青藤碱对家兔血管平滑肌细胞增殖的影响

研究青藏对血管平滑肌细胞增殖作用及ＤＮ合成的影响。方法采用内皮素刺激的离子体家兔血管平滑肌细胞增殖模型，细胞计数，氚－胸腺嘧啶核苷掺入方法。结果青藤碱明显抑制血管平滑肌细胞增殖反应及ＤＮＡ合成，呈剂量依赖关系。     

家兔血管成形术前后血小板对培养血管平滑肌细胞增殖的影响

探讨腔内血管成形术后再狭窄形成的部分机制。方法 对家兔腹主动脉粥样硬化狭窄估行ＴＡ，观察培养的ＴＡ前后及正常血管平滑肌细胞的细胞计数和＾１２５碘－尿嘧啶脱氧核苷参入变化。结果 ＴＡ后４０ｈ的ＶＳＭＣ数值较ＡＳ－ＶＳＭＣ增加不明显，但二者较正常ＶＳＭＣ明显增加。     

P27对血管平滑肌细胞增殖的调控

社会正逐步进入老龄化,血管增殖性疾病如动脉粥样硬化,经皮腔内冠状动脉成形术后再狭窄等发病率和死亡率逐年上升,已成为严重影响人类健康的主要疾病目前认为血管平滑肌(vascular smoth muscle cell,VSMC)的异常增殖和迁移在冠心病等血管增殖性疾病的发生发展中具有重要作用.随着分子生物学的发展,对引起VSMC异常增殖和迁移的分子学机制正在不断深入,为血管增殖性疾病的治疗提供了新的思路.通过对细胞周期素(Cyclins)和细胞周期素依赖性激酶(cyclins delay kinase,CDK)及其复合物的抑制作用来调控细胞周期的进程.对P27蛋白的研究将有助于血管增殖性疾病的治疗.本文就P27与VSMC增殖和迁移做一综述.     

尼群地平对猪主动脉平滑肌细胞增殖的影响

观察不同剂量的尼群地平对培养的猪主动脉平滑肌细胞增殖的影响。结果表明：不同剂量的尼群地平对平滑肌细胞增殖的抑制作用汪样，最佳剂量为２．５μｇ／ｍｌ     

凝血酶对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的　探讨凝血酶对大鼠血管平滑肌细胞 (Vascularsmoothmusclecells ,VSMCs)的促增殖作用的量效和时效关系。方法　采用 4～ 10代的VSMCs的单细胞悬液用于实验。 0 .1,0 .5 ,1,3,10U/ml凝血酶刺激VSMCs 2 4h或 0 .5U/ml和 1U/ml凝血酶刺激VSMCs 0 ,1,6 ,12 ,2 4,48,72h ,采用MTS法和 β N 乙酰氨基己糖苷酶测定VSMCs细胞增殖率。结果　①不同浓度的凝血酶对VSMCs有明显促增殖作用 (P <0 .0 1) ;但凝血酶浓度为 0 .1～ 10U/ml在 2 4h时对VSMCs的促增殖作用无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;② 0 .5 (U/ml)和 1.0 (U/ml)两种浓度的凝血酶促VSMCs增殖相对于对照组 ,在各时间段均有明显促增殖作用 (P <0 .0 5 )。增殖曲线呈双峰样改变 ,1h和 2 4h峰值说明凝血酶对VSMCs的促增殖作用不仅有迅速而短暂的作用 ,而且有后发迟缓的作用。结论　①凝血酶浓度在 0 .1～ 10U/ml之间促VSMCs增殖无浓度依赖性 ;②凝血酶促VSMCs的增殖在时间上呈双峰样改变。     

茶多酚对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的　探讨茶多酚对离体大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞增殖的影响。方法　体外培养大鼠主动脉血管平滑肌细胞 ,应用不同剂量的茶多酚作用 2 4 h后 ,采用 MTS/ PES法确定血管平滑肌细胞的增殖状态。应用流式细胞术测定细胞周期。结果　与对照组相比 ,茶多酚对血管平滑肌细胞增殖具有明显的抑制作用 (P<0 .0 0 1)。流式细胞术检测结果表明 ,茶多酚可以使血管平滑肌细胞大部分处于 G0 / G1 期 ,与对照组相比有明显差异 (P<0 .0 5 ) ,并且可以诱导其凋亡。结论　茶多酚可明显抑制离体大鼠血管平滑肌细胞的增殖。     

雌二醇对血管平滑肌细胞增殖的影响

观察雌二醇对血管平滑肌增殖的影响，探讨雌激素抑制动脉粥样硬化的可能机制。方法：采用去卵巢大鼠模型，使用鼠氚标记胸腺嘧啶核苷（3H-TdR）掺入技术，在体观察不同雌激素水平对大鼠胸主动脉中膜组织3H－TdR掺入量的影响。结果：切除卵巢后血管组织中膜3H－TdR掺入量极显著增加，补充大剂量E2后掺入量极显著下降，并已低于假手术组水平（Sham180．4±106.26cpm/mgOVX612.90±262.22cpm/mg，OVZX＋E241．22＋14．45cpm/mg，P＜0.05）。结论：雌二醇对血管平滑肌增殖有明显抑制作用，这可能是其抗AS和减少绝经后冠心病的机制之一。     

雷帕霉素对血管平滑肌细胞增殖影响的实验研究

 【目的】观察雷帕霉素（rapamycin）对体外培养的大鼠胸主动脉平滑肌细胞（SMC）增殖的作用。【方法】组织贴块法体外原代培养大鼠胸主动脉平滑肌细胞，取对数生长期细胞（第6-10代）用作实验，MTr法检测不同浓度雷帕霉素对平滑肌细胞增殖的效果，并用RT-PCR法检测其对平滑肌细胞增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）mRNA表达情况的影响。【结果】①MTT法检测显示雷帕霉素呈剂量依赖性抑制体外培养的大鼠平滑肌细胞增殖，各组吸光值似）分别为：对照组0．902±0．106；0．1ng／mL组0．873±0．079；1ng／mL组0．797±0．046；10ng／mL组0．692±0．061；100ng／mL组0．624±0．075。方差分析差异有显著性。F=28．85，P〈0．001；两两比较1ng／mL以上浓度组与对照组间差异均有显著性，不同浓度间差异显著。0．1ng/mL组与对照组相比差异无显著性。②RT-PCR显示雷帕霉素以浓度依赖模式抑制大鼠平滑肌细胞PCNA-mRNA合成。各组校正后光密度值分别为：对照组219．35±7．20；0．1ng／mL组212．39±6．56；1ng/mL组113．15±10．09；10ng／mL组97．17±12．25；100ng／mL组84．38±8．66。方差分析F=195．49，P〈0．001。两两比较与MTT检测相同。【结论】雷帕霉素呈剂量依赖性显著抑制大鼠平滑肌细胞的增殖，1ng／mL时即可明显起效。雷帕霉素有望成为治疗内支架术后再狭窄的理想药物之一。     

尼群地平对猪主动脉平滑肌细胞增殖的影响

观察不同剂量的尼群地平对培养的猪主动脉平滑肌细胞增殖的影响。结果表明：不同剂量的尼群地平对平滑肌细胞增殖的抑制作用不一样,最佳剂量为２．５μｇ／ｍｌ。     

猪十二指肠类肝素对血管平滑肌细胞增殖的抑制

猪十二指肠类肝素（冠心舒）是一种富含硫酸基的硫酸多糖，对培养的兔主动脉平滑肌细胞增殖以结晶紫、ＭＴＴ染色和３Ｈ－ΤｄＲ掺入等方法测定显示明显抑制作用，作用强度与肝素相仿。同浓度的右旋糖酐对此无抑制作用，说明猪十二指肠类肝素抑制血管平滑肌增生与分子中所含硫酸基有关。猪十二指肠类肝素口服有效，抗凝效价又低于肝素，提示本品有可能用于防治动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄。     

莲心碱对内皮素促血管平滑肌细胞增殖及癌基因表达的影响

采用内皮素建立培养的血管平滑肌细胞增殖模型。用＾３Ｈ胸腺嘧啶核苷（＾３Ｈ－ＴｄＲ）参入法,流式细胞术,免疫细胞化学及Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ方法,观察了莲心碱对血管平 肌细胞增殖的作用及对原癌基因及抑癌基因的影响。结果发现：Ｌｉｅｎ能逆转内皮素所致的「＾３Ｈ」ＴｄＲ参入量增多,阻止血管平滑肌细胞由静止期进入ＤＮＡ合成期和有丝分裂期,并能逆转内皮素引起的ｃ－ｆｃｓ,ｃ－ｍｙｃ,ｃ－ｓｉｓ原癌基因相     

STUDY ON THE INHIBITORY EFFECT OF ANTISENSE ETAR OLIGODEOXYNUCLEOTIDES ON THE PROLIFERATION OF VASCULAR SMOOTH CELLS

Ｒ啨ｓｕｍ啨　　 Ｏｂｊｅｃｔｉｆ　Ｐｏｕｒ啨ｔｕｄｉｅｒｌ ｅｆｆｅｔｉｎｈｉｂｉｔｅｕｒｄｅｓｏｌｉｇｏｄ啨ｓｏｘｙｎｕｃｌ啨ｏｔｉｄｅｓｄｅｃｏｎｔｒｅｓｅｎｓｄｅｓｒ啨ｃｅｐｔｅｕｒｓｄ ｅｎｄｏｔｈ啨ｌｉｎｅＡ (ＯＮＤｓ ＲＥＴＡ)ｓｕｒｌａｐｒｏｌｉｆ啨ｒａｔｉｏｎｄｅｓｃｅｌｌｕｌｅｓｄｅｓｍｕｓｃｌｅｓｌｉｓｓｅｓｖａｓｃｕｌａｉｒｅｓ (ＣＭ ＬＶ) .　Ｍ啨ｔｈｏｄｅｓ　ＬｅｓＯＮＤｓ ＲＥＴＡ ｄｅｓｅｎｓ ,ｄｅｃｏｎｔｒｅｓｅｎｓｅｔｎｏｎａｐｐａｒｉ啨ｓｏｎｔ啨ｔ啨ｓｙｎｔｈ啨ｔｉ…     

Mg~(2+)和牛磺酸对内皮素促血管平滑肌细胞增殖的影响

本工作应用培养的家兔主动脉血管平滑肌细胞,通过细胞计数和~3H-胸腺嘧啶核苷参入的方法,观察到内皮素可以刺激血管平滑肌细胞的增殖;同时,内皮素的这种效应可以被Mg~(2+)和牛磺酸拮抗。     

G蛋白反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞增殖的影响

使用硫代修饰的Ｇ蛋白（Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白）反义寡聚脱氧核苷酸（Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ）作用于含２０％胎牛血清ＤＭＥ培养液培养基的血管平滑肌细胞（ｖＳＭＣ）。通过细胞计数和免疫细胞化学方法，观察了Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ对ｖＳＭＣ增殖和ＰＣＮＡ表达的影响。结果表明，Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ联合应用能明显抑制ｖＳＭＣ增殖；免疫细胞化学分析亦显示ｖＳＭＣ中ＰＣＮＡ蛋白表达显著减少。而相同浓度的正义ＯＤＮｓ只有微小抑制作用。结果提示，Ｇαｑ／１１亚基和ｒａｓ蛋白ＡＳ－ＯＤＮｓ有可能应用于防治临床血管活性物质依赖性细胞增生性疾病的研究。     

东莨菪碱对动脉平滑肌细胞的作用

以培养的兔ASMC为材料,研究了Scop对细胞增殖的影响。有Ca~(2 )时,Scop抑制ASMC的增殖;缺Ca~(2 )时则表现为双向作用,即低浓度刺激、高浓度抑制ASMC增殖。培养液中有Cd~(2 )存在时,Scop对ASMC增殖仍表现为双向作用。     

酶消化法分离培养家兔血管平滑肌细胞

目的探讨胶原酶分离并培养家兔血管平滑肌细胞的方法。方法取家兔腹主动脉，0．2％胶原酶Ⅰ消化分离血管平滑肌细胞并进行培养，相差显微镜观察培养细胞的形态，免疫组化染色法检测细胞胞浆内α-肌动蛋白（α-actin）的表达。透射电镜观察血管平滑肌超微结构。结果相差显微镜下细胞呈长梭形，未见明显异型细胞，α-actin胞浆染色阳性细胞数占总细胞数的99％以上。电镜显示VSMC内肌丝丰富，线粒体、高尔基复合体等细胞器较少，VSMC呈现分化的收缩表型。结论胶原酶可消化分离培养血管平滑肌细胞，且有成活细胞数多、传代周期短的特点，可用于血管平滑肌表型研究。