Rb基因在鼻咽癌中存在状态的研究

首次应用生物素－１４－ｄＵＴＰ标记Ｒｂ３．８ｋｂ探针，结合亲合素－碱性磷酸酶发光及自显影法，对Ｒｂ基因在鼻咽癌中存在状态进行了研究。杂交结果表明，３例正常胎儿鼻咽组织出现分子量为１２．８、１０．２、８．０、６．２、５．６、５．２及４．８ｋｂ的７条杂文区带，１１例鼻咽癌组织均发现有Ｒｂ基因缺失或失活，其中４例为５．６ｋｂ片段缺失，４例为４．８ｋｂ缺失并有２例伴５．６ｋｂ减弱，２例为１０．２ｋｂ缺失，１例为５．６及５．２ｋｂ片段显著减弱，说明在上述１１例鼻咽癌中均有Ｒｂ基因的改变。这种高频率的异常变化，提示Ｒｂ基因的缺失或失活，与鼻咽癌的发生有密切关系。     

NIDDM患者不同血管并发症ApoE基因型频率分布的研究

采用多聚酶链反应（ＰＣＲ），研究ＮＩＤＤＭ患者不同血管并发症ＡｐｏＥ基因型及其等位基因频率分布。结果：（１）并发冠心病（ＣＨＤ）组∈３／３基因型频率为５２％，显著低于对照组７６％（Ｐ＜０．０１）；∈４／３基因型频率为３４％，显著高于对照组１２％（Ｐ＜０．０１）；∈４等位基因频率为２１％，显著高于对照组９％（Ｐ＜０．０５），∈３频率为７４％，显著低于对照组８６％（Ｐ＜０．０５）。（２）大血管病变组∈３／３、∈４／３、∈４频率分别为５６％、３０％、２０％；∈３／３低于，∈４／３、∈４高于对照组（Ｐ＜０．０５）。（３）高血压组和微血管病变组亦有类似变化，但差异无统计学意义。因此推断，∈４等位基因增加ＮＩＤＤＭ患者血管并发症，尤其是ＣＨＤ的危险性。     

NIDDM患者不同血管并发症ApoE基因型频率分布的…

采用多聚酶链反应（ＰＣＲ），研究ＮＩＤＤＭ患者不同血管并发症ＡｐｏＥ基因型及其等位基因频率分布。结果：（１）并发冠心病（ＣＨＤ）组∈３／３基因型频率为５２％，显著低于对照组７６％（Ｐ〈０．０１）；∈４／３基因型频率为３４％，显著高于对照组１２％（Ｐ〈０．０１）；∈４等位基因频率为２１％，显著高于对照组９％（Ｐ〈０．０５），∈３频率为７４％，显著低于对照组８６％（Ｐ〈０．０５）。（２）大血管病变组∈     

Rb1基因位点P123M1．8多态性的建立及其在Wilson病中的连锁关系

视网膜母细胞瘤易感基因（Ｒｂ１）基因位点位于１３ｑ１４～２１，与Ｗｉｌｓｏｎ病基因位点相距４．４分摩（ｃｅｎｔｉｍｏｒｇａｎｓ，ｃＭ）．中国人Ｒｂ１基因５′端第１个内含子中Ｐ１２３Ｍ１，８标记的等位片段与白种人相同，但杂合率有差异。中国人Ｐ１２３Ｍ１．８／ＢａｍＨⅠ的多态性信息含量（ＰＩＣ）为０．５２，并与Ｗｉｌｓｏｎ病基因位点呈紧密连锁关系（θ＝０．０５，Ｚ＝３．８４６）。应用Ｐ１２３Ｍ１．８标记对９个Ｗｉｌｓｏｎ病家系进行连锁分析，证实该标记可用于Ｗｉｌｓｏｎ病的症状前诊断及杂合子检出。     

中国汉族人群APOE等位基因频率的初步研究

载脂蛋白Ｅ（ａｐｏｌｉｐｏｐｒｏｔｅｉｎＥ，ＡＰＯＥ）基因是一个多功能基因，除调节脂类及脂蛋白代谢之外，近年来还发现它与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病及Ⅲ型高血脂症等病之间有密切关系。为对上述疾病进行病因学研究，作者采用一步法ＰＣＲ技术对４３８名无亲缘关系的中国汉族健康受试者的ＡＰＯＥ基因进行分型，并计算其基因频率分布，结果表明，中国治疗人群ＡＰＯＥ３种等位基因的频率分别为：Ｅ２＝０．０４００，Ｅ３＝０．８     

动脉粥样硬化性脑梗塞患者载脂蛋白B基因的MspⅠ限制性片段长度多态性研究

为了解动脉粥样硬化性脑梗塞（ａｔｈｅｒｏｓｃｌｅｒｏｔｉｃｃｅｒｅｂｒａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ，ＡＣＩ）与载脂蛋白代谢异常的关系，利用ＡｐｏＢｃＤＮＡ探针（ＬＢ１．５）检测了５４名ＡＣＩ患者和６２名正常对照者的载脂蛋白Ｂ（ＡｐｏＢ）基因ＭｓｐⅠ限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）等位基因频率。结果显示，１１６份标本共出现２．３５ｋｂ（Ｍ１）和２．６０ｋｂ（Ｍ２）两条杂交片段。Ｍ２等位基因频率在ＡＣＩ（０．１５７）和对照者（０．０５６）之间存在明显差异（χ２＝７．１７，Ｐ＜０．０１）。Ｍ２基因的检出和基因频率的获得为进一步揭示ＡｐｏＢ基因区域在ＡＣＩ的脂类代谢中的作用提供了一个很好的遗传标记。还就不同基因型与血脂、脂蛋白水平的关系进行了讨论。     

全身性红斑狼疮病人C4基因组DNA限制性片段长度多态性的检测

以Ｃ４基因５＇ｃＤＮＡ片段为探针，经Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交法对２４例全身性红斑狼疮（ＳＬＥ）病人基因组ＤＮＡ的Ｃ４基因限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）进行了分析，并与６０例健康人资料进行了对比。结果显示，ＳＬＥ病人Ｃ４Ａ基因缺失的表型频率与基因型频率远较健康人为高，分别为２９．２％对６．７％（Ｘ＾２＝７．７５，Ｐ＜０．０１）及１８．７％对３．３％（Ｘ＾２＝１０．８，Ｐ＜０．００５）。在两名同合子     

早老素1基因多态性与Alzheimer病的相关研究

目的探讨中国人群中早老素１（ＰＳ１）基因多态性与Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病（ＡＤ）的相关情况。方法应用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）和限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）方法,观察了５８例早发性ＡＤ患者、６５例迟发ＡＤ患者、１５７名正常人中的ＰＳ１多态性分布,并对ＡＤ与ＰＳ１基因的各等位基因和基因型进行关联分析。结果（１）早发ＡＤ患者中,ＰＳ１基因２／２型频率显著降低（Ｐ＜０．０５）;等位基因１频率显著升高,等位基因２频率显著降低（Ｐ＜０．０５）。迟发ＡＤ患者与正常对照之间不存在ＰＳ１等位基因和基因型分布的差异。（２）早发ＡＤ与ＰＳ１等位基因１正关联（ＲＲ＝２．２９,Ｐ＜０．０５）,与等位基因２（ＲＲ＝０．４４）和２／２基因型负关联（ＲＲ＝０．２３,Ｐ＜０．０５）;迟发ＡＤ与ＰＳ１各等位基因及等位基因型之间无明显关联。（３）ＡｐｏＥε４型、早发性及女性ＡＤ患者与ＰＳ１基因的相关性尤为显著。结论中国人群中ＰＳ１基因多态性可能仅与早发ＡＤ之间具有关联,而与迟发ＡＤ无关;这种关联具有年龄、性别差别     

人类bcl—2cDNA在NIH／3T3细胞中的表达

将０．９１ｋｂ的含有完整开放阅读框的人类ｂｃｌ－２ｃＤＮＡ以正向克隆于逆不病毒载体ｐＬ－ＸＳＮ的ＥｃｏＲ１位点，经ＰＡ３１７细胞包装后感染ＮＩＨ／３Ｔ３细胞，筛选出Ｇ４１８抗性克隆，经免疫印迹证实人类ｂｃｌ－２ｃＤＮＡ在ＮＩＨ／３Ｔ３细胞中获得了表达，这一表达人类Ｂｃｌ－２蛋白的哺乳类细胞模型的建立探讨ｂｃｌ－２的作用机制及其与其它基因间关系的研究奠定了基础。     

与成人型多囊肾病基因位点1连锁的微卫星的遗传多态性研究

目的探讨广泛应用于高加索人多囊肾病（ＰＫＤ１）基因诊断的两个微卫星在中国汉族及壮族人群中的多态性及其等位基因频率是否存在群体差异。方法用聚合酶链反应（ＰＣＲ）扩增与ＰＫＤ１连锁的两个微卫星，１０％非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳结合ＤＮＡ序列测定检测ＰＣＲ产物。结果ＡＣ２．５和ＳＭ７两个微卫星：（１）在汉族中分别观察到１０和１１个等位基因，期望杂合度分别为６８．４％及７７．４％，多态信息含量（ＰＩＣ）分别为０．６８及０．７７；（２）在壮族中分别观察到８及９个等位基因，期望杂合度分别６７．１％及５７．５％，ＰＩＣ分别为０．６７及０．５７；（３）６个ＡＣ２．５等位基因的频率及８个ＳＭ７等位基因的频率存在群体差异（Ｐ＜０．０５）。结论ＡＣ２．５和ＳＭ７在汉族和壮族中均高度多态（ＳＭ７在壮族中稍差），可用于汉、壮族人ＰＫＤ１基因诊断。同时，这两个微卫星的等位基因频率分布具有群体差异，在应用它们进行基因诊断和疾病关联性研究时应引起注意。     

HLA-A, -B及-DRB1等位基因的多态性与白血病易感性的关联

目的:探讨甘肃汉族人群中白血病的易感性与HLA基因多态性之间的关联。方法:采用序列特异性寡核苷酸探针杂交技术(PCR-SSO),对57例白血病患者和45例健康对照组进行HLA-A、-B及-DRB1基因分型。结果:在等位基因HLA-A、-B及-DRB1中,白血病患者的HLA-A01、-B38及-DR15基因的基因频率高于正常对照组(P<0.05),而HLA-A11及-DR03基因的基因频率明显下降(P<0.05)。结论:甘肃省汉族人群基因HLA-A01、-B38及-DR15对白血病具有遗传易感作用;而基因HLA-A11和-DR03对白血病具有遗传拮抗作用。     

HLA-DRB1基因多态性与慢性髓性白血病的相关性研究

目的:探讨HLA-DRB1等位基因多态性与慢性髓性白血病(CML)关联性。方法:采用序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)DNA分型技术对762例慢性髓性白血病患者(男性492例,女性270例)及2 264例正常对照进行了HLA-DRB1基因分型。结果:正常人群的HLA-DRB1*15等位基因频率最高(17.25%),其次为DRB1*09(14.05%)、DRB1*12(11.73%)和DRB1*04(10.98%),DRB1*10等位基因频率最低(1.39%)。CML患者HLA-DRB1*08等位基因频率显著高于正常对照组(7.48%vs 5.39%,χ2=8.963,OR=1.023,P=0.004),男性患者的DRB1*08基因频率也明显高于正常对照(7.72%vs 5.39%,χ2=8.059,OR=1.025,P=0.007)。女性患者的DRB1*08基因频率也高于正常对照(7.04%vs 5.39%,χ2=0.115,OR=0.995,P=0.774),但没有统计学差异。结论:CML男性患者HLA-DRB1*08的表达明显高于正常人群,提示DRB1*08可能是男性CML患者的易感基因。     

PGM3 LOCUS AND ITS GENETIC POLYMORPHISM IN LEUCOCYTES OF GOATS

PGM₃ activity was investigated in 150 ‘Boerbok’ goats and 132 Angora goats by means of horizontal starch gel electrophoresis. In ‘Boerbok’ goats no polymorphism was found. In Angora goats three different phenotypes have been recognized: F, S, and FS. The results suggest the occurrence of two common alleles: PGM₃-^F and PGM₃-^S at an autosomal locus with frequencies of 0.6176 and 0.3824, respectively.     

中国汉族两群体HLA-DQA1基因的遗传构成及有关15群体DQA1基因频率的比较分析

以HLA基因的PCR-RFLP分型方法研究了哈尔滨地区(Hans-H,71例)和上海地区(Hans-S,98例)两个汉族群体HLA-DQA1座位的遗传多态性。共检出8种等位基因。两群体均以DQA1*0301频率最高,而*0401最低(哈尔滨群体未检出),频率分布符合Hardy-Weinberg平衡。综合分析华人12群体及日本人、高加索人和尼格鲁人等3群体的HLA-DQA1的基因频率显示:卡方总体检验Hans-H及Hans-S与北方华人其它4群体(除维族)间相互无显著差异(P>0.05)),但逐项检验群体间多存在一个至几个基因频率的显著差异(P<0.05～0.001)。总体检验北方华人6群体(包括Hans-S)与南方5群体间均有显著差异(P<0.05～0.001),但满族与南方汉人3群体总体检验无显著差异(P>0.05),而维族与北方华人6群体则有显著差异(P<0.05～0.001)。另外,华人与异族间总体均有非常显著差异(P<0.001),但相对而言,华人(尤其是北方人)与日本人最为接近,华人与高加索人相似性较大,与尼格鲁人差异最大,而高加索人与尼格鲁人差异也较小。并对上述结果进行了讨论。     

HLA-DRB1基因多态性与急性淋巴细胞白血病和慢性髓性白血病易感性关联的研究

目的探讨急性淋巴细胞白血病（ALL）和慢性髓性白血病（CML）易感性与HLA-DRB1基因多态性之间的关联性,找出急性淋巴细胞白血病和慢性髓性白血病的易感基因。方法采用序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）DNA分型技术对56例ALL患者、48例CML患者和105例健康对照进行了HLA-DRB1基因分型。结果ALL患者组与HLA-DR7基因关联,基因频率为24.1%,RR=2.56,χ     

汉族人群4q亚端粒区等位片段4qA和4qB的结构特征

目的研究中国人4q35亚端粒区等位片段4qA和4qB的结构特征,探讨其与面肩肱型肌营养不良症（facioscapulohumeral muscular dystrophy,FSHD）的内在联系。方法研究对象包括80名无血缘关系的健康成年人。低熔点胶包埋法抽提基因组DNA。同一样品分别进行EcoRⅠ酶切、EcoRⅠ/BlnⅠ双酶切和HindⅢ酶切,脉冲电场电泳分离,p13E-11、4qA和4qB探针Southern印迹,计算4qA/4qB的频率、基因型频率及各型EcoRⅠ片段的长度,SPSS13.0统计软件分析数据。结果4q亚端粒区4qA的频率（46.9%）与4qB（53.1%）基本相等（χ2=1.250,P〉0.05）,4qA/4qB杂合型频率明显高于纯合型频率（P〈0.05）,4qA型和4qB型EcoRⅠ片段长度分别为（115.8±11.9）kb和（98.3±8.6）kb,两者差异有统计学意义（t=23.04,P〈0.001）。8.8%（7/80）的个体检测到易位构型。2名个体出现4qB型短EcoRⅠ片段。结论正常中国人4q亚端粒区4qA和4qB的频率基本相等,杂合型频率明显高于纯合型频率。4qB型D4Z4缺失不致病。4qA和4qB型EcoRⅠ片段具有动态性变化特征。     

联合应用STR连锁分析与多重等位基因特异PCR进行PKU基因诊断

应用ＰＣＲ结合银染色显色法分析了苯丙氨酸羟化酶基因内含子３中１个四核苷酸（ＴＣＴＡ）重复序列的多态性，结果表明：在５２例正常人和２３个ＰＫＵ家系中检测到９种等位基因片段，从２２４～２５６ｂｐ连续分布，其中２２４ｂｐ等位片段第１次在中国人群中被检测到，多态信息量（ＰＩＣ）分别为０．６５４和０．７３０。同时分析了ＳＴＲ多态性与多重等位基因特异ＰＣＲ（ＭＡＳＰＣＲ）在ＰＫＵ基因诊断中的联合应用，结果表明     

RB患者及家庭成员Rb基因突变和患病风险的基因诊断及遗传咨询

目的建立Ｒｂ基因突变的基因诊断方法，正确估计视网膜母细胞瘤（ＲＢ）患者的预后及其家庭成员的患病风险。方法综合利用Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交、ＳＳＣＰ分析、直接ＤＮＡ序列测定等多种分子生物学技术作染色体单体型分析及Ｒｂ基因点突变的直接检测。结果７９个有Ｒｂ基因突变的ＲＢ家系中２５例先证者仅查出体细胞起源的Ｒｂ基因突变，其余５４例存在生殖细胞起源的Ｒｂ基因突变，其中３６例突变是新产生的，１５例突变由亲代遗传而来，此外，尚有３例Ｒｂ基因突变嵌合体。结论直接检测Ｒｂ基因点突变可不依赖于患者家庭成员ＲＢ发病情况的遗传背景资料诊断患者是否属于遗传型，正确估计患者的预后；并能在肿瘤发生前甚至产前检出Ｒｂ基因突变携带者，正确估计患病风险     

N—乙酰化转移酶基因多态与肝癌遗传易感性的研究

为探讨Ｎ－乙酰化转移酶（ＮＡＴ）基因多态与肝癌遗传易感性的关系，应用ＰＣＲ、ＡＳＰＣＲ和ＲＦＬＰ，对６５例肝癌患者和１０６例健康对照进行了研究。结果表明，病例组慢型基因频率为７０．７７％，对照组为５２．８３％，两者差异显著（Ｐ＝０．００１）。ＯＲ值为２．１６，ＥＦ值为０．３８０１。提示携带慢型基因者患肝癌的危险性增加１．１６倍，由慢型基因所致的肝癌病例占人群中全部肝癌病例的３８．０１％。病例组基因型Ｆ１／Ｆ１、Ｆ１／Ｓ和Ｓ／Ｓ的频率分别为９．２３％、４０．００％和５０．７７％，对照组则分别为２２．６４％、４９．０６％和２８．３０％，两者差异显著（Ｐ＝０．００５６）。ＯＲ值分别为１．００、２．００和４．４０，存在剂量反应关系。发现４个新的慢型基因亚型，其点突变组合为３４１／５９０、５９０／８０３、２８２／３４１／５９０、２８２／３４１，将其暂命名为Ｓ９，Ｓ１０，Ｓ１１和Ｓ１２。