靶向活化T细胞核因子1基因的shRNA质粒表达载体的构建

 目的　利用pRNAT-U6.1／Neo质粒构建靶向NFAT1基因的3个shRNA,为下一步探索肺癌基因治疗的RNA干扰途径奠定基础。方法　设计3对shRNA（NFAT1-sh-1、NFAT1-sh-2、NFAT1-sh-3）,以人类基因同源性差的无关序列（NFAT1-sh-NC）作为阴性对照。筛选与人类其他基因同源性小、特异性针对目的基因的siRNA。合成并克隆至带有U6启动子的pRNAT -U6.1／Neo质粒中,构建质粒表达载体,通过凝胶电泳鉴定后转化至大肠杆菌中进行培养,并提取质粒进行DNA测序鉴定。结果　成功构建和筛选出靶向NFAT1基因的3对shRNA质粒表达载体,GC比例为40 ％～55 ％。结论　构建的3个靶向NFAT1基因shRNA质粒表达载体有助于肺癌靶向基因治疗RNA干扰的研究。为筛选有效的基因干扰载体,以及对荷瘤肺癌裸鼠靶向RNAi抗肿瘤细胞生长的研究鉴定了基础。     

NFAT分子在肿瘤发生与发展中的作用

活化T细胞核因子( nuclear factor of activated T cell,NFAT)作为细胞信号转导中的一类重要因子,不仅在免疫系统中发挥功能,在肿瘤发生、发展中也起着关键性作用。NFAT的活化主要通过钙离子信号启动,进而发生核转位并与DNA结合,通过与其他共转录因子的相互协同,调节目的基因的表达。不同亚型的NFAT在肿瘤细胞转化和生长中发挥不同的调控作用,并促进肿瘤血管生成和肿瘤细胞的浸润或迁移。进一步了解NFAT在肿瘤中的表达和作用机制,探究其在肿瘤发生、发展中的作用,可为肿瘤临床治疗中有效靶点的寻找带来更多新的突破。     

细胞核因子kB与肿瘤治疗

以前认为肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）是一种很有希望杀死肿瘤细胞的物质,有实验证明可缩小肿瘤组织。近几年来研究证明,ＴＮＦ不能直接杀死肿瘤细胞,确切地说ＴＮＦ不能单独对肿瘤细胞有杀伤作用,而是通过抑制细胞核因子－ｋＢ（ＮＦ－ｋＢ）使肿瘤细胞死亡。故认为其对肿瘤的治疗有潜在作用。     

细胞核因子κB与肿瘤治疗

以前认为肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）是一种很有希望杀死肿瘤细胞的物质,有实验证明可缩小肿瘤组织。近几年来研究证明,ＴＮＦ不能直接杀死肿瘤细胞,确切地说ＴＮＦ不能单独对肿瘤细胞有杀伤作用,而是通过抑制细胞核因子κＢ（ＮＦκＢ）使肿瘤细胞死亡。ＮＦκＢ是一种ｐ５０和ｐ６５组成的异源双体,其活性还受到强抑制物ＩκＢ的控制。ＮＦκＢ在维持组织细胞的生死平衡、炎症反应和肿瘤治疗中的细胞凋亡起到调控作用,肿瘤治疗中的细胞因子、放疗和化疗药物都需通过ＮＦκＢ才能起作用,故认为其对肿瘤的治疗有潜在作用     

T细胞特异Elf-1转录因子的研究进展

 Elf-1是Ets转录因子家族的一员,参与细胞增殖、分化和恶变等生理病理过程。文章对Elf-1与T细胞分化发育、肿瘤及自身免疫性疾病的关系进行综述。     

T细胞特异Elf-1转录因子的研究进展

Elf-1是Ets转录因子家族的一员,参与细胞增殖、分化和恶变等生理病理过程.文章对Elf-1与T细胞分化发育、肿瘤及自身免疫性疾病的关系进行综述.     

T细胞特异Elf-1转录因子的研究进展

Elf-1是Ets转录因子家族的一员,参与细胞增殖、分化和恶变等生理病理过程.文章对Elf-1与T细胞分化发育、肿瘤及自身免疫性疾病的关系进行综述.     

NFAT蛋白各亚型在食管鳞癌组织中的表达与临床病理因素间的关系

背景与目的：研究发现,活化T细胞核因子(nuclear factor of activated T cells,NFAT)与多种恶性肿瘤关系密切,食管鳞癌是我国最常见的恶性肿瘤之一。本研究探讨食管鳞癌组织NFAT各亚型的表达及其与食管鳞癌各临床病理因素的关系。方法：采用免疫组化法检测104例食管鳞癌组织和癌旁食管黏膜组织中NFAT各亚型的表达情况。结果：NFAT1～4在食管鳞癌组织中阳性表达率分别为53.8%、10.6%、26.9%和45.2%,与在癌旁食管黏膜组织中的表达差异有统计学意义(P<0.001)。NFAT1的表达与饮酒史(62.3% vs 37.1%,P=0.01)、淋巴结转移(68.4% vs 5.5%,P=0.002)及较晚的分期(58.7% vs 36.2%,P=0.02)密切相关,多因素分析提示NFAT1过表达仅与淋巴结转移相关。淋巴结转移者的NFAT3表达率(39.4%)明显高于无淋巴结转移者(19.7%)。结论：NFAT蛋白在食管鳞癌组织中过表达,NFAT1与NFAT3的表达率与淋巴结转移密切相关,可能在肿瘤的发生、发展中起一定作用。     

T细胞因子3在消化系统恶性肿瘤中的研究进展

T细胞因子3(TCF3)属于淋巴增强因子/T细胞转录因子（LEF/TCF）家族成员,是经典的WNT信号通路下游关键效应分子,通过激活一系列WNT靶基因的转录,在多种恶性肿瘤的发生、发展过程中起重要作用。本文对TCF3的生物学特性及其在消化系统恶性肿瘤中的作用机制和研究进展进行综述,分析TCF3在消化系统恶性肿瘤中的功能及临床潜在价值。     

STAT3与上皮-间质转化在肿瘤细胞中的作用及其关系

信号转导与转录激活因子(STAT3)可被多种细胞因子激活,参与肿瘤细胞增殖、血管生成、肿瘤侵袭和化疗耐药等过程.上皮-间质转化(EMT)在肿瘤的侵袭转移及化疗耐药等过程中也起重要作用.研究表明,STAT3可通过调控EMT,改变肿瘤的侵袭转移能力,增强肿瘤细胞对化疗药物的耐药性.探讨STAT3与EMT在肿瘤细胞中的作用及其相互关系有助于为分子靶向治疗提供可靠的理论依据.     

MACS法对骨髓中胃癌细胞的富集效率研究

目的探讨和比较微型免疫磁珠在胃癌微转移细胞检测方面的特异性、富集效率及回收率.方法选取2002年12月～2003年6月间行手术治疗的胃良性病变患者15例,将其骨髓有核细胞与胃癌细胞株OCUM-2MD3细胞以10种不同比例混合,使其中肿瘤细胞的频数自(0～5)×10-5,作为骨髓微转移肿瘤细胞模型.以结合有CK7/8抗体的MACS微型免疫磁珠、标记异硫氰酸荧光素的抗CK抗体(CK-FITC)以及标记叶绿素蛋白的抗CD45抗体(CD45-PerCP)标记后,以MS /RS 型阳性分选柱进行2次肿瘤细胞富集.在富集前后分别进行FACS分析和免疫荧光检测.结果FACS分析9组混合细胞标本中,肿瘤细胞的富集倍数为8664±1222,回收率为(61.4±8.7)%;直接免疫荧光法测得4组混合细胞的总回收率为(49.3±8.2)%,明显低于FACS测得的回收率(P=0.037).结论MACS法可有效地富集骨髓细胞中存在的胃癌细胞;MACS免疫磁珠富集结合FACS分析敏感性高,可重复性好,是检测骨髓中胃癌微转移细胞的有效方法.     

肿瘤干细胞缺氧微环境的形成及其对肿瘤转移的促进作用

肿瘤干细胞位于特定的微环境中,这些微环境在肿瘤细胞的增殖和转移中起到了重要的作用。缺氧是实体肿瘤组织微环境重要的特征之一,最近一系列研究结果表明缺氧微环境下可能是肿瘤干细胞促进肿瘤转移的重要环节,这一结果为理解肿瘤的发生机制和治疗肿瘤提供了新的线索。     

CD44在肿瘤进展中的作用

CD44 has been the subject of extensive research because of its role in cancer and many physiological processes. Through binding to different ligands, CD44 can initiate a series of cascade. CD44 not only can promote tumorigenic and tumor metastasis, but also can suppress tumor growth and progression. In-depth study of CD44 and its role in signal pathway may provide a new path for cancer treatment.     

Platelet-derived endothelial cell growth factor predicts of progression and recurrence in primary epithelial ovarian cancer

We investigated the clinical significance of platelet-derived endothelial cell growth factor (PD-ECGF) as measured by enzyme-linked immunosorbent assay in primary epithelial ovarian cancers (EOC), finding amounts to be significantly greater in cancers than in normal ovarian tissue (p<0.01). PD-ECGF was significantly more abundant in stages III and IV than in lower stages (p<0.05), and also was high in tumors with macroscopically evident metastases in the peritoneal cavity (p<0.05), or pelvic (p<0.01) or paraaortic (p<0.01) lymph node metastases. Further, PD-ECGF was significantly lower in mucinous than in serous adenocarcinomas (p<0.05). No significant correlation was seen between PD-ECGF and histologic grade, maximum intraperitoneal metastatic tumor diameter (<2 vs.>2 cm), or presence of demonstrable malignant cells in peritoneal fluid. In stage III disease, PD-ECGF exhibited significant correlation with recurrence (p<0.05). Our data suggested that results of PD-ECGF assays in primary tumors can predict progression and recurrence of EOC.     

GSDML基因在宫颈癌及其他恶性肿瘤中的研究进展

GSDML基因属于一个全新的含有Gasdermin结构域的GSDMDC蛋白超家族,位于人染色体17q21,被认为是进化重组热点.由于DFNA5、DFNA5L、GSDM及MLZE都参与了癌肿的发生发展,GSDML也被预示与肿瘤存在一定相关性.在宫颈癌组织中核内GSDML蛋白的表达水平远远高于邻近癌组织及相应的非肿瘤组织,提示GSDML可作为正常宫颈向癌前病变缺损以及宫颈癌转变过程中重要监测指标.     

组织因子及其抑制剂-1、2与肿瘤转移及血栓形成的相关性研究

 目的　探讨组织因子（TF）、组织因子抑制剂（TFPI）-1、2在肿瘤转移和血栓形成中的作用。方法　收集292例恶性肿瘤患者血液和组织标本,以130位门诊体检人员作对照组。ELISA法检测血浆TF、TFPI-1和TFPI-2浓度;免疫组织化学染色观察TF、TFPI-1和TFPI-2的表达。结果　各肿瘤组TF以及TFPI-1血浆浓度均高于对照组（P＜0.05）,肺癌组TF和TFPI-1血浆浓度分别为（3.34±1.12）U／L、（156.13±57.12）μg／L,高于其他类型肿瘤组;各组TFPI-2差异无统计学意义（P＞0.05）。各肿瘤组TF组织表达均较瘤旁组织增高（P < 0.05）;TF在肺癌组织表达显著高于其他肿瘤组织（P < 0.05）。肿瘤合并血栓形成组与无血栓形成组TF、TFPI-1血浆浓度均较对照组增高（P < 0.05）,TF在血栓形成组较无血栓形成组明显增高（P < 0.05）。结论　多种肿瘤高表达TF,不同肿瘤类型表达部位不同,类型不同的肿瘤表达强度不尽相同。血循环中TFPI-1和TF的失衡状态可能与肿瘤的高凝状态有关,促进了肿瘤血栓形成。