蒙药野罂粟对腹泻大鼠结肠组织病理形态、VIP含量及VIPRmRNA表达影响的实验研究

目的研究野罂粟对腹泻模型大鼠结肠组织病理形态、血管活性肠肽(VIP)水平及其受体mRNA表达变化,探讨野罂粟抗腹泻的作用机制。方法采用HE染色法观察大鼠结肠组织病理形态,应用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)及反转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR),检测结肠组织VIP含量及VIPRmRNA表达。结果野罂粟能够明显改善大鼠结肠组织病变,且显著降低大鼠结肠组织VIP含量及VIPR1mRNA表达水平(P0.01)。结论野罂粟抗腹泻作用机制与VIP水平及VIPR1mRNA表达下调有关。     

白术、茯苓、白术茯苓汤对脾虚大鼠VIP及VIPR2的基因表达的影响

目的:研究白术、茯苓及白术茯苓汤对血管活性肠肽(VIP)及其VIPR2基因表达的影响.方法:运用大黄厚朴枳实加饥饱失常法复制脾气虚证的动物模型,采用放射免疫及RT-PCR等方法,观察白术、茯芩、白术茯苓汤对脾气虚大鼠血浆及结肠组织VIP的影响.结果:(1)与模型组比较,白术茯苓汤组能下调血浆及结肠组织VIP含量(P＜0.05),茯苓组呈下调趋势.白术组则不明显;(2)与模型组比较,三组方药均可使脾虚大鼠VIPR2的基因表达量下降(P＜0.05).结论:(1)白术茯苓汤组下调脾气虚大鼠VIP含量优于单味药.表明中药配伍运用的必要性和科学性;(2)三组方药均能降低脾虚大鼠VIPR2的基因表达量,可能与白术、茯苓及白术茯苓汤对VIP的作用靶点有异.     

脾气虚证小肠运动异常的VIP/NO信号转导机制初探

目的探讨脾气虚小肠运动异常的细胞信号转导机制。方法Wistar健康大鼠30只,随机分为正常组、模型组、四君子汤防治组,每组10只。采用“破气苦降加饥饱失常法”塑造大鼠脾气虚证模型,分别采用放射免疫法、硝酸还原酶法及分光光度法测定各组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌中血管活性肠肽(VIP)、一氧化氮(NO)含量与一氧化氮合酶(NOS)活性;同步观察各组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌张力变化。结果模型组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌中VIP、NO含量与NOS活性明显低于正常组和四君子汤组,四君子汤组和正常组之间无显著差别;模型组大鼠十二指肠、空肠、回肠平滑肌张力较正常组和四君子汤组明显增强,但四君子汤组和正常组之间未见明显改变。结论脾气虚证与小肠平滑肌VIP/NO信号通路之间具有较好的相关性,该信号通路变化可能是脾虚证小肠运动异常以及脾虚证主要病理生理机制之一。     

脾气虚模型大鼠胃窦血管活性肠肽表达变化及四君子丸对其的影响

目的观察脾气虚模型大鼠胃窦血管活性肠肽的含量及表达水平的变化,探讨脾主运化的现代生物学基础。方法24只SPF级SD大鼠,随机分成3组,每组8只,对照组、脾气虚模型组和四君子组,其中脾气虚组和四君子组采用饮食不节加劳倦的方法建立脾气虚模型共14天,然后通过测定体重、进食量等进行模型评价;模型建立成功后,四君子组采用四君子丸进行灌胃治疗14天,同时对照组和脾气虚模型组采用生理盐水灌胃。采用ELISA法测定血清和胃窦组织VIP含量的变化;采用RT-PCR测定胃组织VIP的mRNA表达水平变化。结果和对照组比较,脾气虚模型大鼠体重、进食量显著降低;和对照组比较,脾气虚模型组大鼠胃窦VIP含量显著升高,VIP的mRNA表达水平显著升高;和脾气虚模型组比较,四君子组大鼠胃窦VIP含量显著降低,VIP的mRNA表达水平显著降低。结论脾气虚模型大鼠胃窦VIP含量升高,VIP的mRNA表达水平显著升高可能是引起胃肠道运动功能降低,食量显著减少的机制之一。     

白术茯苓汤不同配比对脾虚型克罗恩病大鼠结肠VIP及其受体的影响

目的：观察脾虚型克罗恩病（CD）大鼠结肠粘膜中血管活性肠肽（VIP）及其受体（VIPR1）表达的变化,以及白术茯苓汤不同配比对其的影响。方法：采用破气耗气加饥饱失常之复因脾虚造模法结合Morris方法复制脾虚型CD动物模型,白术茯苓汤不同配比灌胃给药,免疫组化法检测结肠组织VIP及VIPR1的蛋白表达。结果：与空白组相比,模型组大鼠结肠VIP及其受体VIPR1蛋白表达明显增高（P〈0.05）;与模型组比较,B5组（白术：茯苓=12：15）、B6组（白术：茯苓=15：12）、B7组（白术：茯苓=18：9）结肠组织VIP及其受体VIPR1蛋白表达明显降低（P〈0.05）。结论：白术茯苓汤B5组、B6组、B7组剂量配比能下调脾虚型克罗恩病结肠组织VIP及其受体VIPR1蛋白表达,从而防止致炎因子的分泌,减轻结肠的炎症反应,发挥其治疗作用。     

电针双侧“足三里”穴对脾气虚模型大鼠小肠及下丘脑组织胃促生长素和血管活性肠肽表达影响的研究

目的:观察电针双侧"足三里"穴对实验性脾气虚大鼠小肠及下丘脑组织胃促生长素(Ghrelin)和血管活性肠肽(VIP)表达的影响,探讨对脾气虚证大鼠的治疗机制。方法:选用健康雄性SD大鼠40只,随机分为4组。其中正常对照组10只,气虚模型组10只,针刺治疗组10只,非经非穴组10只。除正常对照组外,其余3组均采用游泳力竭和饮食不节的复合因素建立脾气虚证模型。电针双侧"足三里"穴治疗6 d后,用10%水合氯醛腹腔麻醉(3 mL/kg体质量)。开腹,取小肠、下丘脑组织,液氮浸泡后冻存于-80℃冰箱待用;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠小肠组织Ghrelin和VIP蛋白含量变化,荧光定量PCR法检测大鼠小肠及下丘脑组织Ghrelin、VIP及其受体mRNA表达的变化。结果:与正常对照组比较,气虚模型组、非经非穴组大鼠下丘脑和小肠组织中Ghrelin及其受体mRNA、VIP及其受体mRNA、Ghrelin和VIP蛋白表达均明显降低(P0.05);与气虚模型组相比,针刺治疗组下丘脑和小肠组织Ghrelin及其受体mRNA、VIP及其受体mRNA、Ghrelin和VIP蛋白表达明显上调(P0.05),非经非穴组未见显著性差异(P0.05)。结论:针刺"足三里"穴通过调节脾气虚大鼠脑肠肽Ghrelin及VIP的表达水平,从能量代谢角度发挥对脾气虚大鼠的调控作用。     

白术茯苓汤不同配比对脾虚型克罗恩病大鼠结肠VIP 及其受体的影响

目的：观察脾虚型克罗恩病（CD）大鼠结肠粘膜中血管活性肠肽（VIP）及其受体（VIPR1）表达的变化,以及白术茯苓汤不同配比对其的影响。方法：采用破气耗气加饥饱失常之复因脾虚造模法结合Morris 方法复制脾虚型CD 动物模型,白术茯苓汤不同配比灌胃给药,免疫组化法检测结肠组织VIP及VIPR1的蛋白表达。结果：与空白组相比,模型组大鼠结肠VIP 及其受体VIPR1蛋白表达明显增高（P<0.05）;与模型组比较,B5组（白术∶茯苓=12∶15）、B6组（白术∶茯苓=15∶12）、B7组（白术∶茯苓=18∶9）结肠组织VIP及其受体VIPR1蛋白表达明显降低（P<0.05）。结论：白术茯苓汤B5组、B6组、B7组剂量配比能下调脾虚型克罗恩病结肠组织VIP及其受体VIPR1 蛋白表达,从而防止致炎因子的分泌,减轻结肠的炎症反应,发挥其治疗作用。     

电针对功能性消化不良模型大鼠胃肠动力及VIP和CGRP水平的影响

目的观察电针对功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)大鼠血管活性肠肽(vasoactive intestinal peptide,VIP)、降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)、胃排空及小肠推进率的影响。方法将48只SD大鼠随机分为空白组、模型组及电针组,每组16只。除空白组外,模型组与电针组大鼠均采用郭氏夹尾刺激法联合不规则饮食法及冰生理盐水灌胃法多因素干预法造模,共14天。造模成功后电针组大鼠取"足三里"、"太冲"穴电针干预,每天1次,干预28天。治疗结束后分别对3组大鼠进行灌胃处理,解剖取材,测定胃内残留率及小肠推进率;观察大鼠胃窦及空肠病理变化;采用Real-time PCR法测定各组大鼠胃窦、空肠组织VIP及CGRP mRNA表达水平。结果 3组大鼠组织均未发现器质性改变,胃肠无溃疡及炎性浸润和腺上皮病变等特征。与空白组比较,模型组大鼠胃内残留率明显升高,小肠推进率降低,胃窦及空肠组织VIP及CGRP mRNA表达水平明显升高(P0.01,P0.05);与模型组比较,电针组大鼠胃内残留率明显降低,小肠推进率明显升高(均P0.01),胃窦及空肠组织VIP及CGRP mRNA表达降低(P0.05,P0.01)。结论电针治疗可降低FD模型大鼠胃肠道VIP及CGRP表达,加速胃排空及小肠推进率。电针改善FD胃肠动力可能与降低胃肠道VIP、CGRP水平有关,提示脑肠肽分泌异常可能是FD发病的重要机制之一。     

“肺肠合病”模型大鼠胃肠组织血管活性肠肽含量变化探讨

目的建立肺病（过敏性哮喘）、肺肠合病（过敏性哮喘合便秘）大鼠模型,通过观察肺病、肺肠合病模型大鼠胃肠组织肠道血管活性肠肽（VIP）含量变化,探索＂肺与大肠相表里＂的相关病理机制。方法实验设空白对照组、肺病组（过敏性哮喘）、肺肠合病组（过敏性哮喘合便秘）共3组。造模结束后大鼠颈椎脱臼法处死,取出胃、十二指肠、空肠、回肠、直肠,用4%多聚甲醛固定1周后进行免疫组化检测。结果与空白对照组比较,肺病组、肺肠合病组大鼠胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠、直肠组织VIP含量无差异（P〉0.05）;肺病组大鼠结肠组织VIP含量有差异（P〈0.05）,肺肠合病组大鼠结肠组织VIP含量有显著差异（P〈0.01）;与肺病组比较,肺肠合病组大鼠结肠组织VIP含量均有差异（P〈0.05）。结论提示肺病可能影响到肠,VIP可能是肺与大肠相联系的共同物质基础,为＂肺与大肠相表里＂理论提供神经肽学方面的现代医学实验依据。     

白术茯苓汤及水煎液提取分离组分对脾气虚大鼠VIP受体的影响

目的 观察白术茯苓汤及其水煎液提取分离组分与组分配伍对脾气虚大鼠VIP受体的调控作用.方法 以大黄厚朴枳实加饥饱失常法复制脾气虚证的动物模型,采用ELISA法检测,观察白术茯苓汤水煎液提取分离组分对脾气虚大鼠肠组织VIP受体的影响.结果 与模型组比较:①白术茯苓汤组、总多糖高剂量组、白术内酯Ⅲ中剂量组、组分配伍中剂量组能降低VIPR1水平(P<0.05);络合物高剂量组能显著降低VIPR1水平(P<0.01).②白术内酯Ⅲ高剂量组、络合物高剂量组、组分配伍中剂量组能降低VIPR2水平(P<0.05);白术茯苓汤组、总多糖高剂量组、络合物中剂量组能显著降低VIPR2水平(P<0.01).结论 白术茯苓汤及各提取分离组分对VIP受体皆有不同程度地下调作用.     

桂枝汤对胃肠运动双向调节作用的研究Ⅱ.对胃动素、胃泌素含量的影响

桂枝汤可降低新斯的明性胃肠功能亢进大鼠的下丘脑、血液、胃窦、十二指肠和空肠胃泌素、胃动素含量的升高；也可使阿托品性胃肠功能受抑大鼠的胃泌素、胃动素含量升高，并使之趋向正常；而对正常大鼠却无明显的影响，提示本方对胃肠运动机能的双向调节是通过调节中枢下丘脑、血液、胃肠局部组织中的胃泌素、胃动素的含量而发挥作用     

四君子汤对动物肠菌失调及正常胃肠功能的药理研究

观察四君子汤对动物肠道菌群失调及正常胃肠功能的药理作用。方法：选用大黄灌胃制造肠道菌群失调模型,选用胃排空、小肠推进运动、胃液分析以及离体肠肌实验。结果：四君子汤对肠道菌群失调的小鼠,能使肠道双歧杆菌和乳酸杆菌菌量明显增加;对正常动物的胃排空、小肠推进运动、胃液分泌以及离体肠肌具有明显的抑制作用     

三拗汤合六君子汤化裁治疗小儿慢性咳嗽临床研究

目的:观察三拗汤合六君子汤化裁治疗小儿慢性咳嗽的临床疗效。方法:将80例慢性咳嗽患儿随机分为治疗组和对照组,每组各40例。对照组给予常规对症治疗,治疗组在对照组的基础上加用三拗汤合六君子汤化裁治疗。观察两组患者的临床疗效,比较两组患者治疗前后症状积分及肺功能变化情况。结果:对照组有效率为62.50%,治疗组有效率为95.00%,两组患者临床疗效比较,差异具有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后中医证候积分明显低于治疗前,且治疗组低于对照组,差异具有统计学意义(P0.05)。两组患者治疗后肺功能改善明显优于治疗前,且治疗组优于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论:三拗汤合六君子汤化裁治疗小儿慢性咳嗽临床疗效显著,且可有效改善患者临床症状。     

中西医结合治疗咳嗽变异性哮喘32例

目的：观察金水六君煎合三拗汤中西医结合治疗咳嗽变异性哮喘的临床疗效.方法：64例咳嗽变异性哮喘患者随机分为两组各32例.对照组予氨茶碱、酮替芬口服.治疗组在对照组治疗基础上予以金水六君煎合三拗汤加味方,2周为1疗程,2个疗程后观察疗效.结果：治疗组临床治愈13例,显效10例,有效6例,无效3例,总有效率90.6%（95%CI=75.0%～98.1%）;对照组临床治愈8例,显效5例,有效12例,无效7例,总有效率78.1%（95%CI=63.8%～92.4%）;两组综合疗效比较（u=2.1034,P=0.0357）,差异有显著性.结论：金水六君煎合三拗汤中西医结合治疗咳嗽变异性哮喘的临床疗效优于单纯西医疗法,其收益为OR=0.37（但95%CI跨过1）,NNT=8（95%CI=3.3～22.2）.     

限食及限水状态下肺、肠组织血管活性肠肽、胆囊收缩素、P物质表达差异的实验研究

目的：比较限食、限水及生理状态下,肺与空肠、回肠、结肠组织上的血管活性肠肽（VIP）、胆囊收缩素（CCK）、P物质（SP）的表达差异,由＂肠病及肺＂探讨肺与大肠的关系。方法：27只SD雌性大鼠,分成限食组、限水组、生理组,每组9只。限食组给予平均进食量的1/2;限水组给予每天饮水量的1/2;生理组正常饮食,饲养7 d。用放射免疫分析法检测各组大鼠肺、空肠、回肠、结肠组织上的VIP、CCK、SP含量。结果：限食组大鼠肺与空肠、回肠、结肠的CCK表达比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;与空肠的VIP、SP表达比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;与回肠、结肠比较,无显著差异;限水组大鼠肺与空肠的VIP、SP比较,表达有显著差异（P〈0.05）;与回肠、结肠表达比较,差异有统计学意义（P〉0.05）;肺与空肠、回肠、结肠的CCK表达比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;生理组大鼠肺与空肠的VIP、CCK、SP表达比较,差异有统计学意义（P〈0.05）;与回肠、结肠表达比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论：无论在限食、限水或者是在生理状态下,肺、结肠和回肠这三者之间的关系都最为密切。同时,VIP、CCK及SP这三种脑肠肽物质是肺、肠之间的物质基础,VIP、SP相较于CCK,更有可能是肺与大肠之间关系密切的物质基础。     

六君子汤中陈皮对脾虚模型大鼠胃肠道调节的药效学研究

目的：研究六君子汤中陈皮对脾虚模型大鼠胃肠道调节的药效学过程,从而明确中药复方配伍后的药效物质基础及作用机制,为后期合理用药提供参考。方法：以脾虚证模型大鼠为研究对象,以胃肠激素水平、CD3细胞百分率及TFF3mRNA表达情况为主要指标,大鼠体质量变化、胃排空率及小肠推进率为辅助指标,追踪并鉴定陈皮胃肠动力调节及胃肠免疫作用的活性成分。结果：各批次六君子汤可显著改善脾虚模型大鼠的一般状态,对脾虚模型大鼠有促进胃排空及小肠推进作用,可显著升高血浆中MTL及血清中GAS的含量,降低血浆中VIP的含量,使小肠黏膜中CD3细胞百分率明显升高,TFF3mRNA的表达情况明显优于造模恢复组及长期造模组。结论：含有陈皮的六君子汤可通过调节胃肠激素水平从而改善脾虚症状引起的胃肠动力紊乱,能够升高免疫细胞的数量,增强TFF3mRNA的表达,可进而促进受损肠黏膜细胞的修复,增强肠黏膜防御能力。     

枳术汤对脾虚便秘小鼠结肠P物质和血管活性肽的影响

目的：观察脾虚便秘小鼠结肠中P物质（SP）和血管活性肽（VIP）的表达,探讨枳术汤对脾虚便秘小鼠胃肠动力靶向调控的可能机制。方法：采用脾虚泄泻、饥饱失常以及燥结便秘等复合因素造模方法制作脾虚便秘模型;造模组分别予以枳术汤、便秘通口服液、蒸馏水干预;用免疫组化染色方法观察SP和VIP的表达情况。结果：模型组和蒸馏水组的SP和VIP的表达均较正常对照组减少（P〈0．01）;经治疗后,枳术汤大、中剂量组恢复接近至正常水平。结论：枳术汤对脾虚便秘小鼠模型胃肠动力靶向的调控机制可能与调节SP和VIP有关。     

桂枝汤有效部位B对胃肠运动双向调节作用的实验研究Ⅵ—对cAMP、蛋白激酶A和C活性的影响

目的：探讨桂枝汤有效部位B(Fr．B)对胃肠运动双向调节的作用机理。方法：应用放射免疫法测定阿托品致胃肠运动受抑或新斯的明致胃肠运动亢进大鼠下丘脑及胃肠组织cAMP含量、PKA和PKC活性。结果：对阿托品致胃肠运动受抑大鼠,Fr．B可拮抗下丘脑和空肠组织cAMP含量及PKA、PKC活性的降低,对胃窦组织PKA活性的降低也具拮抗作用;对新斯的明致胃肠运动亢进大鼠,Fr．B可升高胃窦组织PKA活性、下丘脑和空肠组织PKC活性,对cAMP含量无明显影响。结论：Fr．B对胃肠运动的双向调节与其影响下丘脑及胃肠局部组织中cAMP含量和蛋白激酶活性有关。     

加味六君子汤及金水宝胶囊配合西药综合治疗对稳定期慢性阻塞性肺病肺功能的影响

目的:观察加味六君子汤合金水宝胶囊配合西药治疗脾虚痰瘀、肺肾两虚型稳定期慢性阻塞性肺疾病(COPD)的临床疗效。方法:将100例脾虚痰瘀、肺肾两虚型COPD稳定期患者随机分为两组。对照组50例给予规范化西医综合治疗,治疗组50例在对照组治疗的基础上予加味六君子汤联合金水宝胶囊治疗。两组均以3个月为1个疗程,2个疗程后统计临床疗效,以肺功能和6 min步行距离(6MWD)为观察指标,重点检测患者第一秒用力呼气容积(FEVl)/用力肺活量(FVC)、FEVl、第1秒时间肺活量占预计值百分比(FEVl%)。结果:与对照组比较,治疗组治疗后FEVl(%)(P<0.05)、FEVl/FVC(P<0.05)、6MWD(P<0.01)参数显著提高,差异均有统计学意义。结论:加味六君子汤方加用金水宝胶囊配合西药治疗脾虚痰瘀、肺肾两虚型稳定期COPD疗效可靠,能明显改善肺功能参数。