何首乌及其混伪品的凝胶电泳鉴别

对何首乌及其五种混伪品进行聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴别研究。结果表明,其电泳谱带的差异可作为何首乌及其混伪品的鉴别依据。     

武当山何首乌及其混伪品的鉴定研究进展

通过对武当山何首乌作用情况的调查,发现何首乌混伪品５种;将头花千金藤误作何首乌钐,极易发生中毒,就彻底纠正;将凝胶电泳、ＵＶ、ＩＲ光谱技术应用于何首乌及其混伪品鉴别之中,编制出鉴别检索表,使鉴定方法更趋完善;“人形雌雄何首乌”属无稽之谈,植物块根不可能分化出人体五官、性别特征;经考证,古时的何首乌混淆品宕芋,即为现今的冀蓼;探讨何首乌种混淆的历史渊源,分析将“雌雄”引用于中药名称中的利与弊,防止产     

何首乌及其混伪品理化鉴别

采用薄层色谱法和紫外光谱法,以大黄素、大黄酚、二苯乙烯甙作为客观指标,鉴别何首乌及其混伪品,方法简便、可靠。毛脉蓼与何首乌理化鉴别特征的相似性,揭示二者含有多种相同的成份,为寻找何首乌新的药用资源提供了信息。     

何首乌混伪品历史渊源与宕芋考证

经考证,本草中何首乌混淆品宕芋即为现今的翼蓼;在探讨何首乌出现混伪品历史渊源的同时,提出澄清办法。     

何首乌及其混伪品的鉴别检索(Ⅰ基原性状)

经过对何首乌及其４种混淆品、１种伪品的鉴定,分别从原植物、性状、组织、粉末显微特征４方面编制成检索表,使其更趋系统性和实用性。     

基于ITS2 序列鉴定南北葶苈子药材及其混伪品

目的：利用ITS2 序列对多基原药材葶苈子及其混伪品进行分子鉴定,以保证药材质量及临床疗效。方法：提取46 份葶苈子药材及其混伪品的DNA,通过聚合酶链式反应（PCR）扩增其ITS2 序列并双向测序,应用CodonCode Aligner v 4.25 对测序峰图进行校对拼接,并去除低质量序列及引物区,得到ITS2 序列。用MEGA 6.0 软件计算物种种内和种间Kimura 2-parameter（K2P）遗传距离,分析变异位点并构建邻接（NJ）系统聚类树,综合应用相似性搜索法、最近距离法以及NJ 系统发育树等进行鉴定分析。结果：葶苈子的基原植物播娘蒿和独行菜的种内最大K2P 遗传距离分别为0.021 和0.010,均小于其与混伪品之间的种间最小K2P 遗传距离;NJ 树结果显示播娘蒿和独行菜各自聚为一支,表现出良好的单系性,均可与混伪品明显区分开。结论：以上几种鉴定方法分析结果表明,ITS2 序列能准确鉴别南北葶苈子药材与混伪品,为保障临床安全用药提供了新的技术手段。     

基于ITS2 序列的车前子原植物及其混伪品的分子鉴定

目的：通过分析车前子原植物及其混伪品的ITS2 条形码序列,探索鉴定车前子及其混伪品的新方法。方法：对研究材料进行DNA 提取、PCR 扩增和双向测序,所得序列经过CodonCode Aligner 拼接后,用软件MEGA5 进行相关数据分析,计算其种间、种内遗传距离,并利用已建立的ITS2 数据库及其网站预测ITS2 二级结构和构建系统发育树。结果：车前种内最大K2P 距离为0.009 9,与混伪品种间最小K2P 距离为0.497 6;平车前种内最大K2P 距离为0.005 2,与混伪品种间最小K2P 距离为0.519 1。车前子基原植物与其混伪品的二级结构的分子形态均有明显差异。由所构建的系统聚类树可以看出,车前与平车前的不同来源样品聚在一支,并能很好与混伪品区分开。结论：ITS2 条形码序列能够成功鉴定车前子基原植物与其混伪品,为车前子的基原鉴定提供了新的方法。     

基于ITS2条形码序列鉴定中药材佩兰及其混伪品

目的:对中药材佩兰及其混伪品进行ITS2条形码鉴定,以确保该药材的质量以及临床疗效。方法:提取佩兰的DNA,利用PCR技术扩增其ITS2序列,双向测序,所得序列经过CodonCodeAligner拼接后,用软件MEGA5进行相关数据分析,计算其种内、种间遗传距离,并构建系统发育树。结果:佩兰药材的ITS2序列长度为218 bp;佩兰种内最大K2P距离为0.009,与混伪品种间最小K2P距离为0.024。ITS2序列的NJ系统聚类树可明显区分佩兰药材及其混伪品,表现出良好的单系性。结论:ITS2条形码序列能够成功鉴定中药材佩兰与其混伪品,为保障临床安全用药提供了新的技术方法。     

三叶青相关序列扩增多态性-聚合酶链式反应体系的建立与优化

目的建立浙江和江西产的三叶青(Tetrastigma hemsleyanum)SRAP-PCR的反应体系和扩增程序。方法应用L9(34)正交设计方法,以三叶青基因组DNA为模板,研究了Mg2+、dNTP、引物和模板DNA 4种PCR反应组分浓度变化对扩增结果的影响,根据梯度PCR仪引物的条带数量及清晰度选择退火温度。结果优化后的25μL反应体系包含:10×PCR buffer2.5μL,2.5mmol/L MgCl2,0.15mmol/Ld NTP,0.15μmol/L引物,1.0U Taq DNA聚合酶,50ng DNA模板。扩增程序的最佳退火温度为51℃。并筛选出8对扩增产物丰富,多态性好的引物。结论正交设计优化的三叶青SRAP反应体系,经过10份样品检验,证明该体系稳定可靠,多态性好,可用于三叶青遗传多样性分析。     

基于psbA-trnH序列的芦根及其混伪品DNA条形码鉴定

目的:应用psb A-trnH序列对芦根及其混伪品进行鉴定研究,为该药材的临床用药安全和市场监管等方面提供参考。方法:对芦根及其基原物种进行DNA提取、PCR扩增psb A-trnH序列、双向测序,结合Gen Bank下载序列,对序列进行比对、计算遗传距离、构建NJ系统聚类树。结果:芦根psb A-trnH序列长度为482～483 bp,种内有2个变异位点,有2种单倍型,G+C含量为37. 7%～37. 8%。芦根psb A-trnH序列种内遗传距离为0～0. 004 2,芦根与其混伪品的种间遗传距离为0. 008 3～0. 036 1,大于芦根种内最大遗传距离。基于psb A-trnH序列构建的NJ聚类树显示,芦根样品单独聚为一支,其混伪品各自聚为一支。结论:应用psb A-trnH序列可以鉴别芦根及其混伪品。     

何首乌ISSR—PCR反应体系的建立与优化

目的 建立和优化ISSR-PCR反应体系.方法 通过单因素实验研究ISSR反应体系中主要成分(模板、Taq DNA聚合酶、Mg2 、引物、dNTPs)以及退火温度对扩增结果的影响.结果 建立了适合何首乌ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μl反应体系中,内含1×Taq酶配套缓冲液、100ng模板、1.5 U Taq DNA聚合酶、1.5 mmol/L Mg2 、0.6μmol/L引物、0.2 mmol/L dNTPs.扩增程序为94℃预变性5 min;然后是94℃变性45s,(据不同引物的退火温度)复性1 min,72℃延伸1.5 min,共35个循环;72℃延伸7 min,4℃保存.结论 这一优化体系的建立为今后利用ISSR标记技术进行何首乌鉴定及种质资源遗传多样性分析提供了一个标准化程序.     

何首乌规范化生产操作规程(SOP)(草案)

1 主要内容与适用范围 1.1 主要内容 本规程按我国中药材GAP产品标准规定了贵州省施秉县何首乌产区有关何首乌规范化生产的综合技术要求。 1.2适用范围 本规程适用于贵州省施秉县何首乌主要生产区。 栽培品种为蓼科植物何首乌Polygonum muitiforum Thunb。 按本规程实施,3年生可产鲜何首乌2.5万kg/hm~2     

制何首乌与其伪品制番薯的多种鉴别方法

目的:为何首乌的真伪鉴别提供科学依据。方法:性状鉴别、理化鉴别、TLC、HPLC。结果:二者有显著差异。结论:4种方法均可用于区分何首乌及其伪品制番薯。     

中药何首乌总基因组DNA的提取

目的为获得高质量的何首乌总基因组DNA。方法采用CTAB法提取,对其提取方法进行改进。结果用改进的方法提取的样品DNA的OD260/OD280值在1.630~1.955之间,琼脂糖凝胶上主带清晰、降解较少,能完全被限制性内切酶EcoRⅠ和M seⅠ完全酶切,得到合适的AFLP指纹样式。结论改良的CTAB法提示提取何首乌DNA的理想方法,适合AFLP-PCR反应和其他分子生物学应用。     

何首乌及其炮制品中二苯乙烯甙含量测定

应用一阶导数光谱法测定何首乌及其炮制品中二苯乙烯甙的含量。实验结果表明:本法操作简便,重现性好,结果稳定,可用为何首乌炮制质量标准之一。     

氮素营养失调对一年生何首乌生物量的影响△

该试验采用砂培的方式,以何首乌扦插苗为材料,研究了氮素营养失调对一年生何首乌生物量的影响,结果表明:缺氮处理一年生何首乌迅速表现症状,叶绿素含量较低,氮元素过量地上部徒长、有蚜虫,叶绿素含量较高;缺氮处理何首乌地上部质量较小,与正常处理间差异达极显著水平,氮素过量何首乌地上部质量与正常处理差异不大;氮素过量与不足何首乌块根质量均较低与正常处理间达极显著水平,缺氮处理根系增多,膨大的块根较少或无,须根系较多;无氮处理根冠比、比重和折干率均为最高。     

Antioxidant activities of Polygonum multiflorum Thunb., in vivo and in vitro

We have demonstrated the presence of both in vivo and in vitro antioxidant activities in the crude water-extract of the root of Polygonum multiflorum Thunb. (PMC), as indicated by its ability to protect against CCl₄-induced hepatotoxicity in rats and to scavenge ferri-heme oxidants generated in an in vitro system. Activity-directed fractionation of the PMC indicated that the antioxidant components were contained in the ethylacetate fraction.     

何首乌的提取工艺研究

目的研究不同提取工艺对何首乌浸膏中二苯乙烯苷和总糖的影响,优选制备何首乌浸膏的提取工艺。方法以蒸制何首乌为原料,何首乌中二苯乙烯苷和总糖的提取量为指标,采用旋转响应表面实验设计对何首乌浸膏制备过程中的水提取工艺进行研究。结果最佳的提取工艺为何首乌饮片与水比例1∶10.5,每次加热提取1.5h,提取3次,此条件下何首乌中二苯乙烯苷提取量达2.70%,总糖提取量达6.23%。结论该方法适用于何首乌的提取。     

转基因何首乌毛状根化学成分的研究

目的研究转基因何首乌毛状根中的化学成分。方法采用硅胶、Sephadex LH-20、ODS柱色谱等方法分离何首乌毛状根中的化学成分，并根据理化性质和波谱数据鉴定其化学结构。结果从何首乌毛状根60％乙醇提取物中分离得到了12个化合物。利用理化性质及波谱技术确定其结构分别为：2，3，5，4’-四羟基反式二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（1）、没食子酸（2）、没食子酸甲酯（3）、3，5-二羟基苯甲酸（4）、丁香酸（5）、对羟基苯甲酸（6）、胡萝卜苷（7）、β-谷甾醇（8）、豆甾醇（9）、烟酸（10）、碳直链十七酸（11）、碳直链三十一酸（12）。结论上述12个化合物均为首次从转基因何首乌毛状根中分离得到；化合物3，4，5，6为首次从该种植物中分离得到。