果于首次免疫或加强免疫后都可检测到一定水平的特异性抗体。所免疫的家免可以诱发针对恶性疟原虫抗原及ＧＺ－ＡＢ的迟发性超敏反应（ＤＴＨ）。我们的研究表明，含有多个恶性疟原虫抗原表位的人工合成基因可以在减毒鼠伤寒沙门菌中表达，活菌可诱发家兔产生特异的体液免疫及细胞免疫，为恶性疟口服活菌苗的制备打下基础。     

丙型肝炎病毒及恶性疟原虫复合抗原基因表达及诱导小鼠免疫应 …

将合成的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）复合多表位抗原基因ＰＣＸ及恶性疟原虫（Ｐｆ）多价抗原基因ＡＢ（ＳＰｆ６６＋ＳＰｆ１０５）克隆到表达载体ｐ＾ＷＲ４５０－１中,以β－半乳糖甘酶（ＧＺ）－ＨＣＶ－Ｐｆ复合多肽抗原的形式在大肠杆菌中高效融合表达了目的蛋白ＧＺ－ＣＡＢ,表达量约３０％。所表达的重组抗原可被ＨＣＶ患者血清及鼠抗Ｐｆ抗体特异识别,显示了该融合蛋白质具有ＨＣＶ和Ｐｆ的免疫原性。该蛋白免疫小鼠后,诱发     

丙型肝炎病毒及恶性疟原虫复合抗原基因表达及诱导小鼠免疫应答的研究

将合成的丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）复合多表位抗原基因ＰＣＸ及恶性疟原虫（Ｐｆ）多价抗原基因ＡＢ（ＳＰｆ６６＋ＳＰｆ１０５）克隆到表达载体ｐＷＲ４５０ ｌ中,以β 半乳糖甘酶（ＧＺ） ＨＣＶ Ｐｆ复合多肽抗原的形式在大肠杆菌中高效融合表达了目的蛋白ＧＺ ＣＡＢ,表达量约３０％。所表达的重组抗原可被ＨＣＶ患者血清及鼠抗Ｐｆ抗体特异识别,显示了该融合蛋白质具有ＨＣＶ和Ｐｆ的免疫原性。该蛋白免疫小鼠后,诱发针对ＧＺ ＣＡＢ、ＧＺ ＰＣＸ及ＰｆＡｇ的特异性体液免疫应答及针对ＧＺ ＣＡＢ、ＧＺ ＰＣＸ的迟发性超敏反应,ＣＤ８＋Ｔ细胞明显升高,提示该复合抗原作为ＨＣＶ Ｐｆ双价疫苗的可行性。     

在大肠杆菌中表达恶性疟原虫裂殖子表面抗原及一些异常现 …

将我国恶性疟原虫ＰＣＣ－１／ＨＮ株ＭＳＡ１第二区基因（ＭＳＡ１Ｒ２）和ＭＳＡ２全基因克隆入ｐＷＲ４５０－１表达载体中，在大肠杆菌中表达了ＭＳＡ１Ｒ２和ＭＳＡ２与β－半乳糖苷酶的融合蛋白，分子量分别为７２ｋＤ和９４ｋＤ，约占菌体蛋白总量的２５￣３０％和５￣８％。用兔抗恶性疟原虫血清进行Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析，诱导的ｐＷＲ－ＭＳＡ１Ｒ２和ｐＷＲ－ＭＳＡ２工程菌分别在７２ｋＤ和９４ｋＤ处出现与抗恶     

在大肠杆菌中表达恶性疟原虫裂殖子表面抗原及一些异常现象的探讨

将我国恶性疟原虫ＦＣＣ－１／ＨＮ株ＭＳＡ１第二区基因（ＭＳＡ１Ｒ２）和ＭＳＡ２全基因克隆入ｐＷＲ４５０－Ｉ表达载体中，在大肠杆菌中表达了ＭＳＡ１Ｒ２和ＭＳＡ２与β－半乳糖苷酶的融合蛋白，分子量分别为７２ｋＤ和９４ｋＤ，约占菌体蛋白总量的２５—３０％和５—８％。用兔抗恶性疟原虫血清进行Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析，诱导的ｐＷＲ－ＭＳＡ１Ｒ２和ｐＷＲ－ＭＳＡ２工程菌分别在７２ｋＤ和９４ｋＤ处出现与抗恶性疟抗体反应的特异染色区带，而未经诱导的工程菌和ｐＷＲ４５０Ｉ转化菌则无反应。对ＭＳＡ２－ｐＷＲ工程菌在诱导后出现的工程菌生长缓慢、表达量低、表达产物分子量偏大等异常现象进行了分析。     

恶性疟原虫疫苗研究VIPfCMR基因与人白细胞介素-2基因的连接与克隆

用限制性内切酶ＥｃｏＲＩ和ＳａｌＩ将恶性疟原虫复合抗原基因ＰｆＣＭＲ从质粒ｐＷＲ４５０－１／ＰｆＣＭＲ中切下，插入质粒ｐＢＶ２２０／ＩＬ－２中人白细胞介素－２（ＩＬ－２）基因的ＥｃｏＲＩ位点。重组质粒转化大肠杆菌ＤＨ５ａ，通过ＰＣＲ扩增和酶切鉴定，筛选出正向插入的重组载体ｐＢＶ２２０／ＰｆＣＭＲ－ＩＬ－２。为表达ＰｆＣＭＲ－ＩＬ－２融合蛋白打下基础。     

猪卵透明带-3α基因在大肠杆菌中的融合表达和鉴定

目的通过遗传工程获得ＺＰ３α融合蛋白,以便用表达产物制备ＺＰ３α单克隆抗体。方法根据重新测序的猪ＺＰ３αｃＤＮＡ５＇端非编码碱基数,ｐＷＲ４５０表达质粒家族的ｐＷＲ４５０－２被选用来表达β－半乳糖苷酶（ＬａｃＺ）／ＺＰ３α融合蛋白。带５＇端非编码区和信号顺序的全长ＺＰ３αｃＤＮＡ片段,用ＥｃｏＲⅠ酶切自ｐＺ５８质粒,然后被重组插入ｐＷＲ４５０－２质粒中被截短ＬａｃＺ＇基因的３＇端多克隆区。此重组质粒转化大肠杆菌ＴＧ１后,ＺＰ３α融合蛋白的表达通过ＩＰＴＧ诱导。结果在１ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ存在下可观察到ＬａｃＺ／ＺＰ３α融合蛋白在大肠杆菌中的表达,表达量约占总细菌蛋白的５％。在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上,融合蛋白显示相对分子质量为１０．２×１０４。在蛋白印迹实验中,融合蛋白显示了与兔抗猪ＺＰＩｇＧ的特异免疫学反应。结论猪ＺＰ３α融合蛋白的可获得性将有助于今后开展制备抗ＺＰ３α单抗和评价它的抗生育功效等研究     

恶性疟原虫HRPⅡ基因的克隆与表达

采用ＰＣＲ方法特异性扩增恶性疟原虫云南株（ＰＦＤ－３／ＹＮ）富含组氨酸蛋白Ⅱ基因,经基因序列测定后克隆于ｐＷＲ４５０－１融合蛋白表达载体,并转化大肠杆菌ＴＧ１。在不同菌体浓度及不同剂量ＩＰＴＧ诱导下检测ＨＲＰⅡ融合蛋白的表达。采用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ及Ｗｅｓｔｅｒｎ－ｂｌｏｔ分析对表达产物进行鉴定。结果显示ＨＲＰⅡ基因与ｐＷＲ４５０－１重组后在大肠杆菌ＴＧ１中表达一６８ＫＤａ的融合蛋白,当工程菌ＯＤ５９０为１．０～１．２时,加入终浓度１ｍｍｏｌ／ＬＩＰＴＧ进行诱导,表达量较高。Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析表明ＨＲＰⅡ基因表达产物能被抗ＨＲＰⅡ单克隆抗体所识别     

抗人C1q轻链可变区基因在E.coli中的表达

应用基因工程技术，将抗人Ｃ１ｑ轻链可变区基因的重组质粒ｐＧＥＭ－Ｃ１ｑＶＬ中分离，克隆进表达载体ｐＪＬＡ５０２。该表达截体含ＣＩＴｓ８５７抑制子基因，通过开温诱导法，重组表达子在宿主菌ＨＢ１０１中表达，获得抗人Ｃ１ｑ轻链可变区片段，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ表明其分子量范围为１２－１３ＫＤ。这为进一步抗人Ｃ１ｑ小抗体的表达积累了经验，有利于用于抗原－抗体结构功能的研究。     

淋球菌膜抗原CppB基因的克隆及在大肠杆菌和减霉鼠伤寒沙门菌中？…

将ＰＣＲ扩增的淋球菌ＣｐｐＢ膜蛋白的基因区段，分别克隆在游离蛋白表达载体ｐＫＫ２２３－３和融合蛋白表达载全ｐＷＲ４５０－１上，以点杂交证实了克隆子。控制合适表达条件，在大肠杆菌中获高效表达，免疫印迹证实其可被淋病患者血清特异识别，将融合蛋白表达质粒转入减毒鼠伤寒沙门氏菌中也获表达，为淋病口服活疫苗的制备奠定了基础。     

足背短肌的应用解剖

本文用手术显微镜及测微器在50侧(男30、女20)成人尸体的标本上对伸(足母)短肌和伸趾短肌的形态.血供和神经支配进行解剖与测量.伸(足母)短肌的长54.8±0.90mm,宽15.90±0.44mm厚3.46±0.18mm;伸趾短肌的长65.65±1.58mm,宽19,46±0.51mm,厚3.43±0.19mm.血供主要来自跗外侧动脉,其起点处的外径1.72±0.09mm,入肌处的外径0.82±0.06mm,可游离的长度24.85±1.41mm;肌肉由腓深神经分支支配.本文还讨论了该肌瓣的临床应用及作为供体时应注意的问题.     

EFFECTS OF GLUCOCORTICOIDS ON DIFFERENTIATION OF ZONA GLOMERULOSA OF FETAL ADRENAL CORTEX OF RATS

The tissue differentiation of the zona glomerulosa of the fetal adrenal cortex of rats was studied by giving experimental treatments to the fetus in vivo. A low-glucocorticoid-condition was given to the fetus by bilateral adrenalectomy of pregnant rats for removing exogenous glucocorticoids from the fetus, and by brain aspiration of the fetuses for removing the fetal pituitary gland (ACTH) and endogenous glucocorticoids. When the fetus was placed under a low-glucocorticoid-condition for the last couple of days of gestation, poor differentiation of the zona glomerulosa occurred speciflcally in the fetal adrenal cortex. The degree of the poor differentiation seemed to be proportional to the duration of the low-glucocorticoid-condition. Supplemental administration of glucocorticoids could prevent this poor differentiation of the zona glomerulosa. These results indicate that the tissue differentiation of the zona glomerulosa of the fetal adrenal cortex depends much on glucocorticoids.     

大鼠角膜中央区SP样、CGRP样免疫阳性纤维的起源

向角膜中央区注射ＨＲＰ后，用抗ＳＰ和抗ＣＧＲＰ抗体对三叉神经节、颈上神经节和迷走神经节进行免疫组织化学处理。结果证明：双重阳性细胞出现于三叉神经节的内侧区且集中分布于背内侧部．ＣＧＲＰ样双重阳性细胞主要分布在节的背内侧部的周边区；ＳＰ样双重阳性细胞散在于节的背内侧部的深部。两者均为圆形或椭圆形。在颈上神经节和迷走神经节内未见双重阳性细胞。     

川楝素对家蝇生长发育的影响

本文通过实验室饲养研究了川楝素对家蝇(Musca     

卫氏并殖吸虫成虫和囊蚴抗原分析

本文报道了应用等电点聚焦电泳(IEF)、聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳(Dise-PAGE)和免疫电泳(IE)对卫氏并殖吸虫成虫和囊蚴抗原进行理化性质和免疫学性质分析的结果。成虫和囊蚴在理化性质方面存在许多相似组分和少数特征组分;成虫和囊蚴存在共同抗原和期特异抗原;期特异抗原大多数含糖脂蛋白,部分期特异抗原为主要血清学抗原。     

云南正常人角膜前曲率半径的测量

测定统计了云南正常人515例(1030)眼的角膜前曲率半径,结果如下:水平经线前曲率半径为7.728±0.301mm((?)±s);垂直经线前曲率半径为7.627±0.307mm.水平经线与垂直经线间以及男女性别间的测定值存在显著差异,而同性别中左右眼间无显著差异,随年龄增大,角膜前曲率半径值呈增大趋势.     

我国恶性疟原虫裂殖子表面蛋白MSP-2的抗原表位分析

根据我国恶性疟原虫株MSP-2基因序列,检索我国虫株MSP-2是否具有国外已鉴定的MSP-2抗原表位。结果显示,我国虫株MSP-2具有已鉴定的FC-27等位基因型可变区抗原表位STNS和DTPTATE。同时应用计算机辅助抗原表位分析技术对MSP-2进行抗原表位分析预测,并以合成肽技术鉴定了预测表位的免疫原性。抗原指数分析表明,MSP-2分子亲水性指数和侧链易曲性指数最高的区域分别位于aa153～166和aa65～72,而aa53～60可能是我国虫株特异的抗原表位。用4个合成肽进行免疫学鉴定,证实预测的表位可以诱导抗肽抗体反应,免疫血清可识别重组MSP-2和恶性疟原虫全抗原中MSP-2抗原区带,且合成肽可与我国流行区高度免疫人群免疫血清反应。由于这些表位存在于我国海南、云南、安徽株MSP-2序列中,可以作为研制我国恶性疟重组多价表位疫苗的候选抗原表位。     

几种实验啮齿动物精母细胞联会复合体的初步观察

本文对实验啮齿动物豚鼠、兔、大白鼠、小白鼠(津白Ⅰ号、津白Ⅱ号和昆明种)精母细胞联会复合体进行了观察。其联会复合体基本组成是相同的,如都包括2条侧体和两侧体间的空间中的一条中体,并有较细的横丝等,但在形态上,还存在一定差异。同源染色体和其间的联会复合体,吸附于核内膜上,核内膜加厚形成板状物,其中体明显到达核膜。性泡是X染色体和Y染色体在减数分裂期间配对。小鼠核仁密切联系性泡。性泡也可紧密贴于核膜,中体上存在有数目不等的小结节。