左旋千金藤啶碱对缺氧纹状体和海马脑片Ca^＋／CaM PKⅡ和PKA活 …

目的 研究左旋千金藤啶碱对Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性的影响。方法 采用大鼠海马及纹状体病片体外缺血模型,用放射性＾３２Ｐ－ＡＰＫ掺入法测定Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性。结果 体外培养的纹状体和海马脑片在缺血３０ｍｉｎ后,Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性均明显下降,纹状体ＰＫＡ活性增加,于缺血前１０ｍｉｎ加入不同浓度ＳＰＤ后,二酶活性较单纯缺血均有明显改变。结论 ＳＰＤ对纹状体ＰＫＡ以及纹状体和     

左旋千金藤啶碱对缺氧纹状体和海马脑片Ca~(2 )/CaMPKⅡ和PKA活性的影响

目的研究左旋千金藤啶碱（ＳＰＤ）对Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性的影响。方法采用大鼠海马及纹状体脑片体外缺血模型,用放射性３２Ｐ－ＡＴＰ掺入法测定Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫＩ活性。结果体外培养的纹状体和海马脑片在缺血３０ｍｉｎ后,Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性均明显下降,纹状体ＰＫＡ活性增加,于缺血前１０ｍｉｎ加入不同浓度ＳＰＤ后,二酶活性较单纯缺血均有明显改变。结论ＳＰＤ对纹状体ＰＫＡ以及纹状体和海马Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性在缺血时的活性改变有一定的保护作用     

多巴胺对大鼠海马和新纹状体脑片Ca^2＋／CaM PKⅡ活性的影响

目的 研究多巴胺（ＤＡ）对Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性的影响。方法 采用大鼠海马、新纹状体脑片体外培养模型，以＾３２Ｐ掺入法测定Ｃａ＾２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性。结果（１）单纯外源性ＤＡ引起Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性显著下降；海马、新纹状体脑片引起最大抑制作用的ＤＡ浓度分别是５００、１０μｍｏｌ／Ｌ。（２）酶活性随ＤＡ作用时间的延长逐渐下降；海马脑片１００μｍｏｌ／Ｌ ＤＡ作用２０ｍｉｎ酶活性方     

MK801拮抗脑缺血导致的Ca~(2 )/CaMPKⅡ活性抑制

目的研究脑缺血兴奋毒性与Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ的关系。方法采用离体孵育的大鼠海马脑片制备“缺血”模型。采用３２Ｐ标记，滤纸片吸附法测定Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性。结果①Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性随“缺血”时间延长而降低，“缺血”３０ｍｉｎ可降至正常的１６．４％；②单纯过量外源性谷氨酸作用３０ｍｉｎ可导致Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性降低；无胞外Ｃａ２＋时，谷氨酸导致的酶活性抑制程度不如有胞外Ｃａ２＋时显著；③ＭＫ８０１对“缺血”导致的Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性抑制有部分拮抗作用，２５μｍｏｌ／ＬＭＫ８０１可使“缺血”３０ｍｉｎ的Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性恢复至正常的４３．８％。结论脑缺血导致的Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性抑制可被ＭＫ８０１部分拮抗，说明其活性抑制与ＮＭＤＡ受体介导的兴奋性毒性作用有关。     

谷氨酸对培养的皮质神经元Ca~(2 )/CaMPKⅡ活性的影响

目的研究谷氨酸（Ｇｌｕ）对皮质神经元的损伤及对Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性的影响。方法５００μｍｏｌ／ＬＧｌｕ作用１０ｍｉｎ，测Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ及乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）活性。结果Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性和正常对照相比下降４６．３％，１００μｍｏｌ／Ｌ氯胺酮几乎完全保护该酶活性；ＬＤＨ活性在１ｈ时无明显变化，２４ｈ时明显升高。结论（１）Ｇｌｕ对皮质神经元损伤致Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性下降早于ＬＤＨ变化；（２）Ｃａ２＋／ＣａＭＰＫⅡ活性下降主要由ＮＭＤＡ受体介导，与非ＮＭＤＡ受体无关。     

低温再灌注对海马Ca^2＋／CaM PKⅡ活性及迟发性神经元死亡的影响

目的 研究低温再灌注对海马Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫⅡ活性恢复及迟发性神经元死亡（ＤＮＤ）的影响。     

aFGF和Genistein对AGZY—83A细胞内PKC活性及[Ca^2＋]i的影响

目的：探讨ａＦＧＦ及ＴＰＫ抑制剂Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ对ＡＧＺＹ－８３Ａ细胞内ＰＫＣ活性游离Ｃａ＾２＋浓度的影响。方法：用不同浓度的ａＦＧＦ和Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ诱导ＡＧＺＹ－８３Ａ细胞,（γ－Ｐ＾３２）－ＡＴＰ标记的Ｈｉｓｔｏｎｅ Ⅰ为底物,液体闪烁测定ＰＫＣ活性;Ｆｕｒａ－２／ＡＭ负载荧光光度法测定细胞内游离Ｃａ＾２＋浓度。结果：ａＦＧＦ诱导后,细胞内ＰＫＣ活性及Ｃａ＾２＋浓度升高,且与ａＦＧＦ呈剂     

大鼠纹状体突触体酪氨酸羟化酶自身调节的研究

依赖Ｃａ２＋／ＣａＭ的ＰＫⅡ和依赖Ｃａ２＋／ＰＩ的ＰＫＣ对大鼠纹状体突触体的磷酸化均显著激活酪氨酸羟化酶（ＴＨ）的活性，增加Ｌｄｏｐａ的生成。选择性Ｄ２受体激动剂ＬＹ１７１５５５不影响ＰＫⅡ和ＰＫＣ对ＴＨ的磷酸化激活。ＣａＭ拮抗剂Ｗ７和去除反应液中的Ｃａ２＋均不影响Ｋ＋６０ｍｍｏｌ／Ｌ去极化对纹状体ＴＨ的激活，而ＰＫＣ抑制剂多粘菌素Ｂ却能完全阻滞Ｋ＋去极化对ＴＨ的激活效应。研究结果表明：（１）多巴胺（ＤＡ）自身受体介导的自身递质生物合成的负反馈调控与ＰＫⅡ和ＰＫＣ对ＴＨ的磷酸化激活不偶联；（２）Ｋ＋去极化对ＴＨ的激活是由ＰＫＣ介导的，不受ＤＡ自身受体的调控。     

染铅鼠海马神经原长时程增强过程中Ca^2＋浓度及PKC活性的…

为探讨中枢神经系统铅中毒的生化机制，以慢性染铅鼠为动物模型，用高叔刺激诱发海马区产生长时程增强后，以Ｆｕｒａ－２为Ｃａ＾２＋指示剂，测定海马神经元Ｃａ＾２＋浓度，以放射性［ｒ－＾３２Ｐ］－ＡＴＰ掺入外源性底物方法测定神经元胞浆及胞膜ＰＫＣ活性。结果：染铅组长时程增强过程中Ｃａ＾２＋浓度明显升高（２３６．４８±６１．８３ｎｍｏｌ／Ｌ，与对照组比较有统计学意义（Ｐ〈０．０００１）。ＰＫＣ活性亦升高（胞     

氯胺酮对大鼠海马脑片缺氧诱导Ca^2＋／CaM PKⅡ活性抑制的拮抗 …

目的 研究Ｃａ＾２＋和氯胺酮对海马脑片Ｃａ＾２＋／ＣａＭ ＰＫ Ⅱ活性的影响。方法 采用鼠海马脑片体外缺氧模型进行实验。结果 （１）有钙或无钙培养时，酶活性随缺氧时间的延长均下降，但前者比后者酶活性下降更显著。提示外Ｃａ＾２＋在神经元缺氧损伤中起重要作用；（２）氯胺酮对缺氧所诱导的酶活性抑制均有明显的拮抗作用，说明脑缺氧引起酶活性下降与ＮＭＤＡ受体介导有关。结论 脑缺氧时该酶活性的抑制与下列通路有     

年龄作为高血压危险因素的分子基础

目的 研究高血压的发病基础和年龄与高血压的关系。方法 我们应用酶学测定方法,测定了幼年期、童年期、青春期、青年期和壮年期Ｗｉｓｔａｒ大鼠主动脉（Ａ）、尾动脉（ＣＡ）和肠系膜动脉（ＭＡ）平滑肌的钙／钙调素依赖性蛋白磷酸酶（Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ）的活性。结果 幼年期和童年期各血管间和组间Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性坎显著差异（Ｐ〉０．０５）;青春期三种血管间Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性无显著差异,但活性均明显高于幼年期和童年期组（Ｐ〈０．０１）;青年期三种血管间的Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性无显著差异,但活性均明显高于青春期（Ｐ〈０．０１）;壮年期组Ａ和ＣＡ血管Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性与青年期组无显著差异,但ＭＡＣａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性明显低于青年期（Ｐ〈０．０１）。结论 不同血管的舒张功能随年龄增长逐     

不同年龄自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞Ca^2＋转运功…

应用不同年龄自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）血管平滑肌原代与传代细胞（ＶＳＭＣ），观察Ｃａ＾２＋转运功能障碍及某些相关因素的变化，结果表明：（１）在血压未升高的ＶＳＭＣＣａ＾２＋内流已较同龄对照组ＷＫＹ大鼠明显增加，而Ｃａ＾２＋外流量较ＷＫＹ大鼠显著降低。表明ＳＨＲＶＳＭＣ膜Ｃａ＾２＋转运功能障碍在血压升高前就已发生，并随年龄及血压增高有加重趋势；（２）ＶＳＭＣｃＡＭＰ及钙调素含量变化与细胞膜Ｃａ＾２＋     

aFGF对肺腺癌AGZY—83A细胞株TPK,PKC活性及Ca^2＋浓度的影响

目的：观察ａＦＧＦ与细胞膜上特异受体结合后引起的细胞内信号转导途径，探讨ａＦＧＦ导致细胞增殖的机理。方法：以不同浓度的ａＦＧＦ处理ＡＧＺＹ－８３Ａ细胞，利用［γ－３２Ｐ］ＡＴＰ掺入外源性底物的方法测定受体的酪氨酸蛋白激酶活性（ＴＰＫ）及蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）活性；用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ为荧光指示剂测定［Ｃａ２＋］ｉ。结果：随着ａＦＧＦ浓度增加，ＴＰＫ及ＰＫＣ活性随之升高。当ａＦＧＦ浓度为１．１２μｇ／ｍｌ时ａＦＧＦ处理组的ＴＰＫ是对照组的４倍；膜ＰＫＣ活性也是对照组的４倍，胞浆ＰＫＣ活性是对照组的１．７５倍。［Ｃａ２＋］ｉ是对照组的３倍。结论：该细胞株中ａＦＧＦ受体具有ＴＰＫ活性。ＴＰＫ激活后进一步促进蛋白质和酶磷酸化，而使ＰＫＣ活性及［Ｃａ２＋］ｉ升高，即ＰＫＣ和Ｃａ２＋是ＴＰＫ的下游信号分子，进一步促进ｃ－ｆｏｓ、ｊｕｎ基因表达增加，导致细胞增殖     

兔脑局部缺血后脑组织ATP酶活性及SEP,TCD改变

建立兔脑ＭＣＡＯ局部脑缺血实验模型。用生化方法分别测定Ｎａ＾＋、Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶和Ｃａ＾２＋，Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶活性，并行体感诱发电位（ＳＥＰ）及经颅多普勒超声检查（ＴＣＤ）。结果发现：脑缺血早期Ｎａ＾＋，Ｋ＾＋－ＡＴＰ酶活性迅速下降，Ｃａ＾２＋，Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶略有下降。ＳＥＰ的Ｎ１波、Ｐ２波的潜伏期明显延长。ＴＣＤ检查中，ＭＣＡＯ侧不能测出波形，而对侧平均流速（Ｖｍ）显著增快，再通后ＭＣ     

尾加压素在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制

目的 观察近年新发现的活性肽尾加压素（Ｕｒｏｔｅｎｓｉｎ Ⅱ,ＵⅡ）在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制。方法 （１）采用＾３Ｈ－胸腺嘧啶（＾３Ｈ－ＴｄＲ）掺入法测定ＵⅡ对原代培养的大鼠气道平滑肌细胞（ＡＳＭＣ）ＤＮＡ合成的影响,应用不同阻断剂观察ＵⅡ诱导细胞ＤＮＡ合成的信号转导通路。（２）采用Ｆｕｒａ－２／ＡＭ荧光探针,测定ＵⅡ对胞浆游离钙浓度的影响。结果 （１）ＵⅡ呈浓度（１０＾－１０～１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ）依赖性刺激ＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ时,为对照组的７倍（Ｐ〈０．０１）;（２）蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）阻断剂Ｈ７、丝裂素活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）阻断剂ＰＤ９８０５９及钙通道阻断剂尼卡的平均能抑制ＵⅡ刺激的ＡＳＭＣ＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入,其抑制率分别为２９％（Ｐ〈０．０５）,４５％（Ｐ〈     

不同年龄大鼠血管平滑肌Ca^2＋／CaM—PP活性特点

本文应用酶学测定方法,测定了８周,１０周,１６周,２０周和２４周Ｗｉｓｔａｒ大鼠主动脉（Ａ）,尾动脉（ＣＡ）和肠系膜动脉（ＭＡ）平滑肌依赖钙的钙调素依赖性蛋白磷酸酶（Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ）的活性,结果发现;（１）８Ｗ和１０Ｗ各血管间和组间Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性无明显差异（Ｐ〉０．０５）;（２）１６Ｗ三种血管间Ｃａ＾２＋／ＣａＭ－ＰＰ活性无显著差异,但活性均明显高于８Ｗ和１２Ｗ组（Ｐ〈０．     

血小板衍生生长因子刺激鼠成骨细胞内Ca^2＋浓度变化的实？…

观察血小板衍生长因子等生长因子对鼠成骨细胞内Ｃａ＾＋浓度变化的影响。方法酶消化法体外分离培养胎鼠成骨细胞,应用ＡＣＡＳ检测成骨细胞内Ｃａ＾２＋浓度的变化。结果ＰＤＧＦ可促进成骨细胞内Ｃａ＾２＋浓度的瞬时增加;ＰＤＧＦ与ＢＭＰ、ＴＧＦ－β联合应用对成骨细胞Ｃａ＾２＋浓度升高有协同作用;ＡＣＡＳ能准确测量胞内Ｃａ＾２＋浓度的动态变化,结论ＰＤＧＦ可促进成骨细胞Ｃａ＾２＋浓度的增加,且与ＢＭＰ,ＴＧＦ－     

荧光试剂法测定小鼠受精卵胞质游离Ca^2＋

目的 通过测定小鼠卵细胞受精过程中胞质游离Ｃａ＾２＋浓度的变化，研究其变化规律及在胚胎早期发育中的作用。 方法 采用Ｃａ＾２＋特导荧光试剂Ｆｕｒａ－２／ＡＭ和ＡＲ／ＣＭ／ＭＩＣ型单细胞阳离子测定系统，测定了休止于第二次成熟分裂中期（ＭⅡ）的小鼠卵母细胞受精过程中的胞质游离Ｃａ＾２＋浓度。 结果 小鼠卵受精过程中胞质游离Ｃａ＾２＋浓度发生波动或振荡。 结论 这对胚胎发育的早期研究有一定意义。     

高钾离子引起PC12细胞内游离Ca2+浓度升高的机制

目的：分析高钾离子（Ｋ＾＋）引起ＰＣ１２细胞内游离钙离子浓度（［Ｃａ＾２＋］ｉ）升高的可能机制。方法：利用ＭｉｒａＣａｌ Ｉｍｉａｇｅ Ｓｙｓｔｅｍ检测［Ｃａ＾２＋］ｉ，Ｃａ＾２＋荧光探针为Ｆｕｒａ－２／ＡＭ。结果：（１）ＫＣ１浓度为３０￣１００ｍｍｏｌ／Ｌ时，可剂量依赖性地诱导ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ升高；（２）在细胞外无Ｃａ＾２＋时，高Ｋ＾＋对ＰＣ１２细胞［Ｃａ＾２＋］ｉ无影响；（３）Ｌ－     

三七总皂甙对大鼠脊髓损伤组织总钙和脂质过氧化的影响

打击法致大鼠脊髓损伤４ｈ后脊髓组织ＭＤＡ、ＦＦＡ含量均显著增加（Ｐ＜０．０１）；ＸＯＤ活性显著升高（Ｐ＜０．０５），ＳＯＤ活性显著降低（Ｐ＜０．０１）；［Ｃａ＾２＋］ｔ显著增加（Ｐ＜０．００１）。表明ＳＣＩ病理过程中伴随Ｃａ＾２＋介导的自由基生成和膜脂质过氧反应。不同剂量的（３０、９０、２７０ｍｇ／ｋｇ，ｉｖ）ＰＮＳ均可抑制ＭＤＡ生成（Ｐ＜０．０１）；大剂量（２７０ｍｇ／ｋｇ）ＰＮＳ还可抑制ＦＦＡ