非小细胞肺癌患者外周血细胞中p53基因突变的研究

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）患者外周血细胞中p53基因突变检测的临床意义。方法收集32例NSCLC患者和30例健康者的外周血标本,采用PCR结合DNA测序方法检测血标本中p53基因突变,然后进行统计学分析。结果①肺癌组32例患者血标本共有12例检测到p53基因突变,突变率为37．5％;健康组30例血标本没有检出p53基因突变。②肺癌患者血液p53基因突变率在（Ⅰ＋Ⅱ）期为9．1％、（Ⅲ＋Ⅳ）期为52．4％,差异有统计学意义（P〈0．05）。结论检测外周血中p53基因突变对于肺癌的诊断、发现远处转移和估计预后具有重要的意义。     

血清p53抗体检测在肺癌诊断中的应用

目的探讨血清p53抗体检测在肺癌早期诊断、疗效判定及判断预后中的临床意义。方法应用ELISA法检测华北煤炭医学院附属开滦医院2000年1月至2003年4月间收治的76例肺癌患者血清p53抗体滴度,经酶联免疫检测仪测定吸光值E450,计算p53抗体指数,进行统计学分析。结果76例中有37例p53抗体阳性,阳性率48.68%;在早期(Ⅰ期)肺癌中,p53抗体阳性率为65.21%;明显高于癌胚抗原(CEA)的阳性率(P<0.05);血清p53抗体与CEA联合检测对肺癌的检出率明显高于单独血清CEA检测对肺癌检出率(P<0.01)。手术治疗、化疗及未接受治疗的3组肺癌患者的p53抗体分别呈现动态降低或升高变化,显示p53抗体与肿瘤负荷、病程及病情恶化程度密切相关(P<0.01及P<0.05)。结论血清p53抗体检测有助于肺癌的诊断及早期诊断;其动态变化规律有助于监测病情、判断疗效及判断预后。     

非小细胞肺癌组织中MinaS3、p53、PCNA的表达及意义

目的 探讨Mina53在非小细胞肺癌中的作用及Mina53、p53、增殖细胞核抗原（PCNA）在其中联合表达的意义。方法用免疫组化S-P法检测34例非小细胞肺癌组织,10例正常肺组织中Mina53、p53、PCNA的表达。结果在正常肺组织中Mina53、p53、PCNA表达量都很少,而在非小细胞肺癌组织中均高度表达。在非小细胞肺癌组织中,Mina53的阳性表达率是52．94％（18／34）,其表达与临床病理分型、淋巴结转移有明显的相关性（P〈0．05）。p53、PCNA的阳性表达率分别是64．71％（22／34）、76．47％（26／34）,其与各临床病理参数均无相关性（P〉0．05）。Mina53、p53、PCNA在非小细胞肺癌组织中的表达两两之间均有相关性（P均〈0．01）。结论Mina53有可能成为非小细胞肺癌的标记物,Mina53与p53、PCNA在非小细胞肺癌中联合检测,可起到互补作用,较全面地反映非小细胞肺癌肿瘤细胞的增殖情况。     

p53、p21^WAF1蛋白在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的 检测原发性非小细胞肺癌中ｐ５３、ｐ２１＾ＷＡＦ１蛋白表达与临床病理及预后的相关性。方法 应用免疫组织化学（ＳＰ法）方法。结果 共检测非小细胞肺癌１４７例,其中鳞癌６３例,腺癌６６例,腺鳞癌１４例,大细胞癌４例。ｐ５３蛋白总阳性率为６１．２％（９０／１４７）,鳞癌阳性率为６３．５％（４０／６３）,腺癌为５７．６％（３８／６６）,腺鳞癌为７１．４％（１０／１４）,大细胞癌２例阳性。ｐ２１＾ＷＡＦ１蛋白总阳性率为４０．１％（５９／１４７）,鳞癌为４１．３％（２６／６３）,腺癌为４２．４％（２８／６６）,腺鳞癌２８．６％（４／１４）,大细胞癌１例阳性。肺腺癌ｐ５３蛋白阳性表达与其预后相关,６６例腺癌中,生存率低于３年组和高于３年组的ｐ５３蛋白阳性率分别为７５％（２１／２８）和４４．７％（１７／３８）,差异显著（Ｐ     

非小细胞肺癌组织中stathmin、p53蛋白表达及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）组织中stathmin、p53表达及其对肿瘤预后和辅助化疗方案的预测作用。方法应用免疫组化二步法检测56例NSCLC组织中的stathmin、p53,并与炎性假瘤对照（良性组）。对其中行根治术后用含紫杉类辅助化疗的32例NSCLC患者的预后进行分析。结果NSCLC组织中stathmin、p53表达阳性率分别为46．43％、35．71％,显著高于良性组（P〈0．05）。stathmin、p53均在低分化和有淋巴转移的NSCLC中表达明显（P〈0．05）。32例术后化疗患者中,stathmin、p53全阳性者的生存率较全阴性者低（P〈0．05）。结论stathmin、053均呈阳性表达预示着NSCLC的恶性程度较高,对含紫杉醇类化疗药物的敏感性较差,术后预后较差。     

非小细胞肺癌患者痰中p53和K-ras检测的意义

目的　研究 p53和 K- ras基因在非小细胞肺癌患者痰中突变率及其意义。方法　研究组为各期非小细胞肺癌患者 ,其中 期 8例 , 期 1 2例 , 期 1 3例 , 期 9例 ;鳞癌 2 0例 ,腺癌 2 2例。对照组慢支、肺结核等良性病变患者 1 3例。两组患者均留取痰标本 ,采用 PCR- SSCP方法分别检测 p53和 K- ras基因 5- 8外显子和 K- ras1 2外显子突变 ,统计发生突变与未发生突变者例数 ,χ2 检验分析结果。结果　研究组和对照组 p53基因突变率分别为 40 .4%和 1 5.4% (P<0 .0 5)。不同分型和分期的患者 p53和 K- ras基因突变均无显著性差异 ,吸烟与未吸烟、化疗与未化疗患者 p53和 K- ras基因突变无显著性差异。研究组 p53和 K- ras基因突变率明显高于对照组 ;研究组 p53和 K- ras基因同时突变率显著高于对照组。结论　p53和 K- ras基因突变联合检测诊断肺癌特异度高。     

p53基因增强非小细胞肺癌细胞对顺铂化学敏感性的研究

我们以具有抑制细胞增殖和促进细胞凋亡的p53基因加入肺癌细胞培养板上,观察它对DNA损伤药顺铂（cisplatin,CDDP）抑癌作用的影响,从分子水平上为提高肺癌疗效拓展新的途径。材料与方法（1）材料：非小细胞肺癌（NSCLC）细胞系LTEP-a-2购自中国科学院上海细胞生物研究所。表达型p53质粒：由美国华盛顿大学吴坡博士赠送。SA阳离子脂质体：购自中国科学院上海生物化学研究所。CDDP：锦州制药厂产,批号961201－4。(2)基因转染：收获对数生长期的LTEP-a-2细胞,继续培养24小时,取所需量的p53cDNA质粒,以每μg质粒50μl的不含小…     

痰液中survivin、p53蛋白检测对肺癌的诊断价值

目的 探讨检测痰液中survivin、p53蛋白在肺癌诊断中的应用价值。方法 采用改良Saccomanno法收集40例肺癌患者、11例肺良性病变者和9名健康者痰液，用流式细胞技术检测痰液中survivin、p53蛋白的表达水平。结果 ①肺癌患者组痰液survivin、p53蛋白的表达量显著高于肺良性病变组和健康对照组（P〈0．05）；肺良性病变组和健康对照组痰液间无显著性差异（P〉0．05）；②痰液中p53蛋白的表达与吸烟指数有关。③痰液中survivin的表达与p53相关（r=0．575，P〈0．01）。结论 ①survivin、p53蛋白表达增高在肺癌的发生中起着重要作用。②痰或诱导痰中survivin、p53蛋白检测有可能为肺癌的诊断提供一个新的无创、安全的辅助方法。     

p53基因内含子与肺癌

内含子是确保基因mRNA正常转录的必需结构,并且影响基因的表达。部分基因的内含子具有核酶作用,能降解特定的mRNA。内含子碱基在数量上占据基因DNA结构的绝大多数,许多酶切位点位于内含子上,通过核酶内切酶的作用使DNA降解是细胞凋亡的重要机制,而肿瘤是一种与细胞凋亡密切相关的疾病。通过这些机制,p53基因内含子的结构变化与肺癌的发生、发展有关。     

血清p53抗体在肺癌早期诊断中的价值

目的探讨p53抗体在肺癌诊断,尤其是早期诊断中的价值。方法应用酶联免疫吸附法（enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测32例健康者、37例肺疾病患者和82例肺癌患者血清中p53抗体的水平。结果肺癌患者血清p53抗体水平显著高于肺疾病及健康者（P〈0.05）;血清p53抗体诊断肺癌的敏感性和特异性分别为29.27%及100%;血清p53抗体阳性率与肺癌病理分型及临床分期无关（P〉0.05）。结论p53抗体可作为肺癌诊断,尤其是早期诊断的新的有价值的标志物。     

小细胞肺癌中P^53基因突变的检测及临床意义

应用聚合酶链反应－单链构象多态性分析的方法，检测了３２例手术切除、甲醛固定、石蜡包埋的小细胞肺癌组织第７、８外显子的突变情况，突变率达５３．１３％（１７／３２），且Ｐ＾５３突变与性别、吸烟史、临床分期及淋巴结转移情况无关（Ｐ〉０．０５）；对所有患者进行随访，发现Ｐ＾５３突变组与未突变组的３年术后生存率的差异有显著性（Ｐ〈０．０５），而１年、２年的术后生存率两组均无显著性差异（Ｐ〉０．０５），从Ｋａ     

非小细胞肺癌患者呼出气冷凝液中p53蛋白检测的临床意义

目的 研究非小细胞肺癌(NSCLC)患者呼出气冷凝液(EBC)中p53蛋白检测的临床意义.方法 收集98例NSCLC患者的EBC和血浆,应用双抗体夹心ABC-ELISA法检测EBC和血浆中p53蛋白表达水平,并与98名健康对照者测定值比较.用免疫组化法检测98例NSCLC患者手术切除标本癌组织中p53蛋白表达.比较肺癌组中不同分型、分期、病理类型、肿瘤大小以及有无淋巴结转移、吸烟史者EBC和血浆中p53蛋白水平和癌组织p53蛋白阳性表达率.应用 ROC曲线分析肺癌组血浆及EBC的p53蛋白诊断肺癌的特异性及敏感性.结果 ①肺癌组EBC中p53蛋白测定值高于健康对照组[(233.99±7.91)ng/L vs(130.26±4.73)ng/L,P＜0.01];肺癌组血浆p53蛋白测定值高于健康对照组[(292.58±8.79)ng/L vs(141.66±3.33)ng/L,P＜0.01].②肺癌组中央型患者EBC中p53蛋白测定值高于周围型患者[(248.22±8.58)ng/L vs(215.78±6.61)ng/L,P＜0.05].③免疫组化阳性组EBC中p53蛋白测定值高于阴性组「(249.77±8.07)ng/L vs(216.86±7.44)ng/L,P＜0.05].④肺癌组中吸烟者血浆p53蛋白测定值高于无吸烟者[(310.18±9.04)ng/L vs(254.55±6.91)ng/L,P＜0.01].⑤癌组织p53蛋白阳性表达率为47.96%(47/98).⑥血浆p53蛋白对于肺癌的诊断的敏感性为95.90%.特异性为90.04%;EBC p53蛋白埘于肺癌的诊断的敏感性为92.90%,特异性为79.59%;肺癌患者p53蛋白诊断最佳参考临界值血浆为175.68 ng/L,EBC为166.26 ng/L.结论 NSCLC患者中EBC p53蛋白的检测有助于肺癌的诊断.

Abstract：

Objective To study the clinical significance of the detection of p53 protein in exhaled breath condensate (EBC) of patients with non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods EBC and plasma of 98 patients with NSCLC were collected,p53 protein expression in EBC and plasma was detected by enzyme-linked immunosorbent assay,and the data were compared with those of 98 healthy controls. p53 protein expression in cancer tissue of 98 patients with NSCLC was detected by immunohistochemistry. p53 protein expression in EBC and plasma and positive expression rate of p53 protein in cancer tissue were compared among patients with different lung cancer type,stage,histologic type,tumor size,and lymph node metastasis,smoking history. The specificity and sensitivity of diagnosis of p53 protein in patients with NSCLC were analyzed by ROC curve. Results ① The level of p53 protein in EBC of patients with NSCLC was significantly higher than that in healthy control group [(233.99±7.91) ng/L vs ( 130. 26 ± 4. 73) ng/L,P ＜0. 01]. The level of p53 protein in serum of patients with NSCI.C was significantly higher than that in healthy control group [(292. 58 ± 8. 79) ng/L vs (141. 66±3. 33) ng/L,P ＜0. 01]. ② The level of p53 protein in EBC of patients with central lung cancer was higher than that in patients with peripheral lung cancer [(248. 22 ± 8. 58) ng/L vs (215. 78 ± 6.61) ng/L,P＜0. 01]. ③The level of p53 protein in EBC of patients with positive immunostaining group was higher than that in negative group [(249.77 ± 8.07) ng/L vs (216.86 ± 7.44) ng/L,P ＜ 0. 05]. ④The level of p53 protein in serum of smokers was significantly higher than that in non-smokers [(310.18 ± 9.04) ng/L vs (254. 55 ± 6. 91) ng/L,P ＜0. 01]. ⑤The positive expression rate of p53 protein in cancer tissue was 47. 96% (47/98). ⑥The sensitivity and specificity of diagnosis of p53 protein were 95. 90% and 90. 04% in plasma,and those were 92. 90% and 79. 59% in EBC. The cut off values of p53 protein were respectively 175. 68 ng/L and 166. 26 ng/L in EBC and serum. Conclusions The detection of p53 protein in EBC of patients with NSCLC is helpful for the diagnosis of lung cancer.     

非小细胞肺癌患者呼出气冷凝液中p53基因突变检测的研究

目的 探讨非小细胞肺癌(NSCLC)患者呼出气冷凝液(EBC)中p53基因突变检测的临床意义.方法 采用PCR结合DNA测序法,检测53例NSCLC患者(治疗前)EBC中p53基因第5、6、7、8外显子的突变情况,32名健康体检者EBC标本作为对照.结果 肺癌组(治疗前)EBC标本中扩增到p53基因26例,其中10例检...     

非小细胞肺癌患者呼出气冷凝液中p53蛋白检测的临床意义

Objective To study the clinical significance of the detection of p53 protein in exhaled breath condensate (EBC) of patients with non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods EBC and plasma of 98 patients with NSCLC were collected,p53 protein expression in EBC and plasma was detected by enzyme-linked immunosorbent assay,and the data were compared with those of 98 healthy controls. p53 protein expression in cancer tissue of 98 patients with NSCLC was detected by immunohistochemistry. p53 protein expression in EBC and plasma and positive expression rate of p53 protein in cancer tissue were compared among patients with different lung cancer type,stage,histologic type,tumor size,and lymph node metastasis,smoking history. The specificity and sensitivity of diagnosis of p53 protein in patients with NSCLC were analyzed by ROC curve. Results ① The level of p53 protein in EBC of patients with NSCLC was significantly higher than that in healthy control group [(233.99±7.91) ng/L vs ( 130. 26 ± 4. 73) ng/L,P ＜0. 01]. The level of p53 protein in serum of patients with NSCI.C was significantly higher than that in healthy control group [(292. 58 ± 8. 79) ng/L vs (141. 66±3. 33) ng/L,P ＜0. 01]. ② The level of p53 protein in EBC of patients with central lung cancer was higher than that in patients with peripheral lung cancer [(248. 22 ± 8. 58) ng/L vs (215. 78 ± 6.61) ng/L,P＜0. 01]. ③The level of p53 protein in EBC of patients with positive immunostaining group was higher than that in negative group [(249.77 ± 8.07) ng/L vs (216.86 ± 7.44) ng/L,P ＜ 0. 05]. ④The level of p53 protein in serum of smokers was significantly higher than that in non-smokers [(310.18 ± 9.04) ng/L vs (254. 55 ± 6. 91) ng/L,P ＜0. 01]. ⑤The positive expression rate of p53 protein in cancer tissue was 47. 96% (47/98). ⑥The sensitivity and specificity of diagnosis of p53 protein were 95. 90% and 90. 04% in plasma,and those were 92. 90% and 79. 59% in EBC. The cut off values of p53 protein were respectively 175. 68 ng/L and 166. 26 ng/L in EBC and serum. Conclusions The detection of p53 protein in EBC of patients with NSCLC is helpful for the diagnosis of lung cancer.     

非小细胞肺癌患者呼出气冷凝液中p53基因突变检测的研究

Objective To investigate the clinical significance of p53 gene mutation in exhaled breath condensate (EBC) of patients with non-small cell lung cancer (NSCLC). Methods The mutations of exons 5,6,7 and 8 of p53 gene in EBC of 53 patients with NSCLC and 32 healthy persons were detected hy polymerase chain reaction and DNA sequencing method. Results In NSCLC group,p53 gene of 26 cases was amplified,p53 gene mutation was found in ten cases of them,the mutation rate was 38. 5%. In control group,p53 gene of 15 cases was amplified,p53 gene mutation was not found. The mutation rate of p53 gene in NSCLC group was higher than that in control group ( P ＜ 0. 01). Conclusions This research had successfully amplificated and analyzed p53 gene mutation in EBC,which will be helpful for pathogenesis research and clinical diagnosis of lung cancer.     

血清VEGF和p53抗体与非小细胞肺癌的相关性研究

目的分析非小细胞肺癌（NSCLC）患者血清VEGF、p53抗体表达水平及其诊断价值。方法采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测69例初诊为NSCLC的患者血清VEGF和p53抗体浓度,另有45例健康志愿者作为对照。结果 NSCLC患者血清VEFG和p53抗体均明显高于对照组健康人群（P〈0.001）,两者在病理分型中腺癌最高（P〈0.001）,临床分期中以Ⅳ期最高（P〈0.001）;VEGF与p53抗体浓度值呈正相关（r=0.762,P〈0.001）;两项联合检测全部NSCLC的敏感性为86.9%,高于单项检测（P〈0.001）。结论 NSCLC患者血清VEFG和p53抗体显著增高,检测患者血清这两项指标对于肺癌的临床辅助诊断有着重要意义。     

血清p53抗体是消化系肿瘤新的标志物

目的　探讨血清p5 3抗体对消化系肿瘤的诊断价值。方法　应用ELISA法检测了食管癌、胃癌、肝癌患者血清中p5 3抗体的浓度。结果　血清p5 3抗体浓度在肿瘤患者和良性疾病对照组中分别为 46 .9pg/mL和 18.6pg/mL(P <0 .0 5 )。以对照组 X± 2S为界值 ( 2 1.3pg/mL) ,则肿瘤组血清p5 3抗体阳性率为 2 1.4%,而对照组则为 5 .6 %(P <0 .0 5 )。肿瘤伴远处转移者p5 3抗体阳性率高于无转移者 (P <0 .0 0 5 ) ,手术后p5 3抗体浓度显著下降 (P <0 .0 5 )。血清p5 3抗体与CEA显著相关 (P <0 .0 0 5 )。血清p5 3抗体对消化系肿瘤诊断的敏感性、特异性、准确性分别为 2 1.4%、94.4%、5 0 %。结论　血清p5 3抗体浓度在消化系肿瘤中异常升高 ,是特异性的肿瘤标志物。     

口腔黏膜癌前病变细胞和患者血清中p53、p16及PCNA的表达及意义

目的 探讨口腔黏膜癌前病变细胞和患者血清中p53、p16及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达及其意义.方法 选择我院口腔科手术切除及活检标本65例,其中口腔扁平苔藓21例,口腔白斑22例,慢性盘状红斑狼疮22例.结果 p53蛋白在慢性盘状红斑狼疮/口腔白斑中表达的阳性率明显高于口腔扁平苔藓,差异有统计学意义(P ＜0.05);p16蛋白在口腔扁平苔藓中表达的阳性率明显高于口腔白斑/慢性盘状红斑狼疮,差异有统计学意义(P ＜0.05);PCNA在慢性盘状红斑狼疮/口腔白斑中表达的阳性率明显高于口腔扁平苔藓,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 p53基因突变使p53蛋白过度表达、p16蛋白表达缺失和PCNA的过度表达与口腔黏膜癌前病变的发生和发展具有相关性,为口腔黏膜癌前病变的诊断提供了理论依据.     

痰标本检测p53基因突变及其在肺癌早期临床诊断中的意义

目的　评价痰标本检测p53基因点突变方法及其作为肺癌早期临床诊断监测指标的真实性和可靠性。方法　用聚合酶链反应（PCR）-单链多肽性（SSCP）-银染法检测54例原发性肺癌患者和114例良性肺疾病患者痰标本中p53基因第5～8外显子的点突变,同时进行痰涂片细胞学检查。结果　p53突变在肺癌组检出率为55.56%(30/54),非肺癌组检出率为1.75%(2/114),P<0.001。痰标本检测p53基因突变作为肺癌临床诊断监测指标的灵敏性为55.56%,特异性为98.25%,阳性似然比为31.75。肺癌组p53阳性检出率（55.56%）与痰涂片瘤细胞阳性检出率（35.19%）比较,差异有显著性（P＜0.05）,关联性有极显著意义（P＜0.01）。肺癌组p53检出率与性别、吸烟指数、病理分型、疾病分期均无明显关系,但与年龄有密切关系,高龄患者（≥60岁）检出率高（P=0.02）。结论　PCR-SSCP-银染法检测痰标本p53突变可以在可疑肺癌患者（如吸烟并慢性肺疾患者）中作为一项随访监测指标,并将有助于肺癌的早期临床诊断。     

非小细胞肺癌组织中VEGF、p16及p53蛋白的表达及意义

目的探讨血管内皮细胞生长因子（VEGF）、p16蛋白及p53蛋白在非小细胞肺癌（NSCLC）发生、发展中的作用。方法应用免疫组化SP法检测82例非小细胞肺癌组织中VEGF、p16及p53表达。结果p53、p16及VEGF总阳性表达率分别为42．7％、45．1％和32．9％。有淋巴结转移者VEGF阳性率显著高于无转移者（P〈0．05）。肺鳞癌中p16与P53同时表达异常（p16阴性表达、p53阳性表达）者VEGF阳性率高于其它表型（P均〈0．05）。p16、p53的异常表达在有淋巴结转移者中分别为34．6％、50．9％,无淋巴结转移者中分别为66．7％、25．9％（P均〈0．05）。p16和p53的异常表达在Ⅲ期患者中的阳性率分别为51．7％和60．O％,在Ⅰ和Ⅱ期分别为58．％和24．4％（P均〈0．05）。结论NSCLC血管生成与p16和p55表达异常有关。