非甾体消炎药对大鼠小肠黏膜机械屏障功能的影响

目的 探讨非甾体消炎药对大鼠小肠黏膜机械屏障功能的影响.方法 雄性SD大鼠32只,分为模型组和对照组,模型组予双氯芬酸灌胃,2次/d,每次7.5 mg/kg,对照组使用相同剂最的生理盐水灌胃,分别按造模后1 d和5 d时相点分为2个亚组(每组8只).进行胃及小肠大体损伤评分、小肠黏膜病理组织损伤评分,采用Carl Zeiss Imaging Systems图像分析系统进行绒毛高度、黏膜厚度、黏膜截面积定量分析,观察透射电镜下肠黏膜超微结构变化.结果 模型组胃黏膜的损伤评分与对照组的差异无统计学意义.模型组第1天小肠黏膜可见散在红斑、糜烂和溃疡,溃疡沿肠系膜侧分布;第5天小肠黏膜可见出血、穿孔和窦道形成,其大体损伤评分均高于对照组(P＜0.05).模型组第1天和第5大Chiu氏病理评分分别为3.5分和5.0分,与对照组相比差异有统计学意义(P＜0.05).造模第1天大鼠空、回肠绒毛高度分别为(126.9±32.0)μm和(118.6±22.9)μm,较对照组显著降低(P＜O.05);而空、回肠黏膜厚度、黏膜截面积和对照组相比差异无统计学意义,但有下降趋势;第5大大鼠空、回肠绒毛高度[(73.4±25.4)μm和(109.3±17.6)μm]显著降低、黏膜厚度[(123.8±51.6)μm和(165.7±37.4)μm]变薄、黏膜截而积[(2.48±1.01)mm2和(3.27±0.76)mm2]变小,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.05).透射电镜下见模型组第1天大鼠小肠黏膜微绒毛水肿、排列紊乱,线粒体肿胀,部分峪减少,内质网出现不同程度扩张,细胞问连接开始出现部分增宽;第5天小肠黏膜上皮微绒毛脱落更为明显,细胞连接断裂破坏严重.结论 双氯芬酸可导致大鼠小肠黏膜屏障功能受损.绒毛变短、黏膜厚度变薄、微绒毛脱落和细胞间紧密连接增宽可能是其形态学基础.     

谷氨酰胺对非酒精性脂肪肝炎大鼠肠黏膜屏障的保护作用

目的 探讨谷氨酰胺对非酒精性脂肪肝炎肠黏膜屏障功能的保护作用.方法 32只SD大鼠随机分为正常对照组8只,给予普通饮食喂养;高脂饮食组24只,给予高脂饲料喂养,于8周末从高脂饮食组随机抽取8只大鼠处死作为单纯性脂肪肝组,剩余大鼠随机分为谷氨酰胺组、NASH组,谷氨酰胺治疗组在8周末加用谷氨酰胺灌胃.12周末处死所有大鼠,测定大鼠门静脉血浆中内毒素、腹主动脉血浆中D-木糖以及肠粘液中sXgA的水平,测定小肠组织匀浆中SOD的活性和MDA的含量,并测定大鼠血清中TC、TC、ALT、AST,HE染色观察肝脏病理改变.结果 12周模型组大鼠血清ALT、AST明显升高,肝脏病理表现为脂肪性肝炎,谷氨酰胺治疗组大鼠血清ALT、AST明显下降(P＜0.05),肝组织炎症活动计分也明显下降(3.25±1.49 vs.4.38±1.06,P＜0.05),但仍显著高于8周单纯性脂肪肝组大鼠水平(3.25±1.49 vs.2.00±0.76,P＜0.05).谷氨酰胺治疗组肝细胞脂肪变性程度无显著变化.谷氨酰胺治疗组大鼠门静脉血浆中内毒素、腹主动脉血浆中D-木糖、小肠组织匀浆中MDA含量与模型组相比明显降低(P＜0.05).肠黏液中slgA的水平和小肠组织匀浆中SOD与模型组相比明显升高(P＜0.05).结论 谷氨酰胺可以降低高脂饮食诱发的非酒精性脂肪性肝炎大鼠血清中转氨酶水平和肝组织炎症损伤,降低门静脉血中内毒素水平,但不能完全阻止炎症的进展,提示肠黏膜屏障功能的改变是非酒精性脂肪性肝炎发病的重要机制之一.     

非酒精性脂肪性肝炎大鼠小肠黏膜结构变化的研究

目的:探讨非酒精性脂肪性肝炎形成阶段肠黏膜屏障的损伤情况.方法:24只雄性Wistar大鼠随机分为对照组(普通饮食)和模型组(高脂饮食),各组12只.8周、12周处死大鼠后称量体重、肝重,并计算肝指数,检测血清甘油三酯(TG)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平及门静脉、腹主动脉血中内毒素(ET)水平;取小肠组织经透射电镜观察其超微结构的改变;取肝标本做HE染色,观察其病理变化.结果:8周、12周模型组大鼠肝指数与同期对照组相比差异有显著性意义(P＜0.01);8周模型组大鼠TG、ALT与同期对照组比较呈升高趋势,12周差异有统计学意义(P＜0.05);8周、12周模型组大鼠血清TNF-α水平与同期对照组比较明显升高(P＜0.05);8周、12周模型组大鼠门静脉ET水平较对照组明显上升(P＜0.05);腹主动脉血ET与同期门静脉ET比较,差异有显著性意义(P＜0.05);8周、12周观察模型组大鼠小肠组织病理学变化,发现肠上皮细胞变性、坏死、脱落,并有炎细胞浸润;透射电镜显示肠上皮连接增宽,绒毛稀疏、缺如,固有层水肿.结论:非酒精性脂肪性肝炎发生时伴有肠源性内毒素血症(IETM)的形成,IETM可促使炎症因子TNF-α释放增加,加重肝脏损害,IETM的形成与肠黏膜屏障受损有关.     

肠黏膜屏障功能异常与炎症性肠病

正常肠黏膜屏障由机械屏障、化学屏障、免疫屏障、生物屏障构成,能有效阻止肠道内细菌和内毒素易位。检测肠黏膜通透性可反映肠黏膜屏障功能。肠黏膜屏障受营养、感染、损伤等多种因素影响。研究表明肠黏膜屏障功能损伤与炎症性肠病（IBD）密切相关,然而其为IBD的病因还是继发性改变目前仍存在争议。保护和恢复肠黏膜屏障功能对IBD的治疗具有重要意义。     

非侵入性方法检测肠黏膜屏障功能的研究进展

异常的肠道通透性在人类多种疾病中起着非常重要的作用,包括糖尿病、炎症性肠病、乳糜泻、多发性硬化、食物变态反应过敏症、肠易激综合征等.近年大量的研究发现:一些自身免疫性疾病伴有肠道通透性增加,这种现象发生在疾病之前,被认为与疾病的发病机制相关.研究肠黏膜屏障的功能与结构,可以提高我们对疾病的病因及病理生理认识,并且对于早期检测疾病以及对疾病进行二级预防有重要意义.目前有多种试验方法评估肠黏膜上皮细胞受损、紧密连接功能以及肠黏膜屏障的完整性.本篇综述主要探讨目前评估肠黏膜屏障功能的检测方法.     

酒精性脂肪肝大鼠肠道屏障功能变化及化滞柔肝颗粒的保护作用

目的：观察酒精性脂肪肝大鼠肠道屏障功能改变,并探讨化滞柔肝颗粒的保护作用。方法将60只SD 大鼠随机分为正常对照组、模型组、小剂量化滞柔肝组（1.1 g·kg-1·d-1）、中剂量化滞柔肝组（2.2 g·kg-1·d-1）和大剂量化滞柔肝组（4.4 g·kg-1·d-1）。给予模型组和治疗组动物56%红星二锅头灌胃,1次/d,连续5周,制备大鼠酒精性脂肪肝模型;分别检测肠道细菌移位率（BT）和肠黏膜通透性[以乳果糖（L）/甘露醇（M）排出率（L/M%）表示]。同时观察血生化、肝脏和末段回肠黏膜病理学改变。结果在实验5 w 末,模型组大鼠肝组织呈中度脂肪变和炎症改变,其 BT、L/M 比值、碱性磷酸酶（ALP）和肝质量指数分别为70.0%、（0.38±0.18）%、（427.1±126.6）IU/L 和（4.3±0.6）%,均显著高于对照组[（分别为10.0%、（0.23±0.07）%、（306.4±67.1）IU/L 和（3.6±0.4）%,P〈0.05）];与模型组比,各剂量化滞柔肝颗粒处理动物肝组织小叶内炎症减轻,小剂量组 L/M 和肝质量指数分别为（0.27±0.06）%和（3.8±0.3）%,均低于模型组（P〈0.05）,肠道 BT 和血生化指标较模型组也有改善;中剂量和大剂量组 L/M 分别为（0.22±0.16）%和（0.18±0.07）%,肝质量指数分别为（3.7±0.3）%和（3.6±0.2）%,显著低于模型组（P〈0.01）,而肠道 BT 为10.0%和22.2%,ALT 为（39.8±5.0）U/L 和（40.8±5.6）U/L,AST 为（113.4±38.3） U/L 和（111.2±28.9） U/L,ALP 为（334.4±47.6） IU/L 和（350.2±112.2） IU/L,也均低于模型组[分别为70.0%、（54.1±17.2）U/L、（163.2±67.5） U/L、（427.1±126.1）IU/L,P〈0.05）]。结论酒精性脂肪肝大鼠伴有肠道屏障功能减弱,化滞柔肝颗粒对酒精性脂肪肝大鼠肠道屏障功能及肝脏功能具有双重保护作用。     

炎症性肠病肠黏膜屏障损伤机制

肠黏膜屏障是指将肠腔内细菌、抗原等物质与肠黏膜固有层免疫细胞隔离开,避免固有层免疫细胞激活的肠黏膜结构,要由肠黏膜基底膜、上皮细胞层及其表面的黏液层所构成.炎症性肠病(innammatory bowel diseasc,IBD)肠黏膜屏障损伤的机制为:IBD发病时,肠黏膜所产生的大量炎症细胞因子、炎症介质等损伤肠上皮细胞,诱导上皮细胞凋亡;影响上皮细胞紧密连接蛋白的表达及分布,破坏上皮细胞间紧密连接;抑制黏蛋白的产生,破坏上皮细胞表面的黏液层,造成肠黏膜屏障障碍.     

酒精性脂肪肝大鼠肠源性内毒素血症模型的建立

目的：建立酒精性脂肪肝大鼠肠源性内毒素血症模型。方法采用梯度酒精灌胃法早晚两次灌胃,并以10%酒精为饮料,建立大鼠酒精性脂肪肝模型。分别于3w和6w检测肝脂肪变、肝内炎症、肝功能和血清内毒素水平。结果模型组自6w出现显著的肝脂肪变,肝指数（3.6±0.2）、肝脂肪变积分（3.0±0.9）和炎症积分（1.0±0.6）均显著高于同期对照组水平[分别为（3.1±0.1）、（0.0±0.0）和（0.0±0.0）,P＜0.05];在6周时模型动物血浆内毒素、血清D-乳酸、二胺氧化酶和AST分别为（1435.6±52.9）pg/ml、（20.7±5.4）mmol/L、（25.5±2.0）U/L和（124.5±13.2） U/L,较正常组均明显升高[分别为（89.9±10.5）pg/ml、（5.0±1.1）mmol/L、（7.4±1.7）U/L和（40.4±15.2）U/L,P＜0.05]。结论用该方法连续6w成功建立单纯性酒精性脂肪肝肠源性内毒素血症模型。     

重组人小肠三叶因子对肠黏膜上皮细胞保护作用的研究

目的 应用基因重组获得人小肠三叶因子（hITF）．并研究外源性hITF保护肠黏膜的作用及其可能机制。方法 构建毕赤酵母重组表达质粒pPICg／hITF，经发酵上清过柱纯化，应用质谱技术鉴定所得目的蛋白；用大鼠小肠隐窝上皮细胞株（IEC-6）观察不同浓度重组hITF对肠上皮细胞形态、增殖和迁移功能的影响。结果获得基因重组hITF，质谱分析证实为所需目的蛋白。体外实验结果表明，在10^-9、10^-7、10^-5mol／L浓度，重组hITF能促进肠上皮细胞迁移，但对肠上皮细胞的光镜下形态和增殖功能无明显影响。结论 重组hITF能促进肠上皮细胞迁移，可能是其对肠黏膜保护的主要作用。     

梗阻性黄疸肠黏膜屏障损伤病理生理机制的研究进展

肠黏膜屏障具有机械屏障、化学屏障、生物屏障、免疫屏障等功能,是防止肠道内的有害物质和病原体进入机体内环境,维持内环境稳定的一道重要屏障.梗阻性黄疸(obstructive jaundice,OJ)患者病死率和并发症发生率居高不下,主要原因是败血症和肾功能衰竭.临床与基础研究证实OJ存在肠黏膜屏障损伤,其主要病理生理机制是肠黏膜通透性增加、肠黏膜上皮氧化应激损伤及肠源性内毒素血症,具体机制尚未明确.本文对OJ引起的肠黏膜屏障损伤的病理生理机制作一综述.     

肠道内环境在酒精性脂肪肝发病中的初始作用及益生菌的治疗效果

目的 探讨酒精性脂肪肝(ALD)肠源性内毒素血症升高的始动因素,并观察四联活菌对ALD的干预效果. 方法 将50只雄性SD大鼠随机分为模型组(酒精灌胃组)、干预组(酒精和双歧四联活菌灌胃组)和对照组(等渗盐水灌胃组),喂养4、8周后分别取各组大鼠肝组织行HE染色观察肝脏病理学变化及电子显微镜下肠道黏膜变化、紧密连接occludin蛋白的表达变化;测定各组大鼠血清氨基转移酶、甘油三酯、内毒素的水平;取肠道新鲜粪便培养大肠杆菌.数据多组间比较采用单因素方差分析,差异有统计学意义者两两比较采用LDL-t检验. 结果 造模4周后,对照组、模型组及干预组的内毒素水平分别为(0.67±0.14)pg/ml、(4.42±1.28) pg/ml、(2.88±0.83) pg/ml,三组之间差异有统计学意义(F=27.288,P＜0.01);与对照组比较,模型组内毒素水平明显升高(P＜ 0.05);与模型组比较,干预组内毒素水平明显降低(P＜0.05).而三组之间ALT、AST、甘油三酯的差异并无统计学意义(P均＞0.05).造模8周后,对照组、模型组及干预组的ALT和AST水平分别为(62.33±7.12) U/L和(90.50±10.67) U/L、(95.50±8.73) U/L和(130.00±14.91) U/L、(81.33±6.19) U/L和(110.33±7.26) U/L,差异均有统计学意义(F=18.051,P＜0.01;F=30.170,P＜0.01);对照组、模型组及干预组的甘油三酯水平分别为(0.84±0.84) mmol/L、(1.40±0.17) mmol/L、(1.10±0.17) mmol/L,F=10.592,P＜0.01.对照组、模型组及干预组的大肠杆菌计数分别为(2.23±0.46) lg3/ml、(4.81±0.29) lg3/ml、(3.61±0.50)lg3/ml,差异有统计学意义(F=23.579,P＜0.01);三组的内毒素水平分别为(0.52±0.21)pg/ml、(12.46±2.61) pg/ml、(6.83±1.74) pg/ml,差异有统计学意义(F=30.731,P＜0.01).与对照组比较,模型组ALT、AST、甘油三酯、大肠杆菌计数及内毒素水平均明显增高(P值均＜0.05);与模型组比较,干预组上述指标均明显降低(P值均＜0.05).造模8周后模型组比4周模型组小肠上皮细胞结构破坏更明显,细胞间隙增宽;干预组细胞连接结构比较清晰,细胞间隙稍增宽;造模8周后模型组occludin的表达强度明显下降,且分布不连续;而干预组occludin蛋白的表达水平则介于模型组与对照组之间.结论 ALD早期存在肠道微生态紊乱并产生肠源性内毒素血症,肠道通透性的增加可能是促使内毒素升高的始动因素;双歧四联活菌可能通过改变肠道菌群种类,上调肠道上皮黏膜occludin蛋白的表达,阻止内毒素通过紧密连接入血,从而有助于延缓ALD的进一步发展.     

非酒精性脂肪性肝病的预后

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）是最常见的肝脏疾病,其预后和自然史仍不是非常清楚。由于多数患者长期稳定而无明显症状,因而常不被重视。目前认为,部分脂肪性肝病患者可发展为严重的肝脏疾病,甚至发展为失代偿期肝硬化。一些老年隐源性肝硬化患者病史中常有脂肪肝、肥胖症 及2型糖尿病，肝脏疾病则成为他们主要的致死原因，因此对这些患者，其危害性甚至超过糖尿病相关的心、脑血管疾病。[第一段]     

非酒精性脂肪性肝病的治疗

非酒精性脂肪性肝病（NAFLD）及其主要类型一非酒精性脂防性肝炎（NASH）,不仅是肝酶持续异常的首要病因,而且可导致失代偿期肝硬化、肝细胞癌以及肝衰竭。随着亚洲地区肥胖症和糖尿病患者的不断增多,近期NAFLD或NASH的患病率仍将不断攀升并呈现出低年龄化的发病趋势。为此,亚太地区NAFLD工作组起草了NAFLD诊疗指南,无疑这将对本地区NAFLD的诊断和治疗起到重要指导作用。[第一段]     

非酒精性脂肪性肝病与酒精性肝病的异同

脂肪性肝病是一种常见病,根据有无大量饮酒史可分为酒精性脂肪性肝病(alcoholic fatty liver,AFL)与非酒精性脂肪肝(NAFLD),前者是酒精性肝病(ALD)的一个类型。ALD是世界范围内发病率和病死率最高的疾病之一,其发生肝硬化和肝癌的机会要远超过NAFLD[1]。在临床工作中,两种疾病因无特异的临床表现,鉴别主要依赖于饮酒史,但一些患者的饮酒量介于两者诊断（指南）标准之间,此外回忆和估计的饮酒史并不可靠,而作为两种不同原因诱导的疾病,还可能存在重叠的情况。现就近年来流行病学、自然转归、发病机制、诊断和治疗等方面的研究结果对两者进行比较鉴别。     

非酒精性脂肪性肝病与肠道菌群的关系

非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)是一种多病因导致的临床病理综合征,已成为最常见的慢性肝病之一,目前NAFLD完整的生理机制尚不完全清楚,近年来提出肠道菌群通过调控能量代谢、增加内源性乙醇、调节胆汁酸及胆碱代谢,破坏免疫平衡引发机体低度炎症等途径促进NAFLD的发生、发展,本文就肠道菌群与NAFLD的相关机制做一概述。     

肠道在非酒精性脂肪性肝病发病中的病理生理作用

非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)是造成慢性肝功能异常的重要原因[1]。随着病程进展出现多水平的代谢异常,常常伴有其他重要脏器损伤,为NAFLD的诊治带来巨大的困难[2]。现有的临床试验初步证明改善肠黏膜屏障功能的治疗有可能为肝脏疾病带来了更好的治疗和预后。现就肠道在NAFLD发病中的病理生理作用作一综述。     

Effects of bile duct ligation and cholic acid treatment on fatty liver in two rat models of non-alcoholic fatty liver disease

Background

Non-alcoholic fatty liver disease, one of the most prevalent liver disorders in Western countries, is characterized by hepatic accumulation of triglycerides. Bile acids have long been known to affect triglyceride homeostasis through a not completely understood mechanism.

Aim

To analyse the effects of two different manipulations of bile acid circulation on non-alcoholic fatty liver disease.

Methods

Two animal models of non-alcoholic fatty liver disease were developed by either feeding rats with a choline deficient or with a high fat diet. After 4 weeks, rats were randomized to undergo either bile duct ligation, sham operation or cholic acid administration.

Results

During cholestasis there was an increased CYP7A1 expression, the rate limiting enzyme in bile acid synthesis, and a reduction of hepatic concentration of oxysterols, ligands of the liver X receptors. Target genes of the liver X receptors, involved in fatty acid and triglyceride synthesis, were down-regulated in association with decreased hepatic triglyceride content and improvement of fatty liver. Administration of cholic acid, ligand of farnesoid X receptor, also had a beneficial effect on fatty liver in rats on choline deficient diet.

Conclusion

These results indicate that pharmacological approaches increasing the expression of CYP7A1 or stimulating farnesoid X receptor pathway could represent a promising treatment for non-alcoholic fatty liver disease.     

非酒精性脂肪性肝病的临床及病理学特征

目的 探讨我国成人非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)不同ALT水平患者的临床及病理学特征.方法 分析2005年1月-2009年3月经肝活体组织检查证实的108例NAFLD患者的人口学、生物化学及病理学资料,并比较血清ALT正常与增高患者的病理学及临床特征. 结果在108例NAFLD中,49例(45.4%)为单纯性脂肪肝(NAFL),57例(52.8%)为非酒精性脂肪性肝炎(NASH),2例(1.9%)为NASH相关肝硬化.ALT和AST水平,NASH患者分别为(156.2±137.7)U/L和(82.2士67.8)U/L,NAFL患者分别为(103.9±93.7)U/L和(52.2±33.4)U/L,t值分别为2.55和3.13,尸值均<0.01,差异有统计学意义.AST/ALT比值NASH患者为0.61±0.30,NAFL患者为0.78土0.77,NASH患者AST/ALT比值低于NAFL患者,t=2.18,p=0.03,差异有统计学意义.ALT增高组中NASH占64.9%(50/77),ALT正常组NASH占29.0%o(9/31),x~2=11.49,p=0.00.ALT增高组炎症程度显著高于ALT正常组,x~2=10.30,P=0.01,差异有统计学意义;但肝脂肪变和纤维化程度在两组之间,x~2=5.52,6.12;P=0.12,0.10,差异无统计学意义.ALT增高组血清AST、y-谷氨酰转肽酶、总胆固醇、载脂蛋白A1、载脂蛋白B和收缩压水平均比ALIT正常组显著增高(t值分别为5.91,2.00,2.30,2.10,3.14,2.43;p值分别为0.00,0.05,0.02,0.04,0.00,0.02),而AST/ALT比值、B超下脾脏肋间厚度则显著降低(t值分别为3.70和2.95;p值分别为0.00和0.01).多元回归分析显示血清ALT增高与病理学NASH相关(OR=2.78,95%CI 1.06～7.3,p=0.04),但血清ALT预测NASH的准确性欠佳,ROC曲线下面积为0.69(95%CI 0.59～0.8,P=0.00).结论 在中国成人NAFLD患者中可以见到完整的疾病谱.ALT升高患者NASH比例更高,血清ALT水平可预测NAFLD患者炎症程度,但不能预测脂肪变和纤维化程度.     

Lipidomics in non-alcoholic fatty liver disease

Non-alcoholic fatty liver disease (NAFLD), the most common chronic liver disorder in Western countries, comprises steatosis to nonalcoholic steatohepatitis (NASH), with the latter having the potential to progress to cirrhosis. The transition from isolated steatosis to NASH is still poorly understood, but lipidomics approach revealed that the hepatic lipidome is extensively altered in the setting of steatosis and steatohepatitis and these alterations correlate with disease progression. Recent data suggest that both quantity and quality of the accumulated lipids are involved in pathogenesis of NAFLD. Changes in glycerophospholipid, sphingolipid, and fatty acid composition have been described in both liver biopsies and plasma of patients with NAFLD, implicating that specific lipid species are involved in oxidative stress, inflammation, and cell death. In this article, we summarize the findings of main human lipidomics studies in NAFLD and delineate the currently available information on the pathogenetic role of each lipid class in lipotoxicity and disease progression.