乙型肝炎病毒前S1抗原检测方法及其临床意义探讨

用乙型肝炎病毒(HBV)前S1蛋白合成肽(21～47aa)免疫家兔制备多克隆兔抗前S1抗体,建立前S1抗原ELISA检测方法,对前S1蛋白合成肽的最低检出限为0.1μg/L,可测到2.5×10~5个/Dane颗粒。特异性好,用兔抗前S1抗体可以抑制前S1蛋白合成肽、基因表达前S1蛋白、纯化Dane颗粒和前S1抗原阳性血清与包被抗体的结合。本方法精密度高,批内变异和批间变异的变异系数均不超过0.15。在不同人群中,前S1抗原检出率以慢性活动性乙型肝炎最高。急性乙型肝炎时,前S1抗原与HBeAg平行存在,比HBsAg消失早,作为反映病毒清除的指标优于HBsAg。前S1抗原与HBV-DNA的相关性优于HBeAg,可作为病毒复制与传染性的标志。     

单克隆抗体酶免疫试验检测乙型肝炎病毒基因组前S2区编码的抗原决定簇

作者制备了3株分泌抗前S2McAb的杂交瘤细胞,其中1株是通过用纯化的病毒颗粒免疫小鼠而得,分泌Mo-F124;另2株是用前S2阳性的重组HBsAg颗粒免疫小鼠而成,分别分泌Mo-F376和Mo-F52。Mo-F52为IgM,另2株McAb为IgG1亚类。3株McAb均与前S2阳性的病毒颗粒制剂和重组HBsAg颗粒(前S2和S基因的产物)结合,而不与     

比较含S抗原和前S2+S抗原的酵母重组乙型肝炎疫苗的安全性和免疫原性

作者在104名健康男性成人中比较了含前S2+S抗原的重组疫苗和仅含S抗原的重组疫苗的安全性、耐受性和免疫原性。将志愿者随机分成4组,1组接种仅含S抗原的疫苗(10μg/剂),另3个组分别接种12、24和48μg/剂的前S2+S抗原疫苗(前S2与S的重量比为1:5)。在0、1和6个月肌     

用牛乳头状瘤病毒载体在小鼠细胞中稳定表达含前S2蛋白的HBsAg

adr亚型乙型肝炎病毒(HBV)DNA的BglⅡ大片段(2.8千个碱基)含有HBsAg的前S2和S区。将其插入含有新霉素抗性基因(新霉素磷酸转移酶基因)的牛乳头状瘤病毒载体。该载体还含有SV40拼接和聚(A)附加信号以及小鼠金属硫因启动子。将该DNA重组体转染小鼠C127细胞,建立起一个分泌大量含有前S2蛋白的22nmHBsAg颗粒的稳定的转化细胞系(MS128)。该细胞系以1～4μg/ml/天(18μg/10~7细胞/天)的平均速度分泌HBsAg,并稳定持续51天。分泌的HBsAg颗粒具有多聚人血清白蛋白(pHSA)受体。用免疫沉淀法和聚丙烯酰胺凝胶电泳分析显示,分泌物有22K、26     

乙型肝炎e抗原单克隆抗体的制备、鉴定和诊断应用

快速敏感及特异的检测方法对于乙型肝炎的诊断、监测和可能扑灭是必不可少的。目前普遍公认人血清中最重要的检测标志是HBsAg、HBcAg抗体、HBeAg和HBV DNA。识别特定表型的单克隆抗体(McAb),比常用的多克隆抗体(McAb)有更好的特异性和敏感性。本文介绍用重组抗原免疫制备HBeAg McAb,并用McAb建立一种检测人血清HBeAg的试验方法。免疫用HEeAg系经1%SDS裂解的重组HBcAg纯品。BALB/c小鼠于0、21、42天用重组HBeAg皮下免疫,每次50μg,第一次加福氏完全佐剂,以后用不完全福氏佐剂。融合前4天用50μg HBeAg脾内加强,然后取脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合。杂交瘤培养上清用ELISA筛选,所用     

识别乙型肝炎病毒前S(2)抗原决定簇的单克隆抗体——前S(2)抗原决定簇及抗前S(2)抗体的特征

作者将小鼠骨髓瘤细胞与经乙型肝炎病毒(HBV)免疫的小鼠脾淋巴细胞融合,获得一株分泌单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,所产生的McAb能特异性地识别由HBV基因组前S(2)区编码的抗原决定簇。由这株杂交瘤细胞分泌的McAb Mo-F124能与HBV及重组HBsAg颗粒表面和前S(2)抗原决定簇反应。前S(2)抗原决定簇为前S(2)和S基因产物,即HBV包膜上的34KD糖蛋白,经金     

标准或大剂量S亚单位重组乙型肝炎疫苗与含S亚单位、前S1、前S2颗粒疫苗再接种无应答健康成人的比较研究

为了比较两种剂量[10μg(S10)和 40μg(S40)]市售重组S亚单位乙型肝炎(HB)疫苗和10μg前S1、S2和S亚单位混合颗粒的重组疫苗(MPV)在健康无免疫应答成人中诱生的保护性抗体,作者选取20～64岁对至少三次肌肉注射血源性或酵母重组HB疫苗的基础免疫无应答的成人为受试对象.受试者在年龄、体重、性别、研究前HB疫苗接种次数方面无差异,将受试对象随机分为三组,分别于 0、1、2月接受 MPV、S10或S40疫苗.疫苗接种后的不良反应与以往文献报道一致.发热和注射部位发红、疼痛为最常见反应,分别为5.5%和23%～55%.各组间不良反应率无统计学差别.     

乙型肝炎DNA疫苗在黑猩猩中的免疫原性以及与其他疫苗的比较

以前的研究证实,编码HBsAg的DNA疫苗在小鼠中有良好的免疫效果.本文作者评价了乙型肝炎DNA疫苗在黑猩猩中的免疫原性.作者构建了编码乙型肝炎病毒ayw亚型(前S2+S)抗原的真核表达载体pCMV-S2.S,在0、8、16和27周分别以400μg和2mg的剂量肌肉注射两只黑猩猩(编号分别为CH1545和CH1547),并在52周用重组S蛋白(adw亚型)加强1次;随访72周,每周采血用ELISA检测总抗体、组及亚型特异性抗体.实验结果如下:(1)CH1547初免后抗-HBs水平>100mIU/ml,加强免疫后有持续的高水平抗体(约为1万mIU/ml);CH1545初免后没有检出抗体,加强免疫后抗体水平     

含前S1和前S2抗原的重组乙型肝炎疫苗在小鼠中的免疫原性

作者对由乙型肝炎病毒DNA转染的中国仓鼠卵巢（CHO）细胞分泌的重组乙型肝炎病毒表面（HBs）蛋白20nm颗粒的免疫原性作了评价,并与两种酵母重组疫苗进行了比较。该CHO细胞重组疫苗（Bio-Hep-B）的主要成份是小分子HBs（SHBs）蛋白,还含有中分子HBs（MHBs,即前S2）和大分子HBs（LHBs,即前S1）抗原。两种酵母重组疫苗（Engerix-B和H-B-VaxⅡ）仅含有非糖基化     

前S1抗原和HBV-DNA检测在乙型肝炎病毒检验中的价值

目的分析前S1抗原和乙型肝炎病毒脱氧核糖核酸(HBV-DNA)检测在乙型肝炎病毒检验中的价值。方法200例接受乙型肝炎病毒检查的受检者为研究对象,均进行前S1抗原及HBV-DNA水平检测。分析前S1抗原、HBV-DNA检验HBeAg的表现,前S1抗原、HBV-DNA检验不同乙型肝炎病毒阳性表现。结果前S1抗原检验乙型肝炎e抗原(HBeAg)阳性140例(93.33%),阴性32例(64.00%)。HBV-DNA检验HBeAg阳性135例(90.00%),阴性20例(40.00%)。前S1抗原检验乙型肝炎表面抗原(HBsAg)(+)10例(20.00%),HBeAg(+)HBsAg(+)55例(91.67%),HBeAg(+)HBsAg(+)乙型肝炎核心抗原(HBcAg)(+)85例(94.44%),HBV-DNA检验HBsAg(+)0例(0),HBeAg(+)HBsAg(+)50例(83.33%),HBeAg(+)HBsAg(+)HBcAg(+)85例(94.44%)。结论前S1抗原、HBV-DNA检验在乙型肝炎病毒检验中的价值显著,可作为临床检验标准。     

第三代乙型肝炎疫苗

美国Medeva制药公司用重组哺乳动物细胞研制了第三代乙型肝炎(HB)疫苗Hepagene。现行的HB疫苗由重组酵母制备,仅含HB病毒的S抗原;而Medeva公司的Hepagene则包括完整的表面抗原,是第一种包含前S1和前S2表位的HB疫苗,这两种表位与S抗原一起构成了病毒包膜的主要部分,因此,Hepagene与现行重组疫苗相比,能诱导较高的血清阳转率和抗体应答。     

新型阳离子纳粒-重组抗原鼻内免疫诱导的强粘膜和全身抗体及CTL应答

作者对新型阳离子纳粒 ( SMBVTM)用作两种重组蛋白——乙肝表面抗原 ( HBs Ag)和 β-半乳糖苷酶 ( gal)的鼻内疫苗传递系统进行了评估。 SMBVTM由磷脂层围绕的正电荷多糖核心组成 ,大小 6 0 nm。HBs Ag是颗粒性抗原 ,β- gal是可溶性单体抗原。两种抗原分别与 SMBVTM配方 ,形成 SMBVTM- HBs Ag和 SMBVTM- β- gal,鼻内免疫 7～ 9周龄的雌性 BALB/ c鼠 ,间隔 3周免疫 2或 3次。　　试验结果 :( 1 )配方中 HBs Ag的用量为1、3、1 0μg,β- gal的用量为 1、5、2 0μg时 ,各组均能产生血清 Ig G抗体 ,2或 3次免疫后抗体滴度…     

重组酵母乙型肝炎疫苗在围产期免疫接种无应答者中的免疫原性

本文报道了对围产期免疫接种无应答者再次免疫接种的结果。 作者按0、1和2月程序给1154名新生儿接种血源性乙型肝炎疫苗（437人接种5μg,717人接种10μg）,结果1093人（94.7％）产生良好的抗体应答,166人（15.2％）产生抗乙型肝炎核心抗原（HBcAg）抗体,45人无抗体应答。这45人到4岁时再以0、1和5月程序接种3针默克药厂的重组酵母乙型肝炎疫苗（33人接种10μg,12人接种5μg）,第3剂后1个月以及1、2和4年采集血样,用放射免疫法检测乙型肝炎表面抗原（HBsAg）和抗-HBs水平,酶免疫法检测抗-HBc,对结果进行统计分析。 结果表明,5μg组中HBsAg阳性和乙型肝炎e抗原（HBeAg）阴性母亲的婴儿无应答率明显高于10μg组,而HBsAg阳性和HBeAg阳性母亲的婴儿无应答率两组均最低。再用5μg和10μg重组酵母乙型肝炎疫苗给无应答者接种后,其抗-HBsAg滴度均高于10mIU/ml（包括1名仅接种1剂10μg重组疫苗的儿童,其滴度1年后仍高于100mIU/ml）;4年后,大约30％的儿童（10μg组为13/32、5μg组为1/12）抗体滴度仍高于100mIU/     

含PreS1、PreS2和S抗原的重组乙型肝炎疫苗辅以不同佐剂在HBV转基因小鼠中的免疫原性

目的 研究以免疫刺激复合物(immune stimulating complex,ISCOM)或Al(OH)3为佐剂的含PreS1、PreS2和S抗原的重组乙型肝炎疫苗在HBV转基因小鼠中诱导的免疫应答.方法 将纯化的含PreS1、PreS2和S抗原的重组HBsAg(SS1S2)分别辅以ISCOM或Al(OH)3佐剂制成疫苗.HBV转基因小鼠每月肌内注射1针疫苗,共注射7针.免疫前及每针后1个月称量小鼠体重,观察小鼠生长情况.免疫前及每针后1个月采血,用ELISA检测HBV S、PreS1、PreS2抗原及其相应抗体.7针后1个月分离小鼠脾淋巴细胞,用酶联免疫斑点试验分别测定分泌IL-4、IL-5、IFN-γ的效应T细胞频数.结果 小鼠生长状况良好,每针后体重均有增长.首针后1个月,10只ISCOM+ SS1S2免疫鼠分别有3和1只抗S和PreS1抗体阳转,无一小鼠抗PreS2抗体阳转;10只Al(OH)3+ SS1S2免疫鼠的抗体均为阴性.7针后1个月,10只ISCOM+ SS1 S2免疫鼠的抗S和PreS1抗体均阳转,8只抗PreS2抗体阳转;10只Al(OH)3+ SS1S2免疫鼠分别有9、7和1只抗S、PreS1和PreS2抗体阳转;ISCOM+SS1S2组和Al(OH)3+ SS1S2组的抗S抗体几何平均滴度分别为1∶15 647和1∶1 039,差异有统计学意义0=5.18,P=0.000).7针后1个月,ISCOM+ SS1S2组和Al(OH)3+ SS1S2组分泌IL-4的细胞频数分别为219和78斑点形成细胞(spot-forming cell,SFC)/106细胞(t=10.50,P=0.000),分泌IL-5的细胞频数分别为286和34 SFC/106细胞(t=19.53,P=0.000),差异有统计学意义.结论 含PreS1、PreS2和S抗原的重组乙型肝炎疫苗辅以ISCOM或Al(OH)3佐剂在HBV转基因小鼠中均具有免疫原性,且ISCOM+ SS1 S2的免疫原性强于Al(OH)3+ SS1S2.     

含前S1和前S2抗原的哺乳动物细胞重组乙型肝炎疫苗对儿童的安全性和免疫原性

本文对来自中国仓鼠卵巢（CHO）细胞的基因工程乙型肝炎病毒（HBV）疫苗Bio-Hep-B（含S、前S1和前S2抗原）接种健康儿童的安全性和免疫原性作了评估。 作者将217名抗-HBc IgM、HBsAg、抗-HBs阴性和丙氨酸转氨酶（ALT）水平正常的未经乙型肝炎免疫接种的4～9岁儿童随机分成两组。第1组162人,第2组55人,分别于0、1、6个月注射2.5μgBio-Hep-B疫苗或10μg对照疫苗Engerix-B（仅含S抗原）,注射剂量为0.5ml。在第0、30、60、180、210和360天时采集所有受试者的血样,检测抗-HBs滴度和ALT水平。观察每次接种后5     

乙型肝炎病毒包膜前S120-145区的合成肽的抗体是病毒中和抗体

用合成肽研究证明,乙型肝炎病毒(HBV)包膜蛋白中,存在前S编码序列。在S蛋白(226个氨基酸)氨基末端,有55个氨基酸,它由S区上游的前S区包膜基因编码,称为中分子蛋白。由完整的包膜基因(S和前S)编码的389或400个氨基酸(取决于HBV不同的抗原亚型),称为大分子蛋白。在前S区内有不依赖二硫键的连续的抗原决定簇。S区编码的决定簇和前S编码的决定簇同时存在于HBsAg颗粒上时,前S编码的中分子蛋白决定簇比S编码的决定簇具有更高的免疫原性。实验表明,前S区能诱生中和抗体,抗前S特异性抗体能抑制HBV对肝细胞的粘附。     

重组DNA和血源性乙型肝炎疫苗在儿童中免疫原性的比较

血源性乙型肝炎疫苗(HeVacB)及中国仓鼠卵巢(CHO)细胞重组乙型肝炎疫苗(GenHevacB)分别含5μg和20μg HBsAg,其中前S2蛋白含量分别为1～2%和20%。两种疫苗接种于塞内加尔Dakar地区220名婴儿,按2、4、9或10月龄接种,第1、2针于不同部位同时接种百白破-脊髓灰质炎疫     

乙型肝炎病毒前S1抗原检测及其意义

我们对同时进行乙型肝炎病毒标志物(HBVM)和HBV前S1抗原(PreS1)检测的39例病人,进行统计分析,现报道如下。1资料与方法1.1样本:从我院检测HBVM的血清标本中按各种模式分类随机抽查39例,检测HBV前S1抗原。1.2仪器:奥地利SLT-Ⅲ全自动酶标仪,奥地利SLT全自动洗板机。1.3试剂:HBVM试剂盒,上海科华公司生产。HBV前S1抗原试剂盒,上海阿尔法生物技术有限公司生产。1.4方法:ELISA法,按试剂盒提供的操作说明书操作。2分组及结果将HBsAg阴、阳性标本分为两组,HBsAg阳性组HBV前S1抗原检出率为42%(10/24)。HBsAg阴性组HBV前S1抗…     

重组HIV-1gp160疫苗诱导血清和唾液抗体

作者用重组痘苗病毒/噬菌体T7杂交系统在Vero细胞中表达1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)包膜基因,产生重组糖蛋白(rgp)160抗原,并加入0.25%脱氧胆脂、0.20%Al(OH)_3制成疫苗.分别于0、28、178和365天对6名18～60岁未感染HIV-1的健康志愿者以50μg/次肌肉注射,其中4人     

重组杆状病毒甲型流感血凝素疫苗在健康成人中具有良好的耐受性和免疫原性

作者采用双盲法,对几种重组杆状病毒甲型流感血凝素疫苗(rHAO)的反应原性和免疫原性,与现行标准的三价流感灭活疫苗(TIV)进行了比较.TIV含A/山东/9/93(H3N2)、A/得克萨斯/36/91(H1N1)和B/巴拿马/45/90的血凝素各15μg.rHAO有五种:SF rHAOA/北京/92 45μg疫苗,含45μg重组流感病毒血凝素;SF rHAO A/得克萨斯/91/15μg、45μg和135μg疫苗;SF rHAO双价疫苗,含A/北京/92和A/得克萨斯/91两种病毒的重组血凝素各45μg.选择18～45岁健康成人共153名,以双盲法随机分组接受上述六种制品之一,三角肌肌肉注射0.5ml.随后连续6天记录局部、全身反应症状和严重程度.并于注射前和注射后3周采集血样,分别用血凝抑制(HAI)试验和ELISA检测血凝素(HA)特异性抗体.